电化学发光法检测鳞状上皮细胞癌抗原的性能验证及与化学发光微粒子法检测的一致性评价

目的对罗氏Cobas e602电化学发光法检测鳞状上皮细胞癌抗原(SCCA)进行性能验证,并对电化学发光法和新产业Maglumi 2000 Plus化学发光微粒子法检测SCCA结果进行一致性评价。方法对电化学发光法检测SCCA的精密度、线性范围、稀释倍数、参考区间进行性能验证。用化学发光微粒子法和电化学发光法同时检测107例血清样本SCCA,对两种方法检测结果进行一致性评价。结果电化学发光法检测SCCA低值和高值的批内 CV 分别为2.4%和3.7%,批间 CV 分别为1.2%和1.6%;在0.32~68.26 ng/mL范围内线性良好, R 2 =0.9997;在1 ∶10和1 ∶20稀释倍数性能良好,临床可报告范围上限达到1400 ng/mL;20名表观健康者均在试剂盒给定的参考区间内(0~2.7ng/mL)。电化学发光法和化学发光微粒子法一致性评价结果显示,组内相关系数ICC=0.836,两种方法总体一致性良好;Bland- Altman偏差分析显示两种方法SCCA结果在低值部分(0~5.0ng/mL)一致性良好,随着SCCA浓度增加,偏差逐渐增大。结论罗氏Cobas e602电化学发光法检测SCCA的精密度、线性范围、稀释倍数、参考区间均符合检测要求。罗氏Cobas e602电化学发光法和新产业Maglumi 2000 Plus化学发光微粒子法检测SCCA在低值部分一致性良好,随着SCCA浓度升高,偏差逐渐增大。     

普门电化学发光仪检测降钙素原的性能分析

目的分析普门(Lifotronic)eCL8000电化学发光仪检测降钙素原(procalcitonin,PCT)的性能。方法以降钙素原(PCT)作为检测指标,根据临床和实验室标准协会(CLSI)文件要求从精密度、正确度(方法学比对)、线性范围、生物参考区间等方面评价普门eCL8000电化学发光仪的性能。结果普门eCL8000电化学发光仪检测PCT的批内精密度变异系数CV高低值分别为2.60%和2.11%,批间精密度CV值分别为3.92%和2.22%。PCT检测结果最大偏倚为14.29%(≤1/2TEa),且与参考方法拟合相关系数R^2=0.9977。线性范围相关系数R2=0.9993,生物参考区间为≤0.05ng/mL。结论普门eCL8000电化学发光仪检测PCT整体性能良好,能满足实验室的工作要求,可用于临床标本的检测。     

测定癌胚抗原的吖啶酯化学发光免疫分析方法的建立

目的建立一种定量测定血清中癌胚抗原（CEA）含量的检测方法。方法根据双抗体夹心法实验原理,利用吖啶酯化学发光免疫分析技术-结合生物素-亲和素磁颗粒分离技术。结果方法的最低检测限为0.2ng/mL,线性范围为2.2~360ng/mL,批内变异为1.9%~2.2%,总变异为6.5%~8.1%,与ROCHE公司的癌胚抗原检测试剂盒（电化学发光法）测定结果的拟合方程为Y=0.9969X＋0.6168,相关系数为r=0.9921。结论本方法的各项指标均满足临床检测的要求,适合临床推广应用。     

促甲状腺素受体抗体的两种免疫检测方法对比研究

研究采用德国罗氏全自动电化学发光免疫分析法（ECLIA）检测血清促甲状腺激素受体抗体（TRAb）含量与实验室常规检测TRAb的酶联免疫分析方法（ELISA）的差异,探讨ECLIA检测TRAb的可行性和实用性。用两种方法同时检测血清样本399份,其中甲亢患者200例,表面健康者199名,比较两种检测方法的实验分析性能和检测结果差异。结果显示,ECLIA检测TRAb数值与ELISA有显著差异（P〈0.01）,但与ELISA检测值整体相关（r=0.737,P〈0.01）。取各自判断截域值后,两种方法诊断符合率为91.0%,分类一致性Kappa值为0.802（P〉0.05）。研究还显示,ECLIA检测TRAb在线性和精密度方面均良好,且操作简便,检测速度快。     

