呼吸道合胞病毒受体研究进展

呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus, RSV)是急性呼吸道感染的主要病原体之一, 给全世界造成了巨大的负担。病毒与宿主细胞受体识别和相互作用, 是建立感染的关键初始步骤, 受体分布影响病毒的细胞嗜性和组织嗜性, 影响病毒在宿主体内的复制和增殖。但目前RSV受体尚不明确, 这也是阻碍RSV疫苗及治疗性药物研发的原因之一。本文通过对现有的RSV受体进行综述, 以期对RSV疫苗及治疗性药物的研发提供思路。     

呼吸道合胞病毒滴度双抗体夹心ELISA检测方法的建立

目的建立双抗体夹心酶联免疫吸附试验(double antibody sandwich enzyme-linked immunosorbent assay, DAS-ELISA)检测呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus, RSV)滴度。方法以RSV融合前F蛋白的两种抗体AM14与D25作为捕获抗体和检测抗体, 通过对其抗体浓度的优化来确定DAS-ELISA较适反应条件, 并对该方法的特异性、重复性、灵敏度及适用性进行验证。结果选择用AM14抗体作为捕获抗体, D25作为检测抗体。捕获抗体AM14较适工作浓度为20 μg/mL, 检测抗体D25的稀释比例为1∶3 000。建立的DAS-ELISA与轮状病毒(rotavirus, RV)和人3型副流感病毒(human parainfluenza virus type 3, HPIV-3)无交叉反应, 且不同稀释倍数的RSV病毒进行批内与批间重复试验的变异系数(coefficient of variation, CV)均<10%;不同亚型的RSV及蛋白进行试验, 均能检测到病毒滴度;检测结果与CCID50...     

两种商品化新型冠状病毒中和抗体检测试剂盒的应用性能评价

目的评价两种商品化新型冠状病毒(severe acute respiratory syndrome coronavirus 2, SARS-CoV-2)中和抗体检测EIA试剂盒的应用性能。方法使用两种商品化SARS-CoV-2中和抗体ELISA检测试剂盒(A和B), 以疫苗免疫前血清44例、免疫后1个月血清120例、COVID-19患者愈后6个月的恢复期血清64例作为样本盘, 进行中和抗体检测, 同时通过活病毒微量中和试验(micro-neutralization test, micro-NT)检测上述血清样本的50%中和抗体滴度(50% neutralization titer, NT50)。分析两种商品化试剂盒与活病毒中和试验在定性及定量结果上的一致性。结果定性结果分析发现, 以micro-NT检测结果作为标准, A和B试剂盒的阳性符合率分别为97.40%和100.00%;阴性符合率分别为97.30%和95.95%;约登指数分别为0.95和0.96。定量结果分析发现, 对于疫苗免疫后样本, A、B试剂盒与micro-NT检测结果的相关系数分别为0.24(P<0.05)和0.5...     

呼吸道合胞病毒治疗药物及其作用靶点的研究进展

呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus,RSV)在全球造成了严重的疾病负担,特别是在年龄小于2岁的儿童中。目前仍没有安全有效疫苗和特异性的抗病毒药物可供使用。了解病毒感染宿主细胞的机制,可为研发新型抗RSV药物提供靶点。近年来,靶向融合蛋白阻止病毒进入和靶向病毒RNA依赖的RNA聚合酶抑制病毒复制是RSV抑制剂及单克隆抗体研究热点。此外,以宿主因子为靶点研发抗RSV药物受到越来越多的关注。本文就RSV感染的致病机制、药物作用靶点及其代表药物做一概述。     

