UPLC-MS/MS法测定大鼠血浆中雷公藤内酯醇及其药代动力学

目的建立大鼠血浆中雷公藤内酯醇的超高效液相色谱质谱联用(ultra performance liquid chromatography-mass spectrometer/mass spectrometer,UPLC-MS/MS)法测定大鼠灌胃给药与静脉注射给药后的血浆药物浓度,并进行药代动力学参数评价。方法 Sprague Dawley大鼠分别经灌胃与尾静脉注射给药,经颈静脉取血,测定不同时间的大鼠血浆药物浓度,并计算其主要药代动力学参数。结果在0.1~200.0 ng/m L质量浓度范围内,血浆雷公藤内酯醇线性关系良好,血浆中雷公藤内酯醇的定量限为0.1 ng/m L,该药稳定性良好,回收率均在95%以上,日内与日间差异均小于15%。口服与静脉给药后,雷公藤内酯醇在大鼠体内的消除均较快,口服生物利用度为9.5%。结论本实验操作简便、稳定可靠、检测限低、效率高、重现性好,可以可靠地用于雷公藤内酯醇血药浓度测定及其药代动力学研究,本研究结果为雷公藤内酯醇的结构优化、剂型改进以及临床应用提供了实验依据。     

LC-MS/MS法测定大鼠血浆中芹黄春浓度及其在药代动力学研究中的应用

目的：研究大鼠分别灌胃和静脉给药芹黄春（芹菜素-7-O-β-D吡喃葡萄糖苷）溶液后,血浆中的芹黄春药物浓度及其药代动力学性质。方法6只雌性Sprague Dawley大鼠随机分为两组,每组3只,分别经灌胃(10 mg/kg)和静脉注射(2 mg/kg)给予芹黄春溶液后,按设计的时间点从大鼠眼内眦静脉丛采集血液样品,置于肝素化的离心管中,低温离心得血浆。采用甲醇沉淀法处理血浆生物样品,利用LC-MS/MS方法对血浆生物样品进行分析。药代动力学参数由Kinetica 2000软件进行计算。结果芹黄春浓度在1~2000 ng/mL范围内线性关系良好(r=0.9974),定量下限为1 ng/mL,低(8 ng/mL)、中(100 ng/mL)、高(1200 ng/mL)3个浓度的提取回收率均大于90%,日内日间精密度和稳定性的RSD均小于12.8%,日内日间准确度在91.5%~107%,方法学考察均符合要求。大鼠经静脉注射和灌胃芹黄春后,Cmax分别为(2363±96) ng/mL和(13.3±5.8) ng/mL,AUC0~∞分别为(796±201) h· ng/mL和(28.9±9.2) h· ng/mL,大鼠经静脉注射和后t1/2为(1.20±0.17) h,芹黄春的口服生物利用度约为0.6%。结论所建立的LC-MS/MS分析方法方便、快速,灵敏度高,准确度好,可用于大鼠血浆芹黄春浓度测定及其药代动力学的研究。     

HPLC-MS/MS测定大鼠血浆中人参皂苷Rg3的浓度

目的 建立高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS)法测定大鼠血浆中人参皂苷Rg3的浓度,用于大鼠体内人参皂苷Rg3的药代动力学研究.方法 血浆样品经乙酸乙酯液-液提取.色谱柱为Inertsil ODS-3(2.1 mm×50 mm,5μm),流动相:乙腈:10 mmol/L乙酸铵水溶液(含0.1％甲酸,90:10);流速:0.4 mL/min;ESI离子源,负离子模式监测.6只大鼠灌胃给予人参皂苷Rg3 20 mg/kg后按预定时间点眼眶采血.采用DAS 3.3.1软件统计其药代动力学参数.结果 血浆中人参皂苷Rg3的线性范围为2 ～ 400 ng/mL,日内、日间精密度及基质效应RSD均小于15％,主要的药代动力学参数:AUC0-t为(821.659±170.125)ng·h/mL,AUC0-∞为(912.468±190.653)ng·h/mL,Cmax为(138.803±28.997) ng/mL,t1/2为(2.803±0.263)h.结论 建立的方法快速、灵敏、准确.适用于大鼠血浆中人参皂苷Rg3浓度的测定.     

