白细胞介素-10通过降低脂多糖诱导大鼠急性肺损伤高迁移率组蛋白1释放产生保护作用

目的 旨在研究白细胞介素（interleukin,IL）-10对高迁移率组蛋白l（high mobility group protein 1,HMGB1）释放的影响及其肺保护作用,进而探讨IL-10在治疗急性肺损伤中的可能机制. 方法 采用腹腔注射脂多糖（lipopolysaccharide,LPS）致大鼠脓毒症急性肺损伤模型,健康SPF级雄性SD大鼠72只,体重180 g～220 g,采用随机数字表法,随机分为对照组即磷酸盐缓冲液（phosphate buffered solution,PBS）组（P组,6只）、急性肺损伤组即LPS组（L组,30只）、PBS＋IL-10组（PI组,6只）、LPS＋IL-10组（LI组,30只）.P组和PI组腹腔注射等体积PBS的同时分别经由气道滴注5 ml的PBS和IL-10,L组和LI组腹腔注射LPS的同时分别经由气道滴注等体积的PBS和IL-10.L组和LI组注射LPS后的4、8、16、24 h和48 h分别检测各组大鼠肺湿/干重比（wet/dry weight ratio,W/D）和支气管肺泡灌洗液（bronchoalveolar lavage fluid,BALF）中总蛋白浓度,酶联免疫吸附实验法检测BALF中炎性因子肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α,TNF-α）和IL-6水平,苏木精-伊红（hematoxylin-eosin,HE）染色观察肺组织的病理变化,Western Blot分析肺组织中HMGB1表达水平. 结果 腹腔注射LPS后,L组大鼠肺组织W/D和BALF中总蛋白浓度分别为（5.68±0.12） mg/L和（254±105） mg/L,与P组比较,分别增加了12％和297％（P＜0.05）,BALF中TNF-α和IL-6水平明显增加（P＜0.05）,HE染色显示在注射LPS后4h肺组织的细胞浸润达到峰值随后减少,肺组织中HMGB1水平升高（P＜0.05）;使用IL-10后,LI组肺组织W/D和BALF中总蛋白浓度分别为（5.28±0.14） mg/L和（109±48） mg/L,与L组比较,分别降低了7％和57％ （P＜0.05）,BALF中炎性因子水平降低（P＜0.05）,肺组织细胞浸润改善,HMGB1表达下调（P＜0.05）. 结论 IL-10对急性肺损伤具有保护作用,其机制可能为降低BALF中炎性因子的水平,下调晚期炎症介质HMGB1的表达,从而改善肺组织的细胞?     

富氢液对脂多糖致小鼠急性肺损伤的影响

目的 评价富氢液对脂多糖(LPS)致小鼠急性肺损伤的影响.方法 成年雄性C57BL/6小鼠32只,体重20 ～ 25 g,采用随机数字表法,将其分为4组(n=8):对照组(C组)、富氢液组(H2组)、急性肺损伤组(ALI组)和急性肺损伤+富氢液组(ALI+ H2组).ALI组和ALI+ H2组分别雾化吸入LPS25 μg(溶于PBS中)制备ALI模型,C组和H2组分别雾化吸入无菌PBS 50μl.H2组和ALI+H2组雾化吸入PBS或LPS后1和12 h时腹腔注射0.6 mmol/L富氢液5 ml/kg.LPS或PBS处理后24 h时,机械通气15 min,行动脉血气分析,计算氧合指数.然后收集支气管肺泡灌洗液(BALF),测定蛋白浓度,计数中性粒细胞(PMN).采用ELISA法检测BALF中TNF-α、IL-1β、IL-6和高迁移率族蛋白1(HMGB1)的浓度.然后处死小鼠,取肺组织,行病理学损伤评分,测定湿重/干重(W/D)比、髓过氧化物酶(MPO)和caspase-3的活性,计算细胞凋亡指数(AI).结果 与C组比较,H2组氧合指数、BALF总蛋白、TNF-α、IL-1β、IL-6和HMGB1的浓度和PMN计数、肺组织病理学损伤评分、W/D比、MPO和caspase-3的活性以及AI差异均无统计学意义(P＞0.05),ALI组和ALI+H2组氧合指数降低,BALF蛋白、TNF-α、IL-1β、IL-6和HMGB1的浓度、PMN计数、肺组织病理学损伤评分、W/D比、MPO和caspase-3 的活性以及AI均升高(P＜0.05);与ALI组比较,ALI+ H2组氧合指数升高,BALF总蛋白、TNF-α、IL-1β、IL-6和HMGB1的浓度、PMN计数、肺组织病理学损伤评分、W/D比、MPO和caspase-3的活性以及AI均降低(P＜0.05).结论 富氢液可减轻LPS致小鼠急性肺损伤,可能与其抗炎和抗凋亡作用有关.     

