气道上皮细胞上哮喘变应性炎症

气道上皮细胞在哮喘变应性炎症发生中作一种效应细胞，参与介导气道内各种炎性细胞的生存、趋化和活化，它主要通过释放各种细胞因子、炎性介质、趋化因子和粘附分子等对地道变应性炎症发生起重要作用，同时气道上皮细胞又是糖皮质激素治疗哮喘的靶细胞，在哮喘治疗中发挥重要作用。     

Th17细胞在小鼠变应性鼻炎鼻黏膜中的表达及意义

目的：探讨T辅助细胞17(Th17)在小鼠变应性鼻炎鼻黏膜中的表达及意义。方法：以卵清蛋白致敏的Balb/c小鼠变应性鼻炎模型作为实验组,同期以生理盐水替代作为对照组。取两组小鼠鼻黏膜,制成单细胞悬液,使用流式细胞仪检测两组小鼠鼻黏膜中Th17细胞比例。结果：两组小鼠鼻黏膜中均存在Th17细胞,并且实验组中Th17比例[(1.27±0.138)%与(0.771±0.088)%]高于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论：明确变应性鼻炎鼻黏膜中Th17细胞比例,为变应性鼻炎的治疗提供理论依据以及新思路。     

BCG对哮喘小鼠气道炎症反应的影响

目的：探讨卡介苗(BCG)对卯蛋白(OVA)致敏小鼠肺组织中T细胞的在体调节及其对气道炎症的作用。方法：将30只BALB／c小鼠分为3组，第1组吸入雾化的OVA(1次／(1．20min／次，连续10d)，建立致敏模型。第2组(对照)吸入雾化的生理盐水(时间和次数同第1组)；第3组(治疗组)于致敏前10d及14d，各皮内注射BCG 1次，致敏后6d吸入雾化的纯蛋白衍生物(PPD)。用SABC免疫组化法，检测肺组织中CD4^ 、CD8^ 及IFN—γ^ 细胞的变化，以及肺组织和支气管肺泡灌洗液(BALF)中炎性细咆的变化。结果：OVA致敏组小鼠肺组织中CD4^ T细胞增加，CD8^ T细胞无明显变化，主要表现为IFN—γ^-／CD4^ T细胞数的增加，IFN—γ^ ／CD4^ 细胞的比例降低。BCG治疗后，肺组织中CD4^ T细胞减少，CD8^ T细胞数大量增加；IFN—γ^ ／CD4^ 细胞的比例明显增大；BALF中炎性细胞数减少。结论：BCG可在体上调Th1细胞，减轻实验性哮喘动物气道的炎症反应。     

白介素20在变应性鼻炎中的表达及其意义

目的对白介素20(IL-20)及其受体IL-20R1/IL-20R2在变应性鼻炎(allergic rhinitis,AR)患者鼻腔局部组织及血液中的表达进行研究,探讨白介素20在AR发病中的可能作用及意义。方法采集AR患者及对照组共53例患者的鼻甲黏膜及血液,采用免疫组化及酶联免疫法(ELISA法)检测组织内及血液中IL-20及其受体的表达,同时以ELISA方法检测局部组织内转化生长因子β1(TGF-β1)及细胞纤连蛋白-1(fibronectin-1)的表达,HE染色法观察局部嗜酸性粒细胞浸润情况。结果同对照组相比,AR局部组织内IL-20及IL-20R1/IL-20R2阳性细胞数和血清中IL-20、IL-20R2的含量显著增高(P均0.05),而血清中IL-20R1虽有升高,但差异无统计学意义;同时,TGF-β1与fibronectin-1的含量在AR组显著高于对照组(P0.01),且与AR局部组织内的IL-20的表达呈正相关;AR患者局部组织的嗜酸性粒细胞计数显著高于对照组(P0.01),且与AR局部组织内的IL-20呈正相关。结论 IL-20在AR的发生发展中有重要作用,且可能与其促进组织重塑及其对嗜酸性粒细胞的趋化聚集作用密切相关。     

