寡核苷酸微阵列技术用于检测幽门螺杆菌克拉霉素耐药相关23S rRNA基因多态性

目的 幽门螺杆菌（Hp）克拉霉素耐药与23S rRNA基因A2142G、A2143G和C2182T点突变相关。本研究旨在探索建立一种快速、简便的检测方法，获取Hp克拉霉素耐药相关23S rRNA基因多态性的流行病学资料，为临床合理用药提供依据。方法收集胃黏膜标本，用于病理检查、提取DNA。根据核苷酸位点设计相应探针，探针3′端以氨基修饰，氨基与探针序列之间以间隔臂相连，将探针用芯片点样仪点至玻片上。下游引物5′末端用Cy3荧光标记，进行不对称PCR扩增。其产物与芯片杂交，杂交后洗涤、扫描芯片，观察信号强度。非荧光标记引物扩增PCR产物克隆至T载体，测序验证芯片结果。结果（1）寡核苷酸微阵列技术与测序检测Hb 23S rRNA基因多态性结果完全一致。（2）经病理和PCR证实为场阳性的54例标本，杂交结果显示A2142位点均为野生型（54/54）；A2143G突变率为11．11％（6/54），尚未发现A2143C和A2143T的突变；C2182T突变率为12．96％（7／54），尚未发现C2182A和C2182G的突变，其余均为野生型。结论（1）利用寡核苷酸微阵列技术检测坳克拉霉素耐药的23S rRNA基因多态性，快速、简便而准确，可以高通量并直接检测胃黏膜而不需进行细菌培养，为根除Hp选择用药提供科学依据，推动个体化治疗方案的实施。（2）本研究没有发现场23SrRNA基因2142点突变，A2143G和C2182T突变率分别为11．11％和12．96％。     

桂西地区幽门螺杆菌对克拉霉素的耐药性分析

目的 分析桂西地区幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,HP)菌株对克拉霉素的耐药情况,并探讨Hp对克拉霉素耐药与23S rRNA基因点突变的关系.方法 分离培养Hp,纸片扩散法进行药敏实验,PCR方法扩增23S rRNA基因,用聚合酶链反应.限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)检测克拉霉素耐药菌株的点突变,同时进行基因测序确定突变位点.结果 桂西地区Hp菌株对克拉霉素耐药率为22.2%(28/126);PCR-RFLP检测10株对克拉霉素耐药的Hp,均存在23S rRNA基因的A2143G、A2144G点突变,10株敏感菌株均无23S rRNA的点突变,基因测序显示耐药菌株有A2143G、A2144G突变,其他位置未发现突变.结论 桂西地区Hp菌株对克拉霉素耐药率(22.2%)略高于北京、上海等地区;Hp的23S rRNA基因A2143G、A2144G点突变与克拉霉素的耐药相关.     

幽门螺杆菌对克拉霉素耐药分子机制研究进展

幽门螺杆菌（Hpylori,Hp）是慢性胃炎,消化性溃疡的重要致病因素。研究表明,Hp的根治和清除有利于溃疡的治愈。而Hp耐药直接影响Hp的根治和清除,Hp耐大环内酯类药物（克拉霉素）的机制与其23SrRNA的V区上的点突变有关。随着Hp耐药率的逐年升高,有关Hp的耐药分子机制和检测技术成为研究热点。因此,开展Hp耐药的相关研究对Hp的诊断和治疗有重大意义。     

在儿童评价粪便抗原试验检测Hp感染

目的　幽门螺杆菌 (Hp)感染通常在儿童早期获得 ,非侵袭性方法用于监控 Hp感染的发病率、传播和清除率 ;它们容易操作 ,花费低 ,并且有高的诊断精确率 ;特别是对于婴儿和幼儿 ,血清学试验和 1 3 C- U BT达不到上述要求。本研究的目的评价一组儿童用新的酶联免疫吸附试验检测粪便中的 Hp抗原 (Hp SA) ,并与侵袭性试验和 1 3 C- UBT比较。方法　 310名儿童参与到 Hp SA试验中 ,其中 2 74名儿童粪便标本被分成 3组 ;A组 145名儿童 (年龄 0 .5～ 19.8岁 ,6 6 / 145 <6岁 ) ,这些儿童因胃肠症状接受上消化道胃镜检查 ,是否感染 Hp则通过…     

克拉霉素在呼吸道感染中的临床应用

目的 探讨克拉霉素在呼吸道感染中的临床应用.方法 根据克拉霉素的结构特点与药物动力学特征,对克拉霉素在酸性环境中的稳定性、T1/2、在体内的分布、在肝内的代谢、人体生物利用度、抗菌活性等几方面进行了分析. 结果 克拉霉素为大环内脂类抗生素,具有广谱、稳定、T1/2长,5～7h、组织浓度高,8.5~g/ml、人体生物利用度高50%、抗菌活性强等优点,在临床各科感染疾病治疗中有着广泛的适应症. 结论 克拉霉素在扁桃体、肺及支气管分泌物中有显著高浓度,对肺组织有亲和力,使其在呼吸道感染治疗中具有较好疗效.     

