哮喘豚鼠肺组织粒细胞—巨噬细胞集落刺激因子mRNA表达…

目的 探讨粒细胞－巨噬细胞集落刺激因子在哮喘嗜酸细胞炎症中的作用。方法 建立哮喘豚鼠实验模型，用雷公藤处理，观察肺组织Ｅｏｓ密度，斑点分子杂交检测支气管肺组织ＧＭ－ＣＳＦ ｍＲＮＡ含量。结果 哮喘组肺组织Ｅｏｓ浸润密度增加，ＧＭ－ＣＳＦ ｍＲＮＡ表达水平增高，与对照组相比差异有显著性（Ｐ〈０．０５），雷公藤处理后ｍＲＮＡ表达显著降低，但Ｅｏｓ浸润密度减少不明显。结论 ＧＭ－ＣＳＦ ｍＲＮＡ表达增加     

哮喘患者淋巴细胞粒细胞—巨噬细胞集落刺激因子mRNA的表达

哮喘患者淋巴细胞粒细胞－巨噬细胞集落刺激因子ｍＲＮＡ的表达金远林王长征王春霞钱桂生活化的Ｔ淋巴细胞产生的细胞因子白细胞介素（ＩＬ）－５、粒细胞－巨噬细胞集落刺激因子（ＧＭ－ＣＳＦ）及ＩＬ－３，在以嗜酸细胞（Ｅｏｓ）为主的哮喘非特异性气道炎症产生中起重...     

支气管哮喘患者粒—基噬细胞集落刺激因子mRNA表达的研究

目的 探讨利用无创伤性方法寻找较为特异性地反映哮喘患气道炎症的客观指标。方法 通过研究哮喘患气道粘膜细胞粒－巨噬细胞集落刺激因子（ＧＭ－ＣＳＦ）ｍＲＮＡ表达,并以此为参照,分析哮喘患诱导痰细胞ＧＭ－ＣＳＦ ｍＲＮＡ变化,利用免疫组化结合逆转录聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）技术,分析哮喘组（１０例）气道粘膜细胞ＧＭ－ＣＳＦ ｍＲＮＡ的表达;用３％高渗盐水诱导痰液,利用ＲＴ－ＰＣＲ技术分析哮喘组（     

哮喘豚鼠肺组织中嗜酸细胞凋亡与白细胞介素5mRNA表达？…

目的 探讨哮喘时嗜酸细胞（ＥＯＳ）凋亡与肺组织白细胞介素５（ＩＬ－５）ｍＲＮＡ表达的关系。方法 将豚鼠随机分为对照组（正常组７只）、哮喘组（８只）、地塞米松组（８只），应用脱氧核糖核酸末端转移酶介导的缺口末端标记（ＴＵＮＥＬ）技术和原位杂交方法，检测支气管肺泡灌洗液（ＢＡＬＦ）中不同密度ＥＯＳ凋亡百分比和肺组织ＩＬ－５ｍＲＮＡ的表达。结果 （１）正常对照组ＢＡＬＦ中低密度ＥＯＳ、正常密度ＥＯＳ凋是     

吸入糖皮质激素对哮喘内皮素和内皮素转化酶mRNA表达的影响

目的探讨内皮素１（ＥＴ－１）和内皮素转化酶（ＥＣＥ）ｍＲＮＡ在哮喘气道粘膜的表达，以及吸入激素对其表达的影响。方法应用逆转录－ＤＮＡ聚合酶链反应，测定支气管粘膜组织ＥＴ－１和ＥＣＥｍＲＮＡ的表达量；对支气管粘膜炎症程度进行评分。结果哮喘非激素组（１０例）和对照组（１０名）ＥＴ－１ｍＲＮＡ表达量分别为０．８６±０．０６，０．１４±０．０６（Ｐ＜０．０５）；ＥＣＥｍＲＮＡ表达量分别为０．３１±０．０４，０．３０±０．０５（Ｐ＝０．２３８）；哮喘激素组（１０例）ＥＴ－１ｍＲＮＡ表达量为０．２２±０．０１，ＥＣＥｍＲＮＡ表达量为０．１６±０．０１；哮喘非激素组粘膜炎症评分为６．０±１．９，且与ＥＴ－１ｍＲＮＡ表达量呈正相关（ｒ＝０．７８，Ｐ＜０．０５）。结论哮喘支气管粘膜ＥＴ－１ｍＲＮＡ表达增高明显，而ＥＣＥｍＲＮＡ无明显改变；吸入糖皮质激素显著抑制ＥＴ－１和ＥＣＥｍＲＮＡ的表达，可能是抗炎治疗哮喘的机制之一     

