β-榄香烯抗DDP耐药卵巢癌细胞SKOV3/DDP 作用及机制研究

目的:研究β-榄香烯对DDP耐药卵巢癌细胞SKOV3/DDP增殖生长、逆转耐药的作用,以及对耐药细胞中耐药相关蛋白表达的影响。方法:CCK-8法研究β-榄香烯对SKOV3/DDP细胞增殖的抑制作用;克隆形成实验研究β-榄香烯对SKOV3/DDP细胞克隆形成的影响;流式细胞术研究β-榄香烯对SKOV3/DDP细胞凋亡的影响;CCK-8法研究β-榄香烯对SKOV3/DDP细胞产生顺铂(DDP)耐药的逆转指数;Western Blot法研究β-榄香烯对SKOV3/DDP细胞中耐药相关蛋白ABCB1、LRP和P-gp表达水平的影响。结果:β-榄香烯在20、40、80μmol·L^-1时能够抑制SKOV3/DDP细胞的增殖、克隆形成并促进细胞凋亡;β-榄香烯在不具有直接杀伤细胞作用的10μmol·L^-1时即可以逆转SKOV3/DDP细胞对DDP的耐药,其逆转耐药指数为2.58倍;β-榄香烯在20、40、80μmol·L^-1时能够减少耐药相关蛋白ABCB1、LRP和P-gp表达。结论:β-榄香烯能够直接抑制SKOV3/DDP细胞增殖、促进其凋亡并逆转细胞DDP耐药,其作用机制可能与减少耐药相关蛋白ABCB1、LRP和P-gp表达有关。     

铂耐药卵巢癌的免疫治疗研究进展

卵巢癌是女性生殖系统疾病中死亡率最高的恶性肿瘤,大多数患者发现时已处于晚期。虽然经过满意的肿瘤细胞减灭术联合以铂类为基础的化疗可以达到临床缓解,但大多数患者会在最初治疗后数年内复发,继而死亡。化疗耐药和免疫逃逸可能是导致卵巢癌治疗失败的重要原因之一,因此迫切需要新的治疗策略来改善患者的临床结局。本文阐述了免疫治疗在铂耐药卵巢癌治疗中的研究进展。     

奥曲肽对人卵巢癌耐顺铂细胞株SKOV3/DDP移植瘤增殖的影响

目的探讨奥曲肽对人卵巢癌耐顺铂细胞株SKOV3/DDP裸鼠移植瘤生长的影响。方法将SKOV3/DDP细胞接种雌性BALB/c-nu/nu裸鼠右腋前皮下构建移植瘤动物模型,成瘤后随机分成4组。奥曲肽组(A):奥曲肽100μg.kg-1.d-1,用药28 d;顺铂组(B):顺铂4 mg.kg-1.d-1,成瘤后第1、8、15、22天用药;联合组(C):奥曲肽和顺铂联用;对照组(D):生理盐水对照。用药4周后处死裸鼠,取肿瘤标本计算瘤重和瘤体积,并采用免疫组织化学法检测瘤块中生长抑素受体2(SSTR2)和表皮生长因子受体(EGFR)的表达。结果各用药组肿瘤标本的瘤重、瘤体积均低于D组,C组的瘤重、瘤体积低于A、B组(P<0.01)。各组移植瘤细胞均有SSTR2表达;EGFR表达量D组显著高于其他各组(P<0.01),C组及A组EGFR表达量低于其他两组(P<0.01)。结论奥曲肽能抑制人卵巢癌耐顺铂细胞株SKOV3/DDP的裸鼠移植瘤的生长,并与顺铂有协同作用。     

姜黄素联合顺铂对人卵巢癌细胞株SKOV3细胞增殖的抑制作用

目的探讨姜黄素及其联合顺铂对体外培养人卵巢癌细胞株SKOV3增殖的抑制作用。方法将培养的人卵巢癌SKOV3细胞分别单独(姜黄素组或顺铂组)及联合(姜黄素与顺铂联用组)加入不同浓度姜黄素(5、10、20、40μmol/L)、顺铂(2.5 mg/L)作用后,采用四甲基偶氮唑盐比色法(MTT法)检测SKOV3细胞增殖情况。结果不同浓度姜黄素组随着药物浓度增加、作用时间延长,细胞的增殖抑制率上升,差异有统计学意义(P<0.05);联合用药组明显高于单一用药组(P<0.05),两药联合应用具有协同作用。结论姜黄素对卵巢癌SKOV3细胞增殖具有抑制作用,在一定范围内,这种抑制作用呈剂量-时间依赖性;姜黄素与顺铂联合应用具有协同作用,可提高SKOV3细胞对顺铂的敏感性,是一种理想的化疗增敏剂。     

