液相色谱串联质谱法测定血清维生素A、E含量

目的 建立液相色谱串联质谱法(LC-MS/MS法)测定血清维生素A和维生素E含量的方法.方法 采用硫酸锌沉淀蛋白,96孔蛋白沉淀板过滤.采用LCMS/MS[正离子电喷雾离子化(ESI+)的多反应监测模式(MRM)]氘代同位素内标法检测血清维生素A、E含量并进行相关方法学验证.结果 LC-MS/MS检测血清维生素A的批内精密度变异系数为3.2％(2.4％～3.9％),批间变异为5.5％(5.O％～6.0％);维生素E的批内精密度变异系数为4.1％(3.0％～5.1％),批间变异为8.0％(7.6％～8.3％).维生素A在0.06 ～2 μg/mL、维生素E在1.2 ～ 40μg/mL范围内线性良好,线性相关系数分别为0.9987、0.9909.维生素A、维生素E的定量限分别为0.03μg/mL、0.8μg/mL;检测限分别为0.02μg/mL and 0.01 μg/mL.维生素A低浓度回收率为107.5％,高浓度为106.9％;维生素E的低浓度回收率为91.9％,高浓度为88.4％.与液相色谱方法进行比对,两种方法的结果差异无统计学意义(P值均大于0.30)说明两种方法具有一致性.结论 LC-MS/MS检测血清维生素A及维生素E的灵敏度高,结果准确、稳定,可应用于临床分析.     

浅谈高效液相色谱法同时测定钙镁D片中维生素D2和维生素D3的含量

目的用高效液相色谱法同时测定钙镁D片中维生素D2和维生素D3的含量。方法采用Kromasil C18反相色谱分离柱,流动相为甲醇-乙腈（90：10）,检测波长为270nm,流速为0.75ml/min,并且加入维生素A和维生素E进行干扰试验。结果维生素D2、D3在0.8～98mg/L浓度范围内线性关系良好,维生素A和维生素E不干扰测定。结论本方法对于测定片剂中的维生素D2和维生素D3具有简单,易于操作,分离效果好,结果准确的优点,适宜推广使用。     

不同妊娠期血清维生素A和维生素E水平及相关性分析

目的分析不同妊娠期血清维生素A、E含量以及不同妊娠期维生素A、E缺乏或者过量等主要异常表现及其相关性。方法采集整理2015年10月到2017年10月在北京航天总医院进行常规围产保健的妊娠女性1421例,利用高效液相色谱法检测不同妊娠期血清维生素A、E的质量浓度,并定量分析其水平、异常率以及相关性等统计信息。结果妊娠早、中、晚期血清维生素A、E含量的频率分布均表现为近似正态分布;妊娠早、中、晚期血清维生素A、E含量分别为(0.45±0.09)mg/L、(0.45±0.10)mg/L、(0.40±0.09)mg/L,及(10.95±2.50)mg/L、(14.94±3.12)mg/L、(16.82±3.71)mg/L;经方差分析F值分别为122.3和1288,P值均小于0.05;妊娠早、中、晚期血清维生素A、E含量的缺乏比率分别为2.96%、3.66%、11.96%,以及0.07%、0.00%、0.00%,过量比率分别为1.06%、1.55%、0.42%,以及0.63%、6.33%、18.30%;妊娠中期和晚期血清维生素A、E含量的Pearson相关系数达到最大,其值分别为0.68、0.70,P值均小于0.05。结论妊娠期血清维生素A异常主要表现为晚期缺乏,维生素E异常主要表现为晚期过量,妊娠中期和晚期维生素A、E含量的相关性更强,应当根据女性不同妊娠期维生素A、E的异常表现,分别采取针对性干预。     

浅谈高效液相色谱法同时测定钙镁D片中维生素D2和维生素D3的含量

目的 用高效液相色谱法同时测定钙镁D片中维生素D2和维生素D3的含量.方法 采用Kromsil C18反相色谱分离柱,流动相为甲醇-乙腈(90∶10),检测波长为270nm,流速为0.75ml/min,并且加入维生素A和维生素E进行干扰试验.结果 维生素D2、D3在0.8～98mg/L浓度范围内线性关系良好,维生素A和维生素E不干扰测定.结论 本方法对于测定片剂中的维生素D2和维生素D3具有简单,易于操作,分离效果好,结果准确的优点,适宜推广使用.     