糖皮质激素对哮喘患者白细胞介素-5mRNA表达与嗜酸性粒细胞激活作用的影响

为了观察糖皮质激素对哮喘患者白细胞介素（ＩＬ）－５ｍＲＮＡ表达与嗜酸性粒细胞激活作用的影响，本研究用逆转录（ＲＴ）－聚合酶链反应（ＰＣＲ）法半定量分析了哮喘患者用糖皮质激素治疗前后外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）中ＩＬ－５ｍＲＮＡ表达水平的变化，检测了血清嗜酸细胞阳离子蛋白（ＥＣＰ）浓度、一秒钟用力呼气容积（ＦＥＶ１）下降２０％时的乙酰甲胆碱（ＭＣＨ）激发浓度（ＭＣＨ－ＰＣ２０值）和基础ＦＥＶ１占用力肺活量比值（ＦＥＶ１％）等指标。结果发现，糖皮质激素不仅能改善哮喘患者的气道高反应性和通气功能，而且还可抑制ＰＢＭＣ中ＩＬ－５ｍＲＮＡ的表达和降低血清ＥＣＰ浓度（Ｐ＜０．０５）；血清ＥＣＰ浓度下降幅度或ＭＣＨ－ＰＣ２０值改善幅度与ＩＬ－５ｍＲＮＡ表达水平下降幅度之间均呈显著正相关（ｒ分别为０．５４２６和０．４８５７，Ｐ值＜０．０５）。提示糖皮质激素可能是通过抑制ＩＬ－５基因的转录，从而抑制后者对嗜酸性粒细胞的活化，而发挥其抗气道炎症反应和降低气道高反应性的作用。     

粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子对人气道平滑肌细胞内皮素-1及内皮素转换酶基因表达的影响及茶碱对其的作用

目的观察炎前细胞因子粒细胞－巨噬细胞集落刺激因子（ＧＭ－ＣＳＦ）对培养的人气道平滑肌细胞内皮素－１（ＥＴ－１）基因及内皮素转换酶（ＥＣＥ）基因表达的影响及茶碱对此种表达的作用，探讨在炎症环境下气道平滑肌细胞在气道高反应性发生、发展中的作用及低剂量茶碱在遏制气道高反应性的可能机制。方法分别以ＧＭ－ＣＳＦ（１０００μｇ／ｍｌ）或与茶碱（１２５ｎｇ／ｍｌ）联合刺激离体培养人气道平滑肌细胞８小时，运用ＲＴ－ＰＣＲ方法检测平滑肌细胞ＥＴ－１及ＥＣＥ基因的表达。结果对照组基本不表达ＥＴ－１基因；ＧＭ－ＣＳＦ刺激组ＥＴ－１基因显著扩增；同时加入氨茶碱组则ＥＴ－１基因表达完全受抑制；而ＥＣＥ基因表达在上述三组无差别。结论ＧＭ－ＣＳＦ可刺激人气道平滑肌ＥＴ－１基因使其表达增强，而对ＥＣＥ基因无此作用；茶碱可抑制此ＥＴ－１基因的异常表达，这可能是小剂量茶碱在控制气道炎症及气道高反应性方面的一个新机制。     

