骨髓输注联合共刺激阻断诱导免疫耐受的研究进展

诱导移植器官受者特异性免疫耐受是解决目前长期使用免疫抑制剂带来的一系列不良反应及其对移植器官慢性排斥反应最终的手段。骨髓输注诱导嵌合体的形成和共刺激信号的阻断,是目前诱导免疫耐受最为看好的途径。现就骨髓输注与共刺激信号阻断诱导免疫耐受形成的机制、策略和临床应用进行综述。     

照射与非照射方法诱导小鼠皮肤移植耐受

目的：比较不同方法诱导移植耐受的效果,探讨有临床应用前景的非照射耐受诱导方法。方法：分别以主要组织相容性抗原完全不同的雄性ＢＡＬＢ／ｃ和雌性Ｃ５７ＢＬ／６小鼠作为皮肤移植的供体和受体,移植前对受体小鼠单独或联合应用５Ｇｙ全身照射,０．１ｍｌ抗淋巴细胞血清注射、３×１０＾７供体骨髓细胞静脉输注,每千克体重１５０ｍｇ环磷酰胺腹腔注射。结果：各实验组的皮肤移植物存活时间均较对照组明显延长,混合淋巴细胞反     

大鼠肝移植急性排斥反应免疫耐受的实验研究

目的 研究抗CD134抗体+雷帕霉素联合用药抑制排斥反应的作用.方法 制作大鼠肝移植模型,应用抗CD134抗体+雷帕霉素联合用药抑制急性排斥反应的发生,探讨对大鼠肝移植急性排斥反应的OX40-OX40L共刺激途径机制.结果空白对照组:SD对Wistar组存活时间因有排斥反应致存活时间短,存活时间6±2.3天;移植治疗对照组:抗CD 134抗体与雷帕霉素联合治疗组中,SD对SD组,Wistar组对Wistar组因未见明显的排斥反应及封闭了共刺激途径,存活时间长,这两组和SD+wistar组有统计学意义差异.结论抗CD134抗体+雷帕霉素联合用药可以抑制排斥反应的发生.     

OX40-OX40L共刺激分子在肝移植急性排斥反应中作用的实验研究

目的 探讨共刺激分子途径在免疫耐受的作用机制.方法 制作大鼠肝移植模型,应用抗CD134抗体+雷帕霉素联合药物抑制急性排斥反应的发生.结果 空白对照组:SD对Wistar组存活时间因有排斥反应致存活时间短;移植治疗对照组:单纯抗CD 134组与单纯雷帕霉素组,其中SD对SD组和Wistar组对Wistar组大鼠间肝移植因未见明显的排斥反应,存活时间长,MHC完全不匹配的SD 对Wistar组存活时间短,前两者(SD对SD组和Wistar组对Wistar组)和后者(SD对Wistar组)间抑制排斥反应有统计学差异;抗CD 134抗体与雷帕霉素联合治疗组:SD对SD组,Wistar组对Wistar组因未见明显的排斥反应及封闭了共刺激途径,存活时间一样长,前两者(SD 对SD组、Wistar组对Wistar组)和后者(SD对Wistar组)间抑制排斥反应有统计学差异,结果显示抗CD 134抗体与雷帕霉素联合治疗组抑制移植效果最佳.结论 应用抗CD134抗体+雷帕霉素可以诱导免疫耐受的产生.     

照射与非照射方法诱导小鼠皮肤移植耐受

目的：比较不同方法诱导移植耐受的效果,探讨有临床应用前景的非照射耐受诱导方法。方法：分别以主要组织相容性抗原（ｍａｊｏｒｈｉｓｔｏｃｏｍｐａｔｉｂｉｌｉｔｙｃｏｍｐｌｅｘ,ＭＨＣ）完全不同的雄性ＢＡＬＢ／ｃ和雌性Ｃ５７ＢＬ／６小鼠作为皮肤移植的供体和受体,移植前对受体小鼠单独或联合应用５Ｇｙ全身照射、０．１ｍｌ抗淋巴细胞血清注射、３×１０７供体骨髓细胞静脉输注、每千克体重１５０ｍｇ环磷酰胺腹腔注射。结果：各实验组的皮肤移植物存活时间均较对照组明显延长,混合淋巴细胞反应和迟发型超敏反应也表现为供体特异性降低。移植前应用抗淋巴细胞血清、骨髓输注和皮肤移植后注射环磷酰胺可以延长移植物存活时间,平均存活２３．６ｄ,取得与全身照射后输入供体骨髓相似的耐受诱导效果（平均２０．４ｄ）。结论：采用比较温和的非照射的预处理方法,在不应用免疫抑制剂的情况下,也可获得一定程度的免疫耐受,达到延长移植物存活的目的。     

基因治疗防治移植排斥反应的研究进展

在器官移植领域应用基因治疗具有很大的优越性.将能调控移植排斥反应的蛋白质分子的编码基因导入移植物,可以在移植物局部持续产生这些调控分子,与全身应用半衰期很短的免疫抑制剂相比,既可维持局部的免疫抑制或诱导免疫耐受,又可减少或避免对全身的副作用.     

