川芎嗪对人宫颈癌HeLa细胞增殖的影响及其分子机制

目的:研究川芎嗪对人宫颈癌HeLa细胞增殖的影响,并探讨其与趋化因子CXCR4表达水平之间的关系。方法:体外培养人宫颈癌HeLa细胞,经川芎嗪作用48 h后,应用MTT法检测川芎嗪对HeLa细胞增殖活性的抑制,然后采用流式细胞仪检测经川芎嗪处理的实验组与以磷酸盐缓冲液处理的对照组中HeLa细胞的细胞周期分布;应用蛋白印迹法半定量及免疫荧光实验定性检测川芎嗪处理后趋化因子受体CXCR4表达水平的改变。结果:川芎嗪对人宫颈癌HeLa细胞的增殖有明显的抑制作用,与对照组相比差异具有统计学意义(P<0.01)。经川芎嗪处理后的HeLa细胞G0/G1期增多,S期细胞减少,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.01)。川芎嗪能够下调人宫颈癌HeLa细胞的CXCR4蛋白表达。结论:川芎嗪对人宫颈癌细胞HeLa的增殖有明显抑制作用,其抑制作用可能与下调HeLa细胞中CXCR4蛋白的表达有关。     

白藜芦醇抑制HeLa细胞增殖及其作用机制

目的研究白藜芦醇（Res）对宫颈癌HeLa细胞体外生长抑制作用及其机制。方法以17.5、35.0、70.0、140.0μmol/L Res分别处理HeLa细胞24、48与72 h,采用MTT法检测HeLa细胞存活率;应用70μmol/L的Res处理HeLa细胞24 h,采用Western Blot检测HeLa细胞中磷酸化真核细胞翻译起始因子4E（p-eIF4E）、磷酸化4E结合蛋白1（p-4E-BP1）和半胱氨酸蛋白酶蛋白3（caspase-3）的表达。结果不同浓度的Res作用不同时间后HeLa细胞增殖受到明显抑制,且呈时间和剂量依赖性,在相同时间内,随着Res浓度的增加,HeLa细胞的增殖抑制率明显升高（F=93.76~637.22,P〈0.01）;在同一浓度时,随着Res作用时间的延长,HeLa细胞的增殖抑制率也明显升高（F=8.79~29.99,P〈0.01）。70μmol/L的Res作用HeLa细胞24 h后,HeLa细胞中p-eIF4E、p-4E-BP1蛋白表达较对照组减少（t=14.93、4.78,P〈0.01）,caspase-3蛋白表达较对照组增加（t=10.68,P〈0.01）。结论 Res对宫颈癌HeLa细胞体外生长有明显抑制作用,其机制可能与抑制p-eIF4E、p-4E-BP1表达,并诱导caspase-3活化,从而增加HeLa细胞凋亡有关。     

5，7-二甲氧基白杨素对体外培养人宫颈癌HeLa细胞凋亡的影响

[目的】观察5,7-二甲氧基白杨素（dMchR）对体外培养人宫颈癌HeLa细胞凋亡的影响。【方法】运用A0／EB荧光双染色法观察HeLa细胞凋亡形态;采用PI单染流式细胞术检测HeLa细胞凋亡率;运用FITC荧光标记流式细胞术分析HeLa细胞的Bcl-2,Bax蛋白的表达。【结果]dMChR能有效地诱导HeLa细胞凋亡;dMChR能下调HeLa细胞的Bcl-2蛋白表达,上调Bax蛋白表达,且呈浓度依赖性变化。【结论]dM—ChR具有诱导人宫颈癌HeLa细胞凋亡作用,这种作用与上调细胞Bax／Bcl-2比值有关。     