雷公藤内酯醇对内皮细胞血管内皮细胞生长因子活？…

目的：研究雷公藤内酯醇对人内皮细胞血管内皮细胞生长因子（ＶＥＧＦ）ｍＮＲＡ表达及ＶＥＧＦ生成与分泌的影响,进一步探讨雷公藤内酯醇降低肾小球肾炎患者尿蛋白的作用机制。方法：对人内皮细胞系ＥＣＶ－３０４为研究对象,利用ＲＴ－ＰＣＲ,流式细胞仪,酶联免疫吸附法（ＥＬＩＳＡ）检测不同剂量雷公藤内酯醇对佛波脂（ＰＭＡ）诱导的内皮细胞ＶＥＧＦ ｍＲＮＡ表达及ＶＥＧＦ生成与分泌的影响。结果：雷公藤内酯醇可以抑制     

硝酸甘油对哮喘患者一氧化氮内皮素的影响及机制

目的　了解哮喘患者肺泡巨噬细胞（ＡＭ） 、支气管上皮细胞（ＢＥＣ） 源性一氧化氮（ＮＯ）、内皮素（ＥＴ）的分泌状态及硝酸甘油（ＮＴＧ）对哮喘患者ＡＭ、ＢＥＣ产生ＮＯ、ＥＴ的影响及机制。方法　分离纯化了１５ 例轻、中度哮喘发作期患者、７ 名健康受试者ＡＭ、ＢＥＣ,并分为哮喘未干预组、哮喘ＮＴＧ干预组和健康对照组,用放射免疫法和镀铜镉还原法分别测定ＡＭ、ＢＥＣ培养４８ 小时上清液中ＥＴ、ＮＯ·２／ＮＯ·３ 浓度,用原位杂交的方法检测ＡＭ、ＢＥＣｉＮＯＳｍＲＮＡ、ＥＴｍＲＮＡ 的表达。结果　（１） 健康受试者ＡＭ、ＢＥＣ分泌少量ＮＯ和ＥＴ及少量ｉＮＯＳｍＲＮＡ 、ＥＴｍＲＮＡ表达;（２）哮喘患者ＡＭ、ＢＥＣ源性ＮＯ、ＥＴ水平及ＡＭ、ＢＥＣｉＮＯＳｍＲＮＡ、ＥＴｍＲＮＡ表达与各组比较差异有显著性（ Ｐ均＜ ０－０５）;（３）ＮＴＧ 促进哮喘患者ＡＭ、ＢＥＣ源性ＮＯ产生（ Ｐ均＜０－０５）,明显抑制ＥＴ产生和ＥＴｍＲＮＡ 的表达,与对照组比较差异均无显著性（ Ｐ均＞ ０－０５） ,ＮＴＧ同时抑制哮喘患者ＡＭ、ＢＥＣｉＮＯＳｍＲＮＡ的表达,与健康对照组、哮喘未干预组比较差异有显著性（Ｐ均＜０－０５） ;（４） 除哮喘ＮＴＧ     

糖皮质激素对嗜酸粒细胞的作用

嗜酸粒细胞（Ｅｏｓ）是糖皮质激素（ＧＣＳ）作用的重要靶细胞，ＧＣＳ通过干预细胞因子网络，间接抑制Ｅｏｓ的生成，存活和功能，ＧＣＳ对Ｅｏｓ凋亡可能具有直接作用，深入研究细胞信号转导，膜受体与ｍＲＮＡ转录之间的关系，将进一步阐明ＧＣＳ作用的分子机制。     