定量检测抗甲状腺过氧化物酶抗体的吖啶酯化学发光法的建立及初步应用

目的 建立一种用于定量测定血清中抗甲状腺过氧化物酶抗体(Anti-TPO)的吖啶酯为标记物的化学发光免疫分析法并初步进行临床验证.方法 用TPO抗原偶联磁微粒,鼠抗人IgG抗体标记吖啶酯,建立间接法的反应模式.对该方法的线性范围、精密度、检出限、准确度进行测定,并与罗氏的电化学发光试剂进行比对.结果 在5～1 000 IU/mL范围内,线性相关系数r 为0.9999,检出限为0.224 IU/mL,两份样本的精密度(CV)分别为3.1％和4.3％,两份样本的准确度分别为1.1％和3.0％.经检测185例正常健康人,将参考区间定为小于30.32 IU/mL.与罗氏的电化学发光试剂平行测定84份血清样本,两者检测结果的相关系数r为0.975,显著性检验P＜0.01,相关性良好.结论 建立了定量测定血清中Anti-TPO的吖啶酯为标记物的化学发光免疫分析法,满足临床检测要求.     

基于光激化学发光技术开发的多表位检测cTnI的方法

目的建立一种多表位识别检测人血清心肌肌钙蛋白水平的光激化学发光免疫检测分析方法。方法采用双抗体夹心法,通过多表位识别建立检测人血清中心肌肌钙蛋白水平的方法,评估其分析灵敏度、回收率和批内精密度,并与Siemens(化学发光法)进行比较。结果心肌肌钙蛋白I的分析灵敏度为0.06 ng/ml,回收率为93.43%,批内精密度(CV)为0.62%~1.55%,与化学发光法的符合率好(r=0.99)。结论光激化学发光免疫分析方法多表位测定心肌肌钙蛋白I具有超高灵敏度、精密度和准确性,与化学发光法的符合率较好,适用于临床。     

基于光激化学发光技术开发的多表位检测cTnI的方法

目的建立一种多表位识别检测人血清心肌肌钙蛋白水平的光激化学发光免疫检测分析方法。方法采用双抗体夹心法,通过多表位识别建立检测人血清中心肌肌钙蛋白水平的方法,评估其分析灵敏度、回收率和批内精密度,并与Siemens(化学发光法)进行比较。结果心肌肌钙蛋白I的分析灵敏度为0.06 ng/ml,回收率为93.43%,批内精密度(CV)为0.62%~1.55%,与化学发光法的符合率好(r=0.99)。结论光激化学发光免疫分析方法多表位测定心肌肌钙蛋白I具有超高灵敏度、精密度和准确性,与化学发光法的符合率较好,适用于临床。     

AFP电化学发光免疫分析方法的建立

目的建立一种快速、特异、灵敏的检测人甲胎蛋白（AFP）的电化学发光免疫分析法。方法用链霉亲和素包被的磁性微粒、生物素标记的抗AFP单克隆抗体、钌复合物标记配对的抗AFP单克隆抗体组成AFP电化学发光免疫分析法试剂,在电化学发光免疫分析仪上对其准确性、灵敏度、特异性等效能进行方法学评价,同时用所建方法与进口的同类电化学发光免疫分析法试剂（Roche）对80例肝癌患者血清AFP检测结果进行相关性分析。对218名健康志愿者血清AFP进行了正常值调查。结果自建电化学发光免疫分析法检测AFP的批内精密度在2.8%～4.5%之间,批间精密度在3.2%～9.8%之间,分析灵敏度为0.605ng/ml。与进口同类试剂比较,直线回归方程为y=0.9936x-0.4566（r=0.9877,P〈0.05）。分析测量范围为0.605～1452.0ng/ml,自建试剂与CEA和CA199无交叉反应。自建电化学发光免疫分析法检测AFP的正常参考值为〈6.7ng/ml。结论自建AFP电化学发光免疫分析法特异性高,灵敏度好,与进口同类试剂检测结果相关性达0.9877。确定的实验室正常参考范围接近进口同类试剂,具备产业化的潜能。     

CEA电化学发光免疫分析法的建立

目的建立人癌胚抗原（CEA）的电化学发光免疫分析法（ECLIA）。方法生物素标记的CEA McAb、钌复合物标记配对的CEA McAb、链霉亲和素包被的磁性微粒组成CEA ECLIA试剂,用ECLIA仪检测CEA并做方法学评价。用本法与进口的同类ECLIA试剂对119例结直肠癌、150例肺癌、45例胃癌、32例胰腺癌和34例肝细胞癌患者的血清CEA检测结果进行分析。调查218名志愿者血清CEA正常参考值。结果本法检测CEA的批内CV为1.6%～7.1%,批间CV为2.3%～11.7%,灵敏度为0.2 ng/mL。与CA19-9和AFP无交叉反应。自建ECLIA检测CEA浓度范围为0.2～1000.0ng/mL,正常参考值低于5.6ng/mL。结论自建CEA ECLIA与进口试剂比较（r=0.9641,P〈0.05）,正常参考范围接近进口同类方法。具备产业化的潜能。     