米非司酮配伍顺铂对卵巢癌耐药细胞株CAOV3/DDP细胞凋亡和性激素受体的影响

目的 探讨米非司酮配伍顺铂对卵巢癌耐药细胞株CAOV3/DDP增敏作用以及凋亡率、雌激素受体(ER)和孕激素受体(PR)的影响.方法 采用RPMIl640培养液时CAOV3/DDP细胞株进行培养,将CAOU3/DDP细胞株分5组:对照组(不加任何药物)、顺铂组(2μg/ml)、高剂量米非司酮加顺铂组(15μg/ml米非司酮和2μg/ml顺铂)、中剂量米非司酮加顺铂组(10μg/ml米非司酮和2μg/ml顺铂)、低剂量米非司酮加顺铂组(5μg/ml米非司酮和2μg/ml顺铂).培养结束后采用MTT法观察不同浓度的米非司酮配伍顺铂对CAOV3/DDP细胞株增殖活力的影响;采用流式细胞术观察不同浓度的米非司酮配伍顺铂对CAOV3/DDP细胞株凋亡率、ER、PR的影响.结果 与对照组比较,顺铂组对细胞增殖活力、细胞凋亡率以及ER、PR阳性率的影响,差异均无统计学意义(P>0.05);与顺铂组比较,各剂量米非司酮加顺铂组对细胞增殖活力、生存率以及细胞凋亡率、PR阳性率的影响,差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01),且随着米非司酮浓度的升高,对CAOV3/DDP细胞抑制作用逐渐增强,细胞凋亡率显著上升,PR阳性率下降(P<0.05,P<0.01),各组ER阳性率无统计学意义(P>0.05).结论 米非司酮联合顺铂对CAOV3/DDP细胞增殖活力均具有显著抑制作用,且与米非司酮的浓度呈剂量依赖关系,米非司酮可提高顺铂化疗的敏感性,其增敏作用与抑制孕激素分泌,促进卵巢癌细胞凋亡有关     

诺斯卡品逆转人卵巢癌裸鼠移植瘤对顺铂耐药的作用及机制

目的：探讨微管抑制剂诺斯卡品（ NOS ）逆转人卵巢癌细胞株 SKOV3/DDP 裸鼠皮下移植瘤对顺铂（ DDP）耐药的作用及其机制。方法建立人卵巢癌裸鼠移植瘤模型,分为对照组、DDP组、NOS组、NOS与DDP联合组,每组6只。观察各组裸鼠饮食和精神状态,测量裸鼠的体重及移植瘤的体积,并绘制肿瘤生长曲线。用网搓法制备单细胞悬液,采用流式细胞术检测移植瘤细胞周期和细胞凋亡率的变化,细胞中X链锁凋亡抑制蛋白（ XIAP ）、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶（Caspase-3）、B细胞淋巴瘤/白血病-2（Bcl-2）和生存素（Survivin）蛋白表达。结果联合组裸鼠移植瘤体积明显小于对照组和其他用药组（ P ＜0ⅱ．05）。与对照组和DDP组比较,联合组皮下移植瘤细胞凋亡率显著增加（ P ＜0．05）,G2/M期细胞比例增多（ P ＜0．05）,细胞中XIAP、Bcl-2和Survivin蛋白表达降低（ P ＜0．05）, Caspase-3蛋白表达升高（ P ＜0．05）。结论 NOS增加了移植瘤细胞对DDP的敏感性,逆转其对DDP的多药耐药,其机制可能与XIAP、Bcl-2和Survivin蛋白表达的下调,Caspase-3蛋白表达的上调有关。     

