HPLC测定贯叶金丝桃中黄酮的含量

目的建立同时测定贯叶金丝桃中4种黄酮芦丁、金丝桃苷、扁蓄苷和槲皮素的HPLC分析方法。方法C₁₈柱；流动相A：水(磷酸调pH 3.1～3.5)，B：乙腈，梯度洗脱；流速1.0 mL·min^-1；检测波长254 nm。结果线性范围为芦丁1.376～8.256 μg·mL^-1(γ=0.9999)，金丝桃苷3.160～18.960 μg·mL^-1(γ=0.9996)，扁蓄苷0.968～5.808 μg·mL^-1(γ=0.9998)，槲皮素0.776～4.656 μg·mL^-1(γ=0.9993)。平均加样回收率为芦丁97.8%，RSD(n=3) 4.8%；金丝桃苷100.7%，RSD(n=3) 4.1%；扁蓄苷97.3%，RSD(n=3) 0.7%；槲皮素100.5%，RSD(n=3) 4.4%。4个化合物的精密度RSD(n=5)均<2%，重现性RSD(n=5)均<3%。结论本方法简单、有效、可行，可用于贯叶金丝桃黄酮的含量测定。     

口服制川乌提取物后大鼠体内乌头类生物碱的组织分布

目的建立HPLC法测定口服制川乌提取物后大鼠体内乌头类生物碱的方法。方法用Waters 2690@996 PAD系统，Halsil 100 C₁₈柱(250 mm×4.6 mm ID, 5 μm)，水-甲醇-二乙胺(75∶25∶0.1)为流动相，流速0.9 mL·min^-1，检测波长240 nm。结果乌头碱在心脏、脾脏、肺脏、肾脏的线性范围：0.4-100 μg·mL^-1，r分别为0.997 2,0.998 6,0.999 3,0.999 4；在肝脏的线性范围：2-200 μg·mL^-1，r为0.999 0。次乌头碱在心、肝、脾、肺、肾、脑和脊髓的线性范围：5-100 μg·mL^-1，r分别为0.999 4,0.999 7,0.999 8,0.998 4,0.999 8,0.999 8和0.999 7。乌头碱及次乌头碱的检测限(S/N=3)为0.4 μg·mL^-1。各组织中的回收率：乌头碱为88.7%-102.2%，次乌头碱为865%-101.3%。结论本法为确证乌头类生物碱的中毒提供了科学有效的依据。     

改变检测波长HPLC法测定小檗属植物根中的生物碱

应用改变检测波长反相高效液相色谱法测定了5种小檗属植物根中的尖刺碱、小檗胺、异汉防已碱、非洲防己胺、药根碱、巴马亭和小檗碱。色谱柱为μ-Bondapakphenyl;流动相为0.02mol·L^-1磷酸二氢钾乙腈(7:3);0.0～10.0min用203nm检测,10.0～30.0min用346nm检测;流速1.0ml·min^-1。根据这7种生物碱的紫外吸收波长的不同在色谱过程改变检测波长,提高了分析的灵敏度和准确度。     

高灵敏度HPLC测定大鼠血浆中益母草碱浓度及其药动学研究

目的 建立一种高灵敏度HPLC测定大鼠血浆中益母草碱浓度,并研究益母草碱在大鼠体内的药动学特征。方法 大鼠口服益母草碱混悬溶液（50 mg·kg^-1）后,不同时间点尾静脉采血,以苯甲酰精氨酸乙酯为内标,血浆样品经酸化后乙酸乙酯萃取,采用HPLC进行测定。色谱条件：采用Diamonsil C₁₈（250 mm×4.6 mm,5 μm）为色谱柱,以乙腈-0.02 mol·L^-1磷酸二氢钾缓冲溶液（pH 3.0）（22：78）为流动相,流速1.0 mL·min^-1,柱温35℃,检测波长277 nm。并利用PKS 1.0软件计算药动学参数。结果 益母草碱血浆浓度在0.05~1.5 μg·mL^-1内线性关系良好（r=0.999 1）。方法的定量下限（LLOQ）为0.05 μg·mL^-1（RSD=12.8%,n=5）;提取回收率为76.5%~82.5%;批内、批间准确度为96.9%~104.9%;日内、日间精密度均<10%;质控样品经反复冻融3次及-20℃放置1个月后均较稳定。大鼠口服益母草碱后,药-时曲线符合二室开放模型,主要药动学参数为t_max=0.95 h,C_max=0.51 μg·mL^-1,t_1/2=3.64 h,AUC_0-t=1.56 μg·mL^-1·h^-1,AUC_0-∞=1.78 μg·mL^-1·h^-1。结论 该方法准确度、灵敏度高,重复性好,可用于生物样品中益母草碱浓度的测定。     