灵芝孢子对支气管哮喘豚鼠引喘潜伏期及类胰蛋白酶释放的影响

目的研究灵芝孢子对支气管哮喘（简称哮喘）豚鼠引喘潜伏期及肥大细胞类胰蛋白释放的影响。方法10％卵蛋白腹腔注射致敏,雾化吸入1％卵蛋白方式诱导复制哮喘动物模型。30只健康豚鼠随机分为对照组（A）、哮喘组（B）、灵芝组（C）3组,每组10只,分别用生理盐水,灵芝孢子灌胃15d。测定哮喘豚鼠的引喘潜伏期及呼气相气道阻力（Re）,计数支气管肺泡灌洗液（BALF）细胞总数及分类,肺组织HE染色和免疫组织化学观察肺组织病理变化及肥大细胞类胰蛋白酶分布情况。结果①灵芝组的引喘潜伏期明显较哮喘模型组延长,Re显著降低（P〈0．05）。②哮喘BALF白细胞总数及嗜酸粒细胞比例较生理盐水组增高（P〈0．05）,肺组织炎性病变明显;灵芝组BALF细胞总数、嗜酸粒细胞比例及肺组织炎性病变明显较哮喘组降低或减轻（P〈0．05）。③哮喘组类胰蛋白酶染色阳性的肥大细胞计数明显较生理盐水组增多（P〈0．05）,主要分布在气道黏膜下,肺泡间隔及血管周围;灵芝组类胰蛋白酶染色阳性的肥大细胞计数较哮喘组显著减少。结论灵芝孢子有延长哮喘豚鼠引喘潜伏期,降低气道阻力,减轻肺组织炎性病变,抑制肥大细胞释放类胰蛋白酶的作用。     

灵芝孢子对支气管哮喘豚鼠引喘潜伏期及类胰蛋白酶释放的影响

目的 研究灵芝孢子对支气管哮喘(简称哮喘)豚鼠引喘潜伏期及肥大细胞类胰蛋白释放的影响.方法 10%卵蛋白腹腔注射致敏,雾化吸入1%卵蛋白方式诱导复制哮喘动物模型.30只健康豚鼠随机分为对照组(A)、哮喘组(B)、灵芝组(C)3组,每组10只,分别用生理盐水,灵芝孢子灌胃15 d.测定哮喘豚鼠的引喘潜伏期及呼气相气道阻力(Re),计数支气管肺泡灌洗液(BALF)细胞总数及分类,肺组织HE染色和免疫组织化学观察肺组织病理变化及肥大细胞类胰蛋白酶分布情况.结果 ①灵芝组的引喘潜伏期明显较哮喘模型组延长,Re显著降低(P＜0.05).②哮喘BALF白细胞总数及嗜酸粒细胞比例较生理盐水组增高(P＜0.05),肺组织炎性病变明显;灵芝组BALF细胞总数、嗜酸粒细胞比例及肺组织炎性病变明显较哮喘组降低或减轻(P＜0.05).③哮喘组类胰蛋白酶染色阳性的肥大细胞计数明显较生理盐水组增多(P＜0.05),主要分布在气道黏膜下,肺泡间隔及血管周围;灵芝组类胰蛋白酶染色阳性的肥大细胞计数较哮喘组显著减少.结论 灵芝孢子有延长哮喘豚鼠引喘潜伏期,降低气道阻力,减轻肺组织炎性病变,抑制肥大细胞释放类胰蛋白酶的作用.     

Airway inflammation is present during clinical remission of atopic asthma.

Symptoms of atopic asthma often disappear at puberty. However, asthmatic subjects in clinical remission will frequently have a relapse later in life. The aim of this study was to investigate whether subjects in clinical remission of atopic asthma have persistent airway inflammation and/or airway remodeling. Bronchial biopsies were obtained from subjects in clinical remission, asthmatic subjects, and healthy control subjects. The presence and/or activation state of eosinophils, mast cells, macrophages, T lymphocytes, interleukin (IL)-5, eotaxin, and inducible nitric oxide synthase (iNOS) were analyzed. Results were compared with less invasive indicators of airway inflammation. Also aspects of airway remodeling were determined. Eosinophils, T cells, mast cells, and IL-5 were significantly elevated in the airway mucosa of subjects in remission compared with control subjects. Also, blood eosinophil cell counts were significantly higher in subjects in clinical remission. Blood eosinophil cell counts, exhaled nitric oxide (eNO) levels, and bronchial response to adenosine-5'-monophosphate correlated significantly with the quantity of tissue eosinophils. Significant airway remodeling was found in subjects in clinical remission. Our study has shown ongoing airway inflammation and airway remodeling in adolescents in clinical remission of atopic asthma. Subclinical airway inflammation may well determine the risk of an asthma relapse later in life.     

