ERK1/2通路及其介导多发性硬化发病的研究进展

丝裂原活化蛋白激酶1/2（ERK1/2）通路是第一个被发现的细胞信号转导通路,由Ras、Raf、MEK1/2和ERK1/2组成。ERK1/2通路激活后可以将细胞外信号从细胞膜转到细胞核,参与了细胞的多种生理病理功能,如细胞的生长、增殖、分化和凋亡等,并且与多种疾病的发病有关,包括多发性硬化（MS）和实验性自身免疫性脑脊髓炎（EAE）。ERK1/2通路的激活可以引起星形胶质细胞、MG、T细胞、巨噬细胞等活化,释放多种炎性因子,引起髓鞘损伤,导致MS/EAE的发病。多项研究表明,通过抑制ERK1/2通路可以减少炎性因子的释放,减轻髓鞘损伤,改善MS/EAE的病情,为治疗MS药物的开发提供了重要的靶点。     

柴朴汤对哮喘模型大鼠气道炎症及ERK/p38 MAPK信号通路的影响

目的:观察柴朴汤对哮喘模型大鼠气道炎症及细胞外信号调节激酶(ERK)/p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)信号通路的影响。方法:SD大鼠随机分为空白组、模型组、柴朴汤低、中、高(0.75,1.5,3.0 g·kg-1)组,地塞米松组。采用卵蛋白(OVA)致敏激发建立大鼠哮喘模型。柴朴汤低、中、高剂量组于激发前0.5 h给予相应剂量柴朴汤灌胃;地塞米松组于激发前0.5 h给予地塞米松(0.005 g·kg-1)灌胃;模型组于激发前0.5 h给予等体积生理盐水灌胃;空白组以生理盐水代替OVA进行腹腔注射及雾化吸入;隔日1次,共激发28 d。观察各组大鼠支气管肺泡灌洗液(BALF)中细胞总数及分类细胞计数的变化;酶联免疫吸附法(ELISA)检测肺组织磷酸化ERK(p-ERK),磷酸化p38 MAPK(p-p38 MAPK)的活性;实时荧光定量PCR(Real-time PCR)分析检测ERK,p38 MAPK mRNA的表达;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测ERK,p-ERK,p38MAPK,p-p38 MAPK蛋白的表达;光镜下观察病理组织形态学变化及进行炎症评分。结果:模型组大鼠BALF中细胞总数和分类细胞计数;肺组织p-ERK,p-p38 MAPK的活性,ERK,p38 MAPK mRNA的表达,p-ERK,p-p38 MAPK的表达,炎症评分均明显高于空白组(P0.01);柴朴汤低、中、高剂量组和地塞米松组上述指标则明显低于模型组(P0.05,P0.01)。结论:柴朴汤可改善哮喘模型大鼠气道炎症,其机制可能与其抑制ERK/p38 MAPK信号通路有关。     

健脾解毒方对脾虚肝癌大鼠生存的影响及与TCR、ERK1/2信号通路的关系

目的探讨健脾解毒方对脾虚肝癌大鼠生存的影响及与TCR、ERK1/2、p-ERK1/2的关系。方法 105只Wistar大鼠脾虚肝癌模型组,进行造模和干预。随机分为空白对照组(A组),肝癌模型组(B组),脾虚对照组(C组),脾虚肝癌模型组(D组),健脾解毒方低浓度E组、高浓度F组及胸腺五肽组(G组)。实验中记录动物的体质量、生存时间、肝癌大鼠濒死状态时恶液质积分并采集标本。Western blot方法检测大鼠肝组织、肝癌组织、T淋巴细胞中TCR蛋白表达,以及T淋巴细胞中ERK1/2、p-ERK1/2蛋白的表达。结果健脾解毒方高浓度组和胸腺五肽组大鼠终末期体质量、累积生存率高于脾虚肝癌模型组及肝癌模型组(P 0. 05),终末期恶液质积分则更低(P 0. 05)。健脾解毒方高浓度组大鼠肝组织、癌组织中TCR蛋白表达量,外周T淋巴细胞中TCR蛋白、ERK1/2蛋白、p-ERK1/2蛋白表达量均较脾虚肝癌模型组明显增加(P 0. 05)。结论高浓度健脾解毒方能延缓荷瘤鼠恶液质的发生和进展,明显延长荷瘤鼠生存时间,其作用可能与健脾解毒方上调TCR、ERK1/2及p-ERK1/2有关。     