腺病毒介导CD40Ig基因在大鼠肝脏移植中的作用

目的探讨腺病毒介导CD40Ig基因(AdCD40Ig)在大鼠肝脏移植中的作用。方法随机将供受体大鼠分4组,A:同基因移植组,B:免疫排斥组,C:AdLacZ对照组,D:基因治疗组。观察大鼠存活时间,CD40Ig、细胞因子水平和移植肝病理情况。结果 D组存活时间长于B、C组(P<0.05);CD40Ig浓度于术后7天达高峰;D、A组IL-2、IFN-γ水平较B、C组明显降低(P<0.05),D组IL-10较其他组明显增加(P<0.05);B、C两组术后出现中、重度排斥反应,汇管区淋巴细胞浸润明显,D组汇管区轻度炎症,无明显血管损伤证据,病理评级较B、C组有统计学意义(P<0.05)。结论 CD40Ig通过阻断CD40/CD40L通路,可延长移植肝存活时间,在受体内长期表达,减少汇管区淋巴细胞浸润,影响相关细胞因子的表达,对大鼠肝脏急性排斥反应有抑制作用。     

环孢素对大鼠骨髓来源树突细胞成熟及同种免疫刺激活性的影响

目的：研究环孢素对体外培养的大鼠树突细胞前体（DCp）的表型及功能的影响.方法：在大鼠骨髓来源的DC前体培养过程中加入环孢素（1mg/L）,并设对照组,培养期间观察DC形态,流式细胞仪分析细胞表型,混合淋巴细胞反应检测其刺激同种T 细胞增殖能力.结果：环孢素显著抑制了DCp的成熟过程,抑制其表面共刺激分子的表达,并显著抑制其刺激同种T 细胞增殖能力.结论：环孢素可通过抑制DC的成熟而发挥免疫抑制作用.     

同种异体移植免疫耐受的研究进展

随着器官移植免疫学、供受体HLA配型等研究的深入发展,及新型免疫抑制剂的发明、应用,多种器官移植相继获得成功并已成为这些器官终末期疾病的有效治疗手段.但器官移植后需长期乃至终生应用免疫抑制剂,除沉重的经济负担外,还将造成明显的感染和恶性肿瘤发病率和死亡率升高,且迄今对慢性移植排斥尚无有效的控制方法.解决这些难题最终的理想措施是诱导受体建立针对供体移植物的特异性免疫耐受.以下将从T细胞免疫耐受诱导和维持的机制对其进展作一综述.     

同系或同种胸腺与异种胸腺混合移植诱导T细胞免疫耐受的实验研究

目的 探讨同系或同种胸腺与异种胸腺混合移植诱导移植免疫耐受而不发生自身免疫性疾病的可行性。方法 BALB／c裸小鼠的肾包膜下植入胸腺建立异种、同系与异种混合、同种与异种混合胸腺移植模型。4个月后，用流式细胞仪技术检测受者裸小鼠外周血中CD3^＋CD4^＋T细胞，用单向混合淋巴细胞培养了解受者T细胞对ConA以及同种异种淋巴细胞的反应性，异基因皮肤移植观察皮肤移植物存活期。用ELISA法检测受体血清中抗DNA自身抗体。结果 胎胸腺移植4个月后，受者裸小鼠中CD3^＋CD4^＋T细胞重建良好；T细胞对ConA以及无关的SD鼠异种淋巴细胞的反应性强，而对移植胸腺供体来源的淋巴细胞不发生增殖反应；受者对移植胸腺供体来源鼠皮肤移植物不发生排斥，而对无关的SD鼠皮肤移植物发生排斥。异种胸腺移植组发生消耗性疾病死亡高，抗DNA自身抗体明显高于混合胸腺移植组。结论 同系或同种异种胎胸腺混合移植可诱导受者T细胞对供者移植物的免疫耐受。     

