胶原-壳聚糖载硫酸长春新碱微球缓释药膜的研究

目的本研究制备载硫酸长春新碱(vincristinesulfate,VCR)微球的胶原-壳聚糖缓释药膜。并考察加入壳聚糖对药膜性质的影响。选定适当的胶原壳聚糖比例制备药膜。方法采用W/O/O溶剂挥发法制备VCR的聚乳酸-羟基乙酸(poly(lactic-co-glycolicacid),PLGA)微球,并对微球性质表征,采用二次冻干法制备载VCR微球的胶原-壳聚糖药膜,对药膜的表面形态、降解性质、热力学性质及释放性质进行表征,并与释放2周后的药膜进行比较。采用高效液相法分析药物含量。结果VCR制成PLGA微球后再制备成药膜,可达到双重缓释的作用,明显减少药物突释,并延缓药物释放。添加了壳聚糖的药膜降解速度明显小于单纯的胶原药膜。在体外释放实验中,微球突释为(27.2±1.2)%,而胶原药膜的突释为(20.4±1.9)%,胶原与壳聚糖比例为9∶1、4∶1、3∶2的药膜突释分别为(20.2±2.1)%、(18.0±1.1)%和(16.3±1.8)%。结论胶原壳聚糖载VCR的缓释药膜能不同程度减少药物的突释,使药物释放更加平稳缓慢,优于单纯的胶原药膜。     

组织工程复合物腰椎间盘原位植入生物力学稳定性初步研究

目的观察组织工程复合物于犬腰椎间盘原位植入后的生物力学稳定性变化。方法以犬髓核(NP)细胞-聚乳酸-聚羟基乙酸共聚物(PLGA)支架构建组织工程复合物。将24只12个月龄Beagle犬随机分为4组,A组为非手术对照组,B组行腰椎4~5(L4~5)NP摘除,C组行L4~5NP摘除+空白支架植入,D组行L4~5NP摘除+NP细胞-PLGA支架复合物植入。于手术后第4、8、12周处死实验动物取L1~7节段脊柱,使用MTS-858 MiniⅡ型生物力学实验机测量标本L4~5节段在纯力偶距下屈伸及旋转动度,行各组间L4~5节段生物力学稳定性比较。结果 B、C、D组L4~5节段生物力学稳定性较A组均有不同程度降低;B组与C组生物力学特性差异无明显统计学意义(P>0.05);而D组与前两组相比稳定性有明显提高(P<0.05)。结论 NP细胞-PLGA支架复合物腰椎间盘原位植入能够恢复失稳节段的生物力学稳定性。     

阳离子载基因MePEG-PLGA纳米粒的制备及优化处方的筛选

目的 建立纳米粒沉淀法制备阳离子甲氧基封端的聚乙二醇-聚乳酸聚乙醇酸嵌段聚合物(MePEG-PLGA)纳米粒的方法.方法 本研究利用单因素设计和正交实验选定最优实验方案,并对纳米粒的物理性质如表面形态,粒径分布、Zeta电位、DNA结合率,保护DNA能力进行考察.结果 最优条件制备得到的纳米粒粒径大小为89.7 nm,...     

植入型表阿霉素缓释药膜的制备及体内抑瘤活性

制备用于实体肿瘤局部治疗的植入型表阿霉素缓释药膜.采用复乳.溶剂挥发法制备聚乳酸载表阿霉素缓释微球,用交联复合法制备含载药微球的植入型胶原药膜;用扫描、透射电镜、共聚焦及粒度仪等考察微球和药膜的形貌、结构、粒径及体外释放;用H22肝癌荷瘤动物模型评价其体内抑瘤效果.结果:载药微球粒径分布均匀,外观圆整,平均粒径为5.8μm;微球的载药量4.39%,包裹率为37.2%;10h内载药微球在模拟体液中的累积释放率为35%;腹腔注射载药微球与瘤体局部植入胶原药膜对H22肝癌均有明显的抑瘤效果;微球注射与药膜植入两种不同给药方式对H22肝癌抑瘤效果也存在显著性差异(P<0.05).植入型载表阿霉素缓释胶原膜具有良好的药物局部缓释特性,在肿瘤的术后局部治疗方面具有良好的临床应用前景.     