电针内关穴对心肌肥厚大鼠Raf、ERK1/2及p-ERK 1/2表达的影响

目的观察电针内关穴对心肌肥厚大鼠缺血心肌原癌基因丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶-1(protooncogene serine/threonine-protein kinase-1,Raf-1)、细胞外信号调节激酶1/2(extracellular signal regulated kinase 1/2,ERK 1/2)和磷酸化细胞外信号调节激酶1/2(phospho-extracellular signal-regulated kinase 1/2,p-ERK 1/2)蛋白表达的影响。方法清洁级健康SD大鼠40只按随机数字表法分为正常组、模型组、对照组和电针组,每组10只,除正常组正常饲养外,其余三组采用颈背部皮下注射盐酸异丙肾上腺素[isoprinosine hydrochloride,ISO,3 mg/(kg·d)]制备大鼠左心室心肌肥厚模型,共14天。电针组每天注射ISO后取"内关"穴治疗,采用连续波,频率2 Hz,强度1 m A,通电20 min,1次/天,共14天。对照组选取非穴位,内关穴外侧旁开5 mm,干预方法与电针组相同。干预结束后观察大鼠心电图并称重,麻醉后开胸摘取心脏并称重,然后分离左心室称重,并计算左心室质量指数(left ventricular weight index,LVWI)和全心质量指数(heart weight index,HWI);免疫印迹法检测左心室心肌组织Raf-1、p-ERK 1/2及ERK 1/2蛋白含量。结果与正常组比较,模型组ST段抬高幅度、HWI、LVWI、心肌组织Raf-1及p-ERK 1/2蛋白表达升高(P0.01)。与模型组及对照组比较,电针组ST段抬高幅度、HWI、LVWI、Raf-1及p-ERK 1/2蛋白表达降低(P0.05)。结论电针能有效调节心肌肥厚大鼠心肌缺血状况,降低心肌肥厚大鼠心脏指数、Raf-1及p-ERK 1/2蛋白含量,可能是电针通过调节Raf/MEK/ERK改善心肌肥厚的信号调节机制之一。     

基于MEK/ERK信号通路探讨阳和汤含药血清对乳腺癌4T1细胞的影响

目的 通过阳和汤含药血清干预小鼠乳腺癌4T1细胞,探索阳和汤对乳腺癌4T1细胞及其内丝裂原活化蛋白激酶（MEK）/细胞外调节蛋白激酶（ERK）信号通路的影响。方法 制备阳和汤SD大鼠含药血清。将其随机分组为空白组、阳和汤低、中、高剂量组（5.8、11.6、23.2 g·kg^-1）,空白组用生理盐水代替。各组按10%含药血清和90% RMPI 1640完全培养基均匀混合,干预细胞。采用细胞增殖与活性检测（CCK-8）法分别在24、48、72 h检测阳和汤含药血清对4T1细胞增殖的影响;采用流式细胞术检测4T1细胞的凋亡情况;采用划痕实验检测4T1细胞迁移情况;采用Transwell实验检测细胞侵袭能力;采用蛋白免疫印迹法（Western blot）检测MEK1/2、磷酸化（p）-MEK1/2、ERK1/2、p-ERK1/2、大鼠肉瘤病毒（RAS）蛋白的表达水平。结果 与空白组比较,阳和汤干预24、48、72 h,阳和汤含药血清低、中、高剂量组对4T1细胞增殖具有明显抑制作用（P<0.05,P<0.01）;阳和汤干预48 h,阳和汤含药血清低、中、高剂量组细胞凋亡率显著升高（P<0.01）;阳和汤含药血清低、中、高剂量组在24、48 h的细胞划痕愈合能力显著降低（P<0.01）;阳和汤含药血清低、中、高剂量组细胞侵袭能力显著降低（P<0.01）;阳和汤含药血清低、中、高剂量组细胞内MEK1/2、ERK1/2表达差异无统计学意义,p-MEK1/2、p-ERK1/2、RAS蛋白表达显著降低（P<0.01）。结论 阳和汤可抑制乳腺癌细胞4T1增殖、迁移、侵袭,促进其凋亡。其凋亡机制与MEK/ERK信号通路受抑制,p-MEK1/2、p-ERK1/2、RAS蛋白表达下调有关。     