促红细胞生成素预先给药对大鼠内毒素性急性肺损伤的影响

目的 探讨促红细胞生成素(EPO)预先给药对大鼠内毒素性急性肺损伤的影响.方法 成年雄性SD大鼠32只,体重180～220 g,随机分为4组(n=8),C组腹腔注射生理盐水4 ml/kg(EPO溶剂对照),30 min后静脉注射生理盐水2 ml/kg[脂多糖(LP3)溶剂对照];EPO组腹腔注射EPO3 000 U/kg,30 min后静脉注射生理盐水2 ml/kg;LPS组腹腔注射生理盐水4 ml/kg,30 min后静脉注射LPS 6 mg/kg;EPO+LPS组腹腔注射EPO 3 000 U/kg,30 min后静脉注射LPS 6 mg/kg.于静脉注射LPS后4 h时处死大鼠,观察肺组织病理学结果 ,计算肺组织湿/干重(W/D)比;测定肺组织髓过氧化物酶(MPO)活性和丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)含量;采用Western blot法测定肺组织诱导型一氧化氮合酶(iNOS)和硝基酪氨酸(NT)的表达.结果 与C组相比,LPS组和EPO+LPs组肺组织W/D比、MPO活性、MDA和NO含量升高,iNOS和NT表达上调(P<0.01);与LPS组相比,EPO+LPS组肺组织W/D比、MPO活性、MDA和NO含量降低,iNOS和NT表达下调(P<0.01).结论 EPO预先给药可减轻大鼠内毒素性急性肺损伤,与其下调iNOS表达,减少NO生成有关.     

L-精氨酸对内毒素诱导急性肺损伤大鼠肺表面活性物质的影响

目的 评价L-精氨酸对内毒素(LPS)诱导急性肺损伤大鼠肺表面活性物质的影响.方法 健康雄性SD大鼠48只,随机分为4组:正常对照组(C组,n=16)、LPS组(n=16)、LPS 3 h+L-精氨酸治疗组(L1组,n=8)和LPS 6 h+L-精氨酸治疗组(L2组,n=8).LPS组、L1组和L2组静脉注射LPS 5mg/kg,C组给予等容量生理盐水.L1组和L2组分别于给予LPS后3 h或6 h腹腔注射L-精氮酸500 mg/kg.L1组和L2组于给予L-精氨酸后3 h(C组和LPS组分别于给予生理盐水或LPS后6、9 h)取8只大鼠,取肺组织,测定表面活性物质结合蛋白A(SP-A)mRNA的表达水平、肺泡灌洗液(BALF)中总磷脂(TPL)和总蛋白(TP)浓度,光镜下观察肺组织病理学结果.结果 与C组比较,LPS组SP-A mRNA表达下调,BALF中TPL浓度降低,TP浓度升高(P＜0.01).与LPS组比较,L1组SP-A mRNA表达上调,BALF中TPL浓度升高,TP浓度降低(P＜0.05或0.01);L2组上述指标差异无统计学意义(P＞0.05).L1组肺损伤程度轻于LPS组和L2组.结论 L-精氨酸可促进肺表面活性物质合成,从而对大鼠内毒素诱导急性肺损伤具有治疗作用.     

地塞米松对内毒素性急性肺损伤大鼠肺组织MKP-1表达的影响

目的 评价地塞米松对内毒素性急性肺损伤大鼠肺组织丝裂原活化蛋白激酶磷酸酶-1(MKP-1)表达的影响.方法 成年雄性SD大鼠54只,体重180～ 230 g,采用随机数字表法,将其随机分为3组:对照组(C组,n=6)、急性肺损伤组(ALI组,n=24)和地塞米松组(D组,n=24).ALI组和D组尾静脉注射LPS 5 mg/kg制备大鼠急性肺损伤模型,C组给予等容量生理盐水,D组于注射LPS前30 min时腹腔注射地塞米松6 mg/kg.C组于注射生理盐水后1 h(T1)时,ALl组和D组分别于注射LPS后1、3和6 h(T1-3)时,随机处死8只大鼠,取肺组织,检测MKP-1和磷酸化p38丝裂原活化蛋白激酶MAKP(p-p38MAPK)的表达.T3时回收支气管肺泡灌洗液(BALF),测定蛋白和TNF-α的浓度;观察肺组织病理学结果.另取32只SD大鼠,体重180～ 230 g,采用随机数字表法,将其随机分为2组(n=16):急性肺损伤组(ALI1组)和地塞米松组(D1组),处理方法同上.观察48 h内大鼠生存情况.结果 与C组比较,ALI组BALF中蛋白和TNF-α的浓度升高,T1-3时p-p38MAKP表达上调,T2.3时MKP-1表达下调,D组BALF中TNF-α浓度升高,T1-3时p-p38MAKP和MKP-1表达上调(P＜0.05);与ALI组比较,D组BALF中蛋白和TNF-α的浓度下降,T1-3时p-p38MAKP表达下调,MKP-1表达上调(P＜0.05),病理学损伤减轻.D1组大鼠生存率高于ALI1组(P＜0.05).结论 地塞米松减轻大鼠内毒素性急性肺损伤的机制与上调肺组织MKP-1的表达,抑制p38MAPK的磷酸化,降低炎性反应有关.     

