呼吸道合胞病毒受体研究进展

呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus, RSV)是急性呼吸道感染的主要病原体之一, 给全世界造成了巨大的负担。病毒与宿主细胞受体识别和相互作用, 是建立感染的关键初始步骤, 受体分布影响病毒的细胞嗜性和组织嗜性, 影响病毒在宿主体内的复制和增殖。但目前RSV受体尚不明确, 这也是阻碍RSV疫苗及治疗性药物研发的原因之一。本文通过对现有的RSV受体进行综述, 以期对RSV疫苗及治疗性药物的研发提供思路。     

呼吸道合胞病毒治疗药物及其作用靶点的研究进展

呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus,RSV)在全球造成了严重的疾病负担,特别是在年龄小于2岁的儿童中。目前仍没有安全有效疫苗和特异性的抗病毒药物可供使用。了解病毒感染宿主细胞的机制,可为研发新型抗RSV药物提供靶点。近年来,靶向融合蛋白阻止病毒进入和靶向病毒RNA依赖的RNA聚合酶抑制病毒复制是RSV抑制剂及单克隆抗体研究热点。此外,以宿主因子为靶点研发抗RSV药物受到越来越多的关注。本文就RSV感染的致病机制、药物作用靶点及其代表药物做一概述。     

新生儿Fc受体在人呼吸道合胞病毒粘膜免疫中的研究进展

人呼吸道合胞病毒(human respiratory syncytial virus, HRSV)是引起婴幼儿下呼吸道感染的重要病原体。人体粘膜免疫系统是抵御HRSV入侵的第一道屏障, 表达于粘膜表面上皮细胞的新生儿Fc受体(neonatal Fc receptor, FcRn)是免疫球蛋白和白蛋白的特异性受体, 能够介导IgG转运、维持血清IgG浓度, 调节IgG半衰期, 在粘膜免疫中扮演了重要角色。近年来, 利用FcRn介导IgG跨粘膜转运实现了长效单克隆抗体Nirsevimab预防HRSV的研发, 加速了HRSV防治的研究进展, 并为相关疾病的预防与治疗提供了新靶点。本文综述了FcRn在HRSV粘膜免疫中的研究进展, 为HRSV疫苗和单克隆抗体的研发以及HRSV感染的防控等提供参考。     

2019—2023年河北地区儿童呼吸道合胞病毒流行特征分析

目的了解2019—2023年河北地区儿童呼吸道合胞病毒(RSV)的流行特征。方法收集2019—2023年在河北省儿童医院住院治疗患儿的下呼吸道标本46 576例, 采用多重RT-PCR和毛细电泳法检测13种常见呼吸道病原体, 并对数据进行统计学分析。结果 RSV总体阳性检出率为18.76%(8 739/46 576), 男性患儿和女性患儿RSV总体阳性率分别为18.84%(51 74/27 462)和18.65%(3 565/19 114), 性别比较差异无统计学意义(χ2=0.916, P=0.339);RSV检出率与年龄增长存在线性关系(P<0.01);各年份RSV检出率之间差异有统计学意义(χ2=723.71, P<0.01);2019—2021年的阳性检出率高峰期在12月至次年2月;2019年和2020年5—10月阳性检出率极低;2021年全年阳性检出率均在10%以上, 且5月和8月出现了反季节流行的小高峰;2022年全年阳性检出率较低, 无明显季节变化;2023年阳性检出率高峰出现在4—6月。各年龄组阳性检出率在疫情前、疫情期间和疫情后差异有统计学意义(P<...     

天津单中心呼吸道合胞病毒感染儿童的流行病学特征研究

目的分析天津地区呼吸道合胞病毒(RSV)感染儿童的流行病学特征, 为预防和诊治儿童RSV感染提供参考。方法收集2022年1月至2024年1月于天津市第五中心医院治疗的2 743例急性呼吸道感染患儿的临床资料, 采用多重荧光PCR技术检测患儿咽拭子中肺炎支原体、人鼻病毒、腺病毒、甲型流感病毒、乙型流感病毒、RSV共6种病原体的核酸片段, 对RSV-RNA阳性病例的流行病学和临床资料进行回顾性分析。结果 2 743例患儿的RSV-RNA阳性率为15.09%(414/2 743)。2022年患儿RSV-RNA阳性率为9.29%(73/786), 2023年患儿RSV-RNA阳性率为16.53%(302/1 827), 两年间阳性率的差异有统计学意义(χ2=23.45, P<0.05)。冬春季RSV感染率与夏秋季差异有统计学意义(χ2=19.46, P<0.05), 冬季感染率最高(19.32%, 193/999), 秋季感染率最低(9.43%, 45/477)。各年龄组之间, RSV感染率有显著差异(χ2=71.38, P<0.05), 0～2岁组感染率最高(21.18%,...     

