淫羊藿甙对小鼠腹腔巨噬细胞功能的影响

本实验根据小鼠腹腔巨噬细胞吞噬中性红的能力对巨噬细胞产生白细胞介素－１（ＩＬ－１）和肿瘤坏死因子的能力进行活测定。观察了淫羊藿甙对小鼠腹腔巨噬细胞功能的影响。     

体外培养恒河猴外周血单核巨噬细胞的研究

目的：建立一种简单、经济、高效地培养恒河猴外周血单核巨噬细胞（monocyte-derived macrophage,MDM）的方法。方法：用肝素钠抗凝管采集健康成年中国恒河猴（Macaca mulatta）全血,密度梯度离心法分离外周血单核细胞（peripheral blood mononuclear cells, PBMCs）。同时用无抗凝剂采血管采集同一只猴外周血,自凝后分离血清。将猴PBMCs置于CELLBIND Surface的96孔（0.8×106个细胞/孔）或48孔培养板（3×106个细胞/孔）中,用含不同百分比的猴自体血清或胎牛血清（fetal calf serum,FCS）的RPMI 1640培养液培养24h后洗弃未贴壁细胞,加入含有猴自体血清或FCS的新鲜培养基继续培养7天后观察细胞形态学。分化良好的猴单核巨噬细胞贴壁能力强,占据板底大部分区域。胞体形态多样,多数呈长梭形。用巨噬细胞标记受体（CD14）抗体染色判断细胞纯度。并用细菌内毒素（LPS）刺激分化的巨噬细胞,检测巨噬细胞炎性因子的表达。此外,用猴艾滋病毒（SIVmac17E-Br、SIVmac251）和人-猴嵌合体艾滋病毒（SHIV KU-1）感染分化良好的猴巨噬细胞,检测病毒在猴巨噬细胞中的复制。结果：在含2%猴自体血清的RPMI 1640培养条件下,大多数（>85%）猴单核细胞能在24h内贴壁,体外分化5-7天后,猴巨噬细胞纯度大于96%。相比而言,含较高浓度（4%,8%或10%）猴自体血清或FCS的RPMI 1640 培养基对猴单核细胞的贴壁和分化作用较差。分化良好的猴巨噬细胞对LPS刺激敏感,可产生多种巨噬细胞炎性因子。此外,这些细胞对SIV或SHIV均易感,产生感染性病毒。结论：含2%猴自体血清的RPMI 1640培养基适于原代猴单核细胞的贴壁和分化。该方法简单、花费少,无需生长因子,且分化效果好,是培养猴艾滋病毒及开展相关免疫学实验的重要手段。     

恒河猴外周血单核巨噬细胞体外培养方法的建立

目的 建立一种简单、经济、高效的培养恒河猴外周血单核巨噬细胞(monocyte-derived macrophage,MDM)的方法。方法 用肝素钠抗凝管采集成年恒河猴(Macaca mulatta)全血,密度梯度离心法分离外周血单核细胞(peripheral blood mononuclear cells, PBMCs)。同时用无抗凝剂采血管采集同一只猴外周血,自凝后分离血清。将猴PBMCs置于CellBIND Surface的96孔(0.8×10⁶个细胞/孔)或48孔培养板(3×10⁶个细胞/孔)中,用含不同百分比的猴自体血清或胎牛血清(fetal calf serum,FCS)的RPMI 1640培养液培养24 h后洗弃未贴壁细胞,加入含有猴自体血清或FCS的新鲜培养基继续培养7 d后观察细胞形态学。分化良好的猴单核巨噬细胞贴壁能力强,占据板底大部分区域。胞体形态多样,多数呈长梭形。用巨噬细胞标记受体(CD14)抗体染色判断细胞纯度。并用细菌内毒素(LPS)刺激分化的巨噬细胞,检测巨噬细胞炎性因子的表达。此外,用猴艾滋病毒(SIVmac17E-Br、SIVmac251)和人-猴嵌合体艾滋病毒(SHIV KU-1)感染分化良好的猴巨噬细胞,检测病毒在猴巨噬细胞中的复制。结果 在含2%猴自体血清的RPMI 1640培养条件下,大多数(>85%)猴单核细胞能在24 h内贴壁,体外分化5～7 d后,猴巨噬细胞纯度大于96%。相比而言,含较高浓度(4%,8%或10%)猴自体血清或FCS的RPMI 1640 培养基对猴单核细胞的贴壁和分化作用较差。分化良好的猴巨噬细胞对LPS刺激敏感,可产生多种巨噬细胞炎性因子。此外,这些细胞对SIV或SHIV均易感,产生感染性病毒。结论 含2%猴自体血清的RPMI 1640培养基适于原代猴单核细胞的贴壁和分化。该方法简单、花费少,无需生长因子,且分化效果好,是培养猴艾滋病毒及开展相关免疫学实验的重要手段。     