聚乳酸和聚羟基乙酸共聚物复合膜修复坐骨神经损伤

背景：聚乳酸和聚羟基乙酸复合膜具有良好的生物相容性,稳定的机械强度,无毒副作用,可控的降解速率等特点。 目的：观察聚乳酸和聚羟基乙酸共聚物膜对大鼠坐骨神经损伤的修复作用。 方法：手术显露36只Wistar大鼠坐骨神经,随机分成3组：假手术组游离坐骨神经后不作任何处理,对照组切断坐骨神经后行神经断端直接吻合,实验组于神经吻合断端包裹聚乳酸和聚羟基乙酸共聚物膜。 结果与结论：①神经电生理学检测：术后4,6周神经传导速度及波幅比较,对照组<实验组<假手术组(P均<0.05)。②组织学检测：对照组神经与周围组织粘连严重,实验组吻合口光滑平整,聚乳酸和聚羟基乙酸共聚物膜明显降解吸收,与周围组织无粘连,对照组有髓神经数量较假手术组、实验组明显减少,且轴突再生率和再生轴突成熟度较低。③辣根过氧化物酶逆行示踪检测：对照组被辣根过氧化物酶标记的阳性有髓神经纤维数量较假手术组、实验组明显减少。表明聚乳酸和聚羟基乙酸共聚物膜能减轻神经术后粘连,促进神经再生。     

提高PLGA微球载蛋白多肽类药物稳定性添加剂的研究进展

聚乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)包裹药物制成微球制剂是近年来药物输送体系的研究热点,但是PLGA包囊药物尤其是蛋白多肽类变性失活问题是研究的难点.改进生产工艺特别是使用添加剂可提高微球中包载药物的稳定性.综述了PLGA微球制备及释放过程中不同添加剂的作用特别是稳定蛋白药物的作用.     

地高辛-PLGA抗肿瘤纳米粒子的制备及其抗肿瘤活性的初步研究

目的 制备载地高辛的聚乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)纳米粒子,提高地高辛的生物利用度,降低其毒副作用.方法 建立测定地高辛-PLGA纳米粒子载药量和包封率的高效液相色谱法;采用乳化溶剂挥发法制备地高辛-PLGA纳米粒子,并通过单因素实验优化制备条件;采用噻唑蓝法评价地高辛和地高辛-PLGA纳米粒子的抗肿瘤能力.结果 以粒径为筛选条件的单因素实验结果表明,制备地高辛-PLGA纳米粒子的最佳条件为PLGA 30 mg,地高辛2 mg,二氯甲烷3 ml,聚乙烯醇质量分数0.5％,超声功率200 W.此制备条件下得到的地高辛-PLGA纳米粒子的粒径约231 nm,包封率为74.61％,载药量为5.37％,且其抗肿瘤活性优于地高辛,差异具有统计学意义(P＜0.05).结论 以PLGA为载体材料制备地高辛-PLGA纳米粒子可增强地高辛的抗肿瘤作用.     

