头孢菌素C产生菌产黄顶孢霉斜面传代遗传稳定性考察

产黄顶孢霉在酵母膏分离平皿上出现多种形态变异株,一些形态变异株合成头孢菌素C能力有不同程度下降,对产黄顶孢霉遗传稳定性进行了研究,发现随着斜面传代次数增加,群体中低产形态变异株百分率增加,群体抗生素产量相应下降.实验结果表明;在传代过程中正常型菌株的自发形态分离现象以及随之形成的低产变异株积累是产黄顶孢霉在斜面传代中遗传变异的主要原因.     

头孢菌素C酶裂解的进展与产生7—ACA产黄顶孢霉菌株的构建

产黄顶孢霉(A.chrysogenum(C.acremonium))产生的头孢菌素C(CPC),经过化学裂解,形成的母核7-ACA,成为许多半合成头孢菌素的起始原料.自从20世纪60年代初开始探索CPC酰化酶产生菌以来,假单胞菌菌株SY77-1的GL-7ACA酰化酶工作(1975),为CPC酰化酶的获得(1985)打下了基础;虽然迄今报道的CPC酰化酶,还不能像青霉素酰化酶那样应用于工业生产,但随着产黄顶孢霉中基因转化系的逐渐完善(1982~1989),近来矶贝隆夫等(1991)首先报告了构建产黄顶孢霉的7-ACA产生菌     

产黄青霉高产菌株的选育

目的:对现生产用产黄青霉菌诱变育种以获得稳定高产菌株。方法:用化学诱变剂对菌种进行诱变育种,筛选得到的菌株通过摇瓶试验考察其产抗能力与传代稳定性。结果:选育得到的259#菌株摇瓶效价比出发菌株提高,传代三代后仍稳定。结论:通过诱变育种得到259#菌株是高产优质菌株。     

拉曼被孢霉γ-亚麻酸高产突变株的选育

目的诱变、筛选γ 亚麻酸 (GLA)高产菌株。方法采用 5 氟尿嘧啶、紫外线、氯化锂复合诱变及自然分离的方法 ,对拉曼被孢霉AS 3.34 13进行诱变筛选。结果获得一株GLA高产突变株F5。该菌株GLA产量较原始菌株提高了 30 0 %。传代实验证明该菌株遗传性质稳定。经对其发酵培养基及发酵条件的优化 ,该菌株GLA生产能力可达 115 3.6 3mg/L ,较原始菌株提高 335 .87%。结论拉曼被孢霉GLA高产突变株F5已达工业生产菌株要求。     

微波诱变头孢菌素C产生顶头孢霉菌的研究

本实验以头孢菌素C高产菌L32为出发菌株,通过微波诱变,得到变株L32-104,初复筛证明其发酵单位提高20%,且遗传性状非常稳定。该菌株在中试以及大生产中均获成功。实验表明微波诱变法操作简便、安全可靠、方法可行。     

高产脂微生物—深黄被孢霉M018变株的选育及其油脂合成条件的研究

以深黄被孢霉Ａｓ３．３４１０为出发菌株，经紫外线ＵＶ）、硫酸二乙酯（ＤＥＳ）和亚硝基胍（ＮＴＧ）复合诱变处理，选衣成功高产脂深黄被孢霉Ｍ０１８变株，其摇瓶培养，菌体油脂含量达６５．６％，经出发菌株提高１３３％、６０ｍ＾３罐三级发酵培养菌体油脂含量高达７９．２％，生物量达３７．８ｇ／Ｌ。气相色谱分析表达变株Ｍ０１８γ－亚麻酸的含量比出发菌株提高了５３％，连续传代试验表明Ｍ０１８是一稳定的变株。该变株     

编码一种产黄支顶孢霉的头孢菌素C乙酰水解酶基因cahB的克隆和鉴定

利用产黄支顶孢霉 (Acremonium chrycogenum)生产头孢菌素 C时的一个重要问题是头孢菌素 C水解成脱乙酰头孢菌素 C,后者没有商业价值而成为一种无用的副产品。对于产生脱乙酰头孢菌素 C的酶学过程的特性研究将有助于避免这种副产品的积累。将一种来源于 A.chrycogenum C10的胞外头孢菌素 C乙酰水解酶 (CPC- AH)纯化至接近均一 ,该酶的分子量为 31k Da,等电点为 4.0 ,对头孢菌素 C的亲和力较低 (Km 为 33.7mm ol/L)。对该酶氨基末端的 2 0个氨基酸测序 ,基于该序列的探针用于头孢菌素乙酰水解酶基因(cah B)的克隆。 cah B编码 383个…     

两株顶头孢霉生理生化特性的研究

通过对两株头孢菌素C产生菌顶头孢霉生理生化特性的研究,对发酵过程中各个参数的变化规律与头孢菌素产量之间的关系有了一定的认识,并根据不同菌种的代谢特性配置了一套与其相适应的控制条件,从而达到提高头孢菌素产量的目的。     