新生儿Fc受体在人呼吸道合胞病毒粘膜免疫中的研究进展

人呼吸道合胞病毒(human respiratory syncytial virus, HRSV)是引起婴幼儿下呼吸道感染的重要病原体。人体粘膜免疫系统是抵御HRSV入侵的第一道屏障, 表达于粘膜表面上皮细胞的新生儿Fc受体(neonatal Fc receptor, FcRn)是免疫球蛋白和白蛋白的特异性受体, 能够介导IgG转运、维持血清IgG浓度, 调节IgG半衰期, 在粘膜免疫中扮演了重要角色。近年来, 利用FcRn介导IgG跨粘膜转运实现了长效单克隆抗体Nirsevimab预防HRSV的研发, 加速了HRSV防治的研究进展, 并为相关疾病的预防与治疗提供了新靶点。本文综述了FcRn在HRSV粘膜免疫中的研究进展, 为HRSV疫苗和单克隆抗体的研发以及HRSV感染的防控等提供参考。     

2019—2023年河北地区儿童呼吸道合胞病毒流行特征分析

目的了解2019—2023年河北地区儿童呼吸道合胞病毒(RSV)的流行特征。方法收集2019—2023年在河北省儿童医院住院治疗患儿的下呼吸道标本46 576例, 采用多重RT-PCR和毛细电泳法检测13种常见呼吸道病原体, 并对数据进行统计学分析。结果 RSV总体阳性检出率为18.76%(8 739/46 576), 男性患儿和女性患儿RSV总体阳性率分别为18.84%(51 74/27 462)和18.65%(3 565/19 114), 性别比较差异无统计学意义(χ2=0.916, P=0.339);RSV检出率与年龄增长存在线性关系(P<0.01);各年份RSV检出率之间差异有统计学意义(χ2=723.71, P<0.01);2019—2021年的阳性检出率高峰期在12月至次年2月;2019年和2020年5—10月阳性检出率极低;2021年全年阳性检出率均在10%以上, 且5月和8月出现了反季节流行的小高峰;2022年全年阳性检出率较低, 无明显季节变化;2023年阳性检出率高峰出现在4—6月。各年龄组阳性检出率在疫情前、疫情期间和疫情后差异有统计学意义(P<...     

基于核蛋白的麻疹病毒IgG抗体间接ELISA检测方法的建立及应用

目的 以原核系统表达的麻疹病毒核蛋白作为包被抗原,初步建立检测麻疹病毒抗体的间接ELISA方法,并将其应用于人群抗体水平的评估。方法 对各项实验条件进行筛选和优化,确定间接ELISA法的操作流程,并检测了157份健康儿童和新生儿母亲血清中的抗麻疹病毒IgG抗体,与商品化麻疹病毒ELISA IgG抗体检测试剂盒进行比较。结果 本研究建立的间接ELISA方法批内和批间的重复性试验变异系数均小于10%,与试剂盒检测结果相比,血清标本的总符合率为95.5%,灵敏度和特异度分别可达94.8%和98.3%。其中,两种方法检测的85份0～15岁健康儿童血清麻疹病毒IgG抗体阳性率,无论是<8月龄组或8月龄～15岁组,结果差异均无统计学意义(χ2＝0.313,P>0.05;χ2＝0.000,P>0.05),且通过本研究所建立的ELISA方法检测的麻疹病毒抗体水平表现出与试剂盒检测结果在不同年龄组一致的增减趋势,两种方法定量结果的相关系数r为0.893(P<0.001),显示出该方法具备的定量潜力。结论 本研究建立的ELISA方法具有良好的稳定性,且灵敏度高、特异度强,与商品化试...     

天津单中心呼吸道合胞病毒感染儿童的流行病学特征研究

目的分析天津地区呼吸道合胞病毒(RSV)感染儿童的流行病学特征, 为预防和诊治儿童RSV感染提供参考。方法收集2022年1月至2024年1月于天津市第五中心医院治疗的2 743例急性呼吸道感染患儿的临床资料, 采用多重荧光PCR技术检测患儿咽拭子中肺炎支原体、人鼻病毒、腺病毒、甲型流感病毒、乙型流感病毒、RSV共6种病原体的核酸片段, 对RSV-RNA阳性病例的流行病学和临床资料进行回顾性分析。结果 2 743例患儿的RSV-RNA阳性率为15.09%(414/2 743)。2022年患儿RSV-RNA阳性率为9.29%(73/786), 2023年患儿RSV-RNA阳性率为16.53%(302/1 827), 两年间阳性率的差异有统计学意义(χ2=23.45, P<0.05)。冬春季RSV感染率与夏秋季差异有统计学意义(χ2=19.46, P<0.05), 冬季感染率最高(19.32%, 193/999), 秋季感染率最低(9.43%, 45/477)。各年龄组之间, RSV感染率有显著差异(χ2=71.38, P<0.05), 0～2岁组感染率最高(21.18%,...     