淫羊藿水提取物对雄性小鼠性功能的影响

目的 观察淫羊藿对小鼠性行为的影响。方法 小鼠口服不同剂量淫羊藿水提取物后进行交配试验。结果 淫羊藿给药组使雄性小鼠的跨骑、交尾及舔阴茎行为的发生频率显著增高而交尾和舔阴茎行为的潜伏期显著缩短。结论 我们的结果表明淫羊藿水提取物能改善雄性小鼠性功能。     

温度对油炙巫山淫羊藿总黄酮和淫羊藿苷含量的影响

目的考察温度对油炙淫羊藿主要成分的影响.方法采用高效液相法、紫外分光光度法对淫羊藿生品及不同温度炮制品中总黄酮和淫羊藿苷进行定量分析.结果与生品比较,120 ℃炮制品淫羊藿苷和总黄酮的含量均最高;其他温度下总黄酮含量略有降低,淫羊藿苷含量均明显增加.结论温度对总黄酮和淫羊藿苷含量有很大影响,120 ℃可能是巫山淫羊藿油炙的最佳温度.     

补肾中药淫羊藿的化学成分比较与生药鉴别

淫羊藿为常用补肾壮阳中药,但生药来源混杂。本工作对全国大多数省区所用的淫羊藿生药进行了调查和鉴定,认为市售商品主要来源于小蘖科淫羊藿属(Epimedium)8种植物。为了合理利用药物资源,特对此8种15个地区生药的质量从薄板层析、总黄酮成分含量及以抗心律不齐作用等方面进行了比较。同时对不同种淫羊藿的鉴别进行了研究,结果表明不同种淫羊藿所含化学成分相似,但在含量上和药理作用方面有差异。因此在应用时必须注意鉴别。本研究工作表明以非腺毛形态特征可有效地鉴别不同种生药。     

淫羊藿素的药理作用及分子机制研究进展

淫羊藿素(icaritin)是中国传统中草药淫羊藿(Epimedium)的单体有效成分,具有免疫调节、心血管保护、骨保护、抗氧化等广泛的药理学活性,同时,淫羊藿素通过阻滞细胞周期、促进凋亡、抑制转移、免疫调节等多种途径对不同肿瘤均有抑制作用。综述有关淫羊藿素的化学成分及国内外在抗肿瘤和非抗肿瘤药理作用的最新研究进展,为淫羊藿素进一步开发和临床精准应用提供理论依据。     

淫羊藿总黄酮对去势大鼠骨密度的影响

目的:探讨淫羊藿总黄酮对去势大鼠骨密度的影响。方法:取10月龄雌性SD大鼠60只,随机分为正常组、模型组、雌激素组和淫羊藿低、中、高剂量组,每组10只。除正常组外,其余各组大鼠均行双侧卵巢切除术,术后1周分别给予生理盐水、淫羊藿总黄酮和雌激素进行干预,共90天,观察各组大鼠全身、股骨及腰椎骨密度的变化。结果:正常组和雌激素组大鼠全身骨密度均显著高于其他各组(P均0.05);淫羊藿总黄酮低、中、高剂量组大鼠全身骨密度与模型组比较,差异无统计学意义(P0.05);淫羊藿总黄酮低、中、高剂量组大鼠股骨骨密度显著高于模型组(P0.05),淫羊藿总黄酮中、高剂量组大鼠腰椎骨密度显著高于模型组(P0.05)。结论:淫羊藿总黄酮能明显抑制去势大鼠股骨及腰椎骨密度的降低,对去势大鼠全身骨密度无明显影响。     

