神经生长因子对哮喘大鼠Th1/Th2类细胞因子分泌的调控作用

目的探讨支气管哮喘时神经生长因子(NGF)对Th1/Th2类细胞因子分泌的调控作用。方法随机将SD大鼠分为4组:正常对照组、哮喘组(建立哮喘模型)、外源性NGF干预组(NGF组)、抗NGF抗体干预组(抗NGF抗体组),每组8只。14d后取肺组织进行HE染色,观察病理改变;免疫组化和酶联免疫吸附试验(ELISA)检测肺组织的NGF蛋白,Th1类细胞因子γ-干扰素(IFN-γ)、Th2类细胞因子白细胞介素4(IL-4)蛋白水平。结果哮喘组支气管、肺组织炎症明显;肺组织NGF蛋白的分泌水平和免疫阳性信号也显著增高(P<0·001);IL-4蛋白水平明显增强(P<0·05),而IFN-γ蛋白水平明显减低(P<0·001);肺组织中的NGF蛋白与IFN-γ/IL-4蛋白比值呈显著负相关(P<0·01)。NGF组更进一步增强上述变化(P<0·05),而抗NGF抗体干预组显著缓解上述变化(P<0·05)。结论NGF可诱导哮喘大鼠神经源性炎症,并分别通过增强Th2类细胞因子分泌,减弱Th1细胞因子分泌,诱导哮喘Th1/Th2免疫失衡效应。     

吡格列酮对哮喘模型TH1/TH2细胞因子表达的影响

目的 初步探讨过氧化物酶增殖活化受体-γ（PPAR-γ）激动剂吡格列酮对哮喘模型TH1/TH2细胞因子表达的影响及其机制。方法 18只BALB／c小鼠随机分为正常对照组、哮喘组和药物组，每组各6只。采用Western blot方法检测各组小鼠肺组织T-bet和GATA3的表达，同时运用流式细胞仪检测小鼠脾细胞胞内细胞因子白细胞介素4（IL-4）和干扰素-γ（IFN-γ）的表达。结果 哮喘组肺组织T-bet的表达与正常对照相比显著升高（P〈0．01），GATA3无显著变化（P〉0．05）；经吡格列酮治疗的小鼠肺组织T-bet的表达与哮喘鼠比显著增高（P〈0．01），而GATA3无显著变化（P〈0．05）。哮喘鼠T细胞内IL-4／WN-γ比值与正常组相比明显升高（P〈0．01）；经吡格列酮治疗后细胞内IL-4，IFN-γ比值明显降低（P〈0．01）。结论 PPAR-γ激动剂吡格列酮可能通过参与调控TH1细胞转化过程中重要转录因子T-bet的表达，改变IL-4／IFN-γ比值，从而改善相应的炎性症状，PPAR-γ可能成为哮喘治疗的新靶点。     

支气管哮喘患儿治疗前后外周血Th1／Th2相关细胞因子的临床分析

目的：探讨支气管哮喘患儿治疗前后外周血Th1／Th2相关细胞因子水平的变化及临床意义。方法i应用放射免疫分析和酶联法对31例支气管哮喘患儿进行了外周血中Th1型细胞因子（IL-2、IFN-1）和Th2型细胞因子IL-4、IL-10浓度,并与35名正常人组作比较。结果i支气管哮喘患儿在治疗前血清IL-2、IFN-^y水平均非常显著地低于正常儿组（P〈0．01）,而血清IL4、IL-10水平又非常显著地高于正常儿组（P〈0．01）。经治疗1个月后则与正常儿组比较无显著性差异（P〉0．05）。结论：支气管哮喘患儿存在Th1／Th2细胞免疫失衡。Th1免疫功能低下。IFN-1下调可能是参与哮喘发病机制的重要原因,对哮喘有负向调节作用。哮喘患儿存在Th2细胞免疫功能亢进,以IL-4、IL-10为代表的Th2免疫功能在儿童哮喘的发病中发挥正性促炎作用。     