UHPLC测定芎菊上清丸中9种成分含量及化学模式分析

目的 建立UHPLC波长切换法同时测定芎菊上清丸中9种成分的含量方法。方法 采用Agilent Ecilipse C₁₈（2.1 mm×100 mm,1.6 μm）色谱柱,流动相：甲醇-0.05%磷酸水溶液,梯度洗脱;流速为0.3 mL·min^-1;检测波长：327,237,320,345,278,254 nm;柱温30℃;进样量2 μL;并采用SPSS 22.0统计软件对含量测定结果进行主成分分析与聚类分析。结果 绿原酸、3,5-二咖啡酰奎宁酸、栀子苷、甘草苷、阿魏酸、盐酸小檗碱、黄芩苷、升麻素苷、5-O-甲基维斯阿米醇苷线性范围分别为4.30~68.80 μg·mL^-1（r=0.999 0）、6.66~106.56 μg·mL^-1（r=0.999 2）、7.67~122.72 μg·mL^-1（r=0.999 4）、4.88~78.08 μg·mL^-1（r=0.999 1）、2.37~37.92 μg·mL^-1（r=0.999 1）、6.50~103.92 μg·mL^-1（r=0.999 2）、8.85~141.60 μg·mL^-1（r=0.999 4）、0.88~14.08 μg·mL^-1（r=0.999 7）、0.74~11.92 μg·mL^-1（r=0.999 3）;平均加样回收率（n=9）均在99.42%~103.10%,RSD均<2.0%。主成分分析与聚类分析均可将不同生产厂家的芎菊上清丸很好地分类,且分类结果一致。结论 所建立的多成分方法快捷、准确、重复性好,可用于芎菊上清丸的质量控制。     

银桂抗炎合剂质量标准研究

目的 建立银桂抗炎合剂的质量标准。方法 采用薄层色谱法对制剂中的丹参、紫花地丁进行定性鉴别,采用HPLC对主要有效成分盐酸小檗碱进行含量测定。结果 丹参、紫花地丁的薄层色谱法鉴别专属性强,阴性无干扰;含量测定结果显示,盐酸小檗碱浓度在7.80~78.00 μg·mL^-1（r=0.999 3）内与峰面积呈良好的线性关系,平均加样回收率为98.09%（n=6）,RSD=1.09%。结论 本方法简便、专属性强,重复性好,可用于银桂抗炎合剂的质量控制。     

不同厂家黄连配方颗粒中盐酸小檗碱、盐酸巴马亭和盐酸药根碱含量比较

目的　考察不同厂家黄连配方颗粒中盐酸小檗碱、盐酸巴马亭和盐酸药根碱含量。方法　用高效液相色谱法测定盐酸小檗碱、盐酸巴马亭和盐酸药根碱含量。色谱柱为Diamonsil C18 (4 6 mm×250 mm, 5μm); 流动相为0 2 mol·L-1磷酸二氢钠(用磷酸调节pH至3 0) 乙腈(70∶30); 流速为1 mL·min-1; 柱温为30 ℃; 检测波长为345 nm。结果　不同厂家黄连配方颗粒中盐酸小檗碱含量为3 .67~72. 53 mg·包-1, 盐酸巴马亭含量为0 .60~28. 70 mg·包-1, 盐酸药根碱含量为5. 40~26 .54 mg·包-1。结论　不同厂家产品盐酸小檗碱、盐酸巴马亭和盐酸药根碱含量差异显著。     