ICOSL单克隆抗体对BXSB狼疮鼠病变的影响

目的观察大鼠抗小鼠ICOSL多克隆抗体抑制ICOS（可诱导共刺激分子）信号通路对BXSB狼疮鼠病变的影响。方法大鼠抗小鼠ICOSL（可诱导共刺激分子配体）抗体尾静脉注射BXSB狼疮鼠,100μg/次,3次/周,共4周,对照组以相同量PBS注射,在治疗后观察血IgG型dsDNA抗体、尿蛋白、肾小球IgG沉积以及肾组织病理变化。结果实验组狼疮鼠的蛋白尿和IgG型dsDNA抗体较对照组明显减少（P〈0.01）,IgG在肾组织沉积以及肾组织病理损伤也较对照组减轻（P〈0.01）。结论抑制ICOS信号通路可减轻BXSB狼疮鼠病变。     

CTLA4Ig转染供者DC对同种异体胰岛移植存活的影响

目的 探讨共刺激信号阻断剂CTLA-4Ig基因修饰的树突状细胞(dendritic cells,DC)对胰岛移植存活的影响.方法 以BN、Lewis大鼠为胰岛移植供、受体;用CTLA-4Ig基因重组腺病毒转染供、受体骨髓源性DC使之表达CT-LA-4Ig;将供、受体DC于胰岛移植前24 h经股静脉分别注入受体(设为组Ⅰ、组Ⅱ),供、受体DC混合后注入受体(组Ⅲ),注射生理盐水的为空白对照组(组Ⅳ);观察各组糖尿病鼠高血糖改善情况及存活时间,术后第20天,MTT法检测受体脾细胞对供体及无关抗原刺激的反应.结果 与对照组相比,组Ⅰ和组Ⅲ血糖维持正常时间和受体存活时间显著延长[组Ⅰ:(28.75±13.60)d和(35.38±13.21)d,P＜0.01;组Ⅲ:(41.25±13.74)d和(49.50±13.87)d,P＜0.01],组Ⅱ移植胰岛存活时间无延长[(8.75±3.33)d与(7.33±1.97)d相比,P＞0.05].术后第20天,组Ⅰ、组Ⅲ脾细胞对供体抗原刺激的反应均明显低于正常对照[(0.24±0.05)和(0.21±0.05)与(0.70±0.09)相比,P＜0.01],而对无关抗原刺激的反应与正常对照无显著差异[(0.66±0.07)和(0.66±0.07)与(0.69±0.05)相比,P＞0.05].结论 CTLA-4Ig基因修饰的供体DC可以明显延长大鼠移植胰岛的存活时间,而受体DC则无此作用,但两种DC联合应用可以使移植胰岛获得更长的存活时间.     

CTLA4-Ig在异体移植方面的相关研究进展

CTLA4-Ig是一种融合免疫球蛋白,可以选择性地阻断CD28与B7的信号传导通路,导致T细胞免疫失能,诱导对特异性抗原的免疫耐受. 本文介绍了其生物学特性、免疫诱导耐受机制及在异体移植方面的研究进展和局限性,其在异体移植方面展示了良好的应用前景.     

肝肠联合移植的现状

长期应用全胃肠外营养支持 (TPN)的短肠综合征患者在出现肝功能损害、肝功能衰竭时要求作肝肠联合移植。肝肠联合移植是一种新型的难度极大的移植术 ,在国内和亚洲地区还未见报道。作者就肝肠联合移植的历史、适应证、免疫学特点、外科技术进展、围手术期的处理和并发症等作以下综述 ,为临床肝肠移植的开展提供指导     

CD154胞外区基因局部修饰对大鼠移植肾存活的影响

目的观察CD154胞外区基因局部修饰大鼠供肾对延长移植肾存活的效能.方法以CD154基因重组腺病毒为载体,将CD154胞外区基因转入BN大鼠供肾,以Lewis大鼠为受体,行同种肾移植为转染组,并以未转染BN供肾移植给Lewis受体为对照组;观察移植肾存活时间和术后肾功能变化.结果转染组移植肾存活(28±7.3) d,较对照组移植肾存活时间(8.6±1.2)d明显延长;移植组术后血清肌酐较同期对照组明显为低.结论 CD154基因局部转染可明显延长移植肾存活时间.     