胰岛素联合顺铂对人宫颈癌细胞株HeLa生长的影响

目的：观察胰岛素（INS）联合顺铂（DDP）对人宫颈癌 HeLa 细胞生长及凋亡的影响,并初步探讨其作用机制。方法体外培养的人宫颈癌细胞株（HeLa）经INS、DDP单独或联合作用后,MTT检测细胞增殖抑制情况;Annexin V-FITC双染流式细胞术分析细胞凋亡;流式细胞仪检测不同加药处理组的细胞周期时相变化情况;Western blot 印迹方法检测细胞中 JNK2、p-JNK2及caspase-3蛋白的表达情况。结果 MTT结果显示：INS无抑制细胞增殖作用,DDP单药组与联合用药组均能抑制细胞的增殖,两药联合时细胞增殖抑制率明显高于DDP单药组,差异有统计学意义（P=0.000）,细胞凋亡结果显示：INS无促细胞凋亡的作用,联合用药组的细胞凋亡率明显高于DDP单药组（P〈0.01）。细胞周期结果显示：DDP、INS单药均能促进细胞由G1期向S期转变;联合用药组HeLa细胞S期比例增加更加明显,与DDP组相比,差异有统计学意义（P〈0.05）。Western blot 结果显示：实验组与对照组比较,JNK2蛋白水平无明显变化, p-JNK2、caspase-3于DDP组及 DDP＋INS 组中表达增加,联合用药时增加更为明显,与DDP组相比,差异有统计学意义（P〈0.05）,而在INS组中三种蛋白表达变化均不明显。结论 INS 可增强DDP对宫颈癌HeLa细胞的毒性作用,其机制可能与协同DDP促进细胞由G0期步入S期,上调p-JNK2及 caspase-3蛋白表达有关。     

苦参碱抑制宫颈癌HeLa细胞增殖作用及机制

目的探讨苦参碱对人宫颈癌HeLa细胞体外增殖的抑制作用及其分子机制。方法以不同浓度（0.5、1.0、1.5、2.0g/L）的苦参碱分别处理HeLa细胞24、48、72h后,应用MTT法检测细胞增殖抑制率,WesternBlot方法检测培养48h细胞中真核细胞翻译起始因子4E（eIF4E）、4E结合蛋白1（4E-BP1）蛋白表达情况;1.0g/L的苦参碱作用HeLa细胞1、3、6、12h后,Western Blot方法测其eIF4E、4E-BP1蛋白磷酸化水平。结果苦参碱明显抑制HeLa细胞增殖,且呈时间和剂量依赖性：在相同时间内,随着苦参碱浓度的增加,HeLa细胞的增殖抑制率明显升高（F=235.035,P〈0.05）;在同一浓度时,随着苦参碱作用时间的延长,HeLa细胞的增殖抑制率也明显升高（F=320.207,P〈0.05）;2.0g/L苦参碱作用72h对HeLa细胞增殖抑制率最大,为（65.30±2.17）%。不同浓度苦参碱处理HeLa细胞48h后,eIF4E、4E-BP1蛋白的表达均无明显变化（F=0.171、0.932,P〉0.05）。1.0g/L苦参碱作用于HeLa细胞不同时间后,细胞中eIF4E、4E-BP1蛋白磷酸化水平均降低,且呈时间依赖性（F=43.48、107.23,P〈0.01）。结论苦参碱可以明显抑制体外培养宫颈癌HeLa细胞的增殖,其作用可能是通过抑制eIF4E以及4E-BP1的磷酸化,从而抑制蛋白翻译来实现的。     

消旋羟蛋氨酸钙对人肾系膜细胞增殖影响及其机制研究

【目的】体外观察消旋羟蛋氨酸钙对人肾系膜细胞（HMC）的影响。【方法】10mM消旋羟蛋氨酸钙对HMC体外干预,检测干预后转化生长因子-β1（TGF-β1）和乳酸脱氢酶（LDH）的变化,并采用MTT和流式细胞仪检测细胞增殖、凋亡和细胞周期。【结果】10mM消旋羟蛋氨酸钙干预HMC,实验组与对照组相比,TGFB1含量增加;细胞LDH表达水平没有改变;同时细胞出现增殖抑制。细胞流式分析发现,实验组干预后出现了细胞周期G1期阻滞并观测到了细胞凋亡。【结论】10mM的消旋羟蛋氨酸钙可以诱导TGF-β1的表达增加;同时诱导细胞周期G1阻滞并伴随细胞凋亡。     