基于多指标评价的金蕾颗粒质量标准研究

目的 基于多指标评价建立金蕾颗粒的质量标准。方法 根据2020年版《中国药典》颗粒剂项下相关规定,对金蕾颗粒性状、溶化性、粒度、水分进行评价;采用薄层色谱（TLC）法对金蕾颗粒中的湿生扁蕾、金钱草进行定性鉴别;采用高效液相色谱（HPLC）法同时测定当药黄素、木犀草素、山柰酚的含量,色谱柱Agilent SB-C₁₈（150 mm×4.6 mm, 5 μm）,以0.10%磷酸水溶液(A)-甲醇(B) 为流动相进行梯度洗脱,检测波长为360nm,流速1.0 mL·min^-1,柱温30 ℃,进样量5 μL。结果 金蕾颗粒性状、溶化性、粒度、水分均符合2020年版《中国药典》相关规定;湿生扁蕾、金钱草的薄层色谱斑点清晰,无干扰,专属性好;当药黄素、木犀草素和山柰酚分别在20.0～240.0 μg·mL^-1(r=0.999 8)、24.0～288.0 μg·mL^-1(r=0.999 9)、0.4～10.0 μg·mL^-1(r=0.999 9)范围内呈良好线性关系,平均加样回收率分别为99.23%、99.42%、99.49%（n=6）,RSD分别为1.88%、1.32%、2.84%（n=6）。结论 本研究所建立的金蕾颗粒定性定量分析方法专属性好,且操作简单结果准确,为金蕾颗粒的质量控制研究奠定基础。     

定量核磁共振技术测定注射用丹参多酚酸中咖啡酸、丹参素、原儿茶酸和阿魏酸

目的 建立定量核磁共振技术(qNMR)同时测定注射用丹参多酚酸中咖啡酸、丹参素、原儿茶酸和阿魏酸。方法 通过qNMR测定4种单体酚酸，脉冲序列^zg30抑制水峰，谱宽设定8 012.8 Hz，温度为25℃，采样点数为131 072，采集时间为4.09 s，弛豫延迟时间为8.26 s，纵向弛豫时间为1.25 s；采样次数为16，接收器增益值为35.6，数字化仪分辨率值为18，空扫次数为4，发射机频率偏移为6.0×10^-6。以三氟乙酸-d为内标，根据峰面积比与质量比计算4种单体酚酸的含量。结果 咖啡酸、丹参素、原儿茶酸、阿魏酸分别选取9.47×10^-6(s，H-7)、8.02×10^-6(s，H-8)、5.86×10^-6(s，H-8)、12.79×10^-6(s，H-8)处的信号为定量峰；分析物在12 h后稳定性较差，所有样品在制备后12 h内完成测定；咖啡酸在0.103～1.625 μg·mL^-1(r²=0.999 3)，丹参素在2.256～3.194 μg·mL^-1(r²=0.999 5)，原儿茶酸在9.699～13.584 μg·mL^-1(r²=0.999 8)，阿魏酸在1.566～2.649 μg·mL^-1(r²=0.999 6)均呈良好的线性关系；加样回收率分别为104.9%、101.5%、104.1%、101.4%，RSD值分别为1.6%、2.1%、2.3%、1.5%；精密度、准确性、重复性均良好。结论 建立的qNMR可同时测定注射用丹参多酚酸中咖啡酸、丹参素、原儿茶酸和阿魏酸。     

口服固体制剂中淀粉类辅料含量的“逆向工程”分析

目的：建立盐酸小檗碱片、格列吡嗪片、卡马西平片、盐酸雷尼替丁胶囊、茶碱缓释片、对乙酰氨基酚片6种口服固体制剂中淀粉类辅料含量的"逆向工程"分析方法。方法：口服固体制剂经有机溶剂提取去除干扰成分,采用碘溶液（称取碘1.3 g、碘化钾3.6 g加水溶解稀释至100 mL）显色后,在可见波长575 nm处测定吸光度。结果：淀粉浓度在20.288~71.008 μg·mL^-1范围内线性关系良好（r=0.999）,6种口服固体制剂的方法回收率均在85%~110%（n=9,RSD不超过5.0%）,重复性（n=6）RSD均小于5.0%。结论：所建立的淀粉类辅料含量测定方法准确、可靠、操作方便,适合用于口服固体制剂中淀粉、玉米淀粉、预胶化淀粉等辅料的含量测定。     

Determination of the alkaloid content in different parts of some Mahonia plants by HPCE