雷帕霉素联合顺铂对卵巢癌细胞株SKOV3凋亡和自噬的影响

目的研究雷帕霉素联合顺铂对卵巢癌细胞株SKOV3细胞凋亡和自噬的影响,并探讨可能的分子机制。方法雷帕霉素及顺铂分别单独或联合作用于卵巢癌细胞株SKOV3细胞后,流式细胞仪检测凋亡率,实时荧光定量PCR检测各处理组的mTOR mRNA表达,Western blot检测自噬蛋白Beclin1、LC3和抗凋亡蛋白bcl-2的表达。结果雷帕霉素联合顺铂组凋亡率为(12.520±1.499)%,较其他处理组凋亡率提高(P<0.05);雷帕霉素联合顺铂组的mTORmRNA表达为0.339±0.015,较对照组明显降低(P<0.05);雷帕霉素联合顺铂组的自噬蛋白Beclin1、LC3-Ⅱ表达均增强(P<0.05),抗凋亡蛋白bcl-2明显降低(P<0.05)。结论雷帕霉素通过特异性阻滞mTOR的表达,可以促进顺铂诱导的卵巢癌SKOV3细胞凋亡,增强卵巢癌SKOV3细胞自噬性死亡。     

磁性纳米Fe3O4颗粒逆转卵巢癌SKOV3/DDP耐药性的研究

NPs组细胞凋亡率较DDP组明显提高(P<0.05).DDP+Fe3O4-MNPs组细胞内顺铂含量明显高于DDP组(P<0.05).结论 Fe3O4-MNPs可与化疗药物顺铂协同,逆转卵巢癌细胞对DDP的耐受性.其作用可能是通过提高细胞内药物聚集最实现的.     

顺铂联合热疗对卵巢癌铂敏感细胞株COC1和铂耐药细胞株COC1/DDP的影响

目的 探讨热疗联合化疗对卵巢癌铂敏感细胞株COC1和铂耐药细胞株COC1/DDP增殖、凋亡的作用、逆转耐药细胞的耐药性及其可能机制.方法 采用MTT法检测热疗及联合不同浓度的顺铂(1.25、2.5、5、10、20μg·mL-1)对卵巢癌细胞株COC1,COC1/DDP生长的抑制作用;RT-PCR法检测两种细胞株中Sur...     

硼替佐米对卵巢癌SKOV-3/DDP细胞增殖和耐药逆转的影响

目的:探讨硼替佐米对卵巢癌SKOV-3/DDP细胞增殖和耐药逆转的影响和作用机制。方法:采用MTT法检测不同浓度硼替佐米和顺铂(DDP,cisplatin)对SKOV-3/DDP不同作用时间的细胞生长抑制率,以及硼替佐米和DDP合用和单独应用时的细胞生长抑制率;流式细胞术检测细胞凋亡和细胞周期的变化。结果:硼替佐米能够有效抑制SKOV-3/DDP细胞增殖,硼替佐米与DDP合用组的SKOV-3/DDP细胞抑制率较硼替佐米和DDP单用组均明显增强。单独应用硼替佐米细胞周期阻滞于G2/M期,单独应用DDP细胞周期阻滞于S期,两药联合出现更明显的S期阻滞。结论:硼替佐米与DDP具有协同作用,能够逆转SKOV-3/DDP细胞对DDP的耐药性。     