双氢青蒿素对人肺腺癌细胞株A549抑制作用的实验研究

目的观察双氢青蒿素对人肺腺癌细胞株A549的作用。方法采用四唑氮蓝（MTT）法测定不同浓度和时间双氢青蒿素对A549细胞的生长抑制作用;应用流式细胞术检测双氢青蒿素对A549细胞增殖和细胞周期的影响;应用透射电镜分析法检测双氢青蒿素对A549细胞凋亡的影响。结果双氢青蒿素对A549细胞有明显的体外增殖抑制作用,72 h的IC50值为580 nmol/L,且有明显的时间和剂量依赖关系;双氢青蒿素作用后G0/G1期细胞数增加;双氢青蒿素作用A549细胞后可以出现凋亡的形态学改变。结论双氢青蒿素对人肺腺癌A549细胞有生长抑制作用,其机制可能与诱导A549细胞周期阻滞和凋亡有关。     

槲皮素对宫颈癌HeLa细胞STAT3的表达及其信号通路的影响

目的初步探讨信号转导子和转录激活子STAT3在宫颈癌发生发展中的作用以及槲皮素对宫颈癌细胞中STAT3表达的影响。方法用RT-PCR检测不同浓度的槲皮素作用人宫颈癌HeLa细胞中STAT3 mRNA的表达,并以细胞免疫荧光技术观察凋亡细胞内STAT3和磷酸化STAT3(P-STAT3)的改变。结果槲皮素处理HeLa细胞后,当槲皮素浓度从6.25μmol/L增加到50μmol/L,相同时间HeLa细胞内STAT3 mRNA表达逐渐降低,除6.25μmol/L组与溶剂对照组相比无统计学差异(P>0.05)外,余差异全部有统计学意义(P<0.05),且处理24h后,STAT3 mRNA表达量与给药浓度呈负相关,r1=-0.861,P=0.000;各时间段不同浓度组(6.25、12.5、25、50μmol/L)两两相比,差异均有统计学意义(P<0.05)。随着时间变化,相同浓度组中STAT3 mRNA表达明显降低,在给予6.25μmol/L槲皮素后,STAT3 mRNA的表达量呈时间依赖性,r2=-0.539,P=0.000。运用免疫荧光技术观察到STAT3蛋白及磷酸化水平随槲皮素浓度及时间增加表达呈明显下降趋势。结论槲皮素能明显抑制HeLa细胞的生长;槲皮素可抑制细胞内STAT3表达,从而可能通过抑制JAK/STAT信号通路诱导宫颈癌细胞凋亡。     

液基细胞学技术与宫颈癌防治

液基细胞学（Liquid-based cytology）技术又称为液基薄层细胞学技术.液基细胞学技术的发展给细胞病理学检测带来了深刻的变化.液基细胞学技术在传统细胞学检测的基础上从标本收集、保存、制片、染色到诊断各个方面进行了一系列的重大改进,提高了细胞收集率、筛查的阳性率和病理的符合率,已被广泛应用于各器官系统肿瘤的筛查和防治研究.液基细胞学技术除了在脱落细胞、针吸细胞学中有广泛应用外,还可用于免疫组化和分子水平的研究.该技术自问世以来,应用最广泛的是宫颈脱落细胞学,已越来越显示出在宫颈癌防治上的重要作用.本文简要介绍液基细胞学技术的基本原理、诊断分类及其在宫颈癌防治上的应用.     

整合式心理护理对宫颈癌放化疗患者希望水平和应对方式的影响

【目的】探讨整合式心理护理对宫颈癌放化疗患者希望水平和应对方式的影响。【方法】选取放化治疗的宫颈癌患者80例,按照患者意愿分为干预组和对照组,每组40例,干预组患者进行整合式心理护理,对照组仅进行一般注意事项的告知。患者治疗结束后应用本院自制的希望水平和应对方式调查表进行问卷调查,并进行SCL‐90的评分并比较。【结果】干预组患者希望水平明显高于对照组（ P ＜0．05）,其中采取积极方式应对的患者占到总数的95．0％,明显高于对照组的80．0％（ P ＜0．05）;干预组的SCL‐90评分明显高于对照组（ P ＜0．05）。【结论】在有效治疗的基础上整合式心理护理能够有效地改善患者的不良心理因素,增强患者信心,促进病人身体健康,有利于疾病的恢复。     

腺病毒介导p27基因转染对HeLa细胞增殖和凋亡的影响

目的 观察p27基因对人宫颈癌细胞HeLa增殖及凋亡的影响.方法 将已构建成功的腺病毒载体Ad-p27转染至宫颈癌细胞系HeLa细胞,Western blotting法检测病毒转染后p27蛋白在不同时间点表达;噻唑兰(MTT)法检测其对肿瘤细胞增殖的影响;流式细胞术检测其对肿瘤细胞凋亡的影响.结果 HeLa细胞成功转染进Ad-p27;在各观察的时间点内,与对照组比较,同一时间点的细胞中p27蛋白水平均显著增加(P<0.01),细胞增殖能力显著降低(P<0.01),细胞凋亡率则显著增加(P<0.01).结论 p27基因抑制肿瘤细胞增殖,促进肿瘤细胞凋亡,腺病毒构建p27基因有望成为宫颈癌治疗的一个新方法.     