The contents of three quaternary alkaloids (berberine, palmatine, jatrorrhizine) in different parts of the genus Mahonia were determined by high-performance capillary electrophoresis (HPCE). The background electrolyte system composed of 0.1 M phosphate buffer (pH 7.0)-methanol (2:1 V/V) was found to be the most suitable solution for this separation. Brucine was used as internal standard. The linear calibration ranges were 0.004986-0.4986 mg ml-1 (r = 0.9990, n = 5) for berberine, 0.005049-0.5049 mg ml-1 (r = 0.9996, n = 5) for palmatine, and 0.005058-0.5058 mg ml-1 (r = 0.9984, n = 5) for jatrorrhizine. The relative standard deviations were 1.56%, 1.02%, and 1.60% for berberine, palmatine, and jatrorrhizine (n = 6), respectively. The recoveries were determined to be 96.00-101.66% for berberine, 100.15-102.97% for palmatine, and 96.68-102.44% for jatrorrhizine. By using proposed HPCE method, three alkaloids were well-separated within only 5.0 min.     

RP-HPLC法测定黄连上清片中盐酸小檗碱、盐酸药根碱和盐酸巴马汀的含量

目的:建立测定黄连上清片中盐酸小檗碱、盐酸药根碱和盐酸巴马汀含量的方法。方法:采用反相高效液相色谱法。色谱柱为AgilentC18反相柱,流动相为乙腈-25mmoL·L-1庚烷磺酸钠和50mmoL·L-1磷酸二氢钾溶液(含0.14%三乙胺,磷酸调pH至3.0)=30:70,检测波长为348nm,柱温为30℃,流速为1.0mL·min-1,进样量为5μL。结果:盐酸小檗碱检测浓度在40.48～141.70μg·mL-1范围内与峰面积积分值呈良好线性关系,平均加样回收率为100.34%,RSD=1.14%;盐酸药根碱检测浓度在6.04～14.08μg·mL-1范围内与峰面积积分值呈良好线性关系,平均加样回收率为99.70%,RSD=1.02%;盐酸巴马汀检测浓度在10.10～30.30μg·mL-1范围内与峰面积积分值呈良好线性关系,平均加样回收率为100.02%,RSD=1.17%。3批样品中盐酸小檗碱、盐酸药根碱和盐酸巴马汀的含量分别为每片40.64、6.09、10.50μg,40.35、6.05、10.43μg,40.26、6.03、10.40μg。结论:本方法灵敏、准确,专属性强,重复性好,可作为黄连上清片的质量控制方法。     

非共价涂层毛细管电泳法测定黄连及其炮制品中3种生物碱的含量

目的建立同时测定黄连药材中小檗碱、巴马汀和药根碱含量的毛细管电泳方法。方法采用聚凝胺-聚丙乙烯磺酸钠涂层毛细管柱(33 cm×50μm I.D.,有效长度为24.7 cm),运行缓冲液为500 mmol.L-1Tris-甲醇(体积比为70∶30)缓冲溶液(8 mol.L-1,磷酸调节pH 7.5),分离电压为22 kV,检测波长为230 nm,温度为20℃,压力自动进样(5 000 Pa×6 s),阴极检测。结果在所选电泳条件下,黄连中的生物碱组分在4.5 m in内得到良好分离,盐酸小檗碱、盐酸巴马汀和盐酸药根碱的线性范围分别为199.8~1 998、48.45~484.5和47.3~473 mg.L-1,线性关系良好,加样回收率分别为102.8%、100.2%和97.7%。结论该方法可应用于黄连药材中生物碱的分析测定。     

延胡索中5种生物碱的含量测定及稳定性研究

目的:建立延胡索中5种主要生物碱的含量测定方法,并比较产地初加工方法和炮制方法对延胡索中生物碱含量的影响。方法:采用超声提取法提取样品,以高效液相色谱法测定收集自浙江磐安的多个不同延胡索样品及其炮制品中5种主要生物碱的含量。结果:延胡索丙素、巴马汀、小檗碱、去氢延胡索甲素与延胡索乙素检测浓度的线性范围分别为0.05～0.50、0.05～0.50、0.02～0.20、0.20～2.00、0.20～2.00μg.mL-1,平均加样回收率在96.7%～100.2%之间。延胡索生品根据药典规定的原药材处理方式处理后,其生物碱含量降低一半左右,在此基础上的进一步炮制过程对原药材中5种生物碱的含量影响不大。结论:详备的延胡索原药材制备、炮制与生物碱含量检测方法的制定对延胡索药材的质量稳定将起到重要的作用。     