聚乳酸-羟基乙酸共聚物-壳聚糖单向缓释膜制剂的研究

目的研制一种可以携带药物单向作用患处的膜型缓释制剂,避免对周围正常组织产生不良影响。方法昆明小鼠30只,鼠龄6周,雌性,体质量20 g左右。利用聚乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)和壳聚糖分别制作外层膜和释放膜,通过交联层将2层结合,利用单向释放实验、蛋白释放、淫羊藿苷释放(测定其光密度值)确定膜的单向缓释放性。分别取不同释放时期的膜做扫描电子显微镜观察,确定其在不同释放时期膜微观结构的变化。利用降解率确定膜的物理性质,通过细胞实验和动物实验[苏木精-伊红(HE)染色],了解材料的生物相容性和载药后对治疗的有效性。结果通过释放实验、载药实验,证明单向膜可以包载不同溶解性质(水溶性、脂溶性)的药物,具有单向缓释作用。在释药过程中膜微观结构有明显变化,15 d后降解率达到96%左右。生物相容性实验和HE染色实验证明单向膜具有良好的生物相容性。细胞实验证明包载淫羊藿苷的膜可以使骨髓间充质干细胞产生一定量的碱性磷酸酶,发生分化。结论通过以上实验,确定单向膜具有良好的生物相容性、单向释放性和缓释性,载药后有一定疗效。     

异硫氰酸荧光素标记的神经生长因子缓释微球的制备及评价

目的 探讨异硫氰酸荧光素(FITC)标记的神经生长因子缓释微球的制备,并对其进行体内外评价.方法 采用水-油-水的双乳化技术制备FITC标记的神经生长因子缓释微球.利用扫描电镜和荧光显微镜对其形态特征进行观察,并对其体内外释放情况进行研究.结果 制备的FITC标记的神经生长因子缓释微球包封率和载药量分别为(97.9±8.9)%和(4.90±0.56)%.扫描电镜结果显示所制备的微球呈圆形、形态规整、粒径分布较均匀.荧光显微镜结果显示所包载的蛋白类药物在微球内旱随机分布.缓释微球体外持续释放5周后,有73%的蛋白释放出来;荧光示踪显示在体内能够持续释放达5周以上.结论 采用水-油-水的双乳化技术制备的缓释微球可以将生物大分子药物如神经生长因子成功运载到脑内.     

载牛血清蛋白的PLGA纳米粒制备工艺的优化及特性研究

目的制备载牛血清蛋白(BSA)的PLGA纳米粒(NPs),采用正交试验设计对工艺进行优化筛选,并研究其特性。方法以聚乳酸-羟基乙酸共聚物[poly(lactic-co-glycolic acid),PLGA]为载体,二氯甲烷(DCM)和丙酮为有机溶剂,采用复乳化溶剂挥发法制备载BSA的PLGA载药纳米粒。扫描电镜观察纳米粒形态,纳米粒度分析仪测定平均粒径和粒径分布;BCA法测定纳米粒的包封率;同时考察其体外释放特性。结果优化条件下制备的纳米粒呈大小均匀的球形粒子,平均粒径为219nm,包封率为44.7%;体外释放分初期突释和后期缓释两阶段,其2～28d的释放曲线符合Higuchi方程,28d末的累积释放量为87.37%。结论以PLGA为载体的BSA纳米粒具有较小的粒径、较高包封率和明显的缓释性能。     

BSA-PLGA缓释微球的制备及优化条件的探索

目的以牛血清白蛋白(BSA)为模型蛋白、聚乳酸-聚乙二醇酸(PLGA)为包裹材料,探索微球的制备方法并优化制备工艺。方法采用复乳-溶剂挥发法制备BSA-PLGA微球,显微测量微球粒径,以微量BCA法测定微球的蛋白含量并计算包封率,进行体外释放,测定微球的累积释放量。探索BSA投药量、PLGA用量、PVA浓度、超声功率等因素对微球包封率、突释量的影响。结果通过正交实验设计,优化了微球的制备工艺,其优化条件是BSA投药量为10mg、PLGA用量为250mg、PVA浓度为1.5%、超声乳化功率为60周。结论通过控制不同的因素,可以得到较高包封率、较小突释、适当载药量和粒径的BSA-PLGA微球。     

