HPLC法测定小儿氨酚黄那敏颗粒中马来酸氯苯那敏含量

小儿氨酚黄那敏颗粒收载于《国家药品标准化学药品地方标准上升国家标准》,由对乙酰氨基酚、人工牛黄、马来酸氯苯那敏组成,标准品对对乙酰氨基酚进行了含量测定,而未测定马来酸氯苯那敏的含量,本文采用HPLC法测定马来酸氯苯那敏的含量,该方法灵敏、专属性强、操作简便、结果准确。1仪器与试药Waters系列高效液相色谱仪、2996二极管陈列检测器、SB2200超声波清洗器。马来酸氯苯那敏对照品(中国药品生物制品检定所,批号:10004-200305,含量测定用,含量为99.3%),样品由浙江泰康药业集团新余制药有限公司提供,水为超纯水,甲醇为色谱纯;其他试…     

HCV-RNA荧光定量标准品制备的研究

目的 介绍一种简便快速的丙型肝炎病毒(HCV)RNA定量标准品的制备方法.方法 RT-PCR扩增目的片段,产物与pGEM-T裁体连接并转化感受态大肠杆菌DH5α经筛选和测序鉴定,阳性质粒体外转录合成cRNA,准确定量后作为标准品.结果 RNA标准品具有较大的线性范围(109 copies/ml-101copies/ml).批内和批间重复性也较好,cv分别为3.68%和8.40%.结论 本法制备的RNA标准品具有较好的检测灵敏度和特异性,适合临床推广应用.     

鸟苷酰环化酶C质粒标准品的构建

目的:制备人鸟苷酰环化酶C(GC-C)质粒标准品,为实时荧光定量PCR检测GC-C含量,探讨大肠癌患者外周血单个核细胞(PBMC)GC-C mRNA表达水平及临床意义奠定基础。方法:在鸟苷酰环化酶C(GC-C)基因高保守区设计特异性的引物和探针,RT-PCR扩增目的片段并连接于pGEM-T载体,以得到GC-C质粒标准品。结果:经过蓝白斑筛选,PCR或EcoR I酶切初步鉴定,阳性克隆测序分析确定GC-C质粒标准品正确性。结论:正确构建GC-C质粒标准品为RFQ-PCR标准曲线的绘制及GC-C的定量检测奠定了基础。     

薄层扫描法测定咳喘平片中补骨脂素和异补骨脂素的含量

1 实验部分 1.1.1 试剂咳喘平片剂4批由南通中药厂提供;补骨脂素和异补骨脂素标准品,购于卫生部药品生物制品检定所;展开剂:正已烷(AR)——乙酸乙酯(AR)(8:2); 1.1.2 仪器 CS—930薄层扫描仪(日本岛津); 1.1.3 标准品溶液的配制分别精密称取补骨脂素和异补骨脂素标准品0.926mg和0.688mg,于10ml容量瓶中,用乙酸乙酯溶解,振摇,加乙酸乙酯至刻度。     

暑热宁合剂中葛根素HPLC测定条件的优化

目的:优化暑热宁合剂中葛根素的高效液相色谱法测定条件。方法:色谱柱:Xterra188 Waters RP C18(250mm×4.6mm,5μm);检测器:Waters2998二级管阵列检测器(DAD);工作站:Waters Empower;流动相:乙腈-水(10:90);流速:1mL/min;检测波长:250nm。结果:该条件下可使暑热宁合剂中主要成分葛根素达到较好的分离,阴性无干扰。结论:该方法操作简便,结果准确可靠,可实现该样品的简便、准确、快速、经济实用的分析。     

NASBA方法制备HIV／SHIV RNA定量测定标准品及其应用

目的 应用NASBA方法制备SIV/SHIV RNA定量测定标准品.方法 应用NASBA方法直接扩增SIVmac251病毒gag基因上1476～1685之间的片段,扩增的RNA产物(RS-NASBA)纯化后10倍系列稀释,测定定量曲线、标准曲线,测定该标准品的稳定性和重复性.结果 应用Qiagen公司QuantiTect SYBR GREEN RT-PCR Kit,该标准品可精确定量到2.033×10 copies/μL.结论 外标准品RS-NASBA纯度高,稳定性好,可用于定量测定SIV/SHIV RNA拷贝数.     