颐脑解郁方对抑郁大鼠脑内ERK通路的影响

目的:观察抑郁大鼠脑内细胞外信号调节激酶(ERK)通路的表达及颐脑解郁方的干预作用。方法:建立抑郁模型,采用蛋白印迹(Western Blot)实验方法,研究ERK1/2在抑郁模型大鼠脑内左前额叶皮质、海马的表达及颐脑解郁方的干预作用。结果:模型组大鼠海马、前额皮质的ERK1/2表达明显下降,与正常组相比较,有显著性差异(P0.05,P0.01);颐脑解郁方干预后可上调ERK1/2在脑内的表达,与模型组相比有显著性差异(P0.05,P0.01)。结论:抑郁模型大鼠脑内ERK1/2表达降低,颐脑解郁方可使之明显上调,颐脑解郁方的抗抑郁作用可能与上调ERK1/2信号转导通路有关。     

归脾汤对心肌缺血大鼠ERK1/2和p38 MAPK表达的影响

目的：探究归脾汤对心肌缺血大鼠的治疗作用及机制。方法：50只SD大鼠随机分为正常组、模型组、归脾汤低、高剂量组(7.52、15.04 g·kg^-1)、曲美他嗪组(0.002 g·kg^-1)。通过灌胃维生素D₃、高脂饮食和注射异丙肾上腺素的方法建立心肌缺血大鼠模型，药物治疗15 d后，心电图分析其心肌损伤程度；全自动生化分析仪检测血清中总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)和低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)的变化；苏木素-伊红(HE)和马松(Masson)染色观察心肌组织病理改变；原位末端标记(TUNEL)染色检测心肌细胞凋亡；蛋白免疫印迹法(Western blot)检测大鼠心脏中细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)、磷酸化ERK1/2(p-ERK1/2)、p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)、磷酸化p38 MAPK(p-p38 MAPK)、B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)相关X蛋白(Bax)、Bcl-2、剪切胱天蛋白酶-3(cleaved Caspase-3)蛋白表达。结果：与正...     

龟鹿益神颗粒调控MEK/ERK通路对慢性疲劳模型大鼠行为学及骨骼肌抗氧化系统的影响

目的:观察龟鹿益神颗粒对慢性疲劳大鼠模型行为学、骨骼肌MEK1/2、ERK1/2、SIRT1、SIRT3蛋白表达的影响,从MEK/ERK信号传导通路、抗氧化应激效应角度探讨龟鹿益神颗粒治疗慢性疲劳综合征的作用机制。方法:雄性SD大鼠60只,随机分为正常组、模型组、苁蓉益肾颗粒组、龟鹿益神颗粒低、中、高剂量组,每组10只。采用慢性束缚加力竭游泳复合方法构建慢性疲劳大鼠模型,造模14 d后,正常组、模型组每天给予生理盐水灌胃,其余各组给予相应药物,14 d后测量大鼠体质量、旷场跨格次数、力竭游泳时间,取骨骼肌组织,蛋白印迹法测定MEK1/2、ERK1/2、SIRT1、SIRT3蛋白表达水平。结果:给药前:与正常组比较,各组大鼠体质量、旷场跨格次数、力竭游泳时间明显减少(P0.05,P0.05,P0.01)。给药后:和模型组比较,各治疗组大鼠体质量、旷场跨格次数、力竭游泳时间均有显著增加(P0.05,或P0.01),骨骼肌MEK1/2、ERK1/2、SIRT1、SIRT3表达显著增加(P0.01,P0.05,P0.05,P0.01)。结论:龟鹿益神颗粒能够显著改善慢性疲劳大鼠行为学指标,对MEK/ERK信号通路完整性有保护作用,可能通过提高骨骼肌中SIRT1和SIRT3,减轻氧化应激,发挥抗氧化作用,这也可能是其治疗慢性疲劳的作用机制之一。     