HPLC法测定注射用泮托拉唑钠中EDTA-2Na的含量

目的 建立高效液相色谱（HPLC）法测定注射用泮托拉唑钠中EDTA-2Na的含量。方法 选择固定相为十八烷基硅烷键合硅胶（直径为5 μm）,尺寸为250 mm×4.6 mm色谱柱,以乙腈-磷酸盐缓冲液（15∶85,v/v,用磷酸调节pH至2.5±0.1）为流动相,流速为1.0 ml/min,检测波长为255 nm,柱温为35 ℃。结果 EDTA-2Na浓度在2.0~32.0 μg/ml范围内线性方程为A=2.317×104C-1.235×103（r=0.9998）,EDTA-2Na的平均回收率为100.40%,RSD 为0.92%（n=9）。结论 本方法简便、可靠、准确度高、重复性好,可用于测定注射用泮托拉唑钠中EDTA-2Na的含量。     

联合应用MCV、MCH、HPLC方法筛查HbE 60例

目的联合应用MCV、MCH、高效液相色谱（HPLC）方法筛查血红蛋白E（HbE）。方法收集EDTA2K2抗凝血,先行血常规检测平均红细胞体积（MCV）和平均红细胞血红蛋白含量（MCH）初筛,再行HPLC检测HbE,如HPLC结果提示为HbE,进一步行PCR-RBD检测。结果 60例HbE的初筛结果为HBG 122.18±18.37g/L,MCV 76.76±4.19 fl,MCH 25.01±1.72pg;HPLC筛查结果为：HbA2/E洗脱峰含量为26.35±3.16%,滞留时间为3.69±0.03min;基因确诊结果为αα/αα,HbE 52例,合并α地贫8例,HPLC结果与基因诊断结果符合率为100%。结论联合应用MCV、MCH、HPLC法是筛选HbE的有效方法。     

腹泻病儿血中维生素A,锌,铜含量变化的研究

1990年6月至10月在新乡市医院选择新入院6月至5岁腹泻病儿80例和在门诊选择同年龄健康儿童21例,静脉取血测定其血中维生素A、锌、铜的含量及免疫球蛋白的含量。研究结果表明腹泻病儿血中维生素A(26.4±14.6μg/dl)明显低于健康儿童(54.9±17.0μg/dl)。有统计学上显著性差异(P<0.01),血清锌含量和铜/锌比值腹泻病儿为95.0±46.0μg/dl和1.51±0.44,健康儿童为127.4±34.3μg/dl和1.02±0.40,均有显著性差异(P<0.01),血清铜含量两组儿童无差异。免疫球蛋白IgA和IgG两组儿童无差异,而IgM的含量腹泻病儿明显高于健康儿童,有显著性差异。本文研究结果说明维生素A的不足或缺乏会增加腹泻病发生的危险性,若改善儿童的维生素A的营养状况可能会减少腹泻病发生的机会。     

