血小板源生长因子在高脂饮食肾病大鼠中的表达

目的 :探讨 PDGF在高脂饮食肾病大鼠肾小球硬化中的表达。方法 :1 6只Wistar大鼠在阿霉素肾病模型后随机分为肾病组及高脂饮食组 ,饲养 1 2周 ,观察血脂、尿蛋白、肾脏病理积分及 PDGF。结果 :高脂饮食组血胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白、尿蛋白、肾脏病理积分及泡沫细胞明显高于肾病组 ,肾脏免疫组化也显示高脂饮食组 PDGF、FN增多。结论 :高脂饮食可加剧肾小球损伤 ,PDGF参与其发病     

曲尼司特对阿霉素肾病大鼠肾脏CTGF、TGF—β1的影响

目的研究曲尼司特对阿霉素肾病大鼠的肾脏保护作用，并探讨其可能的机制。方法雄性SD大鼠24只，随机分为正常对照组、模型组、曲尼司特组和安博维组。采用单侧肾脏切除加尾静脉注射阿霉素5mg／kg的方法建立阿霉素肾病模型。观察各组大鼠24h尿蛋白定量、BUN、Scr及肾脏病理的影响。应用免疫组化方法测定肾组织CTGF和TGF—β1的表达。结果曲尼司特能减少阿霉素肾病大鼠尿蛋白，延缓Scr上升；减轻基质增生和肾小球硬化；曲尼司特下调阿霉素肾病大鼠肾组织中CTGF和TGF—β1的表达。结论曲尼司特下调阿霉素肾病大鼠肾组织中CTGF和TGF—β1的表达，调节细胞外基质的生成与降解，从而减轻肾脏病理损害，发挥其肾脏保护作用。     

细胞凋亡及Fas和FasL在高脂肾损害中的作用

目的 :探讨细胞凋亡及凋亡相关蛋白 Fas和 Fas L在高脂饮食肾损害中的表达。方法 :将 2 4只 Wistar大鼠随机分为对照组、肾病组及高脂饮食组 ,饲养 1 2周 ,观察血脂、尿蛋白、肾脏病理积分、肾脏细胞凋亡及 Fas和 Fas L的表达。结果 :高脂饮食组血胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白、尿蛋白、肾脏病理积分高于肾病组及对照组 ,肾脏免疫组化也显示高脂饮食组细胞凋亡及 Fas和 Fas L表达增强。结论 :高脂血症可加剧肾小球损伤 ,肾脏细胞凋亡及 Fas和 Fas L参与其发病过程     

阿霉素肾病大鼠podocin mRNA的表达及全反式维甲酸对其表达的影响

目的 观察阿霉素诱导的肾病模型大鼠肾脏podocin mRNA的表达特点和全反式维甲酸(ATRA)对其表达的影响,探讨在蛋白尿发生发展中podocin的作用以及ATRA治疗肾病的可能机制.方法 大鼠随机分为3组(对照组、模型组、干预组),建立阿霉素肾病大鼠模型,于阿霉素注射后第2天干预组每天给予20 mg/kg ATRA灌胃,每周检测24 h尿蛋白定量,4周后处死大鼠,检测血清白蛋白、胆固醇、甘油三酯,RT-PCR检测podocin mRNA的表达.结果 ①模型组、干预组大鼠与对照组相比,pdocin mRNA表达明显增加(P＜0.01),干预组podocin mRNA较模型组有所降低(P＜0.01).②阿霉素诱导的大鼠于注射阿霉素后24 h尿蛋白开始逐渐升高,第28天达高峰,干预组与模型组相比大鼠尿蛋白明显减少,第28天时降低约57％,差异有统计学意义(P＜0.01).结论 阿霉素肾病大鼠肾皮质podocin mRNA的表达发生了显著变化;ATRA可减少肾病大鼠尿蛋白量,同时减少肾皮质podocin mRNA的表达.     