大鼠血浆中藏红花素的HPLC法测定及其药代动力学研究

目的建立大鼠血浆中藏红花素的RP-HPLC测定法,研究藏红花素的药代动力学特征。方法血样经乙腈预处理后,进行HPLC分析,色谱柱为Lichrospher C18(5 m,250 mm×4.6 mm),流动相为乙腈-甲醇-0.5%乙酸溶液(15:20:50,v/v)。10只健康大鼠肌肉注射藏红花素水溶液,计算主要药动学参数。结果在1.08~10.80μg/ml范围内藏红花素浓度与峰面积线性关系良好(r=0.9996),定量限为1.08μg/ml,日内精密度为1.86%~12.98%、日间精密度均小于为2.08%~9.75%,回收率为85.4%~91.7%。龙胆苦苷在家兔的主要药代动力学参数tmax、Cmax、t1/2和AUC分别为87.0 min、3.74μg/ml、140.4 min和768μg.min/ml。结论所建分析方法灵敏、准确、简便,适合于藏红花素的药代动力学研究。     

人血浆中瑞格列奈HPLC法测定及其药代动力学研究

目的建立了人血浆中瑞格列奈浓度的HPLC测定方法,研究瑞格列奈在人体中药物动力学行为。方法血浆样品经酸化后,用醋酸乙酯提取,色谱柱为C18Shim-packCLC-ODS,流动相为0.10mol/L柠檬酸-醋酸钠缓冲液（pH4.0）-甲醇(27∶73)(v/v)。紫外检测波长243nm。测定了22名受试者单剂量口服瑞格列奈4mg后血药浓度-时间过程。结果最低检测浓度2.5ng/ml,回收率大于90%,日间和日内的变异系数小于15%,线性范围为2.5～100.0ng/ml,符合生物样品分析的要求。受试者口服瑞格列奈片4mg后,估算的末端相半衰期0.83±0.31h,峰时间0.75±0.41h,峰浓度53.32±24.94ng/ml,MRT1.58±0.41h,AUC4074.95±30.57ng     

HPLC-MS/MS法测定人血浆中普罗布考浓度

目的建立高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS)技术测定人血浆中普罗布考浓度的方法。方法血浆经乙酸乙酯∶二氯甲烷(1∶1,V/V)提取后,采用HPLC-MS/MS测定。以ultimate CN(50mm×4.6mm,5μm)为色谱柱,乙腈∶水∶氨水=97∶3∶0.05(甲酸调pH=7.20)为流动相进行分离。质谱采用负离子模式检测,以大黄素甲醚为内标,检测离子515.5→236.1(普罗布考)和283.0→239.9(内标)。结果普罗布考在2.5～6000ng/mL范围内线性关系良好,最低定量限为2.5ng/mL,方法回收率在93.02%～104.12%之间,日内、日间精密度分别小于4.67%及5.72%。结论本研究所建立的方法准确、灵敏,可用于普罗布考血药浓度测定及药代动力学研究。     

HPLC-MS/MS法测定大鼠血浆中麻黄碱、伪麻黄碱浓度及药动学研究

[目的]建立同时检测大鼠血浆中麻黄碱、伪麻黄碱的高效液相色谱-质谱联用法(HPLC-MS/MS),并对大鼠口服三拗汤后的麻黄碱、伪麻黄碱进行药代动力学研究。[方法]血浆样品经碱化和乙酸乙酯液-液萃取,以盐酸苯丙醇胺为内标,乙腈-0.1%甲酸水(4∶96)为流动相,经Agilent Zorbax SB-C18柱(4.6 mm×150 mm,5μm)分离,采用电喷雾离子源(ESI),以多反应监测(MRM)模式进行正离子检测,定量分析的离子反应分别为:m/z 166.2→m/z 148.2(麻黄碱),m/z 166.2→m/z 148.2(伪麻黄碱)和m/z 152.1→m/z 134.1(盐酸苯丙醇胺)。[结果]麻黄碱和伪麻黄碱血药浓度在20~10 000μg/L范围内线性关系良好,批内、批间精密度RSD均小于5.3%,高、中、低3种浓度平均方法回收率大于64.7%。[结论]该方法专属、快速、灵敏,可用于麻黄碱、伪麻黄碱的药代动力学研究。     