克拉霉素四联方案对一线方案根除失败的幽门螺杆菌的再根除效果评估

目的 评价含克拉霉素四联方案治疗的一线方案失败后Hp根除效果。方法 择取2016年3月~2017年3月收集的32例接受Hp根除OABM方案和31例接受OAMF方案失败的患者进入本研究,均给予奥美拉唑20 mg,阿莫西林1 g、次枸橼酸铋钾240 mg和克拉霉素500 mg,bid,疗程14 d。治疗8 周后14C-尿素呼气试验评估Hp根除情况。结果 共61例患者完成研究,二线方案根除率OABM组和OAMF组分别为84.37%和77.41%;PP根除率分别为87.09%和82.75%;同时累积根除率为80.95%和85.00%。11.11%患者有副作用。结论 根除率＞80%和很低的不良反应发生率含克拉霉素四联方案可作为一线方案失败后的二线方案。     

肺炎链球菌的耐药基因及其分子生物学检测

目的 肺炎链球菌对β-内酰胺类,大环内酯类抗生素的耐药率在世界各地以较快速度上升,其流行趋势已引起医学界的普遍关注,但不同地区差异较大.肺炎链球菌的β-内酰胺耐药性主要由青霉素结合蛋白变异所致,非pbp基因突变也会导致β-内酰胺耐药性,大环内酯耐药性肺炎链球菌的耐药表型MLS型,M型分别由耐药基因ermB和mefA介导.分子生物学方法的应用使肺炎链球菌耐药性的发生得到较全面的阐述,同时对耐药基因的检测也更快速和准确.     

肺炎链球菌的耐药基因及其分子生物学检测

目的肺炎链球菌对β-内酰胺类,大环内酯类抗生素的耐药率在世界各地以较快速度上升,其流行趋势已引起医学界的普遍关注,但不同地区差异较大。肺炎链球菌的β-内酰胺耐药性主要由青霉素结合蛋白变异所致,非pbp基因突变也会导致β-内酰胺耐药性,大环内酯耐药性肺炎链球菌的耐药表型MLS型,M型分别由耐药基因ermB和mefA介导。分子生物学方法的应用使肺炎链球菌耐药性的发生得到较全面的阐述,同时对耐药基因的检测也更快速和准确。     

血流感染碳青霉烯耐药肺炎克雷伯菌的耐药特征及机制研究

目的 探讨无菌血标本分离碳青霉烯耐药肺炎克雷伯菌(CRKP)的耐药机制及分子分型.方法 测定32株CRKP最低抑菌浓度(MIC),mCIM和eCIM法检测碳青霉烯酶;PCR法检测耐药基因;多位点序列分型(MLST)进行分子分型;RT-PCR检测膜孔蛋白OMPK35/36基因相对表达情况.结果 药敏试验显示32株CRKP...     

武汉地区常住居民幽门螺杆菌感染情况分析

目的:回顾性分析武汉地区部分居民幽门螺杆菌(Hp)的感染情况,为预防Hp感染和Hp相关疾病的防治提供参考。方法:采用ELISA对1846例武汉地区不同性别、年龄、职业、血型及是否吸烟和出现消化不良症状等居民分组检查其血清Hp抗体,应用SPSS13.0统计软件分析比较各组间Hp感染的检出率差异。结果:被检人群Hp感染总检出率为45.18%;男性为45.77%,女性为44.50%(P>0.05);体检健康者Hp检出率为33.18%。不同年龄组Hp检出率不同,小于15岁组最低,为26.32%,之后逐渐升高,至60岁以上组达到61.17%。O型血者Hp检出率较其他血型组显著增高(P<0.05),有消化不良症状组Hp检出率(64.90%)显著高于无消化不良组(44.52%,P<0.05)。结论:武汉地区居民Hp感染较为常见。Hp感染与年龄、血型、消化不良症状密切相关。     