一氧化氮对哮喘气道细胞因子表达的调控作用

目的　探讨内源性一氧化氮 (NO)对支气管哮喘肺组织核因子 κB(NF κB)活性的调节作用及NO对哮喘关键性炎症介质———白细胞介素 4 (IL 4 )、白细胞介素 5 (IL 5 )、gamma干扰素 (IFN γ)的调控作用是否通过NF κB介导。方法　采用病理学观察、免疫组织化学技术、原位组织杂交、电泳迁移率改变试验 (EMSA)、NO代谢产物测定等方法 ,应用NO供体左旋精氨酸 (L Arg)、一氧化氮合酶抑制剂硝基左旋精氨酸甲酯 (L NAME)、NF κB抑制剂二硫代氨基甲酸吡咯烷 (PDTC)作为工具药 ,从哮喘动物模型的整体水平上观察内源性NO对支气管哮喘肺组织NF κB蛋白表达和活性的影响及其对IL 4、IL 5、IFN γmRNA表达的影响。结果　整体应用大剂量的L Arg能使哮喘气道增多的炎性细胞减少 (P <0 .0 5 ) ,NAME能拮抗这一作用 (P <0 .0 5 ) ,PDTC亦能使哮喘气道增多的炎性细胞减少(P <0 .0 5 ) ;L Arg能使哮喘气道P6 5表达及NF κB的活性降低 (P <0 .0 5 ) ,NAME能拮抗这一作用 (P<0 .0 5 ) ,PDTC亦能使哮喘气道P6 5表达及NF κB的活性降低 (P <0 .0 5 ) ;大剂量的L Arg还能使哮喘气道表达增高的IL 4、IL 5mRNA的表达降低 (P <0 .0 5 ) ,而对IFN γ无影响 (P >0 .0 5 ) ,PDTC亦能使哮喘IL 5的表达降低 (P <0 .0 5 ) ,而对IL 4、IF     

雷公藤多甙对哮喘患者TH1/TH2细胞因子平衡状态的调节作用

目的：探讨雷公藤多甙（GTT）对哮喘患者的抗炎、平喘作用的机理。方法：选择60例过敏性哮喘患者随机分为GTT治疗组和对照组，治疗前后分别采用ELISA法检测PBMC培养液上清液中白细胞介素4（IL－4）、γ干扰素（IFN－γ）、可溶性白细胞介素2受体（sIL－2R）、可溶性IgE低亲和力受体（sCD23)含量，采用逆转录PCR检测IL－4mRNA表达量，采用嗜碱粒细胞脱颗粒试验检测嗜碱粒细胞释放能力（BRA）。结果：哮喘患者上清液中IL－4、sIL-2R、sCD23含量、IL－4mRNA表达量及BRA均显著增高，而IFN－γ含量显著减少。治疗组经GTT治疗后，上清液IL－4、sIL-2R、sCD23含量、IL－4mRNA表达量及BRA均显著降低，而INF－γ含量显著增高。对照组治疗前后上述指标差异均无显著性。结论：GTT能显著抑制哮喘患者T细胞和B细胞的活化，能纠正体内TH1和TH2细胞因子的失衡状态，并能降低BRA。这可能是GTT抗炎、平喘作用的重要机理之一。     

螺旋藻对实验性变应性鼻炎大鼠血清TH1/TH2细胞因子表达的影响

目的　观察螺旋藻对实验性变应性鼻炎大鼠血清TH1 TH2细胞因子表达的影响 ,以探讨其治疗机制。方法　用卵清蛋白致敏大鼠制成变应性鼻炎动物模型 ,口服螺旋藻治疗 ,观察其行为学差异 ;组织病理学方法观察鼻黏膜改变 ;用酶联免疫吸附法 (ELISA)对血清中TH1细胞因子IFN γ、IL 2和TH2细胞因子IL 4、IL 5进行检测。结果　行为学得分 ,阳性对照组 (7.8± 1.0 3)明显高于实验组 (1.6± 1.35 )和正常对照组 (0 ) ,差异有显著性 (P <0 .0 1) ;实验组鼻黏膜炎性反应明显轻于阳性对照组 ;实验组IFN γ、IL 2水平明显高于阳性对照组 ;差异有显著性 (P <0 .0 1) ;实验组IL 4、IL 5表达水平明显低于阳性对照组 ;差异有极显著性意义 (P <0 .0 1)。结论　螺旋藻通过调节TH1和TH2细胞因子的表达 ,纠正失衡的TH1 TH2的细胞因子网络而对变应性鼻炎产生治疗作用。     

特发性血小板减少性紫癜患者Th1/Th2的细胞因子水平及临床意义

目的:检测特发性血小板减少性紫癜(ITP)患者外周血Th1(IL-2、IFN-γ)及Th2(IL-4、IL-10)细胞因子的变化,探讨ITP患者发病与Thl/Th2优势活化状态之间的关系.方法:通过酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测30例ITP患者治疗前、治疗后及26例健康志愿者外周血清中IL-2、IFN-γ、IL-4、IL-10水平.结果:ITP患者治疗前IFN-γ及IL-2因子水平高于治疗后和对照组,差异有统计学意义(P＜0.05),而IL-4及IL-10因子治疗前水平低于治疗后和对照组,差异有统计学意义(P＜0.05).结论:Thl型细胞因子介导的免疫应答在ITP的发病机制中占主导地位,糖皮质激素治疗可调整Th1/Th2细胞因子的偏移状态.     