HPLC-MS/MS法研究苯磺酸氨氯地平在健康志愿者体内药代动力学及生物等效性

采用高效液相色谱-质谱/质谱(HDLC-MS/MS)法研究苯磺酸氨氯地平片在健康人体内的药代动力学及生物等效性。     

LC-MS/MS法同时测定人血浆中盐酸二甲双胍和罗格列酮浓度及其药代动力学

目的:建立LC-MS/MS同时测定人血浆中盐酸二甲双胍及罗格列酮浓度的方法,测定志愿者单次和多次顿服二甲双胍罗格列酮胶囊后盐酸二甲双胍和罗格列酮的血药浓度,估算其药代动力学参数。方法:血浆中加入盐酸苯乙双胍为内标,经乙腈沉淀蛋白,取上清直接进行LC-MS/MS测定。色谱柱为Phenomenex Luna CN 100A(150 mm×2.0 mm ID),流动相为CH3OH-30 mmol/L NH4Ac,pH 5.0(80∶20),流速为0.2 mL/min;ESI-MS/MS选择性反应正离子检测。临床试验方案采用拉丁方试验设计。结果:盐酸二甲双胍和罗格列酮的血浆线性范围分别为5~3 000 ng/mL和1.5~500 ng/mL,检测限均为1ng/mL。测定了12名志愿者单次和多次顿服二甲双胍罗格列酮胶囊后的血药浓度经时过程。结论:本方法操作简单,专属性强,灵敏度高,准确性好。盐酸二甲双胍和罗格列酮体内动力学行为符合线性药物动力学特征。     

LC/MS法测定兔血浆中妥洛特罗浓度及其药代动力学

目的:建立兔血浆中妥洛特罗的LC MS定量方法,比较受试制剂和参比制剂中妥洛特罗主要药代动力学参数。方法:血浆中加入内标盐酸克伦特罗,碱化后经正己烷∶异丙醇(95∶5 )混合溶剂提取,进行LC MS测定。色谱柱为LichrospherCN(5 μm ,15 0mm×2 .0mm) ,流动相为甲醇- 0 0 .1mol/L醋酸铵溶液(70∶30 ) ,流速为0 2mL/min ;ESI选择性正离子检测。试验方案采用随机平行试验设计。结果:妥洛特罗血浆线性范围为0 . 5～4 0ng/mL ,检测限为0 .1ng/mL。测得受试贴剂与参比贴剂的主要药代动力学参数无显著性差异,受试贴剂的相对生物利用度为114 . 78%。结论:本方法专属性强,灵敏度高,准确性好。     

克拉霉素血药浓度HPLC-MS测定方法的改进及药代动力学研究

目的：建立快速、灵敏的高效液相色谱-质谱联用方法,测定克拉霉素片在健康人体血浆中药物浓度及其在相对生物利用度及药代动力学的应用 方法： 18名健康受试者自身交叉单剂量口服克拉霉素片受试制剂和参比制剂各500mg后,采用高效液相-色谱法测定用药后不同时间血药浓度,计算其主要药代动力学参数及相对生物利用度。结果：两制剂的血药浓度-时间曲线基本一致,符合二房室模型,受试制剂和参比制剂的药代动力学参数: t1 /2分别为(4.31±3.76),(3.75±0.76)h; tmax分别为(1.55±0.94),(1.72±1.33)h;Cmax分别为(2.21±0.75), (2.15±0.68) μg/mL;AUC0- 24分别为(13.30±3.88) , (14.48±5.21) h•μg/mL;两种制剂AUC0- 24 相对生物利用度为(103.645.3)%,主要药代动力学参数无显著性差异。结论：两种制剂具有生物等效性。     

人血浆中盐酸多奈哌齐的HPLC-MS测定法

目的:建立人血浆中盐酸多奈哌齐的HPC-MS法.方法:血样经饱和NaHCO3碱化后用乙酸乙酯提取,进行HPLC-MS分析,色谱柱为Hypersil ODS(5μm,250mm×4.6 mm),流动相为甲醇-水-三乙胺-冰醋酸(70:30:0.3:0.3),内标为盐酸非洛普,检测离子为m/z 380(多奈哌齐)、m/z 344(内标),裂解电压为120V.结果:在0.2～20ng/ml范围内多奈哌齐与内标峰面积比值与浓度线性关系良好(r=0.9996),最低可定量浓度为0.1 ng/ml,提取回收率为87.52%～90.91%.结论:本实验建立的分析方法灵敏、准确、简便.     