糖皮质激素对哮喘大鼠Clara细胞分泌蛋白表达的影响

目的　观察吸入糖皮质激素对大鼠支气管哮喘 (简称哮喘 )模型肺组织Clara细胞分泌蛋白 (CCSP)mRNA表达的影响。方法　用卵白蛋白 (OVA)致敏、雾化建立大鼠哮喘模型 ,以逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)、斑点免疫印迹法 ,分别检测大鼠激发哮喘 3天后肺组织CCSPmRNA表达水平、支气管肺泡灌洗液 (BALF)CCSP蛋白浓度及雾化吸入布地奈德的影响。结果　哮喘组大鼠肺组织CCSPmRNA表达量为 0 .5 6± 0 .0 5 ,与正常对照组 (0 .6 5± 0 .0 4 )比较差异有显著性 (P <0 .0 1) ;激素治疗组CCSPmRNA表达量为 0 .6 3± 0 .0 4 ,与哮喘组 (0 .5 6± 0 .0 5 )比较差异也有显著性 (P <0 .0 5 )。哮喘组大鼠BALF中CCSP蛋白含量为 4 9± 5 ,与正常对照组 (6 0± 5 )比较 ,差异有显著性 (P <0 .0 1) ;激素治疗组CCSP蛋白含量 (5 7± 5 )与哮喘组比较 (P <0 .0 5 ) ,BALF中嗜酸细胞比例降低 ,气道炎症反应减轻。结论　CCSPmRNA表达减少导致CCSP水平下降 ,从而促进气道炎症而参与哮喘发病。雾化吸入糖皮质激素可增加CCSPmRNA表达 ,抑制哮喘气道炎症。     

表皮生长因子受体对支气管哮喘小鼠气道黏液分泌的影响及机制

目的探讨支气管哮喘（简称哮喘）小鼠气道黏液分泌与表皮生长因子受体（EGFR）、转化生长因子α（TGFα）的关系以及表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂（AG1478）的干预作用。方法32只小鼠随机分为4组：正常对照组、哮喘模型组、AG1478组和地塞米松干预组。建立哮喘小鼠模型,对肺组织切片行过碘酸雪夫染色显示气道黏膜杯状细胞的增生情况。应用免疫组织化学方法检测TGF—α的蛋白及RTPCR方法检测EGFR mRNA表达的变化。结果哮喘组出现气道壁增厚、杯状细胞增多、黏液分泌增加,EGFR、TGF—α水平增高。地塞米松组和AG1478组较哮喘组均有所改善,EGFR、TGF—α表达降低（P〈0．05）。结论EGFR、TGF—α参与哮喘小鼠气道黏液分泌过程,AG1478可抑制气道黏液分泌。AG1478可能通过下调EGFR、TGF-α的表达以及抑制依赖于EGFR下游的细胞信号转导级联反应来发挥其效应。     

内源性硫化氢和胱硫醚-β-合成酶mRNA在支气管哮喘大鼠中的表达及意义

目的 观察支气管哮喘(简称哮喘)大鼠胱硫醚-β-合成酶(cystathionine-β-synthase,CBS)mRNA及硫化氢(hydrogen sulfide,H2S)的表达变化,探讨CBS与H2S的相关性.方法 采用哮喘大鼠模型,将30只SD大鼠随机分成哮喘组、对照组、地塞米松组,分光光度法测定血浆H2S含量,RT-PCR法检测肺组织CBS mRNA的表达水平.结果 血浆中H2S含量哮喘组显著低干对照组,地寒米松组与哮喘组、对照组相比差异无统计学意义.肺组织CBS mRNA的表达水平哮喘组、地塞米松组显著低于对照组,地塞米松组显著高于哮喘组.肺组织CBS mRNA和血浆中H2S的表达水平呈显著正相关.结论 哮喘大鼠血浆中H2S的含量和肺组织CBS mRNA的表达下降,两者呈正相关,提示可能参与了哮喘的炎症过程.地塞米松改善哮喘炎症可能部分通过H2S/CBS体系而起作用.     