乙型肝炎病毒感染者血清TH1/TH2型细胞因子水平及意义

TH1 型细胞因子主要促进细胞免疫 ,在抗病毒免疫中具有重要作用。TH 细胞亚群失衡将严重扰乱体液免疫和细胞免疫。本研究通过检测不同乙型肝炎病毒 (HBV)感染状态下血清TH1 TH2 型细胞因子水平 ,来探讨其在HBV感染中的作用、与慢性乙型肝炎发病的关系及其作为慢性HBV感染者常规临床检测的可能性等。1　对象与方法1.1　研究对象　HBV感染者 38例 (男 2 4例 ,女 11例 ,18～4 1岁 ) ,其中急性乙型肝炎 1例、慢性乙型肝炎 14例、慢性无症状携带者 (AsC) 2 0例、AsC重叠甲型肝炎病毒 (HAV)、戊型肝炎病毒 (HEV)感染各 1例、急性甲型…     

哮喘患者血清细胞因子的变化及其临床意义

目的探讨哮喘患者血清白细胞介素-25(IL-25)、白细胞介素-27(IL-27)在哮喘发展过程中的含量变化及其临床意义。方法分别选择64例急性加重期和临床缓解期哮喘患者,采用免疫散射比浊法测定血清中急性时相反应蛋白[铜兰蛋白(CER)、转铁蛋白(TRF)、α1-酸性糖蛋白(AAG)和结合珠蛋白(HP)]的浓度;ELISA法检测血清IL-25、IL-27浓度,并与30名健康对照者进行比较。并对急性加重期哮喘患者血清细胞因子IL-25、IL-27与急性时相反应蛋白(CER、TRF、AAG和HP)行相关性分析。结果哮喘患者临床缓解期组和急性加重期组HP、IL-25血清浓度均显著高于健康对照组(P<0.05),急性加重期较临床缓解组高(P<0.05);哮喘患者急性加重期TRF的含量显著低于健康对照组和临床缓解组(P<0.05),临床缓解期组TRF的含量出现上调,但与健康对照组比较无统计学意义(P>0.05);急性加重期哮喘患者血清IL-25、IL-27与急性时相反应蛋白(CER、TRF、AAG和HP)均无明显的相关性(P>0.05)。结论 HP能作为较好反映哮喘病情活动的指标,表明IL-25参与了哮喘的炎性病理过程,但其在哮喘炎性病理过程中起何具体作用有待进一步研究。     

T-bet、GATA-3在Th1、Th2细胞分化中的作用及意义

Th1、Th2细胞分化及其相互之间的平衡在免疫应答的调节中起重要作用,Th1／Th2细胞分化受多种因素影响,其中,转录因子T-bet、GATA-3对其具有重要的调节作用。多种疾病的发生、发展和预后均涉及Th1／Th2分化失衡。T-bet和GATA-3对Th1／Th2分化的调控作用、在疾病中的可能作用机制及其研究进展,有助于揭示多种疾病的发病机制,为治疗疾病提供帮助。     