致敬经典：回顾我国儿童中呼吸道合胞病毒感染的早期开拓性研究

呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus, RSV)是世界各地婴幼儿下呼吸道感染最重要的病原。我国儿童中RSV感染的研究始于20世纪70年代初。回顾这段历史, 可以看到科研紧密结合儿科临床需求, 严格按照经典的病毒病原学方法, 得到了翔实可靠的结果, 为我国的RSV研究奠定了基础。     

呼吸道合胞病毒滴度双抗体夹心ELISA检测方法的建立

目的建立双抗体夹心酶联免疫吸附试验(double antibody sandwich enzyme-linked immunosorbent assay, DAS-ELISA)检测呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus, RSV)滴度。方法以RSV融合前F蛋白的两种抗体AM14与D25作为捕获抗体和检测抗体, 通过对其抗体浓度的优化来确定DAS-ELISA较适反应条件, 并对该方法的特异性、重复性、灵敏度及适用性进行验证。结果选择用AM14抗体作为捕获抗体, D25作为检测抗体。捕获抗体AM14较适工作浓度为20 μg/mL, 检测抗体D25的稀释比例为1∶3 000。建立的DAS-ELISA与轮状病毒(rotavirus, RV)和人3型副流感病毒(human parainfluenza virus type 3, HPIV-3)无交叉反应, 且不同稀释倍数的RSV病毒进行批内与批间重复试验的变异系数(coefficient of variation, CV)均<10%;不同亚型的RSV及蛋白进行试验, 均能检测到病毒滴度;检测结果与CCID50...     

基于N-ELISA的呼吸道合胞病毒快速中和抗体检测方法的建立

目的制备针对呼吸道合胞病毒(RSV) N蛋白的兔多克隆抗体, 以其作为检测抗体建立基于ELISA的快速中和抗体检测方法。方法构建pET30a-N质粒, 表达纯化N蛋白, 免疫新西兰兔制备针对RSV N蛋白的多克隆抗体作为检测抗体。阳性血清系列稀释后与100半数组织培养感染剂量(TCID50)/孔的RSV中和, 接种Hep-2细胞培养, 80%丙酮固定细胞, ELISA方法检测感染细胞中病毒的N蛋白, 当每孔的吸光度值低于临界值时, 视为中和试验阳性孔, 阳性孔血清的最高稀释度为该血清的中和抗体滴度。优化抗体稀释度、检测时间、细胞密度及中和时间, 建立基于N-ELISA的中和抗体检测方法, 对建立的实验方法进行细胞代次、边缘孔效应、准确性、重复性以及精密度验证, 初步应用于人RSV IgG阳性血清检测, 分析与微量中和法的相关性。结果成功构建出pET30a-N质粒, 表达纯化的N蛋白纯度较高, 特异性良好;三免后兔血清效价为1∶51 200, 可特异性结合RSV;制备的抗RSV N兔多抗的效价为1∶51 200, 特异性良好, 建立的快速中和抗体检测方法在4 d就可检测, 中和时间可缩短...     