内源性硫化氢和胱硫醚-β-合成酶mRNA在支气管哮喘大鼠中的表达及意义

目的观察支气管哮喘（简称哮喘）大鼠胱硫醚-β-合成酶（eystathionine-β-synthase,CBS）tuRNA及硫化氢（hydrogensulfide,HzS）的表达变化,探讨CBS与HzS的相关性。方法采用哮喘大鼠模型,将30只SD大鼠随机分成哮喘组、对照组、地塞米松组,分光光度法测定血浆H2S含量,RT—PCR法检测肺组织CBSmRNA的表达水平。结果血浆中H2S含量哮喘组显著低于对照组,地塞米松组与哮喘组、对照组相比差异无统计学意义。肺组织CBSmRNA的表达水平哮喘组、地塞米松组显著低于对照组,地塞米松组显著高于哮喘组。肺组织CBSmRNA和血浆中Hzs的表达水平呈显著正相关。结论哮喘大鼠血浆中H2S的含量和肺组织CBSmRNA的表达下降,两者呈正相关,提示可能参与了哮喘的炎症过程。地塞米松改善哮喘炎症可能部分通过H2S／CBS体系而起作用。     

Reduced eosinophil apoptosis in induced sputum correlates with asthma severity.

This study was carried out to investigate the relationship between induced sputum eosinophil apoptosis and clinical severity score, airway obstruction and symptom scores in patients with chronic stable asthma. Altogether, 41 chronic stable asthmatic subjects of varying severity defined by Aas score and 17 control subjects underwent spirometry, symptom questionnaire and successful sputum induction. Sputum was processed and cytospins prepared for light microscopy to determine normal and apoptotic eosinophils. Mild asthmatic subjects had a significantly lower percentage sputum eosinophils and a significantly higher eosinophil apoptotic ratio (AR) than moderate or chronic severe asthmatics. Severe asthmatic subjects had a significantly greater age, duration of asthma and sputum eosinophil count x mL(-1) than mild asthmatic subjects. Asthmatic subjects' symptom scores, severity scores and age inversely correlated with AR and the percentage of sputum eosinophils. Baseline forced expiratory volume in one second inversely correlated with percentage sputum eosinophils and positively correlated with AR. The study demonstrates a relationship between reduced sputum eosinophil apoptosis and increased clinical severity of chronic stable asthma, providing additional evidence that eosinophil apoptosis may be important in the resolution of eosinophilic airway inflammation in asthma.     

Exhaled nitric oxide and sputum eosinophil markers of inflammation in asthmatic children.

Exhaled nitric oxide and eosinophil sputum markers are considered noninvasive ways in which to evaluate airway inflammation in asthma. The aim of this study was to evaluate the relationships between these methods of evaluation in asthmatic children. In a cross-sectional study of 25 mild-moderate asthmatic children (aged 6-13 yrs, 10 patients on inhaled steroids) exhaled NO was measured along with induced sputum by inhalation of hypertonic saline solution. The sputum was processed for eosinophil count and eosinophil cationic protein (ECP) determination. Serum ECP and lung function (forced expiratory volume in one second (FEV1)) were also measured. A significant correlation was observed between exhaled NO and sputum eosinophils (r = 0.438, p = 0.032) as well as between sputum eosinophils and sputum ECP (r = 0.532, p<0.01). No correlation was observed among exhaled NO and serum ECP, sputum ECP, FEV1, respectively. Furthermore no correlation was observed between sputum eosinophil (%) and serum ECP and between sputum eosinophils and FEV1. There was no correlation among the investigated parameters in children treated with inhaled steroids. In conclusion, exhaled NO and sputum eosinophil counts are concordant in evaluating the degree of airway inflammation in patients with mild-to-moderate asthma. However, the association between these two noninvasive markers becomes less in steroid treated patients.