致敬经典：回顾我国儿童中呼吸道合胞病毒感染的早期开拓性研究

呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus, RSV)是世界各地婴幼儿下呼吸道感染最重要的病原。我国儿童中RSV感染的研究始于20世纪70年代初。回顾这段历史, 可以看到科研紧密结合儿科临床需求, 严格按照经典的病毒病原学方法, 得到了翔实可靠的结果, 为我国的RSV研究奠定了基础。     

2018年甘肃省10岁以下儿童流感病毒和呼吸道合胞病毒感染特征

目的 为了解甘肃省2018年10岁以下儿童中门诊流感样(influenza－like illnes,ILI)病例中流感病毒(influenza virus,Flu)、呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus,RSV)的病原学特点及流行特征,为Flu、RSV疾病的诊断治疗及防控提供依据。方法 选取甘肃省19家国家级流感监测哨点医院ILI病例咽拭子标本共8 559份,用实时荧光PCR检测流感病毒,对其中的3 436份,用RT-PCR法对RSV检测。结果 Flu阳性934份,阳性率10.91%,其中甲型H1N1阳性431例、H3N2阳性70例、乙型428例、甲型H1N1和乙型混合5例;RSV阳性320份,阳性率9.31%。14个市州之间Flu、RSV检测阳性率差异存在统计学意义(χ2＝56.99,Р<0.01;χ2＝263.34,Р<0.01)。流感1月份为最高峰,阳性率为50.70%,乙型B/Yamagata系(占53.53%)和甲型H1N1(占39.93%)同时流行。RSV的流行高峰在2～4月,阳性率达13.98%,5岁以下儿童RSV阳性率10....     

2022—2023年承德市呼吸道合胞病毒的暴发流行及其临床特征研究

目的确定呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus, RSV)在承德市的流行情况及临床特征。方法收集2022年8月—2023年6月因呼吸道感染在承德市中心医院儿科住院治疗的患儿咽拭子478份及其临床信息, 实时定量PCR检测A亚型和B亚型RSV的分子流行情况, 对RSV感染患者的临床特征进行分析。结果 67.57%(323/478)的住院患儿为RSV阳性, RSV呈暴发流行且均为RSV-A型, 2022年11—12月和2023年5—6月为RSV-A型的2次感染高峰。RSV-A型阳性患儿中, 86.07%(278/323)为合并其他病原体检出病例, 其中与细菌共检出的例数最多, 以肺炎链球菌为主, 肺炎克雷伯菌次之。流感病毒A型是最常见的共检出病毒。与RSV-A型共检出患儿组相比, RSV-A型单独检出组的乳酸脱氢酶(Z=2.396, P=0.017)较高, 且高于正常高值;RSV-A型共检出组的白细胞计数(Z=2.417, P=0.016)、中性粒细胞比例(Z=3.218, P=0.001)、C-反应蛋白(Z=1.998, P=0.046)和肌酐(Z=2.1...     