IL-23 在变应性鼻炎小鼠模型中的作用及机制的研究

目的:探讨IL-23 在变应性鼻炎小鼠模型中的作用及机制的研究。方法:应用卵清蛋白(OVA)致敏建立小鼠变应性鼻炎模型,给予抗IL-23p19 单克隆抗体干预,计量抗原激发后小鼠搔鼻数量。应用HE 染色方法检测IL-23 对小鼠鼻黏膜炎症影响,应用ELISA 法检测小鼠灌洗液中IL-4、IFN-β及IL-17A 含量。应用PCR 方法检测鼻黏膜中FOXP3 的含量。结果:治疗后抗IL-23p19 抗体组小鼠搔鼻症状相对于抗体对照组明显减轻(P<0.05),与PBS 组比较,OVA 组小鼠鼻黏膜炎症细胞浸润明显(P<0.01),鼻腔灌洗液中嗜酸性粒细胞数明显升高(P<0.05);抗IL-23p19 抗体治疗后,小鼠鼻黏膜炎症细胞浸润显著降低(P<0.05),鼻腔灌洗液中嗜酸性粒细胞数明显降低(P<0.05);抗IL-23p19 抗体治疗后,IL-4 及IL-17A 含量较IgG 抗体对照组降低(P<0.05),IFN-β含量不变(P>0.05)。抗IL-23p19 抗体治疗后,FOXP3 含量较IgG 抗体对照组增高(P<0.05)。结论:抗IL-23p19 抗体可有效治疗小鼠变应性鼻炎,其机制可能是抑制Th17 细胞的增殖并且促进调节性T 细胞的功能。     

变应性鼻炎患者血清IL-17和IL-23的表达及临床意义

目的:检测变应性鼻炎(Allergic rhinitis,AR)患者血清IL-17和IL-23的表达水平并探讨其临床意义。方法:检测25例AR患者(观察组)血清IL-17、IL-23、s Ig E(过敏原特异性Ig E)的表达水平,并以23名健康体检合格者(对照组)为对照,比较两组人群血清中IL-17、IL-23、s Ig E表达水平的差异,并探讨AR患者血清中IL-17、IL-23、s Ig E三者间的相互关系。结果:观察组患者血清中IL-17、IL-23及s Ig E水平均高于对照组(P均0.01);观察组患者血清中IL-17、IL-23、s Ig E三者两两之间均呈线性正相关关系(P均0.05)。结论:IL-17、IL-23参与了AR的发生发展过程,与s Ig E的形成可能有关。     

Th17淋巴细胞在哮喘小鼠气道炎症中的初步研究

目的:初步探索Th17细胞及其分泌的炎症介质在哮喘小鼠气道炎症中的作用机制。方法:20只小鼠随机均分为哮喘组和正常对照组。哮喘组用卵白蛋白(OVA)致敏与激发建立小鼠哮喘模型。正常对照组致敏与激发均以生理盐水代替。HE染色观察小鼠气道及肺组织病理变化;光学显微镜下观察小鼠支气管肺泡灌洗液(BALF)中细胞分类及计数;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测小鼠BALF上清中IL-4、IL-5、IL-13、IFN-γ及IL-17的含量,流式细胞技术(FCM)检测小鼠外周血Th1、Th2及Th17淋巴细胞占CD4+T淋巴细胞百分率情况。结果:哮喘组小鼠BALF中细胞总数和中性粒细胞、嗜酸性粒细胞、淋巴细胞百分率均显著高于对照组(P<0.05),BALF上清中IL-4、IL-5、IL-13及IL-17的水平显著增高(P<0.05),而IFN-γ差异无统计学意义(P>0.05),外周血Th2、Th17细胞明显增高(P<0.05),而Th1细胞无明显变化。结论:Th17细胞及其分泌的炎症介质可促进中性粒细胞及嗜酸性粒细胞在气道内聚集,加重哮喘气道炎症,可能与哮喘气道重塑密切相关。     

乳胶致小鼠气道炎症的研究

目的：以乳胶为致敏原，建立具有哮喘主要特征的小鼠模型，研究乳胶与气道炎症之间的关系。方法：乳胶腹腔注射与滴鼻诱发BALB／C小鼠气道炎症，在激发后2，4小时行支气管肺泡灌洗液(BALF)细胞计数分类、肺组织病理检查、血清总IgE及乳胶特异性IgE(sIgE)测定并检测IL-5、IFN-γ的表达。结果：乳胶诱发后，实验组小鼠BALF中细胞总数及嗜酸粒细胞百分比升高；肺组织病理切片示支气管上皮增生、脱落，粘液腺分泌现象，支气管痉挛、收缩，炎症细胞浸润；血清总IgE及乳胶sIgE水平升高；BALF及肺组织局部IFN-γ减少，IL-5增高。结论：用乳胶蛋白作为致敏原，采用腹腔致敏与多次滴鼻激发可使BALB/C小鼠发生气道炎症，具有与变应原诱导的人类哮喘迟发反应相一致的主要特征：气道变应性炎症；外周血IgE浓度升高；肺组织中Th2型CK表达占优势。     

白介素13+2044G>A基因多态性与尘螨变应性鼻炎的关系探讨

目的 对尘螨诱导引起变应性鼻炎的患者行白介素13+2044 G>A基因分型,探讨白介素13+2044 G>A基因与尘螨变应性鼻炎遗传易感性的相关性.方法 用PCR-RFLP法为97名无亲缘关系的尘螨变应性鼻炎患者和119名无血缘关系的健康汉族人行白介素13+2044 G>A基因分型.结果 尘螨变应性鼻炎组与对照组相比,...     

