冬凌草甲素对人肝癌MHCC-97H细胞系侵袭和迁移的作用

目的:探讨冬凌草甲素(oridonin)对肝癌细胞侵袭和迁移的影响及其机制。方法:采用细胞培养技术培养人肝细胞癌MHCC-97H细胞,用不同浓度的冬凌草甲素处理肝癌细胞,采用划痕实验检测细胞的迁移能力;Transwell实验测定细胞的侵袭能力;黏附实验评价细胞的黏附能力;Western blot法检测LIM激酶1(LIMK-1)、丝切蛋白(cofilin)和磷酸化cofilin(p-cofilin)蛋白水平的改变。结果:冬凌草甲素可明显降低肝癌细胞的体外侵袭、迁移及黏附能力(P0.05),且在一定浓度范围内具有明显的量效关系。冬凌草甲素干预处理细胞后,cofilin的蛋白水平无明显变化,LIMK-1和p-cofilin的蛋白水平明显下调。结论:冬凌草甲素体外具有抑制肝癌MHCC-97H细胞侵袭和迁移的作用,其机制可能与调控LIMK-1/cofilin信号通路有关。     

紫杉醇对高转移性肝癌细胞株MHCC97-H中ezrin表达的影响

目的 研究紫杉醇对体外培养的高转移性肝癌细胞株MHCC97-H中ezrin的表达的影响.方法 将体外培养的MHCC97-H分为4组,分别与不同浓度的紫杉醇共培养,然后用免疫组化、Western blot法、RT-PCR检测各组中ezrin的表达水平,Transwell穿膜实验检测肝癌细胞侵袭能力的变化.结果 正常培养的MHCC97-H中有ezrin的高表达,紫杉醇可以抑制MHCC97-H中的ezrin表达,经紫杉醇处理的肝癌细胞穿透人工膜的能力下降.结论 紫杉醇可以抑制体外培养的MHCC97-H中ezrin的表达,从而抑制肝癌细胞的侵袭能力.     

水飞蓟宾对髓母细胞瘤Daoy细胞迁移和侵袭的影响

目的 探讨水飞蓟宾对髓母细胞瘤Daoy细胞侵袭和迁移能力的抑制作用。方法 不同浓度的水飞蓟宾作用髓母细胞瘤Daoy细胞24h和48 h,应用CCK-8和平板克隆形成实验检测Daoy细胞活力;应用细胞划痕实验检测Daoy细胞的迁移能力;应用Transwell实验检测Daoy细胞的侵袭能力。结果 0.1mM,0.2mM以及0.4mM水飞蓟宾作用Daoy细胞24h和48h后,水飞蓟宾组细胞活力显著低于对照组（P<0.05）,并以剂量和时间依赖方式抑制细胞增殖,Daoy细胞克隆集落形成能力、细胞迁移率与细胞侵袭能力显著降低（P<0.05）。结论 水飞蓟宾抑制髓母细胞瘤Daoy细胞的迁移和侵袭。     

罗哌卡因抑制人肝癌细胞系Hep3B增殖、迁移和侵袭

目的 研究罗哌卡因对人肝癌细胞系Hep3B生物学行为的影响,并探讨其分子机制.方法 设置对照组、罗哌卡因组、si-NC组、si-LINC00853组、pcDNA-NC组、pcDNA-LINC00853组、(罗哌卡因+pcDNA-NC)组、(罗哌卡因+pcDNA-LINC00853)组.采用细胞计数试剂盒(CCK-8法)...     