硼替佐米对人卵巢癌耐顺铂细胞株的生长抑制作用

目的探讨硼替佐米对人卵巢癌耐顺铂细胞株（SKOV3／DDP）的逆转作用及其可能机制。方法体外培养人卵巢癌细胞株（SKOV3）和SKOV3／DDP,空白对照组加RPMI-1640完全培养基;硼替佐米组浓度分别为0．0625、0．1250、0．2500、0．5000、1．0000、2．0000μmol／L,检测不同作用时间对SKOV3／DDP的生长抑制情况;采用流式细胞术检测0．5000μmol／L硼替佐米作用后细胞周期及凋亡率的变化。结果①硼替佐米对SKOV3／DDP细胞生长抑制情况：0．0625、0．1250、0．2500、0．5000、1．0000、2．0000μmol／L的硼替佐米作用SKOV3／DDP细胞24h的生长抑制率依次为（1．19±0．07）％、（2．24±0．08）％、（3．47±0．20）％、（4．61±0．07）％、（5．80±0．17）％、（6．43±0．10）％;作用48h的生长抑制率依次为（9．39±0．08）％、（12．17±0．23）％、（18．08±0．25）％、（41．11±0．10）％、（55．45±0．41）％、（64．91±0．18）％;作用72h的生长抑制率依次为（13．21±0．32）％、（20．18±0．23）％、（22．91±0．35）％、（52．08±0．10）％、（76．59±0．39）％、（83．23±0．38）％。空白对照组抑制率为0,各实验组与空白对照组之间两两比较,差异均有统计学意义（均P〈0．05）。②细胞周期及凋亡率的变化情况：0．5000μmol／L硼替佐米作用SKOV3／DDP细胞48h,细胞周期G2／M期的比例为22．8％,空白对照组为10．1％,差异有统计学意义（P〈0．05）;凋亡率分别为11．7％和2．2％,差异有统计学意义（P〈0．05）。结论硼替佐米能够逆转SKOV3／DDP细胞的耐药作用;并将SKOV3／DDP的细胞周期阻滞于Gz／M期。     

外泌体传递miR-139 调控卵巢癌顺铂敏感性的机制研究

目的探讨外泌体介导的miR-139传递对卵巢癌顺铂(cDDP)敏感性的影响。方法分别提取卵巢癌cDDP敏感细胞及耐药细胞分泌的外泌体,透射电镜观察外泌体形态,Western blotting检测外泌体标志蛋白的丰度,qPCR定量检测miR-139水平,MTT检测cDDP敏感细胞、miR-139敲低敏感细胞源性外泌体对耐药细胞cDDP敏感性的影响。结果卵巢癌细胞培养基上清液中存在大量椭圆形或圆形、粒径50~100 nm且高表达外泌体标志因子Alix、CD63、CD9的囊状结构。相较于卵巢癌cDDP耐药细胞源性外泌体,cDDP敏感细胞源性外泌体中miR-139的丰度更高,且将cDDP敏感细胞源性外泌体与耐药细胞株共同孵育可增强后者的cDDP敏感性,而下调外泌体中miR-139的表达可削弱其对耐药细胞的cDDP敏感性诱导作用。结论卵巢癌cDDP敏感细胞可通过外泌体传递miR-139,增强耐药细胞对cDDP的敏感性。     

miR-218抑制卵巢癌细胞A2780对顺铂耐药性的实验研究

目的研究miR-218抑制卵巢癌细胞A2780对顺铂耐药性的影响及可能机制。方法实时定量PCR检测A2780及顺铂耐药细胞株A2780/DDP中miR-218的表达,转染miR-218 inhibitors和mimics改变A2780及A2780/DDP细胞中miR-218的表达,MTT法检测转染前后细胞对顺铂的敏感性,并分析Wnt2B蛋白表达的改变。结果与A2780细胞相比,miR-218在A2780/DDP中的表达明显降低。A2780细胞转染miR-218 inhibitors后,细胞对顺铂的敏感性降低,Wnt2B蛋白表达明显增强;而A2780/DDP细胞转染miR-218mimics后,细胞对顺铂的敏感性增强,Wnt2B蛋白表达明显减少。结论 miR-218可能通过靶向Wnt2B抑制卵巢癌细胞A2780对顺铂的耐药性。     

卵巢癌患者术后力朴素与顺铂联合静脉化疗的疗效观察

目的观察卵巢癌患者术后应用力朴素与顺铂联合静脉化疗的疗效及毒副反应。方法 24例患者术后采用力朴素与顺铂联合静脉化疗。3周1个疗程,共4~6个疗程。化疗后通过患者的临床症状及化验指标等判断治疗效果及化疗毒副作用。结果治疗有效率为91.67%(22/24),血肿瘤标志物CA125下降率91.67%(22/24)。白细胞下降发生率为45.83%(11/24),胃肠道反应率为70.83%(17/24)。所有患者均未因化疗毒副作用中断或退出治疗。结论力朴素与顺铂联合静脉化疗对术后卵巢恶性肿瘤治疗效果好,毒副反应轻。     