二硫代氨基吡咯烷预先给药对内毒素诱发大鼠急性肺损伤的影响

目的 评价二硫代氨基吡咯烷预先给药对LPS诱发大鼠急性肺损伤的影响.方法 健康成年Wistar大鼠54只,雌雄各半,体重180～220 g,随机分为3组:对照组(C组,n=6)、LPS组(n=24)和二硫代氨基毗咯烷预先给药组(PDTC组,n=24).LPS组腹腔注射LPS 8 mg/kg;PDTC组经尾静脉注射二硫代氨基吡咯烷120 mg/kg,30 min后腹腔注射LPS 8 mg/kg;C组注射等容量生理盐水.LPS 组和PDTC组分别于给予LPS后1、3、6和12 h时,C组于给予生理盐水后即刻,经下腔静脉取血后,各处死6只大鼠,取肺组织,采用双抗体夹心ABC-ELISA法测定血清IL-6浓度,计算肺组织湿重与干重的比值(W/D比),采用免疫组化法测定肺组织HSP70的表达和NF-κB 的活性,电镜下观察肺组织超微结构.结果 与C组比较,LPS组和PDTC组肺组织W/D比和NF-κB活性升高,HSPT0表达上调,血清IL6浓度升高(P<0.01);与LPS组比较,PDTC组肺组织W/D比和NF-κB活性降低,HSP70表达上调,血清IL-6浓度降低(P<0.01),肺组织病理损伤减轻.结论 二硫代氨基吡咯烷预先给药可减轻LPS诱发大鼠急性肺损伤,其机制可能与抑制肺组织NF-κB的活性和上调HSPT0的表达有关.     

脂多糖所致脓毒症诱导的急性肺损伤肺组织T淋巴细胞活化及共刺激分子表达的研究

目的研究腹腔注射脂多糖(LPS)诱导的小鼠急性肺损伤(ALI)模型肺组织T淋巴细胞活化状态。方法健康雄性C57BL/6随机分为生理盐水(NS)腹腔注射组,LPS腹腔注射组,每组4只。模型建立后3 h,获取两组小鼠肺组织细胞并进行T淋巴细胞各亚群及活化指标染色,采用流式细胞术检测。结果与对照组(NS)相比,LPS腹腔注射组小鼠肺组织内抑制性共刺激分子PD-1、CD40/CD40L、CTLA-4在CD4~+和CD8~+T细胞表达水平均显著升高(P0.05),协同共刺激分子CD28(MFI:298.50±4.44)表达水平降低;与对照组相比,早期活化分子CD69在LPS诱导的急性肺损伤模型小鼠肺组织内CD4~+T(MFI:848.30±95.57;t=6.8670,P0.001)和CD8~+T淋巴细胞的表达水平显著升高(MFI:606.00±95.54;t=4.8780,P0.01);晚期活化分子CD38在CD4~+T细胞表达显著升高(MFI:69.38±2.86;t=4.1150,P0.01),在CD8~+T细胞表达无明显升高。结论 LPS诱导的急性肺损伤能够导致肺组织内T淋巴细胞早期活化,并且能够上调其多种抑制性共刺激分子表达,提示T淋巴细胞可能在ALI中发挥重要作用。     

