细菌对利福定的耐药性与细菌包膜屏障的关系

选用大肠杆菌k-12及其耐利福定菌株,利用同位素示踪技术研究发现利福定明显抑制~3H-尿苷掺入敏感菌,而耐药菌掺入则不受抑制,加用膜通透剂EDTA后,~3H-尿苷掺入耐药菌受到明显的抑制;~3H-利福定透入耐药菌的量明显低于透入敏感菌的量,用EDTA后,透入耐药菌中的~3H-利福定显著增加。结果提示:细菌包膜屏障通透性降低使药物进入菌体减少是细菌对利福定耐药的重要机制之一。     

利福霉素的药理与临床

利福霉素的药效动力学目前已知Rif抗菌机制是,抑制细菌RNA聚合酶;而其抗肿瘤作用是,抑制病毒逆向转录酶和DNA聚合酶,这三种酶统称Rif的靶酶。 Rif和细菌RNA聚合酶,容易形成稳定的复合物,使RNA合成停止。利用RNA之放射性前体物之一~3H尿苷掺入菌体速度,可以间接测定菌体RNA聚合酶活性;研究中发现利福定(RFD)和利福平(RFP)与     

利福定耐药机制探讨—耐药菌及敏感菌的形态学比较

本文报道利福定耐药及敏感细菌的形态学比较。扫描电镜见大肠杆菌耐药菌菌体变短,表面较敏感菌坚实、粗糙;透射电镜观察见耐药菌外膜增厚,电子密度增加。敏感菌以利福定(100μg/ml)处理4h后,光镜下可见菌体变得模糊,出现溶解现象;透射电镜见胞质疏松、核糖体减少并出现空泡。耐药菌经药物处理后无明显改变,但用药时加用EDTA,则出现与敏感菌类似的改变。该结果支持利福定耐药性与细菌包膜屏障改变有关。     

中国利福霉素药理学的研究进展

新利福霉素产生菌的发现:利福霉素是一组结构相似而复杂的大环抗生素,由地中海链霉菌及诺卡氏菌产生.1970年代初.四川抗菌素工业研究所在中国桂林泥塘土壤中发现产生利福霉素的小单孢菌(S-190)为国际首创.新利福霉素的研究:中国对国产利福霉素SV及1974年上市的利福平(RFP)的临床前及临床药理进行了深入的研究.利福定(R-761)是一个新的半合成药物,具有抗结核作用强及血药浓度比利福平高两倍的优点.利福喷丁(R-773)是一个长效利福霉素,其半衰期为32.8小时,分别比利福平及利福定长5倍及2倍.体外利福喷丁对结核杆菌的抗菌作用比利福平强,但比利幅定弱.小鼠体内实验表明它的抗结核作用比利福平及利福定强.品型及生物利用度的研究:从丁醇获得的利福平晶型Ⅰ和SVⅢ及丙酮制成的品型们Ⅱ常稳定,具有良好的解离度及生物利用度.而乙醇SVl结晶则非常不稳定,生物利用度低,仅为晶型Ⅰ、SVⅢ和Ⅱl/3.利福定的1、IV晶型有良好的生物利用度,但晶型Ⅱ则甚差.作用机理的研究:同位素前体参入实验发现利福霉素类的RFP、H、R-751、R-761及R-773抑制细菌RNA合成,但对DNA及蛋白质合成的影响较小.R-751对M607的RNA合成也有非常显著的抑制作用.利福霉素还有明显的后效作用,其强度:利福喷丁>利福定>利福平.经药物处理细菌的超微结     

槲皮素对血管紧张素Ⅱ致培养乳鼠心肌细胞肥大的抑制作用

目的:研究槲皮素(Quercetin,Que)对血管紧张素Ⅱ(Aug Ⅱ)诱发培养乳鼠心肌细胞肥大的抑制作用及机制。方法:分别用[~3H]胸苷、[~(14)C]尿苷和[~3H]酪氨酸标记测定DNA、RNA和蛋白质合成;用Lowry法测定蛋白质含量;用组蛋白ⅢS、[γ-~(32)P]ATP与蛋白激酶C(PKC)酶液一起保温测定PKC活性;用聚谷氨酸·酪氨酸(4:1)多肽、[γ-~(32)P]ATP与酪氨酸蛋白激酶(TPK)酶液一起保温测TPK活性。结果:Aug Ⅱ作用于心肌细胞24h后,心肌细胞总蛋白含量明显增加(P<0.01),[~(14)C]尿苷和[~3H]酪氨酸掺入量明显增加(P<0.01),而[~3H]胸苷掺入量未见增加(P>0.05);Aug Ⅱ作用30min后,心肌细胞PKC和TPK活性明显增加。Que(1-100μmol/L)能剂量依赖性地抑制Ang Ⅱ所致心肌细胞总蛋白含量、[~(14)C]尿苷和[~3H]酪氨酸掺入量、PKC及TPK活性的增加。结论:Que可抑制Aug Ⅱ致培养乳鼠心肌细胞肥大,该作用与抑制PKC及TPK活性有关。     