不同剂量顺铂腹腔灌注联合全身化疗治疗无腹水期卵巢癌的临床观察

目的:观察不同剂量顺铂腹腔灌注联合全身化疗治疗无腹水期卵巢癌的疗效和不良反应。方法:43例无腹水期卵巢癌患者随机分成高剂量组和低剂量组。高剂量组(22例)腹腔灌注顺铂75mg·m-2;低剂量组(21例)腹腔灌注顺铂50mg·m-2。同时配合全身化疗,紫杉醇135mg·m-2,第1天,静脉滴注,每3周重复1次。3周期后评价疗效。结果:高剂量组和低剂量组有效率分别为86.36%和52.38%,2组比较有显著性差异(P<0.05);高剂量组和低剂量组一般状况改善率分别为81.82%和47.62%,2组比较有显著性差异(P<0.05);高剂量组Ⅲ～Ⅳ度恶心、呕吐的发生率达31.82%,高于低剂量组9.52%(P<0.05)。结论:高剂量顺铂腹腔灌注联合全身化疗临床疗效确切,并且可明显改善患者的生存质量,但不良反应发生率较低剂量组高。     

顺铂与紫杉醇不同给药方式治疗晚期卵巢癌的疗效对比分析

目的 评价紫杉醇与顺铂不同给药方式治疗晚期卵巢癌的临床疗效.方法 选取2011年6月至2013年5月我院收治的100例晚期卵巢癌患者,随机分为两组,其中观察组50例,采用紫杉醇静脉滴注联合顺铂腹腔内给药治疗,对照组50例,采用紫杉醇联合顺铂静脉滴注给药,观察并比较两组患者的临床疗效及不良反应的发生率.结果 观察组有效率为84％,对照组有效率为56％,两组患者近期疗效相比较差异有统计学意义（P＜0.05）;在不良反应的发生上,白细胞减少程度相比较差异无统计学意义（P＞0.05）,但是观察组恶心呕吐、脱发、肾功能损害、肌肉关节痛的发生率明显低于对照组,差异有统计学意义（P＜0.05）.结论 紫杉醇静脉注射联合顺铂腹腔内给药治疗晚期卵巢癌疗效好,不良反应发生率低,值得在临床上予以推广.     

女性恶性肿瘤对顺铂耐药性分子机制及干预措施研究新进展

系统阐述女性生殖系统恶性肿瘤(宫颈癌及卵巢癌)患者顺铂耐药性分子机制及干预措施研究进展.资料来源于Pubmed数据库及万方数据库.选取2007～2016年发表在pubmed上关于女性生殖系统恶性肿瘤顺铂耐药机制或针对耐药的干预治疗的相关文献,综合已被学者接受的业界认可的数据资料,得出以下结论:目前参与上述恶性肿瘤的顺铂耐药分子机制的因子FGF 13/FHF2、Akt/p53、PPM1D、EZH2等,但针对耐药机制开发的药物多处于临床前或临床研究阶段,这些药物的问世将为女性生殖系统恶性肿瘤的个体化治疗提供可能.     

晚期上皮性卵巢癌术后顺铂腹腔灌注联合化疗疗效观

目的探讨顺铂（Cisplatin,DDP）腹腔灌注联合环磷酰胺（Cyclophosphamide,CTX）化疗治疗卵巢癌患者术后的疗效及预后因素。方法对2000年6月至2005年6月间入住我院的晚期卵巢癌患者术后43例进行回顾性分析,所有患者都经初次手术,化疗方案为PC（CTX iv＋DDP腹腔灌注）,分别为1-~12个疗程不等,分析他们的药物反应以及预后情况。结果Ⅲ期患者中CR10例,PR 14例,SD6例,PD1例,总有效率（overall response rate,ORR）为77.4%。Ⅳ期患者CR3例,PR5例,SD3例,PD1例,PR5例,SD3例,PD1例,ORR为66.7%,两组无显著差异。但Ⅲ期同Ⅳ期患者3年生存率及5年生存率均有显著性差异。43例无进展生存PFS（progression-free survival,PFS）为21.5个月,平均生存时间为37.5个月。结论顺铂腹腔灌注联合CTX化疗治疗卵巢癌是有效而且安全的,预后与病理类型、组织分级、术后残留癌大小及化疗疗程相关。