低温保存同种异体带瓣主动脉移植的免疫反应

背景:前期研究证实,液氮低温保存同种异体主动脉能保持其细胞的生物活性和组织结构的完整性,但有关同种异体带瓣主动脉移植的排斥反应研究较少。目的:观察同种异体带瓣主动脉移植后移植物的免疫指标变化特点。方法:将低温保存的SD大鼠带瓣主动脉异位植入Wistar大鼠腹主动脉,分组干预:同种异体移植组不进行干预;免疫干预组移植后给予环孢素A;对照组为假移植,将腹主动脉切断后直接吻合。移植后1,2,3,4,5周收集移植动物血清标本,免疫组织化学染色测量MHCⅡ阳性表达,淋巴细胞涂片免疫组织化学测定CD4+、CD8+百分率;应用酶联法测定血清中白细胞介素2,肿瘤坏死因子α水平。结果与结论:同种异体主动脉移植后1～4周可见MHC显著阳性,CD4+、CD4+/CD8+比值明显增高,血清中白细胞介素2和肿瘤坏死因子α水平明显增高,并在移植后5周内维持较高水平,与对照组比较差异有显著性意义(P0.05)。环孢素A对同种异体主动脉移植物内膜增厚、淋巴细胞浸润、MHCⅡ表达、T淋巴细胞激活、白细胞介素2和肿瘤坏死因子α水平的增高具有明显抑制作用(P0.05)。说明低温保存同种异体主动脉移植后有明确的免疫排斥反应发生,环孢素A对同种异体移植后的免疫排斥反应有明显抑制作用。     

大鼠皮肤移植排异反应中T淋巴细胞亚群的观察

为了了解在皮肤移植组织排异反应中浸润的不同T淋巴细胞亚群 ,分析其与排异反应的关系。采用HE及免疫组化方法观察大鼠III度烫伤后 2 0例同种异体 自体皮肤混合移植和 15例大张同种异体皮肤移植组织在移植后 4或 5、 7、 14、 2 1和 2 8d时CD4+ 和CD8+ 淋巴细胞的比例。结果表明同种异体 自体皮肤混合移植组 7～ 14d时CD8+ 淋巴细胞明显高于大张同种异体皮肤移植组 (P <0 0 5 ) ,在移植后 4或 5dCD4+ 淋巴细胞明显高于CD8+ 淋巴细胞。大张同种异体皮肤移植组在移植后 7～ 14dCD4+ 淋巴细胞明显高于CD8+ 细胞 ,在植皮后 7～ 2 8d高于同种异体 自体皮肤混合移植组 ,2 1d时差异有统计学意义 (P <0 0 5 )。在 7～ 14d时CD4/CD8比值高于同种异体 自体皮肤混合移植组 (P <0 0 5 )。提示同种异体 自体皮肤混合移植排异反应以CD8+ 淋巴细胞为主 ,而在大张同种皮肤移植排异反应中CD4+ 淋巴细胞起主要作用。     

同系大鼠骨髓间充质干细胞对同种异体胰岛刺激的T淋巴细胞的免疫调节作用

目的:研究同系大鼠骨髓间充质干细胞(Mesenchymal stem cell,MSC)对同种异体胰岛刺激的T淋巴细胞的免疫调节作用,以及对共培养胰岛胰岛素分泌的影响。方法:以Wistar大鼠胰岛作为刺激原,Lewis大鼠MSC及外周血T淋巴细胞作为共培养细胞,分为三组:实验组(A)20IEQ胰岛细胞、1×108 L-1 T淋巴细胞和1×107 L-1 MSCs共培养;药物对照组(B)20IEQ胰岛细胞与1×108 L-1 T淋巴细胞共培养并加入0.25μg/ml CsA;阳性对照组(C)20IEQ胰岛细胞与1×108 L-1 T淋巴细胞共培养。CCK-8检测共培养3天时T淋巴细胞对同种异体胰岛刺激的反应性,ELISA检测共培养3天时上清液IFN-γ、IL-2、IL-4和IL-10的含量,以及共培养胰岛的胰岛素分泌功能。结果:MSC与CsA均可抑制同种异体胰岛刺激的T淋巴细胞增殖,A组T淋巴细胞增殖率(17.10±2.7)%与B组(14.65±1.8)%间差异无统计学意义(P>0.05);C组IFN-γ、IL-2含量显著高于A组及B组,IL-10含量显著低于A及B组,差异有统计学意义(P<0.05);IL-4含量在A、B、C三组间差异均无统计学意义(P>0.05)。A组胰岛的胰岛素分泌水平显著高于B组和C组,差异有统计学意义(P<0.05);胰岛素刺激指数(2.37±0.52)显著高于B组(1.80±0.36),差异有统计学意义(P<0.05)。结论:MSC与CsA均可通过减少Th1类细胞因子的表达使受者Th1/Th2平衡向Th2方向偏移,抑制同种异体胰岛刺激的T淋巴细胞增殖。相对于CsA,MSC可以保持胰岛素高分泌水平和良好的糖刺激反应性,避免了CsA可能带来的毒性和副作用,具有一定的临床应用优势及前景。     