人正常宫颈上皮细胞感染沙眼衣原体的基因表达谱分析

目的分析人正常宫颈上皮细胞(HcerEpic)感染沙眼衣原体(Chlamydia trachomatis, Ct)前后基因表达谱差异。方法 HcerEpic细胞经DEAE-D预处理后加入E型Ct标准株, 培养44 h后收集HcerEpic细胞(感染组), 并以未感染Ct的HcerEpic细胞作为对照组, 提取两组总RNA后反转录并构建cDNA文库。通过高通量测序分析两组基因表达谱差异, 并选择代表性基因通过实时荧光定量PCR(qPCR)验证。结果共检测23 997个基因, 差异基因125个, 其中上调基因119个, 下调基因6个;GO分析显示差异基因富集于对病毒防御反应、Ⅰ型干扰素(interferon, IFN)信号通路、对Ⅰ型IFN的细胞反应等条目;KEGG富集通路为甲型流感、单纯疱疹病毒感染、EB病毒感染、HPV感染、NOD样受体通路等相关通路。结论人正常宫颈上皮细胞感染Ct前后转录组存在差异, 差异基因主要富集于IFN通路, 与细胞抗病毒过程密切相关。qPCR验证了ISG15、IFIT2、OASL、UBE2L6等差异显著且与IFN通路密切相关的基因。     

2018年甘肃省10岁以下儿童流感病毒和呼吸道合胞病毒感染特征

目的 为了解甘肃省2018年10岁以下儿童中门诊流感样(influenza－like illnes,ILI)病例中流感病毒(influenza virus,Flu)、呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus,RSV)的病原学特点及流行特征,为Flu、RSV疾病的诊断治疗及防控提供依据。方法 选取甘肃省19家国家级流感监测哨点医院ILI病例咽拭子标本共8 559份,用实时荧光PCR检测流感病毒,对其中的3 436份,用RT-PCR法对RSV检测。结果 Flu阳性934份,阳性率10.91%,其中甲型H1N1阳性431例、H3N2阳性70例、乙型428例、甲型H1N1和乙型混合5例;RSV阳性320份,阳性率9.31%。14个市州之间Flu、RSV检测阳性率差异存在统计学意义(χ2＝56.99,Р<0.01;χ2＝263.34,Р<0.01)。流感1月份为最高峰,阳性率为50.70%,乙型B/Yamagata系(占53.53%)和甲型H1N1(占39.93%)同时流行。RSV的流行高峰在2～4月,阳性率达13.98%,5岁以下儿童RSV阳性率10....     

2022—2023年承德市呼吸道合胞病毒的暴发流行及其临床特征研究

目的确定呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus, RSV)在承德市的流行情况及临床特征。方法收集2022年8月—2023年6月因呼吸道感染在承德市中心医院儿科住院治疗的患儿咽拭子478份及其临床信息, 实时定量PCR检测A亚型和B亚型RSV的分子流行情况, 对RSV感染患者的临床特征进行分析。结果 67.57%(323/478)的住院患儿为RSV阳性, RSV呈暴发流行且均为RSV-A型, 2022年11—12月和2023年5—6月为RSV-A型的2次感染高峰。RSV-A型阳性患儿中, 86.07%(278/323)为合并其他病原体检出病例, 其中与细菌共检出的例数最多, 以肺炎链球菌为主, 肺炎克雷伯菌次之。流感病毒A型是最常见的共检出病毒。与RSV-A型共检出患儿组相比, RSV-A型单独检出组的乳酸脱氢酶(Z=2.396, P=0.017)较高, 且高于正常高值;RSV-A型共检出组的白细胞计数(Z=2.417, P=0.016)、中性粒细胞比例(Z=3.218, P=0.001)、C-反应蛋白(Z=1.998, P=0.046)和肌酐(Z=2.1...     

呼吸道合胞病毒黏附糖蛋白基因新变异形式的发现及其感染患儿临床特征分析

目的分析北京地区呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus, RSV)流行特征, 监测黏附糖蛋白(G)基因序列变异及感染患儿临床特征。方法收集2023年1月1日—2023年12月31日首都儿科研究所附属儿童医院急性呼吸道感染患儿呼吸道标本, 对经呼吸道病原体多重核酸检测确定为RSV阳性的样本, 进一步通过PCR方法扩增得到RSV G蛋白基因全长, 测序后建立系统发育进化树确定RSV分型及G蛋白序列变异, 通过电子病历系统获得临床资料, 分析北京地区RSV感染患儿临床特征。结果共收集5 489份急性呼吸道感染患儿呼吸道标本, 其中男3 046例, 女2 443例, 平均年龄4.36岁。核酸检测确定为RSV阳性的589例(10.7%, 589/5 489), 其中男349例, 女240例, 平均年龄(2.51±2.78)岁, 中位年龄0.48岁。2023年3月开始RSV呈现持续流行趋势, 存在两个流行高峰, 分别为5月(24.6%, 122/496)和12月(18.2%, 126/693)。2023年7月前以A亚型为优势亚型, 8—10月为两个亚型博弈阶段, 1...     