盐酸戊乙奎醚预先给药对内毒素性急性肺损伤大鼠肺组织NF-κB mRNA表达及SOD活性的影响

目的 探讨盐酸戊乙奎醚预先给药对内毒素性急性肺损伤大鼠肺组织NF-κB mRNA表达及SOD活性的影响.方法 健康雄性SD大鼠32只,月龄2月,体重230～280 g,随机分为4组(n=8),对照组(C组)腹腔和尾静脉均注射生理盐水1 ml/kg;急性肺损伤组(ALI组):腹腔注射生理盐水1 ml/kg,30 min后经尾静脉注射LPS 5 mg/kg;盐酸戊乙奎醚低剂量组(LP组)、高剂量组(HP组)分别腹腔注射盐酸戊乙奎醚0.3和1 mg/kg,30 min后经尾静脉注射LPS 5 mg/kg.静脉注射生理盐水或LPS后6 h时,取肺组织,检测NF-κB mRNA的表达、TNF-α和MDA的含量和SOD活性,计算肺组织湿/干重比(W/D)及含水量,观察肺组织病理学结果.结果 与C组比较,ALI组、LP组和HP组肺组织NF-κB mRNA表达上调,TNF-α及MDA含量升高,SOD活性降低,W/D和肺组织含水量升高(P＜0.05);与ALI组比较,LP组和HP组肺组织NF-κB mRNA表达下调,TNF-α及MDA含量降低,SOD活性升高,W/D和肺组织含水量降低(P＜0.05);与LP组比较,HP组肺组织NF-κB mRNA表达下调,TNF-α及MDA含量降低,SOD活性升高,W/D和肺组织含水量降低(P＜0.05).LP组和HP组肺组织病理学损伤较ALI组减轻.结论 盐酸戊乙奎醚预先给药减轻大鼠内毒素性急性肺损伤的机制可能与下调肺组织NF-κB mRNA表达,降低肺局部炎性反应,增强机体抗氧化能力有关.     

利多卡因对脓毒症大鼠肺组织高迁移率族蛋白B1mRNA表达的影响

目的 探讨利多卡因对脓毒症大鼠肺组织高迁移率族蛋白B1( HMGB1) mRNA表达的影响.方法 雄性Wistar大鼠50只,体重200 ～ 250 g,采用随机数字表法,将其随机分为5组(n＝10):假手术组(S组)、脓毒症组(L组)、低、中和高剂量利多卡因组(LL1组、LL2组和LL3组).除S组外,其他4组采用盲肠结扎穿孔术制备大鼠脓毒症诱发急性肺损伤模型.LL1组、LL2组和LL3组分别于术毕、术后1、2h时腹腔注射利多卡因5、10、20 mg/kg,S组和L组给予等容量生理盐水.分别于术后24、48 h时处死5只大鼠,取肺组织,测定HMGB1 mRNA表达、髓过氧化物酶(MPO)活性和NF-κB活性,光镜下观察肺组织病理学结果.结果 与S组比较,其他4组肺组织HMGB1 mRNA表达上调,MPO活性升高(P<0.05);与L组比较,LL1组、LL2组和LL3组肺组织HMGB1 mRNA表达下调,MPO活性降低(P<0.01);LL1组、LL2组和LL3组肺组织HMGB1 mRNA表达依次下调,MPO活性依次降低(P<0.05).LL1组、屿LL2和LL3组肺组织NF-κB活性逐渐降低,肺组织损伤程度逐渐减轻.结论 利多卡因减轻脓毒症大鼠急性肺损伤的机制与下调肺组织HMGB1基因表达有关,其下调HMGB1基因表达的机制与抑制NF-κB活化有关.     