PTPN11第3内含子基因多态性及H.pylori感染与广西柳州地区胃癌易感性研究

目的探讨蛋白酪氨酸磷酸酶非受体型11（PTPN11）基因多态性及幽门螺杆菌（H.pylori）感染与广西柳州地区胃癌易感性的相关性。方法通过PCR检测H.pylori的尿素酶B亚单位（UreB）基因和两步法聚合酶链反应（PCR-CTPP）对广西柳州地区238例胃癌患者及112例健康对照者的PTPN11基因第3内含子2460位点进行单链构象多态性分析（SNP）。结果胃癌组和对照组H.pylori（＋）者分别为142例（59.7%）和54例（48.2%）,H.pylori（-）者分别为96例（40.3%）和58例（51.8%）,H.pylori感染率在两组间差异有统计学意义（P〈0.05）。胃癌组和对照组PTPN11基因在该位点的基因型频率分布符合遗传平衡状态且差异无统计学意义（P〉0.05）,但两组间的等位基因分布差异有统计学意义（P〈0.05）。与G/G型相比,G/A型和A/A型不能减低胃癌的发病风险（G/A型：OR=0.642,95%CI：0.397～1.039;A/A型：OR=0.399,95%CI：0.097～1.641）;但将G/A型和A/A型合并后与G/G型相比,带有A基因的个体患胃癌的风险显著降低（OR=0.620,95%CI：0.388～0.992）。根据发病年龄、性别、吸烟史、饮酒史和H.pylori感染对胃癌的易感性进行的分层分析发现,PTPN11基因该位点SNP与胃癌的年龄、性别、吸烟史以及饮酒史无关,H.pylori阳性的A基因携带者相对于G/G型个体患胃癌的风险减少到0.52倍（OR=0.521,95%CI：0.274～0.990）。结论广西柳州地区PTPN11基因第3内含子2460位点A基因携带者能明显降低胃癌的发病风险,H.pylori感染与该位点G/G基因型之间存在交互作用。     

上海地区电力员工体检幽门螺杆菌检测结果分析

目的了 解上海地区电力员工体检人群幽门螺杆菌(helicobacter pylori,Hp)感染情况及分布特征,为本地区电力员工幽门螺杆菌的预防与治疗提供科学依据.方法 选取2015年1月至12月本院健康体检者58876名,以性别和年龄进行分组,应用13C尿素呼气试验(13C-ureabreath test,13C-UBT)快速检测体检人群中幽门螺杆菌感染情况,并对其结果进行统计学分析.结果 58876名体检者幽门螺杆菌总感染率为42.4％ (24942/58876),其中男性和女性感染率分别为43.9％(18868/43025)和38.3％ (6074/15851),差异具有统计学意义(P＜0.05);不同年龄感染情况:低年龄组(≤30岁)感染率为37.6％ (2805/7460),中年龄组(31～60岁)为43.5％(18428/42397),高年龄组(＞60岁)为41.1％ (3709/9019),每组之间差异均具有统计学意义(P＜0.05).结论 上海地区电力员工体检幽门螺杆菌感染分布与年龄、性别都有关.     

大黄、黄连、黄芩联合三联序贯治疗Hp感染的疗效分析

目的 对比大黄、黄连、黄芩三味药联合三联序贯治疗Hp感染与三联治疗Hp的临床疗效。方法 把解放军武汉总医院门诊行14C呼气试验检测Hp为阳性的患者67例,随机分为两组,A组:标准三联组（耐信+克拉霉素+阿莫西林）,疗程10 d;B组:先用大黄、黄连、黄芩治疗1周再用标准三联治疗10 d。抗Hp治疗停药4周后复查14C呼气试验。比较各组Hp根除率。结果 A组Hp根除率为51.56%,B组Hp根除率为85.29%,两组差异有统计学意义（P＜0.05）。结论 中药大黄、黄连、黄芩联合标准三联序贯治疗Hp感染的根除率高于三联治疗Hp感染。     

Detection of Helicobacter pylori cagA gene in gastric biopsies, clinical isolates and faeces

Purpose: Helicobacter pylori infection is common in the developing countries. The cagA gene is a marker of pathogenicity island (PAI) in H. pylori. The aim of this study was to determine the prevalence of cagA among dyspeptic patients in Bahrain directly from gastric biopsy and stool specimen. Methods: A total of 100 gastric biopsy samples, 16 clinical isolates and 44 faecal specimens were collected from Bahraini adult dyspeptic patients. cagA gene of H. pylori was assessed using polymerase chain reaction (PCR). Results: The cagA gene was detected in 59 (59%) from biopsy specimens, 10 (62%) clinical isolates and in 10 (22.7%) faecal specimens. The detection of cagA positive H. pylori was significantly higher in patients with duodenal ulcer (80%) compared to those with other endoscopic finding (42%) (P<0.05). Conclusions: Using PCR to detect cagA gene directly from biopsy is a rapid and reliable technique. However, using stool specimen for genotyping in our patients showed reduced sensitivity.     