基于网络药理学和动物体内试验验证云实感冒合剂对呼吸道合胞病毒作用

目的基于网络药理学和体内试验探讨云实感冒合剂抗呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus, RSV)的作用机制。方法网络药理学预测:运用TCMSP、GeneCards等数据库预测云实感冒合剂干预RSV的活性成分及作用靶点。利用Cytoscape 3.2.1软件构建中药成分-疾病靶点网络图。通过STRING数据库分析蛋白质相互作用关系。借助Metascape数据库进行富集分析。采用分子对接技术分析验证网络药理学结果。云实感冒合剂干预RSV感染验证试验:滴鼻法建立RSV小鼠模型, 灌胃合剂后检测血常规、肺指数, 观察肺组织病理变化, 流式细胞术检测外周血T细胞亚群, ELISA检测血清TNF-α、IL-6、IL-1β含量, RT-PCR检测肺组织中TLR4、NF-κB和RSV-N基因mRNA相对水平。结果分析获得云实感冒合剂有效活性成分41个, 抗RSV靶点111个, 富集得到167条信号通路, 主要是PI3K/AKT、MAPK、Toll-like等信号通路。分子对接结果显示, 云实感冒合剂活性成分木犀草素、山奈酚、槲皮素与RSV-G、RSV-F、PI3K、AK...     

呼吸道合胞病毒

近期我国急性呼吸道疾病持续上升与多种呼吸道病原体感染有关。其中呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus, RSV)感染是导致1岁以下婴幼儿肺内感染住院的第一原因。在RSV流行高发季节, 80%以上婴幼儿的急性下呼吸道感染由RSV感染引起。世界卫生组织数据表明, RSV感染是5岁以下儿童因病毒感染而住院甚至死亡的第一大因素。     

血液筛查实验室HBsAg检测的室间质量评价

目的评价我国采供血机构ELISA检测乙型肝炎表面抗原(hepatitis B surface antigen, HBsAg)的检测能力以及所使用的不同试剂盒的检测性能。方法统计分析2018—2021年国家卫生健康委临床检验中心对全国采供血机构实验室开展的HBsAg室间质量评价数据, 评估参评实验室检测能力, 分析和比较各检测试剂的检测精密度以及检测灵敏度等。结果 2018—2021年参与室间质评的单位数量有稳步的增加, 4种国产试剂和2种进口试剂的使用单位数在每年度均超过10家, 两种进口试剂检测adw血清型样本时, 批内CV<7%的实验室比例相对较高(>75%), 而三种国产试剂的批内CV<7%的实验室比例均在50%左右, 说明国产试剂的批内精密度有待提高。3种国产试剂检测0.2 IU/mL的adw2型样本时, S/CO值≥2的实验室为小于50%, 表明这些试剂检测HBsAg弱阳性标本时存在漏检风险;当检测血清型为ayw1时, 两种进口试剂均100%实验室检测正确, 但B试剂和C试剂正确率相对较低(84.4%和60.9%)。结论我国采供血机构实验室ELISA检测HB...     

一株降低了抗体依赖性增强效应的西尼罗病毒中和抗体的表达与体外活性研究

目的建立降低抗体依赖性增强(antibody-dependent enhancement, ADE)效应的抗体表达系统, 以期降低目标抗体的ADE效应。方法对哺乳细胞抗体表达载体Fc区进行L234A和L235A点突变, 建立抗体表达载体pFRT-IgG1κ-FcM。选取前期工作中获得的1株具有显著ADE效应的抗体Wt-WNV利用pFRT-IgG1κ-FcM系统进行表达, 获得突变后抗体FcM-WNV。ELISA检测FcM-WNV与靶抗原西尼罗病毒包膜蛋白DⅢ(West Nile virus envelope protein-DⅢ, WNV E-DⅢ)的结合, 流式细胞术分析FcM-WNV与人高亲和力IgG Fc受体hFcγRⅠ(hCD64)的结合。假病毒感染宿主细胞(BHK21和K562)试验检测FcM-WNV的体外中和活性。结果 FcM-WNV与Wt-WNV表达水平相当, 能识别结合WNV E-DⅢ, 且呈浓度依赖效应;与Wt-WNV相比, FcM-WNV与hCD64的结合力明显减弱, 表现为荧光强度明显降低;与前期实验结果一致, Wt-WNV在5 μg/ml的浓度下具有明显增强WN...     