膝关节移植中应用同种异体骨软骨有效性与安全性的Meta分析

文题释义：同种异体移植：是指同种不同基因型个体之间的移植，是临床最常见的移植类型，也是移植免疫学研究的重点所在。同种异体移植的出现，有效解决了自体移植所面临的移植物数量不足、延长手术时间以及手术伤口面积增加等问题。 单组率的Meta分析：对于某一项结局指标，所纳入的全部研究只提供一组人群的总人数和事件发生人数(患病率、检出率、手术率、病死率、感染率等)的研究(常见于病例系列研究)进行定量综合，为后续研究提供更可靠证据的科研方法。背景：同种异体骨软骨移植治疗膝关节软骨缺损是临床应用最久的方法之一。虽然该方法在临床中应用广泛且深受骨科医师信赖，但仍缺乏循证医学方面的支持。 目的：分析同种异体骨软骨在膝关节移植术中的疗效，对所有已获得的数据进行系统综述和Meta分析，评价同种异体骨软骨在膝关节移植过程中作为移植替代物的有效性及安全性。方法：在PubMed/Medline、EMBASE、Cochrane协作网图书馆、中国知网(CNKI)以及万方数据库中进行文献检索。检索同种异体骨软骨在膝关节移植术中的应用，根据文献纳入标准进行选择，重点选择数据可以被提取以及能够进行Meta分析的文章。结果与结论：①25项研究符合纳入标准，均为病例系列研究，患者报道的结果是同种异体骨软骨可以作为修复膝关节缺损的移植材料；共1 081例患者(1 111膝)纳入研究，发病年龄11-75岁，平均年龄约为 34.41岁，女性比例约为40.81%，随访时间4-384个月，平均76.8个月；②在这些研究中，接受的供者年龄为10-65岁，而根据供者年龄范围与研究数目进行统计发现，15-45岁的供者为主要的获取目标；③术后总体的成功率为74%，总体二次手术率17%；单极移植成功率74.44%(501/673)，双极移植成功率50.94%(27/53)，单极移植成功率明显高于双极移植(χ²=13.679，P < 0.05)；④67例(13.14%，67/510)出现治疗并发症，常见并发症为手术部位持续疼痛(15例)和移植物骨折或碎裂(12例)；⑤提示同种异体骨软骨是膝关节移植中一种有效且安全的移植替代物，整体成功率74%，二次手术率17%，是一种成功率高、再次手术风险低的治疗方式。ORCID: 0000-0001-6786-6595(华堃池)中国组织工程研究杂志出版内容重点：人工关节；骨植入物；脊柱；骨折；内固定；数字化骨科；组织工程     

海藻酸钠-氯化钡微囊在大鼠同种异体胰岛移植中免疫隔离效应的研究

分别将游离胰岛和微囊化胰岛移植于链脲佐菌素(STZ)诱导的糖尿病大鼠肾包膜下及腹腔内,在实验终点取各组大鼠脾细胞,采用混合胰岛淋巴细胞培养方法及ELISA法检测培养上清液中IL-2和IFN-γ含量,观察胰岛移植后大鼠脾脏T淋巴细胞对同种异体胰岛的应答能力。结果表明,微囊化胰岛移植组糖尿病大鼠和游离胰岛移植组糖尿病大鼠胰岛有功能存活时间分别为>6周和(6.6±2.07)d。微囊化胰岛移植组的刺激指数(SI)与正常对照组比较差异无显著性,游离胰岛移植组SI和IL-2、IFN-γ活性显著高于微囊化胰岛移植组和正常对照组(P<0.05)。可见海藻酸钠-氯化钡微囊化胰岛可明显延长同种异体移植物的存活时间,在体外混合胰岛淋巴细胞培养反应体系中表现为免疫低应答性,具有较好的免疫隔离作用。     