HPLC法同时测定对乙酰氨基酚、咖啡因、盐酸麻黄碱和维生素C的含量

目的：建立同一色谱条件下对乙酰氨基酚、咖啡因、盐酸麻黄碱和维生素C含量的HPLC测定法。方法：采用高效液相色谱法,以Capcell-pak C18为色谱柱,流动相为乙晴/庚烷磺酸钠溶液缓冲液（30/70）,检测波长为210nm,流速1.0ml.min-1,采用外标法计算含量。结果：对乙酰氨基酚、咖啡因、盐酸麻黄碱和维生素C的分离度好,乙酰氨基酚在15mg.100ml-1～120mg.100ml-1范围内线性关系良好（r=0.9999）;咖啡因在6.25mg.100ml-1～50mg.100ml-1范围内线性关系良好（r=0.9994）;盐酸麻黄碱在6.25mg.100ml-1～50mg.100ml-1范围内线性关系良好（r=0.9998）;维生素C在40mg.100ml-1～320mg.100ml-1范围内线性关系良好（r=0.9994）。实验的精确度和稳定性良好,样品回收率高。结论：本方法操作简单,结果准确,可以有效地控制该类制剂的质量。     

湛江市区学龄前儿童25-羟维生素D水平研究

目的 调查湛江地区学龄前（0~6岁）健康儿童25-羟维生素D[25（OH）D]水平,了解该人群中维生素D的健康状态。方法选取2017年6月1日~2018年5月31日在我检验中心进行体检的0~6岁儿童共3164例,测定25（OH）D水平,比较不同性别、不同季节的25（OH）D水平。结果 湛江市儿童血清25（OH）D总体水平为（42.75±12.20）ng/ml,男童为（42.27±11.88）ng/ml、女童为（42.93±12.58）ng/ml,不同性别儿童的25（OH）D水平差异无统计学意义（P＞0.05）。25（OH）D缺乏和不足的比例随着儿童年龄的增加而增多;秋季25（OH）D水平较其他季节略低。结论 湛江市区0~6岁儿童中缺乏和不足率均随年龄的成长而增高,应积极采取有效措施监督和提高儿童维生素D水平,以减少维生素D相关疾病的发生,提高健康水平。     

扶正解毒口服液质量控制方法研究

目的 建立扶正解毒口服液的质量控制方法。方法 采用TLC法对扶正解毒口服液中的板蓝根、黄芪和淫羊藿进行鉴别;采用HPLC法测定（R,S）-告依春的含量。结果 在薄层色谱鉴别中均能检出板蓝根、黄芪和淫羊藿的特征性斑点;以（R,S）-告依春对照品浓度为横坐标,峰面积为纵坐标,以峰面积（Y,μv）对浓度（X,μg/ml）进行线性回归,绘制标准曲线,其回归方程为:Y=45784.94X－17640.25,相关系数r=0.99997,试验结果表明:（R,S）-告依春浓度在4.63~123.38 μg/ml,呈良好的线性关系。标准中建立的（R,S）-告依春的含量测定方法耐受性良好、灵敏度高、重现性好、专属性强,可以有效控制产品的质量。结论本方法能准确、可靠的对扶正解毒口服液中（R,S）-告依春含量进行测定,可作为该制剂的质量控制方法。     

郑州地区1180例儿童维生素A、D、E水平研究

目的 了解郑州地区儿童维生素的水平,为临床诊治提供参考.方法 以2016年3月至12月期间在郑州大学第三附属医院儿科门诊健康体检的儿童为研究对象,测量血清25羟维生素D[25(OH)D]、维生素A、E的水平.结果 1180名儿童中,男童755例,女童425例,维生素A平均水平0.22±0.07 mg/L,总体缺乏率为45.34％;维生素D平均水平为64.25±19.65 nmol/L,总体缺乏率为30.51％;维生素E平均水平为4.95±1.64 mg/L,总体缺乏率为51.10％.男童和女童血清维生素E水平差异具有统计学意义(P＜0.05);郑州市城乡儿童三种血清维生素水平差异均具有统计学意义(P＜0.05).结论 儿童维生素的水平缺乏情况,应引起我们的重视,尤其是维生素E,城乡儿童仍然需要进行及时的维生素补充,以预防儿童维生素缺乏症及其并发症的发生.     