高迁移率族蛋白1参与脓毒症大鼠急性呼吸窘迫综合征时中性粒细胞的凋亡

目的 探究脓毒症大鼠急性呼吸窘迫综合征(acute respiratory distress syndrome,ARDS)时高迁移率族蛋白1(high mobility group box 1,HMGB1)参与中性粒细胞(polymorphonuclear neutrophils,PMN)凋亡延迟的相关机制及正丁酸钠(sodium butyrate,SB)的干预效果. 方法 采用随机数字表法将90只健康成年雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠随机分为正常对照组(NS组,6只)、内毒素(lipopolysaccharide,LPS)致伤组(LPS组,42只)、HMGB1抑制剂SB干预组(SB组,42只),LPS组、SB组又分为7个时相点(LPS致伤后0.5、1、2、6、12、24、48 h),每个时相点6只动物.LPS组,腹腔注射LPS 5 mg/kg;SB组,腹腔注射LPS 5 mg/kg后0.5 h静脉注射SB,每次剂量500 mg/kg;NS组,腹腔注射生理盐水1 ml.LPS组、SB组于LPS注射后各时点,颈静脉取血检查PMN,取血后左肺灌洗收集支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF),取右肺中叶行HMGB1 mRNA检测;于LPS注射12h时点(NS组大鼠留取颈静脉血、收集BALF、取右肺中叶行HMGB1 mRNA检测),3组大鼠收集左肺BALF后,取右肺下叶检测肺组织湿/干重比(wet/dry weight ratio,W/D),取右肺上叶进行病理组织学检查;于24、48 h时点,LPS组、SB组取右肺下叶检测肺组织W/D、取右肺上叶进行病理组织学检查. 结果 与NS组比较,LPS组肺组织中HMGB1 mRNA表达量明显增高,24 h达最大值,差异有统计学意义(P＜0.05);SB组的HMGB1 mRNA表达量减少,差异有统计学意义(P＜0.05).LPS组BALF中凋亡早期PMN表达量与NS组类似,但凋亡晚期PMN变化则不同,LPS组外周血中凋亡晚期PMN细胞高于NS组(P＜0.05),LPS组BALF中凋亡晚期PMN细胞均低于NS组(P＜0.05).LPS 12 h组BALF的PMN百分比明显高于NS组[(49.1±6.8)、(2.7±0.5)],差异有统计学意义(P＜0.01).LPS组肺组织光镜下可见肺泡腔水肿,支气管壁中发现PMN浸润,肺泡壁毛细血管扩充血.LPS24 h组肺组织的W/D明显高于NS组[(6.71±0.12)、(4.18±0.26)],差异有统计学意义(P＜0.05).SB干预组的HMGB1 mRNA表达量减少,早期凋亡率类似,SB组的BALF晚期凋亡率高于同时点LPS组的BALF,SB外周血组晚期凋亡低于同时点LPS外周血组,差异有统计学意义(P＜0.05).SB组BALF的PMN百分比、肺组织病理损伤程度、W/D均低于LPS组,差异有统计学意义(P＜0.05). 结论 在大鼠ARDS中,HMGB1 mRNA表达较晚,但持续时间长,SB对HMGB1有潜在的治疗作用,HMGB1可能参与PMN凋亡机制的调节.     

三羟异黄酮预先给药对内毒素诱导大鼠急性肺损伤的保护作用

目的研究三羟异黄酮预先给药对内毒素诱导大鼠急性肺损伤的保护作用及其机制。方法 32只雄性Wistar大鼠,随机分为4组,每组8只:对照组(C组)、三羟异黄酮组(G组)分别腹腔注射生理盐水1 ml／kg、三羟异黄酮50 mg／kg,30 min后,静脉注射生理盐水1 ml／kg;内毒素组(L组)、三羟异黄酮预预先给药组(Gpre组)分别腹腔注射生理盐水1 ml／kg、三羟异黄酮50 mg／kg,30 min后,静脉注射脂多糖6 mg／kg。注射脂多糖后4 h处死动物。测定支气管肺泡灌洗液(BALF)中蛋白浓度、髓过氧化物酶(MPO)活性及中性粒细胞(PMN)数。检测肺组织湿干重比(W／D)、丙二醛(MDA)含量、MPO 活性、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和血红素氧合酶-1(HO-1)mRNA、蛋白表达。观察肺组织病理学的改变。结果与C组比较,L组肺损伤严重、BALF中蛋白、MPO、PMN水平和肺组织W／D、MDA及MPO水平及TNF-α和HO-1 mRNA、蛋白表达水平升高(P<0．05或0．01),G组上述指标差异均无统计学意义(P >0．05);与L组比较,Gpre组除HO-1 mRNA、蛋白表达水平升高(P<0．05)外,其他指标均降低(P< 0．05或0．01)。结论三羟异黄酮预先给药对内毒素诱导大鼠急性肺损伤有一定的保护作用,与抑制PMN在肺组织的聚集、激活,TNF-α表达下调及HO-1表达上调有关。     

高迁移率族蛋白1在内毒素性急性肺损伤大鼠肺血管重构中的作用

目的 评价高迁移率族蛋白1 (HMGB1)在内毒素性急性肺损伤大鼠肺血管重构中的作用.方法 健康清洁级雄性Wistar大鼠30只,体重220 ～ 250 g,采用随机数字表法,将大鼠随机分为3组(n=10)∶对照组(C组)、内毒素性急性肺损伤模型组(M组)和HMGB1抗体组(H组).C组尾静脉输注生理盐水5 ml/1.5 h;M组输注生理盐水3 ml/1.0h,再输注LPS 2 ml(1 mg/kg)/0.5 h;H组于注射LPS后12、24和36 h时尾静脉注射HMGB1抗体2 mg/kg.于注射LPS后72 h时处死取肺,光镜下观察肺组织病理学结果,采用图像分析软件测量并计算肺小动脉中膜/血管面积百分比,免疫组化法检测肺血管增殖细胞核抗原(PCNA)表达,Western bolt法检测HMGB1表达.结果 与C组比较,M组和H组肺小动脉中膜/血管面积百分比、PCNA和HMGB1表达水平升高(P＜0.05),肺组织急性炎症细胞增多,血管壁明显增厚；与M组比较,H组肺小动脉中膜/血管面积百分比、PCNA和HMGB1表达水平降低(P＜0.05),肺组织急性炎症和血管壁增厚明显减轻.结论 HMGB1可能是诱发内毒素性急性肺损伤大鼠肺血管重构的重要因素.     