基于Raf/MEK/ERK 信号通路探讨黄芪建中汤治疗大鼠脾胃虚寒型十二指肠溃疡的作用机制

目的探讨黄芪建中汤通过Raf/MEK/ERK 信号通路治疗大鼠脾胃虚寒型十二指肠溃疡（DU）的作用机 制。方法将60 只SD 大鼠随机分为正常对照组、模型组、埃索美拉唑组（4.17 mg·kg-1）以及黄芪建中汤高、 低剂量组（18.54、9.27 g·kg-1）。采用“苦寒泻下+劳倦过度”法联合阿司匹林、无水乙醇构建脾胃虚寒型DU 大鼠模型。灌胃给药,每天1 次,连续4 d。观察大鼠十二指肠黏膜损伤情况并计算溃疡指数和治疗指数;采 用HE 染色法观察十二指肠黏膜组织病理形态学改变;采用酶联免疫吸附试验检测十二指肠组织中前列腺素 E2（PGE2）、白细胞介素10（IL-10）、肿瘤坏死因子α（TNF-α）水平;免疫荧光法检测十二指肠黏膜磷酸化丝氨 酸/苏氨酸蛋白激酶（p-Raf）、磷酸化有丝分裂原活化蛋白激酶激酶1/2（p-MEK1/2）、磷酸化细胞外信号调节激 酶1（p-ERK1）蛋白表达。结果与正常对照组比较,模型组大鼠的十二指肠溃疡指数显著升高（P < 0.01）;小 肠绒毛脱落,隐窝脓肿,小肠绒毛长度和隐窝深度均显著降低（P < 0.01）;肠黏膜PGE2、IL-10 含量均明显降 低（P < 0.01）,TNF-α 含量显著增加（P < 0.01）;肠黏膜p-Raf、p-MEK1/2 和p-ERK1 蛋白表达量均明显增 加（P < 0.01）。与模型组比较,黄芪建中汤各剂量组的大鼠十二指肠溃疡指数均明显降低（P < 0.01）;肠黏膜 损伤得到明显改善,黏膜形态趋于完整,小肠绒毛长度和隐窝深度均明显增加（P < 0.01）;肠黏膜PGE2 和 IL-10 含量均明显提高（P < 0.01）,TNF-α 含量显著降低（P < 0.01）;肠黏膜p-Raf、p-MEK1/2 和p-ERK1 蛋 白表达均显著下调（P < 0.01）。结论黄芪建中汤对脾胃虚寒型DU 大鼠具有治疗作用,其机制可能与调控 PGE2、TNF-α、IL-10 等炎症介质水平,抑制Raf/MEK/ERK 信号通路活化有关。     

基于Raf/MEK/ERK通路探讨平胃胶囊含药血清对MNNG诱导的人胃黏膜上皮细胞炎癌转化的影响

目的 从快速加速纤维肉瘤/丝裂原活化的细胞外信号调节激酶/细胞外信号调节激酶（Raf/MEK/ERK通路探讨平胃胶囊治疗慢性萎缩性胃炎的可能作用机制。方法 15只SD大鼠随机分为空白组5只、平胃胶囊组10只,空白组大鼠给予1 ml/100 g的生理盐水灌胃,平胃胶囊组大鼠给予平胃胶囊混悬液0.63 g/（kg·d）灌胃,连续3天后采集血清。采用N-甲基-N-硝基-亚硝基胍（MNNG）诱导人胃黏膜上皮细胞GES-1建立癌前病变细胞模型。将造模成功细胞分为对照组（10%胎牛血清）、空白血清组（10%胎牛血清+10%空白血清）、含药血清组（平胃胶囊含药血清）,采用CCK-8法筛选平胃胶囊含药血清干预体积分数及时间。将人胃黏膜上皮细胞GES-1分为正常组、模型组、空白血清组、含药血清组、U0126组、联合组,每组3个复孔。除空白组外其余各组细胞造模成功后,正常组和模型组加入等体积的胎牛血清,空白血清组加入等体积的空白血清,含药血清组加入筛选确认的体积分数的平胃胶囊含药血清,U0126组给予10μmol/L的丝裂原活化的细胞外信号调节激酶1 (MEK1)抑制剂U0126,联合组给予等体积的平胃胶...     