依据CLSI EP9-A3文件评价两种方法学检测降钙素原的可比性

目的 评价磁微粒化学发光法和电化学发光法检测降钙素原(PCT)结果的一致性,以评估磁微粒化学发光法检测PCT是否能够满足临床的需求。方法 根据美国临床和实验室标准协会(CLSI)新指南EP9-A3文件要求,收集2021年10月至12月火箭军特色医学中心患者检测剩余的新鲜血清标本79例,以罗氏电化学发光法为参比方法,迈瑞磁微粒化学发光法为评估方法,对两种方法检测PCT的结果进行相关性和一致性检验。选择普通线性回归(ordinary linear regression, OLR)、加权最小二乘法(weighted least squares, WLS)、Deming回归、Passing-Bablok回归,4种回归模型对两种方法学的检测结果进行拟合分析。结果 2种方法学的PCT检测结果具有显著相关性(r=0.99,P<0.001)。参照方法和评估方法比较,结果显示4种回归模型,均在可接受范围内。根据四截距和斜率判断,Passing-Bablok回归为最佳模型。将PCT的医学决定水平代入回归模型拟合方程,计算得到的相对偏移<1/2 TEa±15%(TEa为国家卫生健康委临床检验中心...     

不同化学发光检测系统测定抗甲状腺过氧化物酶抗体的比较研究

目的 对Roche Cobase E601和SIEMENS Centaur XP两种化学发光检测系统测定抗甲状腺过氧化物酶抗体(TPOAb)结果的可比性和相关性进行评价.方法 使用上述两种发光检测系统测定94例患者血清中的TPOAb浓度,对两组数据进行比较,并对相关性进行分析.结果 两种发光检测系统的批内、批间精密度较好,差异无统计学意义;SIEMENS Centaur XP检测系统阳性率大于Roche Cobase E601检测系统的阳性率,结果比较差异有统计学意义(P<0.05);两检测系统对TPOAb的检测结果总符合率为75.6%,两检测系统检测结果呈正相关(r=0.866,P<0.01).结论建议对TPOAb检测建立标准化的参考系统,现有的检测系统应与标准化的参考系统进行比对.     

人心肌肌钙蛋白Ⅰ酶促化学发光免疫分析方法的建立

目的 建立检测人心肌肌钙蛋白Ⅰ的酶促化学发光免疫分析方法.方法 采用两株抗人心肌肌钙蛋白Ⅰ的单克隆抗体,一株包被聚苯乙烯化学发光板,一株标记辣根过氧化物酶,采用辣根过氧化物酶/鲁米诺/过硼酸钠体系,建立了测定人血清心肌肌钙蛋白Ⅰ的酶促化学发光免疫分析方法,并进行了方法学鉴定.用该法测定80例正常人血清,确定正常参考值范围;测定临床病理样品27例,与Beckman全自动化学发光试剂测定值进行相关性分析.结果 本方法测定范围0.3 ～ 100μg/L,分析灵敏度0.16μg/L;37℃反应时间30min;回收率76.8％ ～ 111.1％;高浓度cTnI血清样品经系列倍比稀释后测定,测定值与稀释度呈线性相关,相关系数0.999;批内、批间变异系数分别为3.90％～6.71％,7.66％～10.34％;与心肌肌钙蛋白T(cTnT)、肌钙蛋白C(TnC)、骨骼肌肌钙蛋白Ⅰ(sKTnI)、骨骼肌肌钙蛋白T(sKTnT)、人心肌脂肪酸结合蛋白(h-FABP)、人心肌肌酸激酶(CK-MB)、人心肌肌红蛋白、C-反应蛋白(CRP)均无交叉;确定临床正常参考值小于0.304μg/L;与Beckman全自动化学发光试剂比较,两者测定值线性相关系数为0.925.结论 该方法反应时间短、特异性强、重复性好,具有应用及推广价值.     