2018—2019年济南市人鼻病毒和呼吸道合胞病毒及腺病毒感染分析

目的研究2018年4月至2019年3月济南市急性呼吸道感染病例中人鼻病毒、呼吸道合胞病毒及人腺病毒的感染情况及流行病学特点, 并对分离出的人腺病毒做全基因组序列分析。方法采集2018年4月至2019年3月济南市第四人民医院、山东大学齐鲁儿童医院、章丘区人民医院的急性呼吸道感染住院病例患者的鼻/咽拭子样本共计1 969份, 采用实时荧光定量PCR的方法检测样本中呼吸道相关病原体, 包括人鼻病毒、呼吸道合胞病毒及人腺病毒的阳性率, 并对分离出的7株腺病毒阳性标本进行测序, 以确定腺病毒型别, 并构建基因进化树进行分析。结果在收集的1 969份标本中, 3种呼吸道病毒阳性病例共计242例, 阳性检测率为12.30 %(242/1969), 鼻病毒阳性率为3.00%(59/1969)、呼吸道合胞病毒阳性率为6.30 %(124/1969)、腺病毒阳性率为3.86%(76/1969)。不同年龄段间鼻病毒检出率差异无统计学意义(Fisher精确检验值8.376, P=0.720), 不同年龄段间呼吸道合胞病毒、腺病毒检出率差异均有统计学意义(χ2=19.28、12.16;P=0.001、0.016...     

呼吸道合胞病毒

近期我国急性呼吸道疾病持续上升与多种呼吸道病原体感染有关。其中呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus, RSV)感染是导致1岁以下婴幼儿肺内感染住院的第一原因。在RSV流行高发季节, 80%以上婴幼儿的急性下呼吸道感染由RSV感染引起。世界卫生组织数据表明, RSV感染是5岁以下儿童因病毒感染而住院甚至死亡的第一大因素。     

基于网络药理学和动物体内试验验证云实感冒合剂对呼吸道合胞病毒作用

目的基于网络药理学和体内试验探讨云实感冒合剂抗呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus, RSV)的作用机制。方法网络药理学预测:运用TCMSP、GeneCards等数据库预测云实感冒合剂干预RSV的活性成分及作用靶点。利用Cytoscape 3.2.1软件构建中药成分-疾病靶点网络图。通过STRING数据库分析蛋白质相互作用关系。借助Metascape数据库进行富集分析。采用分子对接技术分析验证网络药理学结果。云实感冒合剂干预RSV感染验证试验:滴鼻法建立RSV小鼠模型, 灌胃合剂后检测血常规、肺指数, 观察肺组织病理变化, 流式细胞术检测外周血T细胞亚群, ELISA检测血清TNF-α、IL-6、IL-1β含量, RT-PCR检测肺组织中TLR4、NF-κB和RSV-N基因mRNA相对水平。结果分析获得云实感冒合剂有效活性成分41个, 抗RSV靶点111个, 富集得到167条信号通路, 主要是PI3K/AKT、MAPK、Toll-like等信号通路。分子对接结果显示, 云实感冒合剂活性成分木犀草素、山奈酚、槲皮素与RSV-G、RSV-F、PI3K、AK...     

2019—2020年上海市住院儿童病例发热呼吸道症候群病原谱研究

目的了解上海市儿童住院病例中呼吸道症候群的病原谱及临床特征, 为疾病的预防及临床诊断提供参考。方法利用荧光定量PCR结合熔解曲线的判定方法对634份下呼吸道吸取物标本进行22种病原体检测, 采用卡方检验对不同检出率进行统计分析。结果在634份住院病例标本中, 555份病原体核酸检测阳性, 总阳性率为87.54%, 检出的病原体主要为肺炎支原体(mycoplasma pneumonia, MP)、腺病毒(adenovirus, ADV)、呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus, RSV)、甲型流感病毒(influenza virus A, FluA)及博卡病毒(bocavirus, BoV);多重感染的比率大于单一感染, 多重感染的病原体类型是ADV、RSV、FluA或者BoV伴MP共感染;在年龄分布中, FluA在"<2岁"和"2～5岁"这两个年龄组检出率较高, RSV在"<2岁"年龄组的检出率明显高于其他两个年龄组, 而冠状病毒在"2～5岁"和">5岁"的检出率要高于"<2岁"年龄组;结合临床症状的分析显示, RSV在非发热患者...     