复方七芍降压片对SHR大鼠P2Y6、MEK1/2、ERK1/2及血管重塑标志物MMP-9、TIMP-1蛋白表达的影响

目的研究复方七芍降压片对自发性高血压大鼠(SHR)肠系膜动脉中G蛋白偶联受体P2Y6、酪氨酸激酶受体(MEK1/2)、丝裂原活化蛋白激酶(ERK1/2)及血管重塑标志物基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、组织基质金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1)等蛋白表达的影响,探讨复方七芍降压片干预血管重塑的作用机制。方法将雄性SHR大鼠随机分为模型组、厄贝沙坦片组(13.5 mg·kg^-1)、复方七芍降压片组(8.73 g·kg^-1),每组10只,另设10只WKY大鼠为正常对照组;灌胃给药,每日1次,连续给药6周。采用无创血压仪测定每周大鼠尾动脉血压;ELISA法检测大鼠血清中白细胞介素-1β(IL-1β)水平;免疫组化法检测肠系膜动脉中P2Y6、MEK1/2、ERK1/2、MMP-9及TIMP-1蛋白的表达;肠系膜动脉组织HE染色后进行体视学分析,测量肠系膜动脉血管中膜厚度及相同位置的管腔直径,计算两者比值作为动脉壁厚度(WT)值。结果与正常对照组比较,模型组大鼠各周血压明显上升(P<0.01);肠系膜动脉P2Y6、MEK1/2、ERK1/2、MMP-9蛋白表达及MMP-9/TIMP-1比值、WT值明显升高(P<0.05,P<0.01),TIMP-1表达明显降低(P<0.01);血清中IL-1β水平明显升高(P<0.01)。药物干预后,与模型组比较,复方七芍降压片组各周血压均明显降低(P<0.01);肠系膜动脉P2Y6、MEK1/2、ERK1/2、MMP-9蛋白表达及MMP-9/TIMP-1比值、WT值均明显降低(P<0.05,P<0.01),TIMP-1表达明显升高(P<0.05);血清中IL-1β水平明显降低(P<0.05)。结论复方七芍降压片能够显著降低SHR大鼠血压,改善血管重塑,可能与调控肠系膜动脉中P2Y6、MEK1/2、ERK1/2蛋白表达,减轻炎症反应有关。     

热敏灸对骨质疏松症大鼠筋膜中ERK1／2的影响

目的：探讨热敏灸对骨质疏松症大鼠筋膜中ERK1／2的影响。方法：选取80只SD雌性大鼠随机分为正常组,模型组、艾灸组及热敏灸组,每组各20只。对后三组进行造模使其处于骨质疏松症病理状态下,然后对艾灸组及热敏灸组取”肾俞”穴进行常规艾灸及热敏灸治疗,通过westem—blot检测各组ERK1／2的表达水平以观察其改变情况。结果：正常组与模型组中ERK1／2都有少量表达,艾灸与热敏灸组中ERK1／2表达情况都有不同程度改变,尤其热敏灸组改变情况明显,差异具有统计学意义（P〈0．05）。结论：实施热敏灸时,灸信号可能通过使热敏态穴区筋膜结缔组织中ERK1／2信号通路蛋白发生变化,进而对人体生理病理状态起调节作用。     