小干扰RNA抑制CD97的表达及其对胃癌细胞迁移和侵袭能力的影响

目的: 设计合成有效的siRNA-CD97,体外转染胃癌细胞株,观察CD97表达改变及其与胃癌细胞株迁移、侵袭能力改变的关系。方法: 采用AGS和MGC803胃癌细胞株。针对 CD97 基因设计siRNA,采用化学法合成,筛选出最有效的siRNA-CD97。siRNA-CD97转染胃癌细胞后分别用real-time RT-PCR、免疫荧光流式细胞术检测CD97 mRNA和蛋白表达的改变,MTT法检测细胞活性的改变,并用Transwell细胞迁移和侵袭实验检测细胞迁移和侵袭能力的变化。结果: 在siRNA-CD97转染后48 h,real- time RT-PCR结果显示AGS和MGC803细胞CD97 mRNA的表达量相对于未转染的细胞分别下降了(89.34±9.95)%和(95.42±1.93)%。转染后72 h,流式细胞术结果显示AGS细胞CD97^EGF和CD97^stalk抗原的表达强度相对于未转染的细胞分别下降了(19.29±3.45)%和(30.11±5.93)%, MGC803细胞CD97^EGF和CD97^stalk抗原的表达强度相对于未转染的细胞分别下降了(26.25±5.73)%和(16.22±3.23)%。MTT法检测结果显示,siRNA-CD97转染前后细胞的吸光度值没有显著差异。迁移和侵袭实验结果显示,AGS细胞siRNA-CD97转染组迁移和侵袭细胞相对于未转染组分别下降了(67.63±12.03)%和(68.02±15.63)%,MGC803细胞转染组迁移和侵袭细胞相对于未转染组分别下降了(14.92±2.03)%和(22.09±5.43)%。结论: 胃癌细胞转染 siRNA-CD97能够抑制CD97 mRNA和蛋白表达,随着CD97表达的降低,细胞迁移和转移的能力也明显减弱。     

乌头碱对肝癌MHCC97 细胞生长、侵袭和迁移的调控作用及机制研究

目的:探究乌头碱对肝癌细胞生长、侵袭和迁移的作用机制。方法:MTT 法检测不同浓度乌头碱对人肝癌细胞(MHCC97)增殖的影响;Transwell 检测乌头碱对MHCC97 细胞侵袭能力的影响;划痕实验检测乌头碱对MHCC97 细胞迁移能力的影响;Western blot 检测乌头碱对P38MAPK 通路蛋白表达的影响。结果:根据预实验结果,选择5、10、20 μg/ ml 三个浓度进行后续实验。乌头碱(10、20 μg/ ml)作用4 d 后对MHCC96 细胞增殖有明显的抑制作用,并能明显降低肝癌细胞的侵袭能力。乌头碱作用于MHCC97 细胞后,细胞迁移能力明显减弱,p-P38/ P38 比值降低,p-MAPKAPK 和p-HSP27 表达明显减少。结论:乌头碱对肝癌细胞增殖、侵袭和迁移具有抑制作用,其作用机制可能与调控P38/ MAPK 信号通路激活有关。     

lncRNA XLOC006926抑制肝癌细胞增殖、迁移和侵袭的研究

目的探讨lnc RNA XLOC006926调控肝癌细胞增殖和转移机制,结合肝癌患者临床病理特征,分析其临床意义。方法利用实时荧光定量PCR方法检测lnc RNA XLOC006926在肝癌细胞系及肝癌患者配对(癌、癌旁)组织(n=88)中的表达水平。进一步通过CCK-8、克隆形成、划痕及transwell实验检测过表达或抑制lnc RNA XLOC006926对细胞增殖、迁移和侵袭的影响,同时结合临床信息统计分析其与临床病理特征及患者预后的相关性。结果 lnc RNA XLOC006926在肝癌细胞及肝癌组织中的表达显著降低,过表达lnc RNA XLOC006926后肝癌细胞增殖、迁移和侵袭能力降低,相反抑制lnc RNA XLOC006926后肝癌细胞增殖、迁移和侵袭能力增强。结合患者临床信息分析,lnc RNA XLOC006926的表达量与肿瘤大小(P=0.007)、PVTT(P=0.024)具有显著相关性,其低表达预示着预后较差。结论 lnc RNA XLOC006926在肝癌发生发展中发挥了重要作用,参与调节肝癌细胞的增殖及迁移,有望成为肝癌发生发展的生物标志物和肝癌预防治疗的新靶点。     