新生大鼠异种心脏移植免疫耐受的研究

目的诱导新生大鼠免疫耐受。方法将2．5×107个豚鼠脾淋巴细胞分别通过胸腺或腹腔途径注射给新生大鼠,8～10周龄时分别行豚鼠供心移植。结果胸腺或腹腔内注射脾细胞者豚鼠供心存活时间分别为（9．80±2．82）、（8．33±1．21）min,与对照组相比无显著差异（P＞0．05）。结论单一胸腺或腹腔内注射异种脾细胞并不能诱导新生大鼠的异种免疫耐受。     

B7-CD28共刺激通路与系统性红斑狼疮的相关性研究

目的探讨系统性红斑狼疮（SLE）患者外周血淋巴细胞（PBLC）CD28、B7-1（CD80）及B7-2（CD86）的表达及其意义，探讨SLE患者共刺激通路是否异常。方法采用流式细胞仪检测30例SLE患者外周血淋巴细胞的CD28、B7-4，及B7-2，并以15例正常人作为对照。结果SLE患者外周血淋巴细胞中B7-1的表达水平与正常对照组差异无显著性，而B7-2的表达水平明显低于正常对照组（P〈0.01）；SLE患者外周血淋巴细胞中CD28的表达水平明显低于正常对照组（P〈0.05）。结论SLE患者PBLC上的B7-2及CD28的表达降低，影响B7-CD28共刺激通路，可能与SLE的发病有关。     

T辅助细胞与移植免疫耐受

早在1986年，Mosmann和Coffman通过观察CD4＋T辅助细胞（Th）克隆表达不同表型的细胞因子港，提出Th1／Th2模式（Th1／Th2Paradigm）的概念。该理论的核心是T辅助细胞可根据其特定的细胞因子分泌谱区分为Th1和Th2两种亚型；Th1和Th2分泌的细胞因子可对自身或相对亚型的增殖和功能产生影响；Th1和Th2的平衡或消涨决定体内的免疫状态。此后，在这一理论的指导下，围绕同种移植排斥和耐受现象作了大量研究。目前认为Th1与移植排斥反应有关，而Th2能对抗Th1的分化和功能，有可能诱导移植耐受。因此，Th1／Th2模式及建立在此基础上的治…     

小鼠对大鼠异种皮肤移植耐受的诱导

目的探索更为温和的适合临床应用的诱导异种移植耐受的方案。方法给小剂量照射（ 300 rad）的 C57BL/6 (B6)小鼠静脉注射抗小鼠 CD4单抗 0.5 ml后输注 Lewis大鼠骨髓细胞 ,并联合应用腹腔注射环磷酰胺诱导耐受。于耐受诱导后 30 d对受体小鼠作耐受状态的检查,包括供体特异性皮肤移植、混合淋巴细胞反应（ MLR）及迟发型超敏反应（ DTH）。并通过过继转移实验、外源 IL- 2对耐受小鼠供体特异性 MLR的影响等进一步探讨耐受形成的机制。结果 Lewis大鼠的皮肤移植物在耐受 B6小鼠中存活期特异性延长, MLR及 DTH检查证明 B6小鼠对 Lewis大鼠的脾细胞产生特异性耐受,对无关第三者 DA大鼠及 BALB/c小鼠的脾细胞仍表现出强烈的免疫应答。体内外过继转移实验表明 ,耐受不能被转移 ,未发现抑制细胞的存在。耐受小鼠供体特异的 MLR可以被外源 IL- 2逆转 ,说明耐受主要不是克隆排除,而与克隆不应答有关。结论应用低剂量照射、骨髓移植、环磷酰胺及抗 CD4单抗等方法法可以有效诱导出小鼠对大鼠的移植耐受。     

早期T细胞激活过程中NF-κB活化的研究

目的:研究T细胞在CD3/CD28双信号通路共刺激活化早期,细胞中NF-κB的活化以及三氧化二砷对该活化作用的影响。方法:用CD3/CD28单克隆抗体(浓度分别为10μg/ml和5μg/ml)双信号通路对Hut-78细胞进行共刺激30min,采用TransAM的方法观察Hut-78细胞内p65的表达状况,并研究三氧化二砷对该表达的影响。结果:Hut-78细胞在CD3/CD28双信号通路共刺激30min后,细胞核中p65的表达显著下降(P<0.05)。三氧化二砷组p65表达要高于单纯CD3/CD28作用组。全细胞蛋白提取液中的p65表达水平的趋势与细胞核提取液类似。结论:T细胞经过CD3/CD28共刺激,细胞内NF-κB不能得到迅速活化,反而有下降的趋势。三氧化二砷能够促进NF-κB的早期活化。