黔产淫羊藿总黄酮对2型糖尿病小鼠代谢影响的研究

目的:观察黔产粗毛淫羊藿与黔岭淫羊藿总黄酮(TFE)对2型糖尿病模型小鼠血糖及其相关因子的影响。方法:联用高脂饲料及四氧嘧啶建立2型糖尿病小鼠模型,两种TFE分别按剂量100、50mg.(kg.d)-1,灌胃给药14d,检测FBG、TC、TG、HDL-C、LDL-C、SOD、MDA含量。结果:粗毛淫羊藿高剂量TFE能降低2型糖尿病小鼠FBG,改善血脂水平,增加血清SOD含量。结论:高剂量粗毛淫羊藿TFE改善2型糖尿病小鼠的血糖、血脂水平;而黔岭淫羊藿TFE则无明显作用,两者作用存在明显差异。     

炮制对巫山淫羊藿黄酮类成分的影响

目的：为巫山淫羊藿饮片质量控制指标的选择提供科学依据。方法：对贵州不同产地的巫山淫羊藿生品和油炙品饮片,采用紫外-可见分光光度法测定总黄酮含量,HPLC测定朝藿定C和淫羊藿苷含量。结果：巫山淫羊藿炮制后总黄酮含量降低,淫羊藿苷含量升高,朝藿定C含量有升有降。结论：巫山淫羊藿饮片以总黄酮、朝藿定C和淫羊藿苷等多指标进行质量评价为佳。     

淫羊藿总黄酮甙对小鼠纤溶系统及对卒中死亡的影响

用126_Ⅰ标记的纤维蛋白测定淫羊藿总黄酮甙(TFG)对小鼠巨噬细胞(M)纤溶活性的影响,用专一发色底物法测定在TFG作用下小鼠M的纤溶酶原激活剂(PA)的活性。结果表明TFG能使小鼠M中PA的活性显著增加,酶活性相当于0.731 IU/ml(P<0.01)。鼠M纤溶活性也显著增强,给药组的纤溶活性是对照组的2.8倍(P<0.01)。SHRsp大鼠体内实验表明,TFG能显著降低SHRsp大鼠死亡率,并能抑制其血压的升高。对照组大鼠中风死亡率为90％,给药组死亡率5％。     

黔产淫羊藿总黄酮对2型糖尿病小鼠代谢影响的研究

目的:观察黔产粗毛淫羊藿与黔岭淫羊藿总黄酮(TFE)对2型糖尿病模型小鼠血糖及其相关因子的影响。方法:联用高脂饲料及四氧嘧啶建立2型糖尿病小鼠模型,两种TFE分别按剂量100、50mg.(kg.d)-1,灌胃给药14d,检测FBG、TC、TG、HDL-C、LDL-C、SOD、MDA含量。结果:粗毛淫羊藿高剂量TFE能降低2型糖尿病小鼠FBG,改善血脂水平,增加血清SOD含量。结论:高剂量粗毛淫羊藿TFE改善2型糖尿病小鼠的血糖、血脂水平;而黔岭淫羊藿TFE则无明显作用,两者作用存在明显差异。     