两种荧光定量PCR试剂检测HBV-DNA的比较与评价

目的 探讨两种乙型肝炎病毒DNA试剂检测HBV-DNA的相关性,分析其检测结果的差异性。方法 使用凯杰试剂与之江试剂检测75例患者血清中的HBV-DNA水平,凯杰试剂采用手工提取样本中的DNA,之江试剂采用自动核酸提取仪提取DNA,然后进行核酸扩增。对HBV-DNA病毒载量进行对数转换（lg10）,并将两组数据进行相关性分析;对不一致的结果采用罗氏试剂进行确证。结果 以HBV-DNA含量＞5.0×102 IU/ml临界值,拟合两组检测数据结果,相关方程为Y=0.8889X+0.7956（R2=0.8954,P＜0.05）;凯杰试剂检测标本中HBV-DNA含量为[（5.07±1.96）（对数值）],之江试剂检测结果为[（5.30±1.84）（对数值）],差异有统计学意义（P＜0.05）。凯杰试剂检测阳性率为57.33%（43/75）,低于之江试剂的73.33%（55/75）,差异有统计学意义（P＜0.05）。15例检测结果不一致的样本中,凯杰试剂与罗氏试剂结果符合率为37.50%,之江试剂与罗氏试剂检测结果符合率为62.50%。结论 凯杰试剂与之江试剂相关性良好,其检测结果可以比较,且之江试剂检测HBV-DNA的敏感性高于凯杰试剂。     

全自动电化学发光免疫分析法检测血清TRAb的方法学评价

目的:对电化学发光免疫分析(ECLIA)检测血清促甲状腺激素受体抗体(TRAb)进行方法学评价.方法:采用ECLIA分别检测62例GD患者、65例非GD患者以及41例健康对照者血清中TRAb的含量,评估ECLIA检测TRAb的精密度、回收率、诊断敏感性和特异性及与ELISA的相关性.结果:ECLIA检测TRAb的批内、...     

电化学发光免疫分析法检测T3及T4的性能验证

目的 验证罗氏Cobas E601全自动电化学发光免疫分析系统检测T3及T4的分析性能,并探讨配套系统性能验证的简易方案.方法 通过室内质控数据分析,并参考美国临床和实验室标准研究院（CLSI）相关文件,对罗氏Cobas E601全自动电化学发光免疫分析仪检测T3及T4的精密度、正确度、可报告范围和生物参考区间进行试验分析,并与厂商声明的性能或公认的质量目标比较.结果T3及T4的批内精密度变异系数（CV）为1.29％ ～ 6.15％％,＜1/4TEa（CLIA＇ 88）,实验室内精密度CV为4.02％～ 5.65％,＜1/3TEa（CLIA＇ 88）;室间质控品的检测结果与靶值的相对偏倚在-（1.38％～4.18％）之间,＜ 1/2TEa（CLIA＇ 88）;可报告范围与厂家提供的范围相近;T3及T4的测量数值均在提供的参考区间内.结论 罗氏Cobas E601全自动电化学发光免疫分析仪T3、T4检测的主要分析性能符合质量目标要求,能满足临床需要,所采用的验证方案简便可行,且具有实用性.     

免疫透射比浊法测定血清轻链

目的：评价采用免疫透射比浊法检测血清轻链的可行性。方法：在贝克曼CX4全自动生化分析仪上,应用ROCHE公司试剂,以免疫透射比浊法,采用二点终点法,主波长340nm,副波长700nm,温度37℃,六点校准。结果：本法检测kappa轻链,日内不精密度2.5～2.8,日间不精密度3.0～3.2,检测低限为0.19g/L,回收率为92.1～101.5,检测lambda轻链,日内不精密度1.6～1.8,日间不精密度2.2～2.5,检测低限为0.16g/L,回收率为94.2～102.5,免疫透射比浊法（Y）与贝克曼IMAGE特定蛋白分析仪的免疫散射比浊法（X）比较：kappa轻链Y=0.265X-0.232。决定系数（r^2）=0.957,lambda轻链Y=0.438X-0.03。决定系数（r^2）=0.976。结论：免疫透射比浊法简便,灵敏,试剂稳定,适合一般医院血清轻链的自动化分析。     