BSA-PLGA微球的制备条件优化及不同添加剂对包封率的影响

目的探讨不同优化条件及添加剂对BSA-PLGA微球包封率的影响。方法采用水/油/水(W1/O/W2)的双乳化技术制备了BSA-PLGA微球,对影响其包封率的工艺进行了研究并考察了蔗糖、聚乙二醇和甘油对包封率的影响。结果采用优化条件制备的微球包封率为89.1%;BSA溶液中加入添加剂后,包封率可以提高到97.5%。结论采用水/油/水(W1/O/W2)的双乳化制备的BSA-PLGA微球可用于运载生物大分子药物,同时,提高内水相的粘度能够提高蛋白的包封率。     

可降解生物材料聚乳酸-羟基乙酸仿生矿化的实验研究

目的：通过对聚乳酸-羟基乙酸共聚物(poly lactide-co-glycolide，PLGA)的仿生矿化，表面改性，以提高其细胞粘附性；探讨影响仿生矿化的因素和条件，为进一步制备组织工程化人工骨提供依据和实验基础。方法：PLGA膜经碱性溶液水解处理后，应用高温显微镜测量材料表面润湿角的变化；碱处理后的PLGA膜和三维多孔PLGA分别在模拟体液(Simulated Body Fluid，SBF)中矿化14d，在1．5倍SBF中矿化9d，应用扫描电镜进行矿化物形貌观察，X射线能谱分析钙磷比值，X射线衍射仪和傅立叶转换红外光谱仪行矿化物物相分析。结果：PLGA经碱性溶液水解处理后表面亲水性明显增强，在SBF及1．5倍SBF中矿化后表面可以形成明显的矿化物；矿化物的形态与矿化液的浓度有关；矿化物主要成分为羟基磷灰石(HA)，含有碳酸根成分，钙磷比为1．53，类似于人骨无机质。结论：PLGA仿生矿化是制备结构及性质类似骨基质人工骨的可行方法。     

Weft-knitted silk-poly(lactide-co-glycolide) mesh scaffold combined with collagen matrix and seeded with mesenchymal stem cells for rabbit Achilles tendon repair

Abstract

Natural silk fibroin fiber scaffolds have excellent mechanical properties, but degrade slowly. In this study, we used poly(lactide-co-glycolide) (PLGA, 10:90) fibers to adjust the overall degradation rate of the scaffolds and filled them with collagen to reserve space for cell growth. Silk fibroin-PLGA (36:64) mesh scaffolds were prepared using weft-knitting, filled with type I collagen, and incubated with rabbit autologous bone marrow-derived mesenchymal stem cells (MSCs). These scaffold–cells composites were implanted into rabbit Achilles tendon defects. At 16 weeks after implantation, morphological and histological observations showed formation of tendon-like tissues that expressed type I collagen mRNA and a uniformly dense distribution of collagen fibers. The maximum load of the regenerated Achilles tendon was 58.32% of normal Achilles tendon, which was significantly higher than control group without MSCs. These findings suggest that it is feasible to construct tissue engineered tendon using weft-knitted silk fibroin-PLGA fiber mesh/collagen matrix seeded with MSCs for rabbit Achilles tendon defect repair.     

Synthesis and characterization of elastic PLGA/PCL/PLGA tri-block copolymers

Various ABA-type tri-block copolymers composed of poly(L-lactide) (PLA) or poly (lactide-co-glycolide) (PLGA) as the side A block and poly(ε-caprolactone) (PCL) as the middle B block were synthesized to produce rapidly degrading elastic matrices useful for tissue engineering scaffolds. The terminal di-hydroxyl groups in PCL-diol (MW 2000) were used as the initiator for the ring-opening polymerization of L-lactide or D,L-lactide and glycolide, employing stannous octoate as a catalyst. A series of copolymers were synthesized by varying the chain length and monomer composition of the PLA (PLGA) block, while the chain length of the PCL block was fixed. It was found that PLGA/PCL/PLGA copolymers with a MW of 10 000 and lactide/glycolide ratios of 50/50 and 75/25 demonstrated desirable mechanical properties of elasticity (Young's modulus 26.0 and 19.8 MPa) and showed controllable degradability over a 2-month period depending on the monomer composition.     