二硫代氨基吡咯烷预先给药对内毒素诱发大鼠心肌损伤的影响

目的 评价二硫代氨基吡咯烷预先给药对LPS诱发大鼠心肌损伤的影响.方法 成年Wistar大鼠72只,体重200～250 g,雌雄各半,随机分为3组(n=24):对照组(C组)、LPS组和二硫代氨基吡咯烷组(PDTC组).LPS组腹腔注射LPS 8 mg/kg;PDTC组尾静脉注射二硫代氨基吡咯烷120 mg/kg,30 min后腹腔注射LPS 8 mg/kg;C组注射等量生理盐水.分别于注射LPS后1、3/6、12 h时,腹腔注射2%戊巴比妥钠40 mg/kg麻醉大鼠,下腔静脉取血样后处死,开胸取心脏,采用ELISA法测定血清肌钙蛋白T(cTnT)浓度,免疫组化法检测心肌组织Toll样受体4(TLR4)的表达和NF-κB p65的活性;光镜下观察心肌组织病理学结果.结果 与C组比较,LPS组和PDTC组各时点血清cTnT浓度升高,心肌组织TLR4表达上调,NF-κB p65活性升高(P＜0.01);与LPS组比较,PDTC组各时点血清cTnT浓度下降,心肌组织NF-κB p65活性降低,注射LPS后6、12 h时心肌组织TLR4表达下调(P＜0.01),病理学损伤减轻.结论 二硫代氨基吡咯烷可减轻LPS诱发大鼠心肌损伤,其机制可能与抑制心肌组织NF-κB的活性和TLR4的表达有关.     

西格列汀对小鼠内毒素性肺损伤时黏蛋白5AC表达的影响

目的评价西格列汀对小鼠内毒素性肺损伤时黏蛋白5AC(MUC5AC)表达的影响。方法 SPF级健康雄性C57BL/6小鼠36只, 6～8周龄, 体质量20～25 g, 按照随机数字表法分为3组(n=12):对照组(C组)、内毒素性肺损伤组(L组)和内毒素性肺损伤+西格列汀组(S组)。L组和S组气管内滴注LPS 3 mg/kg制备小鼠内毒素性肺损伤模型, C组小鼠气管内滴注等量生理盐水。S组于LPS滴注前1 h腹腔注射西格列汀100 mg/kg, C组和L组小鼠于气管内滴注生理盐水前1 h腹腔注射生理盐水。LPS或生理盐水滴注后24 h时经股动脉采血行动脉血气分析测定PaO2及葡萄糖水平, 随后处死小鼠收集支气管肺泡灌洗液(BALF)和肺组织, ELISA法检测血清及BALF IL-6、IL-1β和TNF-α浓度。称重后计算肺组织湿质量/干质量(W/D)比值, HE染色法观察肺组织病理学结果并行肺损伤评分, 采用免疫组化法及免疫组化综合评分法检测MUC5AC的表达, 采用qRT-PCR法检测肺组织MUC5AC的mRNA表达水平。结果与C组比较, L组和S组PaO2降低, 葡萄糖水平、W/D...     