高脂饮食对阿霉素肾病大鼠肾小球系膜基质的影响

目的 探讨高脂饮食对阿霉素肾病大鼠肾小球硬化的影响。方法 应用病理、免疫组化及分子生物学方法结合图像分析技术,观察高脂饮食对大鼠血胆固醇、尿蛋白、肾脏病理形态学改变以及肾小球系膜基质产生的影响。结果 在非肾病组及肾病组,高脂饮食大鼠的血胆固醇较标准饮食大鼠明显升高,分别为（ 2.2± 0.3） g/L vs(0.9± 0.1)g/L(P     

普罗布考对阿霉素肾病大鼠足细胞nephrin和podocin表达的影响

目的 研究普罗布考对阿霉素大鼠足细胞相关分子nephrin及podocin表达的影响.方法 将36只SD大鼠分为正常对照组(12只)、肾病模型组(12只)和普罗布考干预模型组(12只),采用鼠尾静脉注射阿霉素的方法建立阿霉素大鼠肾病模型.4周末检测各组大鼠24 h尿蛋白定量,光镜下观察肾脏病理学改变,Westem blot技术检测nephrin及podocin的表达.结果 肾病模型组和普罗布考干预组24 h尿蛋白定量均高于正常对照组(P＜0.05),但普罗布考干预组24 h尿蛋白定量低于肾病模型组(P＜0.05).肾病模型组和普罗布考干预组肾小球nephrin、podocin的表达均低于正常对照组(P＜0.05),且普罗布考干预组高于肾病模型组(P＜0.05).结论 普罗布考可能通过减轻足细胞损伤实现对阿霉素肾病大鼠肾脏的保护作用.     

全反式维甲酸对阿霉素肾病大鼠保护作用的实验研究

目的探讨TGF-β,ET-1在肾脏病发病机制中的作用,探讨全反式维甲酸对阿霉素肾病大鼠肾脏病变进展的影响,并为此药治疗临床肾脏疾病提供科学依据。方法雄性Wistar大鼠36只,随机分为正常对照组、肾病对照组及维甲酸治疗组。采用尾静脉一次注射阿霉素（ADR）6．5mg／kg方法建立阿霉素肾病模型。造模7d蛋白尿24小时〉30mg,造模成功。维甲酸治疗组给予全反式维甲酸20mg／kg溶于2ml花生油灌胃,共4周。造模后第7d、21d、42d分别检测24h尿蛋白定量;取肾脏做HE染色,观察肾脏病理形态学改变,免疫组化法测定肾组织中TGF-β1、ET-1表达变化。结果1）维甲酸治疗组24小时尿蛋白定量低于肾病对照组（P〈0．05）;2）免疫组化显示：肾病对照组TGF-β1、ET-1表达明显高于正常对照组,比较有统计学意义（P〈0．05）,维甲酸治疗组TGF-β1、ET-1表达明显低于肾病对照组（P〈0．05）。结论全反式维甲酸可以下调阿霉素肾病大鼠肾脏中TGF-β1、ET-1表达,降低阿霉素肾病大鼠24小时尿蛋白排泄量,减轻肾脏病理损害,对肾脏有保护作用。     

腺病毒Smad 7转染对阿霉素肾病大鼠蛋白尿的影响

目的  在阿霉素（ADR）肾病大鼠模型中,探讨过表达Smad 7对肾病蛋白尿及其病理的影响。方法  本实验用单次尾静脉注射建立阿霉素肾病模型,通过构建重组腺病毒介导外源性Smad 7基因,单侧肾动脉灌注转染Smad 7至靶肾脏。用荧光显微镜检测Smad 7重组腺病毒的转染效果,用邻苯三酚红比色法测定大鼠24 h尿蛋白,HE染色检测各组肾脏病理改变。结果  ①用6.5 mg/kg ADR一次性尾静脉注射SD大鼠可成功构建肾病模型;4周末似微小病变型肾病。②单侧肾动脉灌注能有效将介导Smad 7的重组腺病毒转染至大鼠靶肾脏。③4周末肾病重组腺病毒（Ad-Smad7）组尿蛋白（38.4±6.0）较ADR组（69.58±10.63）减少（P <0.05）。④荧光显微镜显示肾病Ad-smad7组大鼠靶肾中,Ad-Smad7主要在肾小管表达,肾小球表达少。⑤肾病Ad-Smad7组肾脏病理改变轻微,肾病Ad-GFP组、ADR组病理较严重,出现类似局灶节段性肾小球硬化的慢性肾脏病病理表现。 结论  单侧肾动脉灌注有效地使重组腺病毒介导的Smad 7转染至大鼠靶肾脏,使Smad 7在该肾过表达,可减轻肾病大鼠蛋白尿,并改善阿霉素肾病病理。