常见的呼吸道病毒受体及抗病毒药物概述

呼吸道病毒是呼吸系统感染的常见病原体, 附着在宿主细胞受体上是其感染的第一步。受体在确定病毒的寄主范围、组织嗜性和发病机制中起着关键作用。本文就常见呼吸道病毒受体、病毒-受体间相互作用及目前的抗病毒药物做一概述, 为明确病毒感染机制和防控病毒感染提供参考。     

2015—2021年徐州市呼吸道合胞病毒感染与气象因素的关联分析与预测

目的分析呼吸道合胞病毒感染与气象因素的关联, 预测并解释其变化趋势。方法收集2015—2021年徐州市住院儿童的严重急性呼吸道感染病例。通过实时荧光聚合酶链式反应检测呼吸道合胞病毒(RSV), 使用SPSS 26.0软件对结果进行统计分析。使用2015—2019年数据构建负二项回归模型, 探究对RSV感染有影响的气象因素。使用多变量时间序列模型预测2020—2021年RSV检出率。结果 2015—2021年共收集1 663例严重急性呼吸道感染患儿样本, 其中RSV检出阳性样本218例(13.1%)。RSV季节效应明显, 以1年为周期出现冬季(12月至次年2月)为高峰, 夏季(6—8月)为低谷。负二项回归分析表明, 月平均气温、月平均相对湿度和月总日照时数可能是本地区RSV感染的影响因素。以日照时数为协变量的时间序列模型预测结果表明, 2020年预测效果较好, 实际值与预测值接近。2021年的预测变化趋势一致, 但实际值高于预测值。结论月平均气温降低、月平均相对湿度升高或月总日照时数延长可能是本地区儿童中RSV感染增加的影响因素。可以使用2015—2019年数据建立预测模型, 其中202...     

基因生殖腺嵌合变异的分析

目的 对1例亲代表型正常但反复妊娠骨骼发育异常胎儿(可疑成骨不全)的家系进行遗传学分析,探讨胎儿的发病原因。方法 对胎儿标本及亲代DNA进行全外显子组测序(whole exome sequencing, WES),针对WES检测到的阳性位点进行Sanger测序验证。采集提取丈夫精液与单精子DNA,对致病位点进行PCR扩增并Sanger测序。结果 WES检测到胎儿COL1A2基因c.1378G>A(p.G460S)杂合变异,为致病变异,夫妻双方外周血DNA均未检测到该变异。精液DNA检测到该位点野生型与变异型序列,在15个精子中有4个检测到该位点变异。结论 为1例骨骼发育异常的胎儿明确了成骨不全的遗传学诊断。亲代的生殖腺嵌合是该家系反复妊娠骨骼发育异常胎儿的原因。在临床遗传咨询过程中,对于表型和和基因型均正常但反复生育或妊娠相同异常表型后代的案例,需要考虑到生殖腺嵌合的可能原因。     

柯萨奇病毒B组疫苗的研究进展

柯萨奇病毒B组(coxsackievirus group B, CVB)属于人肠道病毒, 包括6种血清型。人体感染CVB后通常症状轻微, 但严重时可以引起心肌炎、胰腺炎、手足口病以及中枢神经系统疾病等, 对婴幼儿危害性极大。CVB在国内外多地均有暴发流行, 不同血清型的流行模式各异, 情况复杂。目前仍缺乏有效治疗和预防CVB的药物与手段。疫苗有望成为解决CVB相关公共卫生问题的一种经济有效的方法, 虽然尚没有CVB疫苗上市, 但是已有多家机构正在进行各种类型CVB疫苗的临床前研究, 包括核酸疫苗、病毒载体疫苗、重组蛋白疫苗、减毒活疫苗和灭活疫苗等。本文对CVB疫苗相关研究进展进行了综述。