工作场所空气中锶及其化合物的火焰原子吸收法测定的实验研究

目的 验证2018年5月1日开始实施的工作场所空气中锶及其化合物测定的标准方法在笔者所在检测机构的适宜性。方法 采用火焰原子吸收法测定相关指标,测定锶标准曲线。对模拟样做加标实验、精密度试验、检出限测定。结果 锶标准曲线相关系数r=0.9994,回收率97.00%~99.70%,精密度RSD%0.14%~0.84%,方法检出限为0.077 μg/ml。结论 笔者所在检测机构实验条件和测试结果都能满足国家标准的要求,该检验可由本机构严格按照国家标准开展锶及其化合物的检测工作。     

维生素D水平与成人哮喘及非哮喘的相关性研究

目的 评估哮喘及非哮喘者的血清维生素D水平及其与肺功能、嗜酸性粒细胞计数的相关性。方法 选取我院2015年9月1日~2016年1月20日收治的85例哮喘患者以及73例健康体检者作为研究对象。根据皮肤过敏试验结果将哮喘患者分为过敏哮喘组56例和非过敏性哮喘组29例,对比两亚组间维生素D水平的差异性;采外周血测量嗜酸性粒细胞计数,用肺功能仪测量肺功能,包括肺活量（FVC）、第1秒最大呼气量（FEV1）、第1秒最大呼气率（FEV1/FVC）,分析过敏哮喘组和非过敏性哮喘组维生素D水平与肺功能、嗜酸性粒细胞计数的相关性。结果 哮喘患者的维生素D水平为（14.36±0.57）ng/ml,低于健康体检组的（22.13±0.84）ng/ml,统计学意义显著（P＜0.01）。过敏哮喘组和非过敏哮喘组的维生素D水平比较,差异无统计学意义（P＞0.05）。低水平维生素D患哮喘的风险增加1.2倍（优势比:1.194,95%可信区间:1.194~1.286,P＜0.01）。维生素D水平与肺功能和嗜酸性粒细胞计数水平无显著相关性。结论 哮喘患者的维生素D水平低于正常人群,维生素D的缺乏与哮喘的发生密切相关;维生素D水平与肺功能、嗜酸性粒细胞计数没有相关性。     

慢性乙型肝炎患者血清HBV-DNA病毒载量与血清肝纤维化指标变化

目的：探讨慢性乙型肝炎患者血清HBV-DNA病毒载量与血清肝纤维化指标变化的关系。方法：以慢性乙型病毒性肝炎患者20例为对象,分为应用抗病毒药有效抑制组10例与未进行抗病毒药治疗组10例,跟踪调查治疗情况5年（2002～2007年）,用荧光定量聚合酶链反应（FQ-PCR）检测HBV-DNA病毒载量,采用放射免疫分析对20例慢性乙肝患者检查血清肝纤维化指标透明质酸（HA）、层黏蛋白（LN）、Ⅳ型胶原（Ⅳ-C）、Ⅲ型前胶原（PCⅢ）水平。结果：5年来,抗病毒药有效抑制组10例患者平均HBV-DNA病毒载量对数水平3.56±1.12,未进行抗病毒药治疗组10例平均HBV-DNA病毒载量对数水平7.76±1.23,有显著差异（P〈0.05）。2002年抗病毒药有效抑制组血清肝纤维化指标分别为HA（82.72±30.62）μg/ml、LN（71.18±26.71）μg/ml、Ⅳ-C（93.77±69.87）μg/ml、PCⅢ（91.4±18.64）μg/ml,2002年未进行抗病毒药治疗组血清肝纤维化指标分别为HA（79.32±31.34）μg/ml、LN（70.25±28.23）μg/ml、Ⅳ-C（90.35±67.81）μg/ml、PCⅢ（85.77±20.56）μg/ml,两组间各项指标统计学无显著差异（P〉0.05）。2007年抗病毒药有效抑制组血清肝纤维化指标分别为HA（85.72±29.52）μg/ml、LN（70.18±25.4）μg/ml、Ⅳ-C（94.2±70.92）μg/ml、PCⅢ（93.4±19.32）μg/ml,2007年未进行抗病毒药治疗组血清肝纤维化指标分别为HA（105.67±28.54）μg/ml、LN（97.75±26.25）μg/ml、Ⅳ-C（132±72.13）μg/ml、PCⅢ（120.72±19.87）μg/ml,两组间各项指标比较均有显著差异（P〈0.05）。结论：有效控制慢性乙肝患者HBV-DNA病毒载量可能是控制患者肝纤维化进展的重要因素。     