淫羊藿苷和淫羊藿素对乳腺癌T47D细胞增殖的影响

目的 研究淫羊藿苷及淫羊藿素对乳腺癌T47D细胞增殖的影响,探讨雌激素受体（ER）与其作用机制的关系。方法 用不同浓度的淫羊藿苷和淫羊藿素处理雌激素受体呈阳性的乳腺癌T47D细胞系后,MTT法检测T47D细胞增殖,流式细胞术检测T47D细胞周期的变化,Western blotting法检测T47D细胞ERα和ERβ蛋白表达。结果 淫羊藿苷和淫羊藿素浓度为1×10^?9～1×10^?6 mol/L,能显著促进T47D细胞增殖,且该作用可被雌激素受体拮抗剂ICI 182.780（1×10^?6 mol/L）所拮抗。与对照组相比,淫羊藿苷和淫羊藿素1×10^?7 mol/L使S期T47D细胞比例明显增加,增殖指数显著升高,但该作用可被ICI 182.780抑制。淫羊藿苷和淫羊藿素1×10^?7 mol/L还可显著增加ERα、ERβ蛋白表达（P＜0.01）。结论 淫羊藿苷和淫羊藿素均可显著促进T47D细胞增殖,该作用可能是通过上调胞内ERα、ERβ蛋白表达介导的。     

淫羊藿甙对小鼠免疫调节作用的研究

目的：探讨淫羊藿甙（ICA）的免疫调节作用。方法：小鼠免疫器官重量称重;测试腹腔巨噬细胞吞噬功能、红细胞花环形成试验和血清TNF水平。结果：ICA实验组小鼠胸腺、脾脏重量明显高于用药前和对照组（P＜0．05）,巨噬细胞吞噬功能显增强（P＜0．05）;小鼠RBC－C2b,RBC-IC花环形成百分率和血清TNFα水平明显增加。结论：ICA可增强小鼠免疫功能。     

淫羊藿甙对成骨细胞凋亡的影响

目的 通过研究淫羊藿甙对体外培养的成骨细胞凋亡的影响,探讨淫羊藿甙防治骨质疏松的可能机制.方法 采用酶消化法和机械分离法获得新生SD大鼠成骨细胞,取第四代细胞随机分为,雌二醇组(1×10-8 mmol/l),淫羊藿甙低剂量组(1 ng/ml),中剂量组(10 ng/ml),高剂量组(100 ng/ml)对照组,经药物处理48 h后,用TUNEL和扫描电镜的方法检测成骨细胞的凋亡.结果 与对照组相比较,淫羊藿甙各剂量组的凋亡指数均下降(P<0.05),其中淫羊藿甙中剂量组的凋亡指数下降明显,差异有高度统计学意义(P<0.01);扫描电镜显示淫羊霍甙各组的凋亡细胞较对照组减少,尤以淫羊霍甙中剂量组最少.结论 淫羊藿甙可以通过抑制成骨细胞的凋亡,促进骨形成,减少骨吸收,从而发挥抗骨质疏松的作用.     

淫羊藿对兔主动脉条收缩反应的影响

淫羊藿水取液使NE和KCl收缩兔主动脉条的量—效反应曲线均右移,并抑制最大效应。明显减弱NE收缩反应中内Ca~(2+)释放依赖性部分,对NE所引起的依赖细胞外Ca~(2+)的收缩比前者更强。提示淫羊藿水提取液可抑制细胞膜上电位依赖性Ca~(2+)通道,同时对受体控制性Ca~(2+)通道抑制作用更强。     

淫羊藿煎汁对小鼠免疫功能的影响

用外周血Ｔ淋巴细胞酸性ａ－醋酸萘酯酶（ＡＮＡＥ）阳性率和免疫器官（脾脏、胸腺）与小鼠体重的比值两个指标，研究淫羊藿对雌性小鼠免疫功能影响。结果表明淫羊藿对环磷酰胺造成的小鼠免疫功能受损有明显的拮抗作用。     

淫羊藿甙对家兔血管平滑肌细胞凋亡相关基因表达水平的影响

目的:观察葡萄糖调节蛋白基因78(GRP78)在动脉粥样硬化组织中的表达,探讨淫羊藿甙防治动脉粥样硬化的可能机制.方法:淫羊藿甙诱导培养的免血管平滑肌细胞凋亡,组织原位杂交观察凋亡基因GRP78在兔斑块组织中的表达水平.结果:兔斑块组织原位杂交显示该基因片段在动脉粥样硬化斑块组织中表达水平增高.结论:葡萄糖调节蛋白78基因在AS细胞质中表达增高,可能是淫羊藿甙作用靶点之一,如上调该基因促进则可促进平滑肌细胞凋亡,将对动脉粥样硬化治疗产生一定作用.