同种异型T细胞抑制全身型MG患者AchR-Ab产生的研究

观察人T细胞对全身型重症肌无力 (MG )患者抗乙酰胆碱受体抗体 (AchR Ab )产生的影响。在体外用乙酰胆碱受体(AchR )为抗原诱导 30例全身型MG患者的淋巴细胞 ,并分别加入正常人T细胞和同种异体MG患者T细胞共同培养后 ,用酶联免疫吸附实验 (ELISA )检测MG患者淋巴细胞培养上清中AchR Ab的含量 ,并用微量细胞毒试验检测培养前后MG患者的T细胞亚群。结果显示 ,加入正常人T细胞组 ,其AchR Ab含量显著低于加入同种异体MG患者T细胞组和MG患者自身对照组 ,且正常人T细胞可使MG患者T细胞亚群间的比例发生改变 ,CD8+细胞数量明显增多 ,CD4+/CD8+比值明显降低。本文提示正常人T细胞能抑制全身型MG患者AchR Ab的产生 ,并对可能的机制及潜在的应用意义作了讨论。     

T细胞识别同种异型移植抗原的研究进展

移植是末期组织、器官功能衰竭最彻底的治疗措施。同种异体移植(allogeneic transplantation)是临床最常见的移植类型。在本质上,人类的同种异体移植排斥反应是由受者的T细胞介导的、针对移植抗原的免疫应答。这一免疫应答是通过受者T细胞表面的T细胞受体(T cell receptor,TCR)识别移植物     

同种异体骨移植后T淋巴细胞的分布与变化

背景：研究表明体液免疫在同种异体骨移植免疫排斥反应中不起主要作用,目前一般认为细胞免疫在排斥反应中起主导作用。 目的：概述同种异体骨移植后T淋巴细胞的分布与变化。 方法：采用电子检索的方式,在万方数据库(http://www.wanfangdata.com.cn/)、Pubmed数据库(http:// www.ncbi.nlm.nih.gov.pubmed/)中检索1990-01/2011-12关于同种异体骨移植后T淋巴细胞的分布与变化的文章,关键词为“骨移植,同种异体,T淋巴细胞”。排除重复研究、普通综述或Meta分析类文章,筛选纳入31篇文献进行评价。 结果与结论：同种异体骨移植后,体内抑制T淋巴细胞被激活,对免疫排斥反应起负反馈调节作用,T淋巴细胞发生显著变化;但深低温冷冻、冷冻干燥、γ射线辐照、复合免疫抑制剂等方法可以有效降低其免疫原性及疾病传播的风险。大量研究认为,同种异体骨具有骨组织的完整性结构、机械稳定性、生物学活性、骨诱导能力和极低的免疫性以及与宿主骨有较强的愈合能力等优点,植入体内后通过全方位再血管化、新骨形成、异体骨与宿主骨连接而实现生物学骨掺入过程。提示同种异体骨是一种可行的移植材料,可作为目前修复骨缺损的重要手段之一。      

实验性冷冻保存带血管的同种异体骨移值

为探讨应用吻合血管的冷冻保存同种异体肋骨移植修复骨缺损的可能性，以15％二甲基甲砜(DMSO)作为低温保护剂，采用两步玲冻步骤，对狗的含后肋问血管的肋骨段进行冷冻处理，在液氟中保存96h后，施行同种异体移植于髂嵴骨缺损区。术后3周内使用免疫抑制剂。对移植体进行免疫学(白细胞个素Ⅱ、T细胞亚群)监测，SPECT扫描、血管造影和病理学分析。实验结果表明，同种异体移植肋骨段血循环丰富，骨细胞代谢活跃，未发生急性排斥反应，3个月达骨性愈台，取得了类似于吻合血管的自体骨移植的效果。     

大鼠骨髓间质干细胞对同种骨髓移植后造血重建和免疫重建的作用

目的：探讨大鼠骨髓间质干细胞（MSC）对 同种异体骨髓移植造血重建和免疫重建的影响。方法:建立大鼠同种异 体骨髓移植模型，通过生存率分析、外周血象检测、免疫细胞计数和受体免疫功能检测，综 合评价MSC对骨髓移植(bone marrow transplantation,BMT)后造血重建和免疫重建的作用。 结果：(1) MSC可促进BMT后造血重建：移植后30 d，共移植组外周血白 细胞、淋巴细胞和血小板数均高于单纯骨髓移植组；共移植组骨髓细胞数也高于对照组。(2 )MSC可促进BMT后免疫重建：移植后30 d，共移植组胸腺细胞数、脾细胞总数均高于骨髓单 纯移植组；共移植组对ConA、LPS 刺激的淋巴细胞增殖反应以及对第三体来源的同种混合淋 巴细胞反应均强于单纯BMT组。结论：大鼠MSC与骨髓共移植对同种异体 骨髓移植造血重建和免疫重建有一定促进作用。     