常见的呼吸道病毒受体及抗病毒药物概述

呼吸道病毒是呼吸系统感染的常见病原体, 附着在宿主细胞受体上是其感染的第一步。受体在确定病毒的寄主范围、组织嗜性和发病机制中起着关键作用。本文就常见呼吸道病毒受体、病毒-受体间相互作用及目前的抗病毒药物做一概述, 为明确病毒感染机制和防控病毒感染提供参考。     

4种戊型肝炎病毒IgM抗体诊断试剂在一起暴发疫情中的性能比较

目的 比较4种戊型肝炎(戊肝)病毒(hepatitis E virus,HEV)IgM抗体诊断试剂盒在1起暴发疫情中的诊断性能。方法 应用4种试剂检测一起戊肝暴发疫情中研究对象的急性期血清标本中的IgM抗体,并检测HEV RNA;进行统计学分析。结果 MP、科华、万泰和贝尔公司试剂的HEV IgM抗体检出率分别为40.00%(108/270)、29.26%(79/270)、28.52%(77/270)和20.37%(55/270),一致率为78.52%(212/270);对HEV RNA阳性血清标本,MP、科华和万泰试剂的检测灵敏度均为66.67%(32/48),贝尔试剂灵敏度为58.33%(28/48);对急性戊肝临床诊断病例血清标本,MP、科华和万泰试剂检测灵敏度为69.81%(37/53),贝尔试剂灵敏度为60.38%(32/53);贝尔与科华、贝尔与万泰试剂对HEV RNA阳性或急性戊肝临床诊断病例血清标本的HEV IgM抗体检出率差异具有统计学意义(McNemar检验：P<0.05),而其他试剂的检出率之间差异无统计学意义(McNemar检验：P>0.05);对H...     

2019—2020年上海市住院儿童病例发热呼吸道症候群病原谱研究

目的了解上海市儿童住院病例中呼吸道症候群的病原谱及临床特征, 为疾病的预防及临床诊断提供参考。方法利用荧光定量PCR结合熔解曲线的判定方法对634份下呼吸道吸取物标本进行22种病原体检测, 采用卡方检验对不同检出率进行统计分析。结果在634份住院病例标本中, 555份病原体核酸检测阳性, 总阳性率为87.54%, 检出的病原体主要为肺炎支原体(mycoplasma pneumonia, MP)、腺病毒(adenovirus, ADV)、呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus, RSV)、甲型流感病毒(influenza virus A, FluA)及博卡病毒(bocavirus, BoV);多重感染的比率大于单一感染, 多重感染的病原体类型是ADV、RSV、FluA或者BoV伴MP共感染;在年龄分布中, FluA在"<2岁"和"2～5岁"这两个年龄组检出率较高, RSV在"<2岁"年龄组的检出率明显高于其他两个年龄组, 而冠状病毒在"2～5岁"和">5岁"的检出率要高于"<2岁"年龄组;结合临床症状的分析显示, RSV在非发热患者...     

狂犬病病毒的检测技术

狂犬病是一种病死率极高的人兽共患病, 在世界范围内广泛流行。通过对犬的大规模免疫等防控措施, 狂犬病逐步得到控制, WHO号召在2030年消除由犬传播的人间狂犬病。狂犬病病原体的检测既是狂犬病病例确诊的重要依据, 也是衡量狂犬病消除进度不可或缺的基本工具。国内外关于狂犬病病毒检测的研究众多, 本文从抗原检测技术、抗体检测技术、核酸检测技术以及其他检测技术4个方面进行了梳理并展开综述。     

重视诺如病毒

1972年, 诺如病毒被发现, 此后被确认为全球急性胃肠炎散发病例及暴发的主要病因之一, 成为全球性的公共卫生问题。50年来, 人们对诺如病毒感染的临床特征、流行病学特征、病原特征等有了较深入认识, 但迄今未能建立有效的体外培养和实验动物模型, 导致其感染和致病机制研究受限, 也无特异的疫苗和药物上市。随着轮状病毒疫苗的全球普及, 诺如病毒成为继轮状病毒后又一亟待控制的重要公共卫生问题。