丝裂霉素产生菌脱葡萄糖阻遏变株的获得

用诱变法结合高浓度葡萄糖作为选择因子,从丝裂霉素产生菌变株174中分离得到脱葡萄糖阻遏变株M-21。此菌株在含4～6％葡萄糖的平板上或发酵液中,均呈对葡萄糖脱阻现象,而亲株174则缺如。M-21的代谢产物经紫外及薄板层析分析为丝裂霉素C,产量比亲株提高12％。此外,对M-21脱葡萄糖阻遏特性进行了初步研究。     

利用亚硝酸诱变原生质体筛选L-亮氨酸高产菌株的研究

本实验以L-亮氨酸产生菌黄色短杆菌CFN-19为出发菌株。我们首先对CFN-19菌株制备原生质体,原生质体制备率为95.1%,再生率为25%,然后对原生质体进行亚硝酸、利福平、氯化锂复合诱变处理,从再生菌株中筛选出一株高产菌株H_(6-66),产酸量由原来的23.1mg/ml提高到32.6mg/ml,提高率达41%.同时又对H_(6-66)菌株进行遗传稳定性考察,考察结果H_(6-66)菌株是高产稳定菌株。     

头孢菌素C生产工艺改进的研究Ⅰ.头孢菌素C新菌种C82—123发酵工艺研究

对Cephalosporium acremonium C82-123发酵过程中的温度,通气,pH调节,碳、氮源等组份的用量,氨水等的补料以及蛋氨酸的诱导作用进行了研究。采用改进后的发酵工艺,使该菌种在7 L 玻璃发酵罐中的发酵效价提高三倍以上。     

金霉素链霉菌2-106菌株的选育及发酵特性研究

微生物诱变育种的主要目的是获得高产菌株,通过诱发突变.使产量性状向着高产方向发展,从而提高抗生素工业生产的产量.金霉素链霉菌生产菌株Streptomyces aureofaciens S_2经过紫外线、甲基磺酸乙酯及秋水仙碱的诱变作用,得到了83-2-106新菌株.新菌株与亲株在形态上有明显的差异.通过研究发现:新菌株在摇瓶中的生产能力比亲株稳定提高10%;对无机磷及空气的需要与亲株明显不同;通过传代试验证明,其生产性能稳定.     

农用抗生素633的研究——Ⅰ.产生菌的分类鉴定

从我国杭州地区土壤中分离获得一株链霉菌No.633的代谢产物对鸡白痢病及寄生虫病有良好的防治效果。这株菌的孢子链螺旋形,孢子表面光滑,气丝淡黄色转淡粉色,基丝赭石色,可溶色素为瓜瓤粉色。在形态、培养特征和生理生化特性上与玫瑰黄链霉菌相似,但又有显著差别,因此定名为玫瑰黄链霉菌杭州亚种(Streptomyces roseoflavus subsp.hangzhouensis n.subsp.)     

农用抗生素B—7的研究：1.产生菌的分类鉴定

从我国海南岛土壤中分离到一株链霉菌B-7,产生多组份的链丝菌素(从1～6),其发酵液对大白菜软腐病有稳定的防治效果,该菌株在形态培养特征和生理生化特性上与淡紫灰链霉菌Streptomyces Lavendulae相似,但又有一定的差别,命名为淡紫灰链霉菌海南变种(Streptomyces lavendulae var.hainanensis n.var.)。     

头孢菌素C发酵添加侧链的研究

如在头孢菌素C(简称CPC)的发酵培养基中,添加硫脲、头孢孟多侧链,1-甲基-5-巯基四唑等含硫化合物,发酵过程中在CPC累积的同时,可生成CPC 3位取代衍生物,其效价约占头孢菌素总效价的20～26%,且不影响CPC的产量和提取收率。这些副产物综合利用,有一定的经济意义。     

苏氨酸产生菌原生质体的研究

考察苏氨酸产生菌GSR 8-25的原生质体制备及再生的最佳条件,并用紫外线(uv)诱变处理其原生质体,从再生株中筛选苏氨酸高产菌株。经多次连续诱变处理得一再生株25-20,其苏氨酸产量由出发菌株的15mg/ml提高到21.5mg/ml,提高率达43.3％.     

高产GL-7ACA酰化酶菌株的获得及其培养条件的研究

从假单胞菌的野生菌株SP-821出发,经化学、物理诱变,获得GL-7ACA酰化酶高产菌株79u-18,酶活性高达700u/L。在菌株选育过程中一个突破性进展是分离获得构成型GL-7ACA酰化酶产生菌株,即该菌在培养中不需加入戊二酸作诱导剂。本文介绍上述菌株的获得及培养条件的研究。