自体与同种异体组织移植重建膝关节前十字韧带

背景:关节镜辅助下重建前十字韧带的移植物主要有自体组织移植物、同种异体组织移植物,各具优势,对于如何选择移植物存在较多争议。目的:评价关节镜辅助下自体与同种异体组织重建膝关节前十字韧带的疗效。方法:回顾性分析2010年6月至2013年6月于阿克苏地区第一人民医院骨科行关节镜辅助下膝关节十字韧带重建52例患者的临床资料,其中自体组织移植组27例,同种异体组织移植组25例。结果与结论:与同种异体组织移植组相比,自体组织移植组重建后住院天数和发热天数均减少(P0.05)。两组重建后物理学检查、功能试验、国际膝关节文献编制委员会分级评估标准与Lysholm-Tegner膝关节综合功能评定结果比较差异无显著性意义(P0.05)。结果证实,关节镜辅助下自体与同种异体组织重建膝关节前十字韧带均是安全可行的手术方案;自体组织移植与同种异体组织移植重建前十字韧带重建后膝关节功能恢复疗效相同,但两组间住院天数和发热天数之间的差异将影响人们对移植物的选择。     

胸腺内注射同种异体抗原抑制坐骨神经移植排斥反应的免疫学研究

目的:探讨胸腺内注射同种异体MHC抗原对同种异体坐骨神经移植的效应.方法:以C57BL/6(H-2b)为供体,BALB/c(H-2d)为受体,将受体鼠分为4组:Ⅰ:自体移植组、Ⅱ:异体移植组、Ⅲ:异体移植加用免疫抑制剂组、Ⅳ:胸腺内注射组:坐骨神经移植前2周将供体MHC抗原提取物注射到受体鼠的胸腺内,移植后3周进行IL-2R、TNF-α、MLR、细胞凋亡等免疫学的检测.结果:胸腺内注射组小鼠的各项免疫指标与异体移植组相比具有统计学意义.结论:胸腺内注射同种异体抗原对抑制同种异体神经移植排斥反应具有一定作用.     

B细胞在移植免疫中的调节作用

传统认为,在移植免疫中B细胞作为抗原提呈细胞可加重T淋巴细胞介导的同种异体反应.但近期研究发现,某些B细胞亚群,如调节性B细胞(Bregs)具有免疫耐受性,在移植排斥反应中发挥负向调控作用,进而延缓同种异体移植排斥进程.因而研究B细胞在移植免疫中的调节作用,阐述B细胞发挥负向免疫调节机制及以B细胞为靶细胞的诱导移植耐受新策略具有重大意义.     

а-MSH基因转染的小鼠同种异体移植心脏存活期延长

目的 观察a-黑素细胞刺激素(a-MSH)基因原位转染供者小鼠心脏对小鼠同种异体心脏移植排斥反应的影响.方法 将携带a-MSH基因和绿色荧光蛋白(GFP)基因的重组腺相关病毒(rAAV-a-MSH)和单纯携带GFP的重组腺相关病毒(rAAV-GFP)分别经主动脉灌注原位转染供者小鼠心脏,再行同种异体心脏移植,观察心脏移植物的存活时间.测定移植心脏的GMSH表达情况,并于术后7 d测定移植心脏的细胞因子及趋化因子水平.结果 腺相关病毒载体能有效地将a-MSH基因导人小鼠心脏,与rAAV-GFP空载体组[(7.0±0.33)d]和PBS组[(7.0±2.23)d]相比,rAAV.a-MSH原位转染组[(16.3±2.21)d]的心脏移植物存活时间延长.术后7 d,rAAV-a-MSH原位转染组心脏移植物的Thl细胞因子(IL-2、IFN-a)水平较其它两组减低,而Th2细胞因子(IL4、IL-10)水平升高,趋化因子MCP-I、RANTES水平下降.结论 携带a-MSH基因的rAAV载体经原位转染供者小鼠心脏,能促进移植心脏局部的细胞因子格局由Th1型向Th2型偏移,降低趋化因子水平,从而延长同种异基因移植心脏的存活时间.     