测定人血浆中利奈唑胺浓度的HPLC-MS/MS法建立

目的：建立高效液相色谱串联质谱法（HPLC-MS/MS）测定人血浆中利奈唑胺的血药浓度,为临床合理用药提供参考。方法以替米沙坦为内标,血浆样品经乙腈沉淀蛋白进行提取分离,以含0.1%甲酸的1 mmol/L乙酸铵溶液和乙腈为流动相,梯度洗脱,采用m/z 338.1→m/z 296.3（利奈唑胺）和m/z 515.3→m/z 276.3（替米沙坦,内标）离子对进行扫描。结果利奈唑胺在0.23~46μg/ml线性范围内关系良好,r=0.9993,最低定量限为46 ng/ml,提取回收率为87%~109%,日内、日间精密度的相对标准偏差均在2.5%~8.6%范围内。结论建立的LC-MS/MS方法专属性强,灵敏度高,操作简单,适于临床利奈唑胺血药浓度监测。     

LC-MS/MS测定大鼠血浆中的野漆树苷及其药代动力学研究

目的：建立大鼠血浆中野漆树苷的LC-MS/MS测定方法,并研究静脉注射后野漆树苷在大鼠体内的药代动力学特征。方法大鼠血浆样品经乙酸乙酯萃取处理,用色谱柱Phenomenex C8（30 mm×2.00 mm,3μm）进行分离,以甲醇-水为流动相梯度洗脱,采用电喷雾离子源（ESI）,负离子模式,多反应监测（MRM）,选择离子分别为野漆树苷（m/z 577.6→269.1）,内标柚皮素（m/z 271.0→151.0）,将建立的方法应用于测定大鼠静脉注射野漆树苷后血浆的药物浓度,并采用DAS 2.0计算得主要药代动力学参数。结果大鼠血浆中野漆树苷在1～2000μg/L浓度范围内线性关系良好,日内、日间精密度（RSD）均＜10%,准确度（RE）在±7%之间,低、中、高3个浓度下提取回收率为86.8%～91.0%,无明显基质效应且稳定性良好。大鼠静注该药（5 mg/kg）后AUC0-t为（72627.8±18067.9）μg·min/L,t1/2为（52.1±14.3）min,CLz为（0.07±0.02）L/（min·kg）。结论该检测方法简单、快速、灵敏、准确,适用于野漆树苷血药浓度监测及其药动学研究。药代动力学参数表明大鼠静注该药后体内消除较快。     

HPLC-MS/MS法测定人血浆中乌苯美司浓度

目的建立高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS)法测定人血浆中乌苯美司浓度。方法采用API3000型HPLC-MS/MS液质联用系统,Ultimate C18分析柱(50mm×4.6mm,5μm),流动相为甲醇-水-甲酸(70∶30∶0.05,V/V/V),流速为0.2mL/min,格拉司琼作为内标。样品经过固相萃取后浓缩进样,多反应离子检测模式,正离子扫描,离子源为ESI源。结果检测乌苯美司的线性范围为0.4～4000ng/mL,最低定量限为0.4ng/mL。批内精密度和批间精密度均小于6%。结论本法具有快速简便、灵敏准确的特点,可满足乌苯美司临床药物浓度测定的需要。     

HPLC-MS/MS法测定人血浆中阿那曲唑的浓度及生物等效性研究

目的:建立人血浆中阿那曲唑的高效液相色谱-质谱(HPLC-MS/MS)测定方法,并评价两种阿那曲唑片的药动学和人体生物等效性。方法:12名男性健康受试者随机交叉口服阿那曲唑受试制剂和参比制剂各2mg,采用HPLC-MS/MS测定血药浓度,并计算其药动学参数,考察其生物等效性。结果:阿那曲唑的受试制剂与参比制剂Cmax分别为(33.31±7.31)、(32.37±5.71)μg/L,Tmax分别为(1.53,1.02)、(1.72,1.64)h,t1/2分别为(44.26±10.10)、(44.51 9.80)h,AUC0-120分别为(1420.52 324.79)、(1365.49 244.60)μg/h/L,AUC0-分别为(1707.07 508.03)、(1631.89 361.07)μg/h/L。与参比制剂相比,受试制剂的相对生物利用度为(104.7 18.6)%。结论:本方法特异性强,重复性好,灵敏度高,测定结果可靠。阿那曲唑片受试制剂和参比制剂具有生物等效性。     