维药祖发奇尼对哮喘大鼠肺组织T-bet、GATA-3、STAT-3 mRNA表达水平的影响

目的:研究维吾尔药祖发奇尼对哮喘大鼠肺组织T-bet、GATA-3、STAT-3 mRNA的表达水平的影响,探讨祖发奇尼治疗哮喘的免疫机制。方法:将大鼠随机分为正常对照组,哮喘模型组,地塞米松治疗组及祖发奇尼高、低剂量治疗组。采用卵清白蛋白(OVA)、氢氧化铝[Al(OH)3]及百白破疫苗联合致敏和OVA生理盐水雾化激发的方法制备哮喘模型。采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测各组大鼠肺组织T-bet、GATA-3、STAT-3 mRNA的表达水平。结果:正常对照组与哮喘模型组、哮喘模型组与各治疗组大鼠肺组织T-bet、GATA-3、STAT-3 mRNA的表达水平差异均有统计学意义(P<0.05);与模型组比较,祖发奇尼治疗后哮喘大鼠肺组织GATA-3、STAT-3 mRNA的表达水平显著降低(P<0.05),而T-bet的表达水平显著增高(P<0.05);祖发奇尼高剂量治疗组大鼠肺组织GATA-3、STAT-3 mRNA的表达水平明显低于低剂量治疗组(P<0.05),而T-bet的水平明显高于低剂量治疗组(P<0.05)。各组大鼠肺组织T-bet mRNA和GATA-3 mRNA表达水平呈负相关关系(r=-0.696),STAT-3mRNA表达水平与T-bet mRNA和GATA-3 mRNA表达水平分别呈负、正相关(r=-0.767,r=0.772),P值均<0.05。结论:祖发奇尼可能在转录水平对Th1、Th2和Th17的分化进行调节,发挥抗炎作用。     

转录因子T-bet/GATA-3在致敏大鼠脾CD4+T细胞中失衡表达和调节的研究

目的 探讨转录因子T-bet/GATA-3在卵白蛋白(OVA)致敏大鼠脾CD4+T细胞中失衡表达,及地塞米松和咪喹莫特对其的调节作用.方法 从SD大鼠脾脏中分离获得CD4+T细胞,ELISA法测定细胞上清液中细胞因子IL-4、IL-5和IFN-γ含量;Western blot检测CD4+T细胞中T-bet和GATA-3表达.结果 在4个时间点培养细胞上清液中,空白对照组检测到低水平IFN-γ;随着培养时间延长,阳性对照组IL-4和IL-5持续增加,IFN-γ保持在低水平.地塞米松干预组IL-4、IL-5和IFN-γ低表达,均低于空白对照组(P＜0.01);咪喹莫特干预组IL-4和IL-5表达降低,IFN-γ表达增强.此作用从培养6 h开始,12 h达高峰,持续至24 h.在4个时间点培养细胞中,空白对照组检测到转录因子T-bet和GATA-3蛋白表达;随着细胞培养时间延长,阳性对照组T-bet表达降低,GATA-3表达增加.地塞米松干预组T-bet低表达,GATA-3在24 h内表达水平无明显变化;咪喹莫特干预组与阳性对照组比较,GATA-3表达降低,T-bet表达增强.此作用从细胞培养6 h开始,12 h达高峰,持续至24 h.结论 OVA致敏大鼠脾CD4+T细胞中,转录因子T-bet/GATA-3失衡表达,即T-bet低表达,GATA-3异常高表达;地塞米松抑制CD4+T细胞中T-bet表达,对GATA-3表达无明显作用;咪喹莫特通过调节CD4+T细胞中T-bet和GATA-3平衡表达,纠正TH1和TH2细胞的失衡,提示咪喹莫特可能在由TH2细胞介导免疫异常的哮喘中发挥作用.     

泡球蚴原头蚴抗原和卡介苗对Th1/Th2转录因子和细胞因子的影响

目的探讨泡球蚴原头蚴抗原和卡介苗免疫小鼠对泡球蚴攻击感染的调节机制。方法用实时定量聚合酶链反应检测鼠脾组织中GATA-3及T-bet的mRNA表达水平;酶联免疫吸附法检测鼠血清中白介素4和γ干扰素的含量。结果卡介苗免疫攻击组与PBS对照组的转录因子(T-bet mRNA)和其标志性细胞因子(INF-γ)的表达量,差异有统计学意义(P<0.05)。结论实验证明卡介苗(BCG)有上调Th1型免疫反应的作用,用BCG可以干预或治疗由泡球蚴抗原诱导的晚期泡球蚴(AE)动物的免疫抑制状态。     