     

白三烯受体拮抗剂对阿霉素肾病大鼠肾间质炎症的影响

目的 探讨白三烯受体拮抗剂对肾小管间质炎症损伤的影响.方法 采用阿霉素肾病大鼠模型,2周成模后用高、低两个剂量的白三烯受体拮抗剂--孟鲁司特(Montelukast)进行治疗,用泼尼松治疗作为对照.HE染色观察肾脏病理;免疫组化检测细胞间黏附分子-1(ICAM-1)和单核细胞趋化因子-1(MCP-1)在肾小管间质中的表达;24h尿蛋白测定采用考马亮蓝方法.结果 模型组大鼠肾脏病理.肾小管上皮浊肿、严重的空泡变件;肾小管不同程度扩张,可见较多蛋白管型;肾间质小灶性一灶性炎细胞浸润.白三烯受体拮抗剂高、低剂量治疗均可显著减少肾小管间质炎细胞浸润,小管上皮浊肿、变性等程度减轻,蛋白管型也较模型组减少.模型组大鼠肾小管问质ICAM-1、MCP-1的表达较正常大鼠显著增强,白三烯受体拮抗剂和激素治疗可显著降低ICAM-1、MCP-1的表达.结论 白三烯受体拮抗剂可显著改善阿霉素肾病大鼠肾小管间质病理损伤和炎细胞浸润,其机制可能通过其抑制白三烯作用而减少了ICAM-1、MCP-1等炎症因子有关.     

灵芝孢子粉对大鼠阿霉素肾病肾组织影响的实验研究

目的探讨灵芝孢子粉对阿霉素肾病大鼠肾脏病理改变的影响。方法将正常雄性SD大鼠随机分为3组:正常对照组、模型组、治疗组。采用两次经尾静脉注射阿霉素(5mg/kg)方法建立大鼠阿霉素肾病模型,给药后即对治疗组予灵芝孢子粉胃饲(8g·kg-1.d-1)共6周。检测各组给药后第2、4和6周各项指标的变化,包括(1)24h尿蛋白定量,血尿素氮(BUN)、肌酐(Scr)、胆固醇和清蛋白。(2)各组取肾皮质进行光镜及电镜等组织病理学检测。结果24h尿蛋白定量和各血液生化指标在不同时间点和不同组别间差异均有统计学意义(P<0.01)。灵芝孢子粉于治疗的第2、4和6周显示出较明显的降尿蛋白作用,治疗组与模型组比较尿蛋白水平和血胆固醇减少,第4周、第6周时血清蛋白升高,肾功能检测显示血BUN及Scr均有不同程度改善(P<0.05)。形态学检测显示肾小球硬化程度和肾小球系膜增生率在灵芝孢子粉治疗组明显轻于模型组,差异有统计学意义(P<0.01)。结论在大鼠阿霉素肾病模型中,灵芝孢子粉显示了降低尿蛋白及减轻肾小球硬化的作用,证实灵芝孢子粉对大鼠阿霉素肾病的肾脏病理改变有早期防护作用。     