HPLC—MS／MS测定人血浆中文拉法辛的浓度及人体生物等效性

目的研究2种盐酸文拉法辛胶囊的人体生物等效性。方法 24名男性健康志愿者采用随机双交叉试验方案设计,分别口服受试制剂或参比制剂（博乐欣）50 mg,采集36 h内动态血标本;HPLC-MS/MS法测定血浆中文拉法辛的浓度,DAS程序对试验数据进行处理,计算药动学参数和相对生物利用度,判定2种制剂的生物等效性。结果受试制剂和参比制剂的主要药动学参数Cm ax分别为（59.32±17.21）、（60.58±17.42）μg·L^-1,Tm ax分别为（2.08±0.46）、（2.25±0.55）h,T1/2分别为（6.69±1.67）、（6.35±1.69）h,AUC0-36分别为（524.65±227.01）、（528.22±226.57）μg·L^-1.h,AUC0-∞分别为（544.81±246.05）、（546.85±244.62）μg·L^-1.h,2种制剂主要药动学参数经对数转换后进行方差分析及双单侧t检验,并计算90%置信区间,表明2种制剂生物等效,受试制剂的人体相对生物利用度为（100.37±10.41）%。结论 2种盐酸文拉法辛胶囊生物等效。     

高效液相色谱-串联质谱同时测定人血浆中8种抗抑郁药的浓度

目的：建立同时测定血浆中米氮平、舍曲林、帕罗西汀、度洛西汀、阿米替林、去甲阿米替林、艾司西酞普兰及劳拉西泮8种抗抑郁类药物浓度的高效液相色谱-串联质谱法（HPLC-MS/MS）。方法：内标为度洛西汀-d7,使用甲醇将血浆样品进行蛋白沉淀后分析。Waters Cortecs C18(2.1mm×50.0mm,2.7μm)色谱柱, 0.1%甲酸水溶液-0.1%甲酸甲醇溶液梯度洗脱,流速0.5mL/min,电喷雾阳离子源。通过实验对这一方法的专属性、精密度、回收率等进行考察。结果：米氮平、帕罗西汀、艾司西酞普兰在1~200ng?mL-1;舍曲林、去甲阿米替林、度洛西汀、阿米替林及劳拉西泮在2.5~500 ng?mL-1范围内均表现良好的线性关系,回收率在94.70%~101.31%之间,精密度（RSD）小于15%。结论：该方法在临床同时测定服药患者血液中抗抑郁药物的浓度时相较其他方法具有快速、灵敏、准确的特点,且具有专属性强,重复性好,稳定性高的优点。     

高效液相色谱串联电喷雾质谱法测定大鼠血浆中山茛菪碱

目的建立大鼠血浆中山莨菪碱的测定方法,并研究山莨菪碱的大鼠药动学。方法采用液相色谱串联电喷雾离子阱质谱法测定大鼠血浆中山莨菪碱。大鼠血浆样品经甲醇2次沉淀蛋白并萃取后,以甲醇-2mmol/L醋酸铵缓冲液(用甲酸调pH3.5)(70:30)为流动相,用AgilentZorbaxEclipseXDB-C_(18)色谱柱分离,通过电喷雾离子阱质谱,以选择离子反应监测方式进行检测。用于定量分析的离子反应分别为m/z306→140(山莨菪碱)和m/z290→124(内标,阿托品)。结果山莨菪碱线性范围为10-5000μg/L,r=0.9990,最低检测限为2μg/L,日内、日间测定值RSD小于4.2%。结论该法快速灵敏,准确度高,适用于大鼠体内山莨菪碱的药动学研究。     

犬组织匀浆中乌头碱的高效液相色谱-质谱测定法及体外稳定性研究(英文)

目的建立了犬组织匀浆中有毒生物碱乌头碱的高效液相色谱-质谱测定法,并应用该方法考察了乌头碱在犬主要组织匀浆中的代谢稳定性。方法色谱柱为C18柱,流动相为含有5 mmol/L甲酸铵和0.2%甲酸的乙腈和水,梯度洗脱。三重四级杆串联质谱配备电喷雾电离源(ESI),正离子模式下以选择离子监测进行检测。乌头碱分别与犬的肝、小肠、胃和肾的组织匀浆温孵,温孵后不同时间点取出,加入内标西酞普兰,乙腈沉淀后取上清液直接进样测定。结果乌头碱浓度在5～500 ng/ml峰面积和内标的比值与浓度呈良好的线性关系;方法的回收率为85.73%～92.12%,其日内、日间的RSD值分别为5.32%～8.95%和5.45%～8.86%。体外孵育2 h后,在犬肝、小肠匀浆中有约20%的乌头碱进行了代谢转化,其t1/2分别为460.6和521.3 min。但在胃和肾中几乎无变化。结论研究提示犬体内的乌头碱主要在小肠、肝脏中代谢转化,但其代谢和清除较慢。