糖皮质激素受体对内毒素性急性肺损伤大鼠的保护作用及机制

目的 探讨糖皮质激素受体(glucocorticoid receptor,GR)在内毒素急性肺损伤(acute lung injury,ALI)中的作用及机制.方法 SD雄性大鼠84只,随机数字表法分为5组:Control组,仅注射生理盐水;脂多糖(lipopoIysaccharide,LPS)组,经尾静脉注射LPS 5 mg/kg;地塞米松(dexamethasone,DEX)+LPS组,注射LPS前30 min腹腔注射Dex 6 mg/kg;米非司酮(RU486)组,皮下注射GR拮抗剂RU486 20 mg/kg,90 min后经尾静脉注射生理盐水;RU486+Dex+LPS组,按照上述顺序分别注射RU486、Dex和LPS.Control组和RU486组6 h后,其余3组分别在1、3、6 h各时间点处死.检测各组大鼠支气管肺泡灌洗液(brobehoalveolar lavage fluid,BALF)中蛋白浓度,肺水系数(1ung index,LI),肺组织的病理变化,凋亡指数(apoptosis index,AI)以及肺组织中p38MAPK的活化状态及表达.结果 与Control组BALF中蛋白浓度(49±5)g/L、LI(2.36±0.14)、AI(12.0±1.7)%相比,LPS组分别为(77±9)g/L、5.93±0.44、(43.9±3.1)%(P＜0.05),HE染色显示肺组织炎症和损伤严重.与LPS组相比,Dex+LPS组分别为(54±4)g/L、3.77±0.48、(32.7±2.7)%(P＜0.05),且肺组织损伤程度减轻,应用GR抑制剂RU486后,Dex的肺保护作用消失.另外,LPS组肺组织中磷酸化p38MAPK(p-p38MAPK)的表达与Control组相比显著升高(P＜0.05);与LPS相比,Dex+LPS组p-p38MAPK表达下调(P＜0.05),而RU486+Dex+LPS组的表达上调(P＞0.05).结论 糖皮质激素受体在内毒素导致的急性肺损伤中发挥着重要的作用.激素活化的GR可能通过抑制p38MAPK的活化/磷酸化抑制肺组织细胞的凋亡,缓解肺损伤的程度.     

内毒素预处理对内毒素血症大鼠肺的作用及机制探讨

目的 观察内毒素预处理对内毒素血症大鼠肺的作用及其机制。方法 将雄性Wistar大鼠84只随机分为7组：生理盐水(NS)组,内毒素脂多糖(LPS)2h、4h、6h组和LPS预处理2h、4h、6h组,每组12只。LPS预处理各组大鼠经腹腔注射LPS0．25mg／kg,24h后再注射LPS0．5mg/kg,NS组和LPS各组在上述时间均给予等容量NS;第2次腹腔注射72h后,LPS各组和LPS预处理各组大鼠经静脉注入(静注)LPS 10mg／kg,NS组注射等量NS。NS组在静注NS后6h,LPS2h、4h、6h组和LPS预处理2h、4h、6h组在静注LPS后2、4、6h时各取6只大鼠取血,行血气分析;取左侧肺组织检测细胞间黏附分子-1(ICAM-1)mRNA及抑制性κB-α(IκB-α)蛋白表达;计数右肺支气管肺泡灌洗液(BALF)中白细胞数,测蛋白含量。上述7组另取6只大鼠,在上述相同时点取全肺,计算肺体指数,测定髓过氧化酶(MPO)。结果 LPS各组大鼠较NS组大鼠肺体指数、BALF中白细胞数和蛋白及肺组织MPO含量均增加,氧分压和HCO3^-下降;而LPS预处理各组大鼠上述各指标变化明显减轻。肺组织ICAM-1 mRNA在LPS2h、4h和6h组表达递增,而在LPS预处理各组表达显著减少;LPS2h组肺组织IκB-α蛋白表达较NS组减少,而LPS预处理2h组较LPS2h组表达增加。结论 内毒素预处理可防止内毒素血症时的肺损伤,可能与内毒素预处理使肺组织IκB-α蛋白生成增加和(或)消耗减少有关。     

姜黄素抑制TLR4/HMGB1通路保护脂多糖诱导急性肺损伤的作用

目的探讨姜黄素对脂多糖(LPS)诱导急性肺损伤的保护作用及相关机制。方法将24只SD大鼠随机分为对照组、LPS组和LPS+姜黄素组,每组8只。检测肺损伤指标(氧分压、肺干湿重比、肺病理评分)、肺组织炎症反应程度[肿瘤坏死因子(TNF)-α、白介素(IL)-6、单核细胞趋化蛋白(MCP)-1以及肺组织中Toll样受体4(TLR4)、高迁移率族蛋白B1(HMGB1)表达水平]。结果 LPS组氧分压显著低于对照组(P0.05),而肺干湿重比、肺病理评分、TNF-α、IL-6、MCP-1、TLR4、HMGB1表达水平显著高于对照组(P0.05);LPS+姜黄素组氧分压高于LPS组(P0.05),肺干湿重比、肺病理评分、TNF-α、IL-6、MCP-1、TLR4、HMGB1表达水平显著低于LPS组(P0.05)。结论姜黄素可能通过抑制TLR4/HMGB1通路,降低肺炎症反应程度,发挥保护LPS诱导急性肺损伤作用。     