新辅助介入化疗在局部晚期宫颈癌治疗中的价值及对细胞因子表达的影响

[目的]探讨新辅助介入化疗在局部晚期宫颈癌治疗中的价值及对MMP-2、Fas和FasL细胞因子表达的影响.[方法]选择2011年1月至2016年1月在本院妇产科收治并确诊的60例肿瘤直径大于4cm的Ⅰb~Ⅱb期宫颈癌患者作为研究对象,随机分为A组和B组,每组30例.A组患者手术前采用动脉介入新辅助化疗及根治性手术治疗;B组患者手术前采用常规静脉化疗及根治性手术治疗,考察各组疗效及副作用.同时,采用免疫组化法检测治疗前后三组患者MMP-2、Fas和FasL细胞因子的表达情况.[结果]A组和B组有效率分别为83.33%和73.33%,A组疗效显著高于B组(χ2=2.116,P=0.045);Ⅰb期有效率显著高于Ⅱa和Ⅱb,Ⅱa显著高于Ⅱb,鳞癌患者的化疗有效率显著高于腺癌,低分化宫颈癌患者有效率显著高于中分化和高分化(P<0.05).A组中共有14例出现化疗副作用,分别为呕吐或恶心(6例)、中度贫血(2例)、下腹胀痛(4例)、脱发(2例);B组共有11例出现副作用,分别为呕吐及恶心(5例)、中度贫血(1例)、脱发(5例);两组差异无统计学意义(χ2=0.617,P>0.05);MMP-2和FasL治疗后的阳性率在A组和B组中均较治疗前显著下降,而A组和B组中Fas阳性率治疗后较治疗前显著升高(P<0.05).[结论]新辅助介入化疗在局部晚期宫颈癌治疗中的效果显著,MMP-2、Fas和FasL细胞因子与宫颈癌肿瘤细胞密切相关.     

肝部分切除术促人结肠癌Caco-2细胞肝转移及相关机制

目的研究肝部分切除术对人结肠癌Caco-2细胞肝转移的影响及其相关机制。方法应用人结肠癌Caco-2细胞系,构建结肠癌肝转移裸小鼠模型,同时行肝部分切除术(PH),假手术(Sham)设为对照,并对Caco-2细胞行siRNA-Snail干扰。观察肝转移灶面积,肿瘤组织Snail和基质金属蛋白酶2蛋白(MMP-2)表达。结果 PH组转移灶面积、Snail蛋白和MMP-2表达均显著大于Sham组和siRNA-Snail-PH组。结论 PH可促进结肠癌发生肝转移,该作用与促进Snail表达及上调Snail调控的MMP-2表达相关。     

干细胞标志物CD44、ALDH1蛋白在宫颈癌组织中表达及其临床意义

[目的]探讨干细胞标志物CD44、乙醛脱氢酶1(ALDH1)蛋白在宫颈癌组织中的表达及其临床意义.[方法]选取新疆维吾尔自治区人民医院病理科2018年1月至2019年12月宫颈癌组织标本78例、癌旁正常组织23例,采用免疫组化检测各组织CD44、ALDH1蛋白表达情况,并分析其与宫颈癌患者临床病理特征的关系.[结果]C...     

HPV分型对宫颈癌患者放疗敏感性的影响

[目的]探讨宫颈癌患者中人乳头瘤病毒（HPV）分型与放疗敏感性的相关性.[方法]收集宫颈癌患者124例,检测患者HPV基因分型,采用放疗方法对入选患者进行盆腔外和腔内照射治疗,分析放疗敏感性与HPV分型的相关性.[结果]124例患者中,HPV阴性1例,在HPV阳性宫颈癌患者检出21种HPV基因型中,高危型常见类型为HPV16、HPV18和HPV58,低危型最常见类型为HPV6和HPV11.放疗不敏感患者中多重HPV感染所占90％,且HPV-18在化疗后未缓解患者中所占比率为80％.[结论]以HPV-18为主的HPV多重感染可能会影响宫颈癌患者放化疗敏感性.     