苯那普利减轻大鼠肾小球硬化及对血小板源性生长因子表达的影响

目的　进一步探讨血管紧张素转化酶抑制剂 (ACEI)减轻肾小球硬化的机理。方法　 3 6只雄性大鼠分为对照组、模型组和治疗组。模型组和治疗组行单侧肾切除大鼠加阿霉素注射 ,治疗组再给予每日苯那普利 6mg .kg- 1 灌胃 1次 ,共 12周。免疫组化法检测肾组织血小板源性生长因子 BB(PDGF BB)的表达 ,并进行半定量分析。计算不同组别肾小球硬化指数。结果　模型组较对照组肾小球硬化明显 ,PDGF BB表达明显增强 (P <0 .0 11) ;苯那普利治疗组肾小球硬化较模型组明显减轻 ,PDGF BB表达亦减弱 (P <0 .0 1)。结论　大鼠阿霉素肾病肾小球硬化时 ,PDGF BB表达增强 ,PDGF BB参与肾小球硬化的进展 ;ACEI可能通过降低PDGF BB在肾组织表达发挥其延缓肾小球硬化的作用     

肾小球硬化大鼠血、尿液生化及肾脏病理学改变

摘要： 目的 观察肾小球硬化（GS）大鼠血、尿液生化及肾脏病理学改变。方法 40只Wistar雄性大鼠随机分为假手术组和模型组，每组均为20只。采用单侧肾切除加1周后尾静脉注射阿霉素(5mg/kg)的方案建立大鼠GS模型，造模后12周末处死。检测血清肌酐(SCr)、尿素氮(BUN)、总蛋白(TP)、白蛋白(Alb)及24小时尿蛋白（24hUPr）。苏木素-伊红（HE）染色观察肾脏病理改变，计算GS指数。免疫组织化学方法检测肾组织Ⅳ型-胶原（Col-Ⅳ）和纤维连接蛋白（FN）的表达水平。结果 （1）模型组24hUPr和血清SCr、BUN显著高于假手术组，而血清TP、Alb则明显降低。（2）GS大鼠肾小球肥大，球囊粘连，囊壁增厚，局灶节段性肾小球硬化，GS指数显著高于假手术组；肾小管萎缩或坏死，可见大量蛋白管型；肾间质增宽，可见大量炎症细胞浸润。（3）GS大鼠肾组织Col-Ⅳ和FN阳性面积比显著高于假手术组，以肾小球表达增高为主。结论 采用单侧肾切除加1周后尾静脉注射阿霉素(5mg/kg)在术后12周可以成功建立GS模型，具体表现为大量蛋白尿、低蛋白血症和明显的肾功能损害，肾脏病理显示GS合并Col-Ⅳ、FN表达普遍增高。     

大黄酸对肾小球硬化肾皮质凋亡蛋白酶-3活性及细胞凋亡的影响

目的观察大黄酸对肾小球硬化及细胞凋亡的影响,以探讨大黄酸对肾小球硬化的保护作用。方法一侧肾切除加尾静脉注射阿霉素制作肾小球硬化大鼠模型,随机分为对照组、肾病组、大黄酸治疗组和苯那普利治疗组,分别在第6、8、10、12周处死每组6只大鼠,免疫组织化学染色测定肾皮质凋亡蛋白酶3(caspase3),比色法测定caspase3活性,凝胶电泳迁移率转换实验(EMSA)检测核因子κB(NFκB)活性,原位末端转移酶标记法(TUNEL)检测肾组织细胞凋亡,观察caspase3、NFκB的表达与肾组织细胞凋亡情况。结果肾病组出现明显蛋白尿,血白蛋白下降及胆固醇上升,肾小球硬化指数、细胞凋亡指数、NFκB活性及caspase3表达随时间延长均明显高于对照组(P<0.05或P<0.01)。各时点比较,第10周肾病组见大量TUNEL阳性细胞,并略高于12周(9.3±2.3比8.4±1.2,P>0.05),caspase3表达也最为显著,明显高于12周(11.4±2.5比8.2±1.7,P<0.05),主要分布在肾皮质毛细血管周围,与凋亡细胞表达趋于一致。大黄酸或苯那普利治疗后,8周起TUNEL阳性细胞明显减少,并维持在一定水平,NFκB活性和caspase3表达均降低(P<0.05),肾脏病理变化及生化改变明显改善,肾皮质caspase3表达与细胞凋亡指数呈正相关(r=0.836,P<0.01)。结论大黄酸对肾小球硬化有明显防治作用,可能通过影响NFκB、caspase3活性在肾小球硬化早期调控病理改变,caspase3表达下降可能是大黄酸减轻肾小球硬化细胞凋亡的分子机制之一。     