木犀草素对人肝癌HepG2细胞株侵袭、迁移和黏附能力的影响

目的:探讨木犀草素对人肝癌HepG2细胞株侵袭、迁移和黏附能力的影响及其作用机制。方法:采用不同浓度木犀草素处理体外培养的人肝癌HepG2细胞株,Transwell实验检测细胞的侵袭能力,划痕实验检测细胞的迁移能力,黏附实验评价细胞的黏附能力,Western blot检测E-钙黏蛋白(E-cadherin)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)、波形蛋白(vimentin)和Snai1蛋白的表达。结果:木犀草素可明显降低肝癌HepG2细胞的体外侵袭、迁移及黏附能力(P0.01),且在一定浓度范围内呈明显量效关系。木犀草素处理肝癌细胞后,上皮细胞标志蛋白E-cadherin表达明显上调,间质细胞标志蛋白N-cadherin和vimentin以及转录因子Snai1表达均明显下调,木犀草素对以上蛋白的调节呈明显浓度依赖性。结论:木犀草素体外具有抑制肝癌HepG2细胞株侵袭、迁移和黏附的作用,其作用机制可能与调控上皮-间质转化有关。     

敲除EZH2抑制人宫颈癌细胞系迁移和侵袭

目的 研究zeste基因同源蛋白2(EZH2)对人宫颈癌细胞系迁移和侵袭的影响,并初步探讨其作用机制.方法 利用CRISPR/Cas9敲除人宫颈癌HeLa和人子宫颈鳞癌SiHa细胞系中EZH2的表达.划痕实验检测细胞迁移;Transwell小室法检测细胞体外迁移和侵袭;实时荧光定量PCR检测STAT3 mRNA水平;W...     

家蝇幼虫抗菌肽对肝癌HepG2细胞增殖、侵袭及迁移的影响?

为了更全面的探究家蝇抗菌肽的抗肿瘤作用,本文从肿瘤细胞增殖、侵袭、迁移的角度研究家蝇幼虫抗菌肽对肿瘤细胞的抑制作用。通过针刺诱导家蝇三龄幼虫、低温离心、固相萃取后冻干获取抗菌肽粗提物,将所获抗菌肽调整至不同浓度进行CCK8细胞增殖实验。并通过细胞划痕实验和细胞侵袭实验判断家蝇抗菌肽对肝癌HepG2细胞迁移和侵袭的影响。实验结果显示家蝇抗菌肽能够明显抑制肝癌HepG2细胞的增殖,且作用效果与浓度呈剂量依赖特点。低浓度的抗菌肽（60μg／mL）能有效抑制肝癌HepG2细胞迁移及侵袭。     

乔松素抑制人胃癌细胞系AGS增殖、迁移和侵袭

目的 探讨乔松素(pinocembrin)对人胃癌细胞系AGS增殖、迁移和侵袭的作用及机制。方法 将AGS细胞分为不同浓度乔松素组(50、100、200和400μmol/L)、NC组、200μmol/L pinocembrin+anti-miR-NC组、200μmol/L pinocembrin+anti-miR-34a-5p组;采用CCK-8法及流式细胞测量术检测AGS细胞增殖及凋亡;采用Transwell小室法及蛋白质免疫印迹法检测AGS细胞增殖及凋亡;实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测miR-34a-5p表达水平。结果 不同浓度乔松素降低AGS细胞的增殖活性(P<0.05),且G₀/G₁期细胞所占比例升高,S期细胞所占比例降低,MMP2、MMP9、p-PI3K、p-AKT蛋白的表达降低,细胞迁移和侵袭数量减少,miR-34a-5p的表达水平升高(P<0.05)。抑制miR-34a-5p表达减轻乔松素对AGS细胞增殖,迁移和侵袭的抑制作用。结论 乔松素可通过调控miR-34a-5p抑制AGS细胞增殖、迁移和侵袭。     