Labrasol对灯盏花素角膜透过率的影响*

[目的]优化暑热宁合剂中绿原酸的高效液相色谱法测定条件。[方法]色谱柱:Xterra188 Waters RPC18;检测器:Waters2998;工作站:Waters Empower;流动相:乙腈-0.4%磷酸(10∶90);流速:1 mL/min;检测波长:327 nm。[结果]该条件下可使暑热宁合剂中主要成分绿原酸达到较好的分离。[结论]高效液相色谱(HPLC)实现该样品的简便、准确、快速、经济实用的分析。     

毛细管电泳法测定石楠叶中有效成分的含量

石楠叶有祛风、通络、益肾之功效 [1]。其中的两种有效成分齐墩果酸和熊果酸在抗炎、保肝、止疼、强心等许多疗效方面已被现代科学证实。目前石楠叶中熊果酸的测定方法有薄层色谱法[2 ] 。本实验采用毛细管电泳法测得了石楠叶中齐墩果酸和熊果酸异构体的含量。1　实验部分仪器与药品 :美国 Waters Quanta40 0 0 E毛细管电泳仪。毛细管 (河北永年光导纤维厂 ,直径 75μm)总长 6 0 cm,有效长度 5 2 cm。数据处理由 Wa-ters Millennium 2 0 1 0色谱管理软件完成。Na2 HPO4 ,Na2 B4 O7,SDS,95 %乙醇均为分析纯。齐墩果酸和熊果酸标准品购…     

酪氨酸羟化酶重组质粒标准品构建

目的:用T-A克隆法构建含酪氨酸羟化酶(TH)基因的重组质粒,并用实时定量PCR(RQPCR)方法制备标准品。方法:提取小鼠肾上腺髓质组织总RNA,逆转录为cDNA后进行RT-PCR,回收纯化电泳胶,T-A克隆与pGEM-T载体连接,转化Top-10感受态细菌,蓝白斑筛选出阳性菌落后,大量提取质粒,再进行RQPCR反应,最后制得含TH的重组质粒标准品。结果:肾上腺髓质TH的表达,PCR扩增,菌液PCR,测序鉴定均证实TH重组到pGEM-T载体上,经RQPCR定量后得到TH重组质粒标准品的标准曲线。结论:该方法能大量制备TH质粒标准品,并且可推广应用。     

黄芩苷标准品制备方法研究

采用醇提酸沉法提取黄芩苷粗品 ,再用分步精制的方法来制备黄芩苷标准品 ,所得标准品的熔点、含量与对照标准品一致。提示 :本法是制备黄芩苷标准品简便可行、收率高的方法     

酮基布洛芬栓剂生物利用度研究

1实验方法1.1试剂酮基布洛芬(ketoprofen简称KP)标准品(武汉第三制药厂);布洛芬标准品(山东新华制药厂);KP胶囊剂(50mg/粒,广东华乐制药厂);KP栓剂(100mg/枚,汉口铁路医院研制);甲醇(分析纯,上海振兴化工一厂),乙腈(分析纯,北京防化研究院化工厂);乙醚(分析纯,上海马陆制药厂);     

虾青素缓解Tau蛋白过度磷酸化减轻视神经放射性损伤的分子生物学机制探讨

目的 分析视神经放射性损伤的分子生物学机制及虾青素对Tau蛋白过度磷酸化减轻效果.方法 选取64例离体培养鼠视网膜神经节细胞株RGC-5培养的神经元,30 Gyγ射线电离辐射,随机选择64个细胞培养小室,根据有无虾青素滴加分为虾青素标准品组及无虾青素标准品组各32个,观察两组照射后12 h、24 h、48 h、1周后Tau蛋白激酶、GSK-3β蛋白、PP-2A蛋白表达差异.结果 同组不同时间比较可见虾青素标准品组照射后随时间增长,Tau蛋白激酶、GSK-3β蛋白有所下降,PP-2A蛋白表达有所上升,这种变化在无虾青素标准品组表现不明显(P>0.05),同时间组间比较照射后不同时间虾青素标准品组Tau蛋白激酶、GSK-3β蛋白表达低于无虾青素标准品组,而PP-2A蛋白表达高于无虾青素标准品组,数据经统计学处理,差异均有统计学意义(P<0.05).结论 虾青素能够有效降低GSK-3β蛋白的表达及提高PP-2A蛋白表达,降低γ射线电离辐射致Tau蛋白过度磷酸化,从而可能对抑制Tau蛋白过度磷酸化而预防电离辐射对视神经的损伤.     