芪益强肾饮对系膜增生性肾小球肾炎大鼠肾组织PDGF和FN的影响

目的观察中药复方芪益强肾饮对系膜增生性肾炎大鼠肾组织血小板源性生长因子（PDGF）和纤维连接蛋白（FN）的影响。方法试验大鼠随机分为正常对照组、模型组、芪益强肾饮组、肾炎康复片组。制备系膜增生性肾小球肾炎大鼠模型;以芪益强肾饮、肾炎康复片灌胃;免疫组化法观察各组大鼠肾组织中PDGF和FN的表达情况。结果芪益强肾饮组及肾炎康复片组大鼠肾组织系膜细胞中PDGF、FN的表达均降低,芪益强肾饮组更为明显。结论芪益强肾饮对系膜增生性肾小球肾炎大鼠肾组织中PDGF和FN的表达有抑制作用,可能会延缓肾小球疾病的发展,在防治肾小球硬化方面有帮助。     

低分子量肝素延缓进行性肾小球硬化的实验研究

目的 :探讨低分子量肝素 (LMWH)对进行性肾小球硬化的延缓作用及可能机制。方法 :通过摘除右肾后重复注射阿霉素的方法建立进行性肾小球硬化大鼠模型 ,给予LMWH治疗 6周 ,观察大鼠蛋白尿、血生化及肾脏病理改变 ,计算肾小球硬化指数 ,运用免疫组织化学法检测肾小球Ⅳ型胶原蛋白 (Col Ⅳ )、层粘蛋白、血小板源性生长因子 B(PDGF B)及碱性成纤维细胞生长因子 (bFGF)的表达。结果 :LMWH治疗后 ,进行性肾小球硬化大鼠的尿蛋白排泄明显降低 ,血清白蛋白升高 ,肾功能得以改善 ,肾脏病理改变减轻 ,肾小球硬化指数下降 ,Col Ⅳ和层粘蛋白在肾小球系膜区的积聚减少 ,PDGF B和bFGF在肾小球的表达受到抑制。结论 :LMWH能明显延缓进行性肾小球硬化 ,其作用与抑制肾小球PDGF B和bFGF的蛋白表达从而减少肾小球系膜基质的积聚有关。     

中药降氮汤对5/6肾切除大鼠肾小球结缔组织生长因子表达的影响

目的：研究中药降氯汤对5／6肾切除肾小球硬化大鼠肾小球结缔组织生长因子（CTGF）表达的影响,探讨其防治肾小球硬化的作用机制。方法：采用5／6肾切除肾小球硬化大鼠模型,设立假手术组、模型组、氯沙坦组和中药降氮汤组。检测各组大鼠术后12周末血清尿素氯、肌酐及胆固醇水平。光镜及电镜观察第12周肾组织病理变化,并应用免疫组化法检测肾小球内CTGF的表达水平。结果：中药降氯汤组和氯沙坦组较模型组血清尿素氮、肌酐、胆固醇水平明显下降（P〈0．01）．两治疗组间比较无显著性差异（P〉0．05）。肾脏病理学检查显示,两治疗组肾小球增生硬化程度明显减轻。免疫组化显示两治疗组肾小球内CTGF表达较模型组明显减少（P〈0．01）,两治疗组比较无显著性差异（P〉0．05）。结论：中药降氮汤可显著抑制5／6肾切除肾小球硬化大鼠肾小球CTGF的过度表达,其防治肾小球硬化的作用机制与抑制CTGF的过度表达有关。     