气道应用T-bet重组腺病毒抑制哮喘小鼠过敏性气道炎症

目的探讨气道应用T-bet重组腺病毒(AdT-bet)对哮喘小鼠气道炎症反应的影响及机制。方法C57BL/6小鼠随机分为4组,实验组(A组)、对照病毒组(B组)、PBS对照组(C组)和正常对照组(D组),A、B、C组采用卵蛋白(OVA)、明矾建立哮喘模型,分别于第19天激发前气道内单次应用50μLAdT-bet(108pfu)、AdLacZ、PBS。26d取肺泡灌洗液(BALF)测定细胞成分、IL-4、IL-5、IFNγ浓度,取血测定血浆IgE水平,观察肺组织病理学变化及GATA-3表达。结果1)A组BALF中的嗜酸粒细胞(EOS)为(0.5±0.2)%明显低于B组(21.2±6.9)%和C组(20.9±6.8)%(P<0.01);2)A组BALF中的IL-4(6.7±3.8)pg/mL和IL-5(12.4±4.9)pg/mL的水平明显低于B组[IL-4(91.4±22.5)pg/mL和IL-5(55.6±10.6)pg/mL]和C组[IL-4(89.8±23.6)pg/mL和IL-5(56.7±11.5)pg/mL](P<0.01),而IFNγ的水平(710±45)pg/mL则明显高于B组(13.1±3.5...     

NOD小鼠胰腺免疫应答格局的动态变化

目的：研究NOD小鼠胰腺免疫应答格局的变化。方法：动态观察小鼠PLN细胞中转录因子T-bet、GATA-3表达水平,以及小鼠胰腺病理变化。结果：小鼠PLN细胞中转录因子T-bet表达水平升高、GATA-3表达水平降低。H-E染色发现胰腺炎症病变程度随鼠龄增长而不断加重。结论：小鼠自身免疫应答不断向Th1偏移,最终导致了糖尿病的发作。     

Pathological role of IL-6 in the experimental allergic bronchial asthma in mice

Although allergic asthma was described to be associated with the presence of mucosal T-helper (Th)2 cells, it is not entirely clear which factors are responsible for priming of T cells to differentiate into Th2 effector cells in this disease. Interleukin (IL)-6 has been recognized as important because it is secreted by cells of the innate immunity and induces the expansion of the Th2 effector cells, which are major players of the adaptive immune responses. Additionally, IL-6 released by dendritic cells (DCs) inhibits the suppressive function of CD4⁺CD25⁺ T-regulatory cells, thus inhibiting the peripheral tolerance. The signal transduction of IL-6 has recently taught us how this cytokine influences different aspects of the immune response, especially under pathological conditions. IL-6 can bind to the soluble IL-6R, increased after allergen challenge in asthmatic patients, and, through a mechanism called trans-signaling, induces proliferation of cells expressing the cognate receptor gp130. This mechanism appears to be used for proliferation by developed Th2 cells in the airways. In contrast, through the membrane-bound IL-6R, IL-6 controls CD4⁺CD25⁺ survival, as well as the initial stages of the Th2 cells development in the lung. These findings impact the establishment of new therapies for allergic diseases; indeed, blockade of the soluble IL-6R through the fusion protein gp130Fc reduces Th2 cells in the lung, and by blocking the membrane-bound Il-6R, anti-IL-6R antibody treatment induces the number of T-regulatory cells in the lung, thereby reducing the local number of CD4⁺ T-effector cells in experimental asthma.     

CD4+CD25+调节性T细胞抑制效应性T细胞在MCMV感染中的免疫作用

目的 通过细胞水平探讨CD4+CD25+调节性T细胞(Treg)在T淋巴细胞与感染小鼠巨细胞病毒(MCMV)的小鼠胚胎成纤维细胞(MEF)共培养体系中发挥的免疫作用.方法 建立小鼠T细胞与感染MCMV的同系MEF(MEFMCMV)体外共培养细胞模型.通过噬斑法检测共培养上清中感染性病毒量;Western blot方法检测辅助性T细胞亚群TH1/TH2特异性转录因子T-bet/GATA-3蛋白表达水平;ELISA法检测共培养上清中细胞因子IL-4、IL-10和IFN-γ表达水平.结果 去除Treg的T细胞(TdepTreg)与MEFMCMV共培养3 d后可显著减少上清中的感染性病毒量;同时THl/TH2上游特异性转录因子T-bet/GATA.3和下游细胞因子IL-4、IL-10和IFN-γ的蛋白质表达水平显著升高.向共培养体系中添加Treg后病毒负荷量显著增加;T-bet/GATA-3和IFN-γ蛋白表达水平下降;IL-10蛋白表达水平在Treg比率为1%～2%时与TdepTreg组比较无显著差异,在Treg比率增至5%～20%时较TdepTreg组显著增加;而IL-4表达水平与TdepTreg组比较无显著差异,上述效应均与Treg添加比率成剂量相关性.结论 巨细胞病毒感染小鼠成纤维细胞后能激活效应性T细胞增殖活化,而Treg可抑制效应性T细胞在MCMV感染中的免疫保护作用.