贝母素乙抑制MEK/ERK的磷酸化对新生小鼠柯萨奇B病毒性心肌炎心肌细胞凋亡和炎症水平的影响

目的:探究贝母素乙抑制MEK/ERK的磷酸化对新生小鼠柯萨奇B病毒性心肌炎心肌细胞凋亡和炎症水平的影响。方法:48只新生BALB/c小鼠中随机挑8只作正常对照组,剩余小鼠采用柯萨奇B3病毒感染小鼠构建CVB3心肌炎动物模型,建模成功后再随机分为曲美他嗪1 mg/kg阳性对照组、模型对照组和贝母素乙2. 5、5、10 mg/kg组;分别尾静脉注射或者灌胃相应药物,连续处理28 d,1次/d;检测小鼠心脏功能指标(心率HR、左心射血分数LVEF、左心室缩短分数FS、左心室壁厚度LVWT及左心室收缩末期容积LVESV);采用ELISA法检测血清中心损标记物肌酸激酶(CK)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)、肌红蛋白(Mb)、炎症因子白细胞介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)及一氧化氮合酶(i NOS)的含量,HE染色观察心肌损伤情况,RT-PCR和Western blotting检测Caspase-3、Caspase-9、丝裂原活化的细胞外信号调节激酶(MEK)/细胞外调节蛋白激酶(ERK)的磷酸化水平。结果:与正常对照组相比,CVB3模型组小鼠心肌细胞...     

四君子汤加减对脑缺血/再灌注损伤大鼠脑组织ERK1/2，Akt，Bax表达的影响

目的:观察四君子汤加减对脑缺血/再灌注损伤大鼠细胞外调节蛋白激酶1/2(ERK1/2),蛋白激酶B(Akt),细胞淋巴瘤/白血病-2相关X蛋白(Bax)的影响,探讨其保护神经细胞可能作用机制。方法:将55只雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、依达拉奉组、四君子汤加减低、中、高剂量组(3.69,7.38,14.76 g·kg-1)。采用线栓法制备大脑中动脉阻塞(MCAO)模型,治疗7 d后处死,取大鼠缺血侧脑组织,运用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测磷酸化ERK1/2(p-ERK1/2),磷酸化Akt(p-Akt),Bax蛋白含量。应用实时荧光定量聚合酶链式反应法(Real-time PCR)测定脑缺血再灌注后脑组织内ERK1/2,Akt,Bax mRNA的表达变化。结果:与假手术组比较,模型组p-ERK1/2,p-Akt蛋白及mRNA表达显著下调(P0.01);Bax蛋白及mRNA表达显著上调(P0.01);与模型组比较,四君子汤加减低、中、高剂量组p-ERK1/2,p-Akt蛋白及mRNA表达明显上调,Bax蛋白及mRNA表达明显下调,差异具有统计学意义(P0.01)。结论:四君子汤加减可能通过上调p-ERK1/2,p-Akt,下调Bax蛋白表达发挥脑保护作用。     

补益心脾对产后抑郁症大鼠模型Th1/Th2平衡细胞免疫调节作用的影响

目的:观察产后抑郁症大鼠模型Th1和Th2细胞比例的变化并探讨参芪解郁方对产后抑郁症Th1/Th2平衡的调节作用机制。方法:选取SD雌性大鼠90只,随机分为正常组、模型组、假手术组、中药组、西药组,每组6只,设灌胃1、2、4周3个时间点。采用流式细胞术检测3个时间点各组大鼠外周血Th1细胞和Th2细胞比例,并计算Th1/Th2比值。结果:1周模型组Th1及Th2细胞比例较正常组降低,差异有统计学意义(P 0. 05),2周、4周模型组较正常组升高,差异有统计学意义(P 0. 05); 1周模型组Th1/Th2比值较正常组升高,差异有统计学意义(P 0. 05),2周、4周模型组较正常组降低,差异有统计学意义(P 0. 05) 3、1周中药组Th1细胞比例较模型组升高,2周、4周中药组较模型组降低,差异有统计学意义(P 0. 05)。1周中药组Th2细胞比例较模型组升高(P 0. 05); 2周、4周中药组较模型组降低,差异有统计学意义(P 0. 05)。1周中药组Th1/Th2比值较模型组降低; 2周中药组较模型升高(P 0. 05),4周中药组升高明显,差异有统计学意义(P 0. 05)。结论:Th1/Th2平衡细胞参与产后抑郁症大鼠模型的发生发展,参芪解郁方通过对产后抑郁症Th1/Th2失衡状态的调节而发挥其效用。     