白介素13＋2044G〉A基因多态性与尘螨变应性鼻炎的关系探讨

目的对尘螨诱导引起变应性鼻炎的患者行白介素13＋2044G〉A基因分型,探讨白介素13＋2044G〉A基因与尘螨变应性鼻炎遗传易感性的相关性。方法用PCR-RFLP法为97名无亲缘关系的尘螨变应性鼻炎患者和119名无血缘关系的健康汉族人行白介素13＋2044G〉A基因分型。结果尘螨变应性鼻炎组与对照组相比,白介素13＋2044G〉A基因型频率差异均无统计学意义（P〉0.05）。结论白介素13＋2044G〉A基因多态性与尘螨变应性鼻炎不存在相关性,大样本和单倍体研究将可能有助于阐明关系。     

Effects of Interleukin-9 Blockade on Chronic Airway Inflammation in Murine Asthma Models

Purpose

Asthma is a chronic inflammatory disease of the airways associated with structural changes and airway remodeling. Interleukin (IL)-9 has pleiotropic effects on both inflammatory cells and airway structural cells, which are involved in asthma pathogenesis. We evaluated the effects of IL-9 blockade on chronic airway inflammation.

Methods

Acute airway inflammation was induced in Balb/c mice using aerosolized ovalbumin (OVA), whereas chronic asthma was induced by OVA exposure for 5 weeks with anti-IL-9 or isotype-matched antibody (Ab) treatment during the OVA challenge. Inflammatory cells in bronchoalveolar lavage fluid (BALF) were counted and lung tissues were stained to detect cellular infiltration, mucus deposition, and collagen accumulation. The levels of interferon (IFN)-γ, IL-4, IL-5, IL-9, IL-17, and immunoglobulin E (IgE) in BALF were measured using enzyme linked immunosorbent assays, and profiles of inflammatory cells and subsets of T helper (Th) cells were analyzed using flow cytometry.

Results

IL-9, IL-17, and IFN-γ levels were significantly increased in the chronic group compared to the acute asthma group. However, the number of IL-9-positive cells was not affected, with a decrease in Th17 cells in OVA-challenged caspase-1 knockout mice. Numbers of eosinophils, neutrophils, B cells, mast cells, and Th17 cells decreased after administration of anti-IL-9 Ab. Total IgE, IL-5, IL-9, and IL-17 levels were also lower in the anti-IL-9 group.

Conclusions

Our results suggest that anti-IL-9 Ab treatment inhibits pulmonary infiltration of inflammatory cells and cytokine production, especially IL-17. These results provide a basis for the use of an anti-IL-9 Ab to combat IL-17-mediated airway inflammation.     

抗Tac单克隆抗体对ConA诱导小鼠实验性肝损伤的影响

本研究采用ＣｏｎＡ诱导，建成小鼠肝损伤模型，并检测其血浆肿瘤坏死因子－α（ＴＮＦ－α）含量的变化，发现模型组鼠血浆ＴＮＦ－α含量为０．１９±０．０６ｎｇ／ｍｌ，而正常对照组未检出ＴＮＦ－α，二者比较有极显著差异（Ｐ＜０．００１）。预先注射抗Ｔａｃ单克隆抗体可减少ＣｏｎＡ注射后小鼠ＴＮＦ－α的产生，与模型组比较（分别为０．０３±０．０２和０．１９±０．０６），二者有极显著差异（Ｐ＜０．００１），而且注射抗Ｔａｃ单抗组无肝损伤发生。上述结果表明，ＣｏｎＡ诱导的肝损伤与ＴＮＦ－α等的介导有关，抗Ｔａｃ单克隆抗体对ＣｏｎＡ诱导的肝损伤有保护作用。     

ELISA法测定白细胞介素－6

建立了灵敏的双抗体夹心ＥＬＩＳＡ法测定人白细胞介素－６．主要步骤为以鼠抗重组白细胞介素－６单抗包被，加入待检抗原，再加多克隆兔抗重组白细胞介素－６血清作用，最后加酶标羊抗兔示踪并放大其反应。本法简便，快速，重复性好，灵敏度达１ｎｇ／ｍｌ，适用于临床与基础研究。     