标准曲线变动性的不确定度分量评定

目的:以实时荧光定量PCR检测乙型肝炎病毒核酸载量实验为例,尝试性评定临床实验室中标准曲线变动性的不确定度分量。方法:对4个乙型肝炎病毒脱氧核糖核酸(DNA)定量检测系列标准品重复测定5次,取各标准品的Ct均值对标准品浓度的对数值求回归直线,进而测定并计算高、中、低值血清样本的DNA载量及其标准曲线变动性的不确定度分量。结果:高、中、低值血清样本浓度取对数后的标准曲线变动性的标准不确定度分量分别为0.079、0.040和0.071。结论:标准曲线变动性的不确定度分量和标准品的数量及标准品重复测量次数相关;和待测样本浓度及其重复测量次数相关。     

HCV-RNA荧光定量标准品制备的探讨

目的探讨丙型肝炎病毒(HCV)RNA定量标准品的制备方法。方法用HCV-RNA阳性扩增目的片段,产物与pGEM-T载体连接并转化感受态大肠杆菌DH5α,经筛选和测序鉴定,阳性质粒体外转录合成cRNA,准确定量后作为标准品。结果 HCV-RNA标准品具有较大的线性范围(109copies/ml-101copies/ml),批内和批间重复性较好,cv分别为2.23%～6.85%和6.10%～10.01%。结论本法制备的HCV-RNA标准品具有较好的检测灵敏度和特异性,适合临床推广应用。     

放射免疫分析工作中标准曲线的初步研究

<正> 本文对放射免疫分析工作中标准曲线基本类型确定、直线化、分段拟合等问题进行了初步研究,探讨了坏点剔除方法。现报告如下: 以标准品B/B_O为纵座标(B,不同含量标准品管的结合率;B_O,标准品O管的结合率),标准品含量C为横座标的标准曲线的类型的确定,作者研究了二种方法。     

薄层扫描法测定二至丸中齐墩果酸的含量

1 仪器与药品日本岛津CS—930型薄层扫描仪,定容毛细管索氏提取器,硅胶G(青岛海洋化工厂),齐墩果酸标准品(卫生部药品生物制品检定所)二至丸(苏州雷允上制药厂,批号900819) 2 测定方法 2.1 薄层板的制备,秤取一定量的硅胶G,按硅胶G:0.5％CMC—Na(3∶1)的比例混合研磨均匀,铺成0.3mm的薄层板,室温干燥后于105℃活化1小时,置干燥器中备用。 2.2 标准品的制备:准确称取干燥至恒重的齐墩果酸标准品10.0mg,用氯仿溶解,定容于10ml容量瓶中。     

2-乙酰氨基芴的合成及鉴定

本文介绍了一种合成2-乙酰氨基芴(FAA)的方法,操作简易,制品质量可靠。红外光谱、核磁共振谱、紫外光谱的测定结果表示本合成品与标准品相同。动物实验证明本制品可诱发大白鼠肝癌,其效果与标准品FAA相同。     

乙酰螺旋霉素标准品溶液的制备及贮藏实验

目的:了解乙酰螺旋霉素标准品溶液的制备及贮藏条件。方法:选择乙醇作溶剂,磷酸盐缓冲液为稀释标准品溶液。3℃～5℃贮藏不同的时间与实验当天新制的标准品溶液对不同批次样品平行测定含量。结果:二者所测含量差异均小于1％。结论:本文提出的乙酰螺旋霉素标准品溶液的制备方法和贮藏条件是可行的。     

细菌内毒素标准品稀释方法的分析

细菌内毒素检查法在一些制剂的热原中，正逐步取代家兔试验法。细菌内毒素标准品（工作标准品或参考标准品）稀释的准确程度，直接影响制剂热原检测的准确程度，关于细菌内毒素标准品的稀释，中国药典要求，细菌内毒素工作标准品复溶后，必须在旋涡混旋器上旋混振荡２０分...     

高效液相色谱法测定金银花中绿原酸的含量

金银花具清热解毒、凉散风热之功效。用于痈肿疔疮 ,喉痹 ,丹毒 ,热血毒痢 ,风热感冒 ,温病发热 [1 ] ,为临床常用中药。金银花化学成分主要含有绿原酸 (Chlorogenic acid)和异绿原酸 (Isochlorogenic acid) [2 ] ,为抗菌有效成分。通过测定金银花中绿原酸的含量 ,可以有效控制金银花药材的质量 ,但原药材质量标准中尚缺含量测定项 ,因此 ,我们采用高效液相色谱法 ,对 2 8批不同产地金银花中绿原酸的含量进行测定 ,现报告如下。1　仪器与试药　　美国 Waters5 10型高效液相色谱仪 ,Waters4 90 E型紫外检测器、Waters6 80型梯度控制器、Wa…