肾炎防衰液对5/6肾切除大鼠肾组织FN表达的影响

目的探讨肾炎防衰液对5/6肾切除(5/6nephrectomize,5/6NT)大鼠肾组织纤维粘连蛋白(fibronectin,FN)表达的影响。方法选用SD雄性大鼠,建立5/6NT大鼠肾纤维化模型。随机分为8组:正常组、假手术组、模型组、苯那普利组、尿毒清组和肾炎防衰液低、中、高剂量组。采用免疫组织化学方法,以苯那普利、尿毒清为实验对照,检测肾炎防衰液对肾组织FN表达的影响。结果模型组肾组织FN强阳性表达,在系膜基质和肾小管基底膜出现大量棕黄色颗粒;苯那普利组、尿毒清组FN中等量表达,在系膜基质和肾小管基底膜出现中等量棕黄色颗粒;肾炎防衰液低、中、高剂量组肾组织FN轻度表达明显少于模型组,在系膜基质和肾小管基底膜出现少量棕黄色颗粒,并呈剂量依赖关系。结论肾炎防衰液抑制5/6NT大鼠肾组织FN的表达,可能是该方减缓肾小球硬化和肾纤维化发展的作用机制之一。     

N-乙酰半胱氨酸对糖尿病大鼠肾脏保护作用的研究

目的观察N-乙酰半胱氨酸(NAC)对糖尿病大鼠肾脏的保护作用,并探讨其作用机制。方法用免疫组化方法检测肾组织胶原Ⅳ、纤维连接蛋白(FN)的蛋白表达;用RT-PCR检测肾组织基质金属蛋白酶-9(MMP-9)及其组织抑制因子-1(TIMP-1)mRNA的表达。结果 NAC能减少尿蛋白,降低血肌酐水平,减少胶原Ⅳ、FN及TIMP-1mRNA的表达,增加MMP-9mRNA的表达。结论 NAC可能通过上调MMP-9在肾组织的表达,减轻细胞外基质(ECM)的聚积,起到减少尿蛋白排泄量,保护肾功能的作用。     

控制血糖对糖尿病大鼠肾PTEN表达及纤维化病变的影响

目的:观察控制血糖前后糖尿病(DM)大鼠肾组织第10号染色体缺失的磷酸酶和张力蛋白同源基因(PTEN)表达变化,探讨PTEN与肾小管上皮细胞向间充质细胞的转化(EMT)的关系及控制血糖对PTEN表达及肾纤维化病变的影响。方法:SD大鼠随机分为正常对照组(N)、糖尿病组(DM)、胰岛素治疗组(DMA),尾静脉注射STZ复制DM模型,于成模13周起,DMA组大鼠采用胰岛素个体化治疗,以血糖控制在4～7 mmol/L,尿糖阴性为准,分别于16周和24周时处死各组大鼠。生化方法测血糖、血肌酐和24 h尿蛋白;观察肾脏病理改变;免疫组织化学和Western blotting检测各组大鼠肾组织PTEN、CollagenⅣ、FN、E-cadherin和α-SMA蛋白的表达;RT-PCR检测PTENmRNA的表达。结果:与N组相比,不同时间点DM组大鼠血糖、血肌酐、24 h尿蛋白明显增多(P<0.05),并出现肾组织纤维化改变;而DMA组大鼠血糖、血肌酐、24 h尿蛋白均显著低于DM组(P<0.05),肾纤维化病变明显改善;不同时间点的DM组大鼠肾组织PTEN蛋白和mRNA的表达均较N组明显减少(P<0.05),并伴有E-cadherin的表达减少(P<0.05),α-SMA表达增加(P<0.05),CollagenⅣ和FN蛋白的沉积增多(P<0.05);而与DM组相比,DMA组大鼠肾组织PTEN蛋白和mRNA表达均明显增加(P<0.05),且E-cadherin的表达增加(P<0.05),α-SMA表达减少(P<0.05),CollagenⅣ和FN在间质的沉积减少(P<0.05)。结论:控制血糖能上调肾小管上皮细胞PTEN的表达,同时能减少肾小管上皮细胞EMT及肾间质ECM沉积,改善肾纤维化病变。