抗人肺鳞腺癌单克隆抗体放射免疫显像的实验研究

以移植人肺腺癌的裸鼠为肿瘤模型，研究１２５Ｉ标记抗人肺鳞腺癌单克隆抗体Ｓ５Ａ１０－２肿瘤显像和生物分布。结果显示，碘标记抗体经腹腔注射在４８ｈ即获清晰图像，１４４ｈ为显像最佳时间。瘤／血比为０．９，瘤／肺比为３．５，瘤／肝比为４．４，定位指数为１．９。     

过敏性紫癜患儿血清IL-9、IL-17、MMP-13的变化及意义

目的:探讨过敏性紫癜患儿血清白细胞介素-9(interleukin,IL)-9、IL-17、基质金属蛋白酶-13(metalloproteinase-13,MMP-13)的变化以及临床意义。方法:选取2016年9月至2018年9月于滨州医学院附属医院儿科收治的122例过敏性紫癜患儿作为实验组,随机选取50例健康儿童作为...     

白细胞介素17 在狼疮性肾炎小鼠中的表达及抗白细胞介素17抗体的干预作用

 目的:探讨白细胞介素17（IL-17）在狼疮性肾炎(LN）小鼠中的表达及抗IL-17抗体的干预作用。方法:11周龄的雌性MRL/lpr小鼠36只随机分为实验组和干预组,另有同龄雌性昆明小鼠18只为对照组。干预组每只小鼠腹腔注射抗小鼠IL-17多克隆抗体20 μg,每2周1次,至实验观察点结束。各组分别于第1次给药后的24 h、14 d及28 d处死6只小鼠。光镜下观察肾脏病理情况,ELISA法检测小鼠血清IL-17的含量,免疫组化法检测肾组织IL-17的表达水平。结果:MRL/lpr小鼠肾小球系膜细胞及基质弥漫增生,肾小管上皮细胞颗粒及空泡变性,灶状萎缩,肾间质淋巴及单核细胞浸润伴纤维化;而干预组肾脏病理改变较实验组为轻。MRL/lpr小鼠的血清IL-17含量在实验组各时点均显著高于对照组（P<0.05）,而在干预组各时点均显著低于实验组（P<0.05）。IL-17在实验组小鼠肾小管上皮细胞中的表达明显增强,在各时点均显著高于对照组（P<0.05）;在干预组,IL-17在各时点的表达均显著低于实验组（P<0.05）。结论:IL-17在MRL/lpr小鼠血清与肾组织中的表达显著增加,而抗IL-17抗体可通过抑制IL-17的表达而抑制LN的炎症免疫反应,减轻肾脏病理损害。     

胃癌单克隆抗体1D1-2在荷瘤裸鼠体内的放射免疫显像

本文应用人胃癌组织及细胞株移植建立了裸大鼠和裸小鼠两种胄癌移植模型。用~(125)I和~(131)I标记抗人胃癌单克隆抗体1D1-2,体外试验表明碘化1D1-2具有特异性的结合活性。注入荷瘤裸鼠体内72h后,显示该抗体高度浓集于肿瘤组织,浓聚指数为4.5,而正常组织仅为1.3,T/NT比分别为2～12倍,与胃组织比为3.2倍、放射免疫显像显示出清晰的肿瘤图像。提示单克隆抗体1D1-2应用于肿瘤定位诊断及导向治疗的可能性。     

~（125）Ⅰ标记单抗MC5对载人肠癌裸鼠移植瘤生长的促进作用

用１２５Ⅰ标记单抗ＭＣ５对载人直肠癌裸且进行实验性治疗研究。１２５Ⅰ－－ＭＣ５对体外直肠癌细胞的特异性结合率为０．４４４。每只小鼠腹腔注射单次剂量７．５ＭＢｑ的１２５Ⅰ－－ＭＣ５发现在４９ｄ后有促进肿瘤生长作用。平均瘤重增加１．５９９６±０．４０９９８。对照组为０．６６４６±０．３２６６ｇ，但两组比较没有统计学上差异（Ｐ＜０．２）。３Ｈ－－ＴｄＲ掺入肿瘤细胞的量检测，１２５Ⅰ－－ＭＣ５组为１５５３０．４±１３２７．６ｄｐｍ／ｇ，对照组为８６０８．５±１２５５．２ｄｐｍ／ｇ。两组比较有非常显著差异（Ｐ＜０．０１）。实验结果提示：抗结肠癌单抗ＭＣ５可以用作人肠癌的导向治疗。但１２５Ⅰ不是一个好的导向治疗标记同位素。低剂量幅射可能促进肿瘤生长。