过表达细胞黏附分子1抑制卵巢癌细胞迁移及侵袭

目的:研究过表达细胞黏附分子1(cell adhesion molecule 1,CADM1)对卵巢癌增殖、迁移和侵袭的影响.方法:qRT-PCR测定CADM1mRNA在卵巢癌细胞系SKOV3及人正常卵巢上皮细胞hose中的表达,将SKOV3细胞分成两组,即CADM1过表达组和对照组,转染48 h后Western印迹测定两组CADM1蛋白表达量,采用lipofectamine 2000分别转染pcDNA3.1-CADM1及pcDNA3.1质粒,采用CCK-8、克隆形成、细胞划痕及Transwell实验分别检测两组细胞增殖、克隆形成、细胞迁移及侵袭能力.结果:CADM1mRNA在SKOV3中表达水平显著低于hose细胞系(1.54±0.34 vs.5.63±0.96,p＜0.05);转染48 h后,CADM1过表达组和对照组CADM1蛋白表达量分别为2.53±0.42,0.37±0.09,差异具有统计学意义(P＜0.05).CADM1过表达组和对照组在0,24,48,72 h 450 nm处的OD值差异无统计学意义(P＞0.05);CADM1过表达组与对照组克隆形成数相比(60.4±7.6 vs.58.3±8.2),差异无统计学意义(P＞0.05);CADM1过表达组细胞迁移率显著低于对照组(20.3％±3.5％vs.60.1％±4.2％,P＜0.05);CADM1过表达组侵袭细胞数显著少于对照组(24.5±5.3 vs.65.1±6.9,P＜0.05).结论:CADM1在卵巢癌细胞系中低表达,过表达CADM1对卵巢癌细胞增殖和克隆形成无影响,但可抑制迁移和侵袭,起抑癌基因的作用.     

尼氟灭酸抑制人脑胶质瘤U87细胞活力、迁移及侵袭

目的:观察尼氟灭酸(niflumic acid,NFA)对人胶质瘤U87细胞活力、迁移及侵袭的影响,并探讨其可能机制。方法:体外培养U87细胞,分为空白对照组和50、100及200μmol/L NFA组。MTT法检测各组U87细胞活力,实时无标记细胞分析(real-time cell analysis,RTCA)技术检测NFA对U87细胞迁移及侵袭的影响。结果:MTT检测结果显示,与空白对照组比较,NFA作用12 h后各组细胞活力显著增加(P<0.05或P<0.01),NFA作用24 h和48 h后,细胞活力显著降低(P<0.05或P<0.01),并呈现浓度依赖性。RTCA检测结果显示,与对照组比较,100和200μmol/L NFA组U87细胞迁移和侵袭能力均降低(P<0.05或P<0.01),200μmol/L NFA组U87细胞迁移和侵袭能力降低更加显著(P<0.01)。结论:NFA可以抑制胶质瘤U87细胞活力、迁移和侵袭。     

芹菜素对喉癌Hep-2细胞增殖、迁移与侵袭的影响

目的探讨芹菜素对喉癌Hep-2细胞增殖、迁移与侵袭的影响及可能机制。方法 MTT法检测不同浓度的芹菜素(0、20、40、80μmol/L)对喉癌Hep-2细胞增殖的影响。40μmol/L芹菜素处理Hep-2细胞48h后,Transwell实验检测Hep-2细胞体外迁移和侵袭能力变化;实时PCR和Western blot检测Hep-2细胞Wnt1、β-catenin、环氧合酶2(COX2)与基质金属蛋白酶2(MMP-2)的蛋白与mRNA的表达水平。结果芹菜素抑制喉癌Hep-2细胞增殖,并呈时间浓度依赖性;40μmol/L芹菜素处理Hep-2细胞48h能够有效抑制Hep-2细胞的迁移和侵袭能力,降低Wnt1、β-catenin、COX2与MMP-2 mRNA相对表达量和蛋白表达水平。结论芹菜素抑制喉癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力与抑制喉癌Hep-2细胞中Wnt/β-catenin信号通路相关。     