HPLC法测定米铂白蛋白结合型纳米制剂中米铂的含量

目的 建立米铂白蛋白结合型纳米制剂中米铂含量测定的高效液相色谱(HPLC)法.方法 采用HPLC测定米铂白蛋白结合型纳米制剂中米铂的含量.色谱条件:辛烷基硅烷键合硅胶色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),甲醇-乙腈-水(91:1:8)洗脱,流速1.0 ml/min,检测波长210 nm,柱温30℃,进样量20μ...     

孕妇血清维生素A、维生素E、25-羟基维生素D与 子痫前期的相关性研究

目的 探讨孕妇血清维生素A、维生素E、25-羟基维生素D水平与子痫前期的相关性。方法 选择2016年3月~2017年10月在我院产检的单胎孕妇为研究对象,其中子痫前期组72例,健康对照组30例。分析血清维生素A、维生素E、25-羟基维生素D水平与子痫前期的相关性及其诊断价值。结果 在孕10~14周时,两组孕妇孕血清维生素A、维生素E 、25-羟基维生素D水平比较,差异无统计学意义（P＞0.05）;孕24~28周时,子痫前期组血清维生素A、维生素E 、25-羟基维生素D水平低于对照组水平（P＜0.05）;多因素Logistic回归分析结果显示,孕24~28周血清维生素A、维生素E、25-羟基维生素D水平与子痫前期发病具有显著的相关性;回归模型显示,血清维生素A诊断子痫前期的AUC为0.976,95%CI为0.931~1.000,当界值为0.46时,预测子痫前期发病的灵敏度为95.70%,特异度为72.50%;维生素E诊断子痫前期的AUC为0.820,95%CI为0.725~0.914,当界值为0.28时,预测子痫前期发病的灵敏度为76.70%,特异度为77.80%;25-羟基维生素D诊断子痫前期的AUC为0.789,95%CI为0.681~0.898,当界值为0.33时,预测子痫前期发病的灵敏度为73.30%,特异度为81.90%;血清维生素A+维生素E+25-羟基维生素D诊断子痫前期的AUC为0.988,95%CI为0.966~1.000。当界值为0.55时,预测子痫前期发病的灵敏度为96.70%,特异度为95.80%。结论 在孕10~14周时,血清维生素A、维生素E、25-羟基维生素D水平下降与子痫前期发病无关;在孕24~28周时,血清维生素A、维生素E、25-羟基维生素D水平下降与子痫前期发病显著相关,孕晚期血清维生素A、维生素E、25-羟基维生素D可作为子痫前期的关键指标。     