川芎中川芎嗪和阿魏酸含量的毛细管电泳测定

目的：研究川芎中川芎嗪和阿魏酸的毛细管电泳分离分析的可行性。方法：通过用毛细管区带电泳分离、紫外检测模式研究内标、电泳缓冲液、进样方式、分离电压等对样品中川芎嗪和阿魏酸分离与定量的影响,优化实验条件。结果：以对硝基苯甲酸为内标,未涂层熔融石英毛细管(39.5 cm×50 μm ID,有效分离长度34.8 cm)为分离通道,30 mmol.L^-1硼砂缓冲液(pH 9.43)为电泳介质,34 kPa.s压力进样,17 kV分离电压,295 nm检测,川芎嗪和阿魏酸分别在7～423 μg.mL^-1和4～900 μg.mL^-1范围内可进行定量检测,回收率分别为100.9％±1.9％和99.8％±1.0％。结论：毛细管电泳法可用于川芎中川芎嗪和阿魏酸的同时分离分析。     

高效液相色谱法测定黄连药材中小檗碱型生物碱的含量

目的:分离并测定黄连药材中小檗碱型生物碱的含量。方法:采用ODS柱(15 mm×6.0 mm),以乙腈-50 mmol·L~(-1)磷酸二氢钾溶液(磷酸调 pH=3.0)(50:50),内含 25 mmol·L~(-1)SDS为流动相,345nm检测。结果:在以上条件下,药根碱、表小檗碱、黄连碱、巴马亭和小檗碱5种生物碱可以完全分离,测定了8种不同黄连药材中4种生物碱的含量。结论:本法可用于黄连药材的研究,也可用于黄连等含小檗碱中药材及制剂的常规检验。     

HPLC-FLU法测定血清中黄藤素的含量

目的　建立血清样品中黄藤素的高效液相色谱－荧光检测法。方法　色谱柱为LiChrosorb SI 60（5 μm） 20 cm×4.0 mm ID; 流动相为二氯甲烷-甲醇-二乙胺-冰醋酸（90∶9∶0.4∶0.5）;流速为1.0 mL.min^-1;荧光检测E_x＝365　nm,E_m＝510　nm。血清样品加13-甲基小檗碱（内标）,用三氯乙酸-氯仿提取,水浴加温、氮气吹干,用二氯乙烷溶解进样。结果　黄藤素和内标的保留时间分别为8.4 min和7.1 min。黄藤素的最低检测浓度为0.1 ng.mL^-1。在0.1～10.0 ng.mL^-1有良好线性关系(γ=0.9999)。血药浓度测定天内、天间精密度分别为0.94％～1.85％和0.15％～6.47％。结论　用高效液相色谱-荧光检测法测定黄藤素的血药浓度,有灵敏、专一和快速的优点,可满足药代动力学研究的需要。     

一测多评法测定黄连须中的5种生物碱

目的 采用一测多评法同时测定黄连须中5种生物碱(盐酸小檗碱、盐酸药根碱、盐酸表小檗碱、盐酸黄连碱和盐酸巴马汀)的含量.方法 以盐酸小檗碱为内参物,采用HPLC法测定其与盐酸药根碱、盐酸表小檗碱、盐酸黄连碱、盐酸巴马汀的相对校正因子,利用该相对校正因子计算其他4种生物碱的含量;同时利用外标法测定5种生物碱的含量,比较两种测定方法的差异,验证一测多评法的可行性和准确性.结果 在线性范围内,盐酸小檗碱与盐酸药根碱、盐酸表小檗碱、盐酸黄连碱、盐酸巴马汀的相对校正因子分别为1.128、1.008、1.070、1.025,在不同实验条件下,相对校正因子的重复性良好,5种生物碱成分含量的计算值与实测值间无显著性差异.结论 一测多评法同时测定黄连须中5种生物碱的含量是可行的、准确的.