血清IL-32、IL-33、IL-35在不同亚型Hp感染者及胃癌患者中的水平及意义

目的 观察血清白细胞介素-32(interleukin-32,IL-32)、白细胞介素-33(interleukin-33,IL-33)、白细胞介素-35(interleukin-35,IL-35)水平与不同亚型幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)感染之间的关系,并探讨胃癌患者血清IL-32、IL...     

泌尿生殖道支原体感染检测、鉴定及耐药性分析

目的 探究泌尿生殖道支原体感染情况及对常用抗菌药物的耐药情况,为指导临床合理应用抗菌药物提供科学依据。方法 本研究使用支原体培养、鉴定及药敏检测试剂盒（液基型）,对临床收集的489例疑似泌尿生殖道感染患者的标本进行支原体培养、鉴定及药敏检测。结果 发现在489例标本中,支原体阳性有202例,阳性率为41.30%,人型支原体单一阳性有24例,占11.88%,解脲支原体单一阳性有171例,占84.65%,混合感染有7例,占3.47%。女性、男性支原体检出率分别为52.36%、17.44%,女性明显高于男性。阳性患者以20~35岁为主,占66.83%。支原体对交沙霉素、强力霉素和美满霉素敏感性最高,敏感率分别为89.60%、88.12%和84.65%,对红霉素、司巴沙星、环丙沙星、氧氟沙星和左氧氟沙星敏感性较低,敏感率分别为18.81%、10.40%、1.49%、6.44%和5.94%。结论 本研究证实支原体感染中主要由解脲支原体感染为主。临床应参考药敏结果合理用药,经验用药时交沙霉素、强力霉素和美满霉素最好,应避免使用司巴沙星、环丙沙星、氧氟沙星和左氧氟沙星。     

核酸序列测定技术分析HBV耐药基因与亚型鉴定

目的:用荧光标记核酸序列测定技术分析患者携带的HBV基因型,判断所携带的HBV亚型以及治疗过程中是否产生耐药性.方法:采用PCR产物直接进行核酸序列分析,使用计算机模拟核酸杂交技术分析HBV基因的亚型与耐药基因.结果:扩增产物的核酸序列分析表明,设计的引物序列在确定的条件下可以特异性的扩增HBV相应的基因片段.患者耐药基因分析结果分别为HBV YVDD变异和YIDD变异;病毒亚型分析结果提示患者携带的HBV均为adr亚型.结论:本方法能够准确判定HBV的YVDD与YIDD变异及其它类型突变,并确定患者携带HBV的基因型,能够准确、客观地反映出病原体的耐药性,可以作为合理用药的重要参考依据.     

Susceptibilities to clarithromycin, amoxycillin and metronidazole of Helicobacter pylori isolates from the antrum and corpus in Tokyo, Japan, 1995–2001

The aim of this study was to determine the susceptibilities to clarithromycin, amoxycillin and metronidazole of Helicobacter pylori isolates from the antrum and corpus of Japanese patients examined during the period 1995-2001. There was an increase, from 6.2% in 1995 to 22.1% in 2000-2001, in the proportion of patients infected with clarithromycin-resistant H. pylori. Of patients infected with clarithromycin-resistant H. pylori, 39.1% were infected with both clarithromycin-susceptible and -resistant H. pylori. Furthermore, the MIC90 of clarithromycin for H. pylori rose from < 1 mg/L in 1995-1998 to 8 mg/L in 1999. In contrast, the MIC90s of amoxycillin and metronidazole were < or = 0.125 and 4 mg/L, respectively, throughout the study period. The results showed that, while most H. pylori isolates were susceptible to amoxycillin and metronidazole, resistance to clarithromycin among H. pylori isolates increased markedly in Japan during 1995-2001. The results also indicated a need to test the susceptibility of H. pylori isolates from more than two samples obtained from two different sites in the stomach of a single patient in order to diagnose the presence of clarithromycin-resistant H. pylori correctly.