(1,3)-β-D葡聚糖、半乳甘露聚糖联合降钙素原检测对侵袭性真菌感染的诊断价值

目的 探讨血清中(1,3)-β-D葡聚糖[ (1,3) β-D-glucan,G]和半乳甘露聚糖(galactomannan,GM)联合降钙素原(procalcitonin,PCT)检测对患者侵袭性真菌感染(invasive fungal infections,IFI)的临床诊断价值。方法 选取徐州市中心医院2017年1月至2018年6月收治的具有高危IFI因素的住院患者447例,根据血培养结果分成实验室诊断组和非实验室诊断组。分别采用定量检测、比色法及电化学发光法对血清中G、GM和PCT的含量进行检测,评价三者联合检测对IFI的早期诊断价值。结果 447例患者中实验室诊断组51例,非实验室诊断组396例。51例患者中G试验阳性39例,GM试验阳性14例,PCT阳性41例。G试验、GM试验、PCT检测的敏感性为76.47%、27.45%和80.39%;特异性为76.77%、87.12%和66.67%;阳性预测值为29.77%、21.54%和23.70%;阴性预测值为96.20%、90.31%和96.35%;阳性似然比为3.29、2.13和2.41;阴性似然比为0.31、0.83和0.29;Youden指数为0.53、0.15、0.47。三者联合检测的敏感性为94.12%、特异性为62.88%、阳性预测值为24.62%,阴性预测值为98.81%,阳性似然比为2.54,阴性似然比为0.09,Youden指数为0.57。三者联合检测的敏感性均高于G试验、GM试验、PCT单独检测及G/GM联合试验,差异具有统计学意义(χ2值分别为6.331、47.545、4.320和5.299,P值均<0.05)。三者联合检测的特异性均低于G试验、GM试验单独检测及G/GM联合试验,差异具有统计学意义(χ2值分别为18.127、62.061和16.754,P值均<0.05),但与PCT单独检测相比差异无统计学意义(χ2=1.245,P>0.05)。结论 G、GM以及PCT三者联合检测可显著提高IFI检出的敏感性,并且对IFI的诊断排除有很大的价值,从而降低假阳性率和假阴性率,为IFI的早期诊断提供一定的依据。     

比色法测定超氧化物歧化酶的临床评价及其应用研究

对比色法测定超氧化物歧化酶试剂盒进行临床评价;比较健康人群与多种疾病患者的血清超氧化物歧化酶（Super-oxide dismutase,SOD）浓度,探索血清SOD对多种疾病的预警价值。用罗氏全自动生化分析仪测定,分析评价比色法测定超氧化物歧化酶试剂盒的准确性、精密度及线性等指标。选取明确诊断的多种疾病（包括冠心病、肝脏疾病和脑部疾病）共105例作为疾病组及144名健康查体者作为对照组,测定两组血清SOD浓度。结果显示,用该方法测定SOD高、低两种浓度血清的准确度分别为99.8%和97.8%,批内变异系数分别为0.59%和0.43%,批间变异系数分别为1.45%和1.09%;在12.5～200U/mL范围内,线性良好,与理论值的相关系数为0.9999（R2=0.9998）。疾病组的血清SOD水平为97.77±28.31U/mL,显著低于对照组139.79±13.88 U/mL（P〈0.01）;疾病组内的每种疾病血清SOD水平均明显低于对照组（P〈0.01）,但各种疾病之间血清SOD水平无差异;比色法测定血清SOD的ROC曲线下面积为90.5%;当界值为116.15 U/mL时,约登指数最大（0.86）,此时灵敏度为97.22%,特异性为74.3%。以上结果表明,超氧化物歧化酶比色法试剂盒操作简便、稳定、快速,符合临床应用要求,适合进行临床大样本的常规检测。对多种疾病具有良好的预警价值。     

中性粒细胞CD64、PCT联合CRP诊断儿童脓毒血症的价值

目的 探讨中性粒细胞CD64、降钙素原（PCT）和C-反应蛋白（CRP）联合检测在儿童脓毒血症早期诊断中的价值。方法选取2017年1月~2018年12月鄂尔多斯市中心医院儿科收治的55例脓毒血症患儿作为观察组,将同期的55例非感染性疾病患儿作为对照组。分别采用流式细胞术、电化学发光法、免疫透射比浊法检测两组患儿入院时中性粒细胞CD64水平、血清PCT浓度、CRP浓度,比较三种指标独立检测和联合检测诊断儿童脓毒血症的灵敏度、特异度、阳性预测值及阴性预测值;分析观察组治疗前后中性粒细胞CD64、CRP、PCT水平变化情况。结果 入院时观察组中性粒细胞CD64、PCT及CRP水平均高于对照组,差异有统计学意义（P＜0.05）;三种指标联合检测诊断儿童脓毒血症的灵敏度、阳性预测值、阴性预测值及准确度最高,分别为85.02%、75.60%、93.21%、90.15%;治疗后观察组患儿中性粒细胞CD64、PCT 和CRP水平均低于治疗前,差异有统计学意义（P＜0.05）。结论 中性粒细胞CD64、PCT及CRP联合检测能有效提高儿童脓毒血症早期诊断率,为临床治疗提供参考依据。