Biodegradable Nanoparticles for Protein Delivery: Analysis of Preparation Conditions on Particle Morphology and Protein Loading,Activity and Sustained Release Properties

Abstract

PLGA particles have been extensively used as a sustained drug-delivery system, but there are multiple drawbacks when delivering proteins. The focus of this work is to address the most significant disadvantages to the W/O/W double emulsion procedure and demonstrate that simple changes to this procedure can have significant changes to particle size and dispersity and considerable improvements to protein loading, activity and sustained active protein release. A systematic approach was taken to analyze the effects of the following variables: solvent miscibility (dichloromethane (DCM), ethyl acetate, acetone), homogenization speed (10 000–25 000 rpm), PLGA concentration (10–30 mg/ml) and additives in both the organic (sucrose acetate isobutyrate (SAIB)) and aqueous (bovine serum albumin (BSA)) phases. Increasing solvent miscibility decreased particle size, dispersity and protein denaturation, while maintaining adequate protein loading. Increasing solvent miscibility also lowered the impact of homogenization on particle size and dispersity and protein activity. Changes to PLGA concentration demonstrated a minimum impact on particle size and dispersity, but showed an inverse relationship between protein encapsulation efficiency and particle protein weight percent. Most particles tested provided sustained release of active protein over 60 days. Increasing solvent miscibility resulted in increases in the percent of active protein released. When subjected to synthesis conditions with DCM as the solvent, BSA as a stabilizer resulted in the maximum stabilization of protein at a concentration of 100 mg/ml. At this concentration, BSA allowed for increases in the total amount of active protein delivered for all three solvents. The benefit of SAIB was primarily increased protein loading.     

PLGA/O-CMC载药纳米微粒的体外降解及释药行为研究

本研究以聚乳酸-乙醇酸共聚物（PLGA）和自行制备的O-羧甲基壳聚糖（O-CMC）为原料，以5-氟尿嘧啶（5-FU）为抗癌药物模型，采用自身设计的改良复乳法制备了载药纳米微粒。微粒平均粒径为98.5nm，粒径分布指数为0.192，粒子表面∈电位为61．48eV，载药率高达18.9％。然后用SEM动态监测载药纳米粒子降解过程中表面形貌的变化，并连续追踪粒子降解过程中的质量损失和降解介质的pH变化。载药纳米粒子在PBS中的释药行为研究表明，（1）前12h的释药动力学符合Huguchi方程，具有一级释放特性；（2）在20d内的释药动力学符合零级释放特性。细胞凋亡实验结果表明载药纳米粒子对TJ905脑胶质瘤细胞增殖有明显的抑制作用。     

携载rhBMP-2微球的新型复合人工骨的制备及生物相容性研究

目的制备一种具有良好生物相容性、降解性和成骨活性、可注射的自凝固新型骨修复材料。方法采用复乳溶剂挥发方法制备携载rhBMP-2的聚乳酸与聚乙醇酸共聚物（PLGA）微球，并将其与rhBMP-2／磷酸钙骨水泥（CPC）复合，制备出rhBMP-2／PLGA微球／CPC复合人工骨。探讨材料特性包括形貌和体外rhBMP-2释放速度，采用体外细胞培养的方法测定复合材料的细胞黏附能力及其浸提液对于人骨髓基质干细胞（MSCs）增殖和成骨分化的影响。结果与单纯rhBMP-2／CPC材料相比较，复合材料rhBMP-2体外释药明显提高。材料与MSCs可良好黏附并使其增殖。体外培养时材料不同时间的浸提液对MSCs细胞的增殖具有促进作用，对于细胞成骨分化的影响与单纯CPC无明显差别。结论rhBMP-2／PLGA微球／磷酸钙骨水泥新型复合人工骨具有良好的生物相容性和活性因子缓释功能，是一种有良好应用前景的骨修复材料。