耐利福定大肠杆菌K—12包膜组分的生化分析

通过提取大肠杆菌K-12敏感株及其耐利福定株的包膜,并对其组分作了初步的生化分析。结果表明:十二烷基磺酸钠—聚丙烯酰胺凝胶电泳发现耐药株包膜蛋白质中一条分子量为52KD的蛋白带较相应敏感株包膜蛋白有明显减少;超薄膜层聚丙烯酰胺等电聚焦电泳分析提示敏感株与耐药株包膜蛋白的等电点无明显区别,均为4.5～6.7;氨基酸组成分析提示敏感株与耐药株包膜的各种氨基酸及其含量无明显区别;薄层色谱分析提示耐药菌膜脂较敏感菌膜脂多分离出1种组分,前者7种组分,后者仅6种组分;敏感株与耐药株包膜总含量分别为每毫克干重包膜含糖186.7±15.3和150.0±17.0微克。提示大肠杆菌K-12耐利福定后包膜屏障通透性的改变可能系蛋白质和脂类改变的结果。进一步的研究工作仍在继续之中。     

四环素和青霉素在铜绿假单胞菌中的蓄积动力学研究及能量抑制剂(CCCP)的影响

为证实国内临床分离的铜绿假单胞菌多重耐药菌株中是否存在与其多重耐药有关的主动外排机制 ,本文研究了 3H-四环素和 3H-青霉素在临床多重耐药菌 (2 1、2 6、2 8、435及 M12 5 1)、敏感菌 (172、2 2 3及K799/6 1)以及体外诱导的多重耐药突变株 (172 o c和 2 2 3o c)中的蓄积动力学及能量抑制剂 (Carbonylcyanide m- chlorophenylhydrazone,CCCP)的影响。结果表明两种药物无论是在耐药还是敏感菌中 ,胞内均可在 5～ 10 min内达稳态浓度 ,而且耐药菌中的稳态浓度明显低于敏感菌。当加入 CCCP后 ,耐药菌中的药物浓度明显增加 ,而敏感菌则降低 ,提示在受试的临床耐药菌中存在主动外排机制 ;此外 ,两种抗菌药物在体外诱导多重耐药菌株中的蓄积研究及 CCCP的影响结果与临床耐药菌相似 ,提示获得性多重耐药与天然多重耐药在其多重耐药性产生方面具相同的主动外排机制。     

欧克双

[药理作用]本品为广谱肠道抗生素，是利福霉素SV的半合成衍生物。与其他利福霉素抗生素一样，通过与细胞。DNA依赖的RNA聚合酶的β-亚单位不可逆地结合而抑制细菌RNA的合成，最终抑制细菌蛋白质的合成。由于其与酶的结合是不可逆的，所以其表现对敏感菌的杀菌活性。抗菌活性的研究资料显示，本品与利福霉素具有同样广泛的抗菌谱。对多数G^ 和G^-菌，     

阴沟肠杆菌对第三代头孢菌素耐药前后的β—内酰胺酶比较

用紫外分光光度法与超薄层分析性等电聚焦电泳技术对Ceftazidime敏感与耐药阴沟肠杆菌的β-内酰胺酶进行了检测与比较,结果表明:1)酶活性明显增加;敏感菌酶活性为5～40单位,耐药后酶活性为149～820单位,增加了13～107倍。2)“底物轮廓”谱扩大;敏感与耐药菌酶对青霉素类均有一定程度水解,但耐药菌酶对第一代头孢菌素的水解明显增强(P<0.01),还扩大了对第二、三代头孢菌素CMD与CPZ的水解。3)等电点(pI)一致;7株敏感与耐药菌酶的pI相等,且pI均≥0.8。     

应用放射性核素检验组织培养基促生长性能的方法

[Dvorakova H et al:J Biol Stand 8(2):107,1980(英文)] 作者根据测定不同条件下培养的人胚肺二倍体细胞中~3H胸苷(或~3H-尿苷)的掺入量,提出了一种新的、快速、可靠的应用放射性核素检验组织培养基促生长性能的方法。     

利福定敏感与耐药结核杆菌等细菌的扫描电镜和透射电镜观察

选用结核杆菌、金色葡萄球菌、变形杆菌与大肠杆菌及其相应的体外诱导耐利福定菌株进行扫描电镜与透射电镜观察。结果提示细菌耐利福定后在形态及结构方面发生了改变,但因细菌的种类而异。     