过表达内质网蛋白29抑制人卵巢癌细胞系OVCAR3侵袭和迁移

目的 探究内质网蛋白29(ERP29)过表达对人卵巢癌细胞系OVCAR3的侵袭、迁移能力的影响及机制.方法 取对数增殖期OVCAR3细胞系,分为过表达组、空载组及对照组.过表达组用脂质体转染法转染ERP29过表达RNA重组真核载体pcDNA3.1-ERP29质粒,空载组转染阴性对照载体pcDNA3.1质粒,对照组不做处...     

下调uPAR表达抑制高侵袭性人膀胱癌细胞系T24的迁移与侵袭

目的探究尿激酶型纤溶酶原激活物受体(u PAR)的表达对高侵袭性人膀胱癌细胞系T24体外增殖与侵袭的影响,以及哺乳动物靶向雷帕霉素靶蛋白复合物2(m TORC2)可能的作用。方法设计合成针对u PAR、Rictor、PTEN基因的siRNA和阴性对照NC siRNA。将对数增殖期T24细胞随机分为5组,并设为实验组siu PAR、siRictor、siRictor+siu PAR、siu PAR+si PTEN和对照组NC。用瞬时转染法将以上siRNA及相应组合分别转入5组T24细胞;分别用RT-qPCR和Western blot检测mRNA及蛋白的表达;用MTT法和Transwell侵袭实验分别检测u PAR siRNA对T24细胞增殖及侵袭的影响。结果 T24细胞中u PAR mRNA和蛋白的表达量显著上调(P0. 05)。沉默u PAR能够显著下调T24细胞中磷酸化Akt Serine-473(P-Akt S473)的表达量(P0. 05),并抑制T24细胞的迁移与侵袭(P0. 05)。敲除PTEN基因的T24细胞中,沉默u PAR基因促进Akt S473磷酸化(P0. 05)。结论沉默u PAR能够抑制T24细胞的迁移与侵袭,在T24细胞中u PAR可能是m TORC2的上游调控因子。     

乙肝病毒促进肝癌细胞系的转移侵袭力

目的探讨乙肝病毒(HBV)对肝癌细胞转移能力的影响及其可能机制。方法以初始汇合度为30%,将3种细胞系HL-7702(人正常肝细胞系)、HepG2(未转染HBV-DNA的人肝癌细胞系)、HepG2.2.15(稳定转染HBV-DNA的人肝癌细胞系)种植于96孔板中,待细胞增殖至70%汇合时,利用划痕器制造划痕伤口,置于活细胞动态成像系统中进行多时间点的显微拍照与数据采集,计算相对伤口密度(RWD),并通过免疫荧光染色与Western blot技术测定细胞中Eph A2蛋白表达,分析其与RWD值的相关性。结果细胞迁移实验中,划痕后24~96 h,HL-7702组RWD显著高于HepG2与HepG2.2.15组(P0.01),划痕后72~144 h,HepG2.2.15组RWD显著高于HepG2组(P0.01);细胞侵袭实验中,HL-7702细胞因不能穿过基质胶,而无RWD值;划痕后72~144 h,HepG2.2.15组RWD显著高于HepG2组(P0.05或P0.01)。Eph A2表达:与HL-7702组比较,HepG2与HepG2.2.15组细胞中Eph A2表达水平显著升高(P0.01),其中HepG2.2.15组中Eph A2表达水平显著高于HepG2组(P0.01),且两组肝癌细胞中Eph A2的表达量与划痕实验的RWD值呈显著正相关(迁移实验:P0.01;侵袭实验:P0.01)。结论乙肝病毒可能促进肝癌细胞的迁移和侵袭能力,其机制可能与上调Eph A2的异常表达有关。     