甘草甜素对大鼠脓毒血症引起的急性肺损伤的保护作用

目的 观察甘草甜素(GL)对大鼠脓毒血症引起的急性肺损伤(ALI)的保护作用.方法 采用脂多糖(LPS)尾静脉注射诱导大鼠脓毒血症引起的AI模型.雄性SD大鼠30只,随机均分为五组:对照组(C组)、模型组(S组.静注LPS 7.5 mg/kg)、GL处理组(GL1、GL2、GL3组,分别于静注LPS 7.5 mg/kg前10 min腹腔注射GL、30、60、120 mg/kg).LPS静沣后12 h,测定各组大鼠支气管肺泡灌洗液(BALF)中自细胞总数、总蛋白的含量、肺组织髓过氧化物酶(MPO)活性和湿干重比值.并观察肺组织病理学变化.结果 与C组相比.S组BALF中白细胞计数、总蛋白含量、肺组织MPO活性和湿千重比值明显增加(P<0.05);S组肺组织切片观察见明显的炎细胞浸润、充血、水肿等.与S组相比,GL1、GL2、GL3组BALF中白细胞计数、总蛋白含量、肺组织MPO活性和肺组织湿干重比值均降低(P<0.05).病理学损伤也减轻;GL3组损伤减轻较GL1、GL2组更为明显(P<0.05).结论 GL可减轻肺泡毛细血管屏障的损伤,并随着剂量的加大损伤减轻更加明显,对脓毒血症引起的急性肺损伤具有保护作用.     

不同剂量6%羟乙基淀粉130/0.4预先给药对大鼠内毒素性急性肺损伤的影响

目的 研究不同剂量6%羟乙基淀粉130/0.4(6% HES 130/0.4)预先给药对大鼠内毒素性急性肺损伤的影响.方法 72只健康清洁级雄性SD大鼠随机分为6组(n=12),对照组(C组)经尾静脉注射生理盐水30 ml/kg;肺损伤组(L组)经尾静脉注射脂多糖(LPS)5 mg/kg;不同剂量6%HES130/0.4组分别经尾静脉注射6%HES 130/0.4 7.5 ml/kg(H1组)、15 ml/kg(H2组)和30 ml/kg(H3组),1 h后再经尾静脉注射LPS 5 mg/kg;H4组经尾静脉注射6%HES 130/0.4 30 ml/kg.各组给药速率均为0.2ml/min.注射LPS后4 h行动脉血气分析,气管插管.每组取6只大鼠,测定肺组织微血管通透性指数(PMPI);每组取6只大鼠,测定支气管肺泡灌洗液(BALF)蛋白浓度、肺组织湿/干重比(W/D)、髓过氧化物酶(MPO)活性,血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-10(IL-10)、丙二醛(MDA)浓度和超氧化物歧化酶(SOD)活性,观察肺组织病理学.结果 与L组比较,H2组血清TNF-α、IL-1β、MDA浓度和肺组织MPO活性降低,血清IL-10浓度和SOD活性升高,H1组IL-1β浓度降低,H1组、H2组和H3组PMPI、BALF蛋白浓度和W/D均降低(P＜0.05);与H2组比较,H1组和H3组血清TNF-α、MDA浓度和肺组织MPO活性升高,血清SOD活性、IL-10浓度降低,H3组血清IL-1β浓度升高(P＜0.05).H1组、H2组和H3组较L组肺组织损伤较轻,其中H2组损伤最轻.结论 15 ml/kg6%HES 130/0.4预先给药可减轻大鼠内毒素性急性肺损伤,其机制可能与抑制炎性因子释放、减少肺内中性粒细胞聚集和氧自由基生成、改善肺微血管通透性有关.     

休克期切痂对烫伤大鼠肺高迁移率族蛋白B1表达的影响及其意义

目的　探讨休克期切痂对烫伤大鼠肺高迁移率族蛋白B1(HMGB1)表达的影响及其与急性肺损伤的关系。方法　将 3 0 %Ⅲ度烫伤Wistar大鼠随机分为 2 4和 72h切痂植皮组。RT PCR和免疫组织化学法检测肺HMGB1变化 ,肺髓过氧化物酶 (MPO)结合病理形态学观察肺损伤情况。结果　伤后 4d、2 4h切痂组肺HMGB1mRNA和Ⅱ型上皮细胞HMGB1蛋白表达较烫伤对照和72h切痂组均有明显下调 (P <0 .0 5 )。伤后大鼠肺MPO活性增强近 2倍 ,而 2 4h切痂大鼠 4d肺MPO活性明显降低。结论　休克期切痂可下调肺组织HMGB1表达 ,部分减轻烫伤后急性肺损伤。