β-细辛醚改变抑郁模型大鼠行为及对海马MEK-ERK级联通路的影响

目的:探讨β-细辛醚对改善抑郁模型大鼠行为及调节大鼠海马组织中丝裂原细胞外激酶-细胞外信号调节蛋白激酶(MEK-ERK)级联通路的作用。方法:2~3月龄SD大鼠80只,分为4组(对照组、模型组、氟西汀组和β-细辛醚组),每组20只。孤养并给予慢性轻度不可预见性刺激。于模型复制成功后第2天开始,分别给予氟西汀组和β-细辛醚组1次/d灌胃,给药剂量分别为氟西汀1.2 mg·kg-1,β-细辛醚25 mg·kg-1。于实验第1,7,14,21天,对每组大鼠进行体重测量、行为学分值评定、糖水消耗量测定。采用RT-PCR法对海马组织中MEK,ERK mRNA行定量分析。免疫组织化学法检测MEK,p-ERK蛋白表达水平。结果:与正常组比较,模型组大鼠随着造模天数增加而表现体重下降,第14天开始,体重下降明显,差异有统计学意义(P<0.05);Open-field-test水平、垂直运动得分与糖水偏爱度显著降低,第7天开始表现明显差异(P<0.01);海马组织中MEK,ERK基因水平显著降低(P<0.01);MEK,p-ERK蛋白表达降低(P<0.05)。与模型组比较,β-细辛醚组大鼠行为学评定结果改善,第14,21天体重增加差异显著(P<0.05);Open-field-test运动评分于14 d开始升高,差异具有明显统计学意义(P<0.01);糖水偏爱度升高;海马组织中MEK,ERK mRNA水平上调(P<0.01),MEK,p-ERK蛋白表达增强,差异具有统计学意义(P<0.05)。效果与氟西汀组相近。结论:β-细辛醚可有效缓解大鼠抑郁症状,其机制可能与增加大鼠海马组织中的MEK,p-ERK蛋白表达有关。     

映山红总黄酮对脑缺血大鼠ERK通路的影响

目的:观察映山红总黄酮(TFR)对大鼠全脑缺血-再灌注损伤是否具有保护作用,以及保护作用是否与ERK信号转导通路有关。方法:采用四血管结扎法建立大鼠全脑缺血-再灌注损伤模型。记录脑缺血前、缺血10min和再灌注后5、10、15、30、45、60 min的脑电图改变;采用蛋白免疫印迹方法,测定大鼠脑皮质和海马组织中ERK1/2和p-ERK1/2在脑缺血-再灌注后表达的变化,以及TFR对此变化的影响。结果:脑缺血时大鼠的脑电图幅度迅速下降,再灌注后脑电幅度逐渐恢复。再灌注45 min和60 min时,映山红总黄酮各剂量组脑电图幅度与模型组比较差异显著(P0.05或P0.01)。蛋白印迹结果显示,与模型组比较,映山红总黄酮各剂量组p-ERK1/2的表达显著性升高(P0.05)。结论:TFR对大鼠全脑缺血-再灌注损伤有保护作用,其机制可能与增加大鼠脑组织中ERK1/2的激活有关。     

左、右归丸对肾虚质大鼠海马区MEK/ERK/CREB信号通路的影响

目的观察左、右归丸对肾虚质大鼠海马区MEK/ERK/CREB信号通路的影响,探讨其治疗肾虚质学习记忆障碍的作用靶点。方法采用"猫吓鼠"方法,构造先天不足+后天惊恐的复合型肾虚质仔鼠,分为肾虚组、左、右归丸组,空白组产自正常孕鼠。实验组予左、右丸浓缩液灌胃,2次/d,连续4周,空白组和肾虚组予等体积生理盐水。Morris水迷宫测定大鼠学习记忆能力。酶联免疫吸附法(ELISA)检测MEK、ERK、CREB蛋白含量。结果①水迷宫实验:对比空白组,肾虚质组逃避潜伏期、总路程、首次穿越目标时间延长;目标区域停留时间减少;实验组明显改善。②测定蛋白含量实验:对比空白组,肾虚质组MEK、ERK、CREB蛋白表达下降;实验组蛋白表达均明显上调。实验组间无显著性差异。结论海马区MEK/ERK/CREB信号通路可能是左、右归丸治疗肾虚质学习记忆减退的作用靶点之一。