结核分枝杆菌异烟肼耐药基因katG点突变的快速检测

目的：探讨快速检测结核分枝杆菌异烟肼（INH）耐药基因型的分子药敏方法。方法：用聚合酶链反应－单链构象多态性（PCR－SSCP）检测了30株INH敏感菌株及30株耐药株的katG基因，随后用SSCP方法鉴定扩增产物有无突变，以结核分枝杆菌H37Rv作对照。结果：所有INH敏感株均观察到katG基因扩增产物，30株INH耐药株中28株观察到katG基因扩增产物。以H37Rv标准株为对照，30株敏感株SSCP带谱与对照相同；28株INH耐药株中13株与对照相同，15株有不同程度的差异。与药敏试验比较，PCR－SSCP检测INH耐药结核菌的敏感性为57%，特异性为100％。结论：多数结核分枝杆菌耐INH是由于katG基因突变所致，用PCR－SSCP筛选突变株可达到快速检测结核分枝杆菌INH耐药基因型的目的。     

Demethoxycurcumin and its semisynthetic analogues as antitubercular agents

Demethoxycurcumin, isolated from the rhizomes of Curcuma longa, was found to possess antitubercular activity against Mycobacterium tuberculosis H (37)Rv strain at 200 microg/mL. Derivatisation of this active principle yielded a potent agent 6, exhibiting considerable activity with a minimum inhibitory concentration (MIC) value of 7.8 microg/mL. H (37)Rv:Mycobacterium tuberculosis H (37)Rv strain MIC:minimum inhibitory concentration.     

Two new cassane-type diterpenes from Calliandra californica with antituberculosis and cytotoxic activities

From the root of Calliandra californica two new cassane-type diterpenes were isolated and characterized, escobarine A (1) and B (2), which showed promising activities against two Mycobacterium tuberculosis strains. The microplate alamar blue assay was used to determine the minimum inhibitory concentrations (MIC) of 1 and 2 against M. tuberculosis H37Rv and the resistant CIBIN/UMF15 : 099 strains. The MIC of 1 against the resistant M. tuberculosis strain showed a value 8 times lower than that of rifampin. The structures of the bioactive constituents were established by extensive NMR data analyses (including 1D and 2D NMR). The relative configuration of 2 was confirmed by X-ray analysis and the absolute configurations of 1 and 2 were determined by the circular dichroism method. Additionally, 1 and 2 displayed remarkable cytotoxic activity when evaluated against five human tumor cell lines.     

天克菌胶囊体内抗结核作用实验研究

目的探讨天克菌胶囊的体内抗结核作用。方法用尾静脉注射结核菌建立结核小鼠模型，定量天克菌药粉溶解灌胃，并设阳性药对照、细菌对照和溶剂对照。观察天克菌胶囊封结核小鼠模型半数死亡时间、生存率、肺组织结核菌阳性率及脾指数的影响。结果与细菌对照组相比，天克菌胶囊可显着延长小鼠半数死亡时间，提高小鼠生存率，降低肺组织结核菌阳性率及脾指数。结论天克菌胶囊有较好的体内抗结核作用。     

Synthesis and antimycobacterial activity of (3,4-diaryl-3H-thiazol-2-ylidene)-hydrazide derivatives

[5-(pyridin-2-yl)-1,3,4-thiadiazol-2-ylthio]acetic acid (3,4-diaryl-3H-thiazol-2-ylidene)-hydrazide derivatives were synthesized and tested for their in vitro antimycobacterial activity. Some compounds showed an interesting activity against a strain of Mycobacterium tuberculosis H(37)Rv and three clinical isolates of M. tuberculosis.     

吡嗪酰胺介入凝胶体外抗结核活性及临床应用

目的观察吡嗪酰胺凝胶体外抗结核作用和支气管介入的安全性。方法手工法、仪器法分别测定吡嗪酰胺单体、吡嗪酰胺凝胶的最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC)及家兔经支气管介入的安全性试验。结果吡嗪酰胺凝胶对人型结核分枝杆菌标准株、牛型结核分枝杆菌、草分枝杆菌MIC值分别为1.0、1.0、10mg/L,MBC值分别为10、10、40mg/L;吡嗪酰胺凝胶与吡嗪酰胺单体MIC、MBC值无显著性差异;动物安全性试验阴性。结论吡嗪酰胺凝胶具有与吡嗪酰胺单体相同的抗结核菌药效,卡波姆基质不影响吡嗪酰胺的抗菌活性;卡波姆基质吡嗪酰胺凝胶应用安全。     

Studies on pyrazine derivatives. Part VIII. Synthesis and tuberculostatic activity of some 6-alkylthio- and 6-phenylthiopyrazine-2-carboxylic acids

2-Cyano-6-alkylthio- and 6-phenylthiopyrazines were prepared from 2-cyano-6-chloropyrazine (CCP) in the reaction with mercaptans. By the transformation of the -CN group the corresponding amides, thioamides, amidoximes, acids, esters and hydroxamic acids and hydrazides were obtained. The oxidation of sulfur in the above mentioned compounds led to sulfoxy- and sulfonyl derivatives. In the screening for antituberculous activity compounds 30 and 42 showed the greatest activity (MIC = 31.2 microgram/cm3) against H37Rv strain and compund 8 so did against saprophytic ATCC 607 strain. The compounds with 6-benzylthio grouping were more active against ethionamide, isoniazide and capreomycine resistant strains.