常住北京市城区少儿血清维生素A和25-羟基维生素D水平分析

目的:检测北京市城区少儿冬季血清维生素A(VA)和25-羟基维生素D(25-OH VD)水平,分析营养状况。方法:2012年12月至2013年2月本院儿童保健门诊体检的0-14岁少儿292例,按年龄分为0-1岁、2-3岁、4-6岁和7-14岁四组,完成问卷调查和体格检查后,采用高效液相色谱法测定每例少儿血清VA水平,采用高效液相质谱串联法测定每例少儿血清25-OH VD水平,分析各年龄组VA、25-OH VD水平差异及每组低水平VA、25-OH VD检出率。结果:(1)292例少儿血清VA平均水平为(1.09±0.29)μmol/L,不同年龄组VA水平有显著性差异(F=10.96,P0.01),以0-1岁组最低(0.9±0.31)μmol/L;所有受检少儿低水平VA检出率为43.84%(128/292),不同年龄组低水平VA检出率有显著性差异(χ2=34.74,P0.01),0-1岁组检出率最高(76.32%)。(2)292例少儿血清25-OH VD平均水平(22.12±8.51)ng/ml,不同年龄组水平有显著性差异(F=7.56,P0.01),7-14岁组最低(18.34±6.34)ng/ml;所有受检者中低水平25-OH VD检出率为80.17%(233/292),不同年龄组低水平25-OH VD检出率有显著性差异(χ2=13.79,P0.05),4-6岁组最高(87.05%)。结论:冬季,常住北京市城区0-1岁幼儿的VA最低,7-14岁的25-OH VD最低,值得关注。     

高效液相色谱法测定聚乳酸中乳酸单体残留量

目的通过高效液相色谱法(high performance liquid chromatography,HPLC)测定聚乳酸材料中乳酸单体的残留量,完善此类材料的质量评价方法。方法用三氯甲烷溶解聚乳酸材料样品后,加入等体积磷酸二氢钾水溶液(20 mmol/L,pH=2.87)涡旋振荡,静置分层后取上清液,采用C18 Synergi4u Hydro-RP 80A色谱柱,进样20μL,以流速0.6 m L/min,磷酸二氢钾水溶液为流动相,柱温30℃,紫外检测波长210 nm,外标法定量并进行方法学研究,包括液相色谱系统适应性、线性范围、检出限、定量限、回收率。结果本方法中理论塔板数为10660,拖尾因子为1.32,分离度为3.81,重复性相对标准偏差为0.54%(n=5),乳酸在浓度1.05~105μg/m L范围内与峰面积保持良好的线性关系(r=0.999979),检出限为0.42μg/m L,定量限为1.05μg/m L,萃取平均回收率为94.76%(n=6),其相对标准偏差为3.04%。聚乳酸样品中乳酸单体平均残留量为144.17μg/g。结论高效液相色谱法测定聚乳酸中乳酸单体残留量具有良好的线性范围,准确度高,重复性好,萃取回收率较高且操作简单,可用于聚乳酸材料中乳酸单体残留量测定。     

基于高效液相色谱法的聚乳酸-羟基乙酸共聚物体外降解产物的测定

目的建立准确、不受基质干扰的测定聚乳酸-羟基乙酸共聚物[poly(lactic-co-glycolic acid),PLGA]降解液中降解产物乙醇酸和乳酸的分析方法并进行方法验证,为PLGA类产品的降解液的质量分析提供重要的技术参考。方法通过优化色谱柱、色谱条件和不同p H值的乳酸和乙醇酸标准溶液的色谱峰面积的比较等方法,确定色谱条件和样品降解液预处理方法,用Waters 1525高效液相色谱仪进行检测,紫外检测器检测波长210 nm,外标法定量。结果亲水性C18柱,20 mmol/L的KH2PO4水溶液为流动相(p H=2.8)和0.6 m L/min的流速等色谱条件可使降解液中的乙醇酸和乳酸得到良好的分离;同时,样品降解液的p H值宜调节至2.8~3.5范围内以对降解液中的乙醇酸和乳酸进行准确定量。此外,方法学验证结果显示,降解液中乙醇酸的线性范围为2.500~250.0μg/m L(r=0.9999),定量限为0.48μg/m L,加标回收率为99.4%~102.6%;降解液中乳酸的线性范围为2.642~264.2μg/m L(r=0.9999),定量限为1.0μg/m L,加标回收率为97.9%~103.2%。结论该方法简便、准确,实验成本较低,且不受磷酸盐缓冲液p H值的影响,稳定性好,可用于聚乳酸-羟基乙酸共聚物材料体外降解的降解产物的含量分析。