宫颈癌顺铂化疗联合放疗的疗效与RRM1表达水平的相关性研究

[目的]探讨顺铂化疗联合放疗方案在宫颈癌临床治疗中的应用价值及临床疗效与核苷酸还原酶M1亚基(RRM1)表达水平的关系.[方法]随机数字表法将98例宫颈癌患者分为A、B组各49例;B组给予单纯盆腔外照射联合腔内近距离照射放疗方案;A组在B组基础上联合顺铂单药化疗方案.比较两组近期疗效、毒副反应率差异,记录其治疗前后肿瘤最大横断直径及宫颈病变组织RRM1表达变化情况.将A组按照近期疗效分为优良组和中差组,比较其宫颈病变组织RRM1表达情况差异,Pearson相关性分析法分析临床疗效与宫颈病变组织RRM1表达水平的关系.[结果]A组总治疗有效率、Ⅲ～Ⅳ度胃肠道反应发生率及Ⅰ～Ⅱ度骨髓抑制、放射性膀胱炎、放射性直肠炎发生率均明显高于B组(P＜0.05).治疗后,A、B两组肿瘤最大横断直径及RRM1高表达率均较治疗前明显降低,且A组＜B组(P均＜0.05).优良组宫颈病变组织RRM1低表达率为57.7％,显著高于中差组的16.7％(P＜0.05).Pearson相关分析结果显示,宫颈癌患者顺铂化疗联合放疗方案的疗效与宫颈病变组织RRM1低表达呈正相关(P＜0.05).[结论]顺铂化疗联合放疗方案对提高宫颈癌患者近期疗效具有积极影响,其疗效同宫颈病变组织RRM1低表达率成正相关.     

沉默SOX2对宫颈癌细胞增殖及侵袭能力的影响及机制研究

【目的】探讨转录因子 SOX2表达下调对宫颈癌细胞增殖及侵袭能力的影响。【方法】将特异性短发夹（shRNA）SOX2干扰载体转染宫颈鳞癌细胞 SiHa获得稳转细胞系（SOX2干扰组）,MTT法检测细胞增殖能力变化,Transwell小室法测定细胞侵袭能力差异,Western Blot检测 SOX2、MMP2、MMP9及上皮间质转化相关因子变化,并与阴性对照转染组与空白对照组比较。【结果】与阴性对照转染组和空白对照组比较, SOX2干扰组 MTT结果显示细胞增殖能力明显降低,Transwell结果显示细胞穿膜数显著减少、侵袭能力降低（P＜0．05）,Western Blot检测 SOX2显著下调、MMP2、MMP9表达下调、E-cadherin蛋白水平升高、Vim-entin表达降低（P＜0．05）;而阴性对照转染组与空白对照组相比各项指标无明显变化。【结论】抑制 SOX2表达能够抑制宫颈鳞癌细胞的体外增殖与侵袭能力,可能与抑制上皮间质转化过程有关。     

低温中药灌肠预防宫颈癌患者放射性直肠损伤的效果

目的 探讨低温中药灌肠预防宫颈癌患者放射治疗所致直肠损伤的效果.方法 将100例采取后装放射治疗的宫颈癌患者随机分为试验组和对照组,两组均采用后装放射治疗常规护理方法.试验组除常规护理外,在施用器放置后,用导尿管连接微量输液泵直肠给药降温,微泵匀速推注4～6℃自制中药10～15ml,后装放射治疗后行上述成分中药常规方法保留灌肠,1次/d,连续3d.观察后装放射治疗5次后3d内、放疗结束后3个月、6个月两组患者发生放射性直肠损伤的情况.结果 试验组后装放射治疗5次后3d内,1、2级直肠反应发生率均低于对照组;后装放射治疗结束后3个月、6个月,试验组直肠损伤的发生率及损伤的程度低于对照组,差异均有统计学意义(P=0.000).结论 低温中药灌肠可降低宫颈癌患者行后装放射治疗所致的放射性直肠反应.