川楝素通过MMP9抑制肾癌细胞的增殖、迁移和侵袭

目的：基于网络药理学方法探讨川楝素治疗肾癌的靶点及作用机制,并通过体外内实验进行验证。方法：通过SwissTarget数据库和TargetNet数据库获取川楝素的作用靶点,GeneCards数据库获取肾癌疾病相关靶点;采用DAVID数据平台对靶点进行GO分析;利用基因表达汇编（GEO）数据库的组织芯片分析靶点基因在肾癌组织的表达水平;基于肿瘤基因组图谱（TCGA）数据库分析靶点基因与肾癌临床表型的关系。采用CCK-8实验及异种移植实验观察川楝素对肾癌细胞体内外增殖的影响;采用Transwell侵袭和迁移实验观察川楝素对肾癌细胞侵袭和迁移的影响;构建基质金属蛋白酶9(MMP9)过表达质粒并转染人肾癌细胞系ACHN和769-P,观察上调MMP9表达对肾癌细胞增殖、侵袭及迁移的影响。结果：基于网络药理学分析结果,川楝素作用于肾癌的靶点包括MMP9在内共有13个靶点;TCGA数据库的临床数据表明,MMP9在肾癌组织中的表达较正常肾组织表达上调（P<0.05）,且其高表达与肾癌临床分期晚、分化程度低、复发及预后差密切相关（P<0.05）。功能实验中,川楝素呈时间和剂量依赖性抑制MMP...     

秦皮甲素抑制人鼻咽癌细胞系HNE-3增殖

目的 探讨秦皮甲素对鼻咽癌细胞生物学行为的影响及其可能作用机制。方法 不同浓度的秦皮甲素处理人鼻咽癌细胞系HNE-3;并将si-NC、si-circ-ZNF609转染至HNE-3细胞,pcDNA、pcDNA-circ-ZNF609分别转染至HNE-3细胞后用秦皮甲素处理细胞;采用CCK-8法检测细胞增殖;采用试剂盒检测细胞内葡萄糖摄取水平与乳酸水平;采用酶活性试剂盒检测丙酮酸激酶和己糖激酶的活性;Transwell小室法检测细胞迁移及侵袭;RT-qPCR检测circ-ZNF609的表达量;Western blot检测MMP-2、MMP-9蛋白表达量。结果 秦皮甲素以浓度依赖性的方式降低细胞存活率和MMP-2、MMP-9蛋白水平(P<0.001),降低葡萄糖摄取水平和乳酸水平(P<0.001),降低丙酮酸激酶和己糖激酶的活性(P<0.001),减少迁移及侵袭细胞数(P<0.001);秦皮甲素可降低circ-ZNF609的表达量(P<0.001),且呈剂量依赖性;转染si-circ-ZNF609后细胞存活率和MMP-2、MMP-9蛋白水平降低(P<0.0...     

黄芩素通过失活JAK/STAT信号通路抑制T24细胞迁移侵袭

目的:研究黄芩素对膀胱癌细胞的细胞迁移和侵袭的影响,并探讨其作用机制。方法:运用Transwell法检测细胞迁移侵袭量;Western blot检测细胞中uPA、MMP-9、TIMP-1、 TIMP-2、p-JAK2和p-STAT的蛋白表达。结果:与NC组相比,黄芩素处理组细胞的迁移量和侵袭量均显著降低(P<0.05),细胞迁移侵袭相关蛋白uPA、MMP-9蛋白表达显著降低(P<0.05),TIMP-1、 TIMP-2蛋白表达显著升高(P<0.05);50μmol/L黄芩素处理组细胞JAK/STAT信号通路相关蛋白p-JAK2、p-STAT表达显著降低(P<0.05),且JAK/STAT信号通路的活性与细胞迁移侵袭量成正相关;激活黄芩素处理组细胞的JAK/STAT信号通路可显著增加细胞的迁移侵袭量。结论:黄芩素可抑制膀胱癌细胞的迁移侵袭,其机制可能与失活JAK/STAT信号通路有关,将可为黄芩素治疗膀胱癌的临床应用提供依据。