供者脾细胞对移植心脏免疫耐受的诱导

目的探讨供者脾细胞对同种异体心脏移植免疫耐受的诱导效果 ,为抗排斥反应治疗提供依据。方法分别采用供者脾细胞 (SPC)和环磷酰胺 (CP)预处理移植受者 ,然后行大鼠异位心脏移植术 ,根据实验分组对移植心脏存活情况进行观察。结果对照组、CP组和 SPC组移植心脏的存活时间分别为 7.2 1± 2 .5 6 d、9.78± 2 .5 5 d和 15 .14± 8.5 6 d,经统计学处理后证实 ,3组移植心脏的存活时间有显著性差异 (P<0 .0 5 )。结论供者脾细胞预处理移植受体 ,可以明显地延长大鼠同种异体心脏移植的存活时间。     

联合阻断CD28/B7和ICOS对同种异体C57BL/6小鼠皮肤移植的影响

目的探讨CD28/B7共刺激通路阻断剂和ICOS/ICOSL共刺激通路阻断剂对同种异体小鼠皮肤移植的影响。方法实验动物随机分为4组,每组6只,供体、受体均为C57BL/6。CTLA4Ig处理组;ICOSIg处理组;CTLA4Ig+ICOSIg处理组;空白对照组。将C57BL/6小鼠背部全层皮肤移植于同种小鼠中段背部。前3组分别以150mg/kg的抗体经腹腔注射,空白对照组只注射同等量的生理盐水,注射时间为皮肤移植后0、2、4d,术后观察皮肤存活情况。术后6d分别处死各组受体鼠和供体鼠,取受体脾脏淋巴细胞与供体脾脏淋巴细胞作混合淋巴细胞反应(MLR),用MTT法测定细胞活力和细胞增殖反应。术后7d切取皮肤移植物作组织学分析。结果与对照组相比,各阻断剂单独治疗组能明显延长移植物的存活时间(<0.05),各阻断剂治疗组淋巴细胞对供体淋巴细胞产生特异性低反应(<0.05),能有效抑制淋巴细胞对同种抗原的免疫应答。组织学检查发现,各抗体治疗组移植皮肤结构基本正常。结论 CTLA4Ig、ICOSIg可以抑制免疫应答,诱导移植皮肤发生免疫耐受,延长存活时间。     

供者特异性活化T细胞频度预测肾移植急性排斥反应

背景：提高移植后排斥反应风险预报的准确性,可为移植后个体化使用免疫抑制剂提供参考。 目的：寻找一种能定量分析供受者间免疫反应强度的方法来预测急性排斥反应。 方法：对同种异体尸肾移植的患者115例采用前瞻性分析,用ELISPOT法检测移植前分泌γ-干扰素的供者特异性活化T细胞的频度,观察随访期内有无急性排斥及肺部感染,并观察HLA错配与急性排斥的关系。 结果与结论：115例群体反应性抗体阴性肾移植受者中有25例发生急性排斥反应,发生急性排斥反应患者的供者特异性活化T细胞频度高于未发生急性排斥反应者(P < 0.01),而HLA-I、II及总的错配数比较,差异均无显著性意义(P > 0.05)。提示,通过移植前对产生γ-干扰素的供者特异性活化T细胞频度的检测,可预测急性排斥反应,对潜在供者进行选择。     

FTY720对小肠移植物中淋巴细胞及单核细胞浸润的影响

目的：研究FTY720对同种异体小鼠小肠移植排斥反应的作用及可能机制。方法：以C3H小鼠（H-2k）为供者，C57BL/6小鼠(H-2b）为受者，行异位小肠移植。分别建立FTY720治疗组、空白对照组及同系移植组，在移植后6 d与12 d进行组织学观测评定排斥分数，流式细胞术分析移植物肠系膜淋巴结（MLN）、派氏结（PP）、粘膜上皮细胞间淋巴组织（IEL）与固有层淋巴组织（LPL）中淋巴细胞中受者淋巴细胞及单核细胞浸润情况。结果：FTY720在移植后6 d可有效抑制排斥反应，但在移植后14 d，排斥反应仍可发生在空白对照组，移植后6 d移植物内受者淋巴细胞基本取代供者细胞；而在FTY720治疗组，受者淋巴细胞进入移植物的速度及数量明显减缓，包括CD4+与CD8+ T细胞，以及CD19+ B细胞。受者来源的γδT淋巴细胞也显著减少。FTY720对Gr1+CD11b+单核细胞系也有一定的抑制作用。结论：FTY720可通过减少受者淋巴细胞及单核细胞进入移植小肠，起到缓解排斥反应的作用。     

同种异体神经移植处置入bFGF复合降解膜的实验研究

目的　探讨在异体神经移植处置入bFGF(basicfibroblastgrowthfactor)复合降解膜,提高神经再生的效果。方法　60只大鼠随机分成A、B、C组,每组2 0只,所有动物左下肢坐骨神经切除2cm后,移植经冷冻处理的同种异体坐骨神经移植物。A组神经移植物经bFGF处理并在移植处置入bFGF复合降解膜,B组移植物不经bFGF处理,移植处置入不含bFGF的降解膜,C组移植物不经bFGF处理,移植处不置入降解膜。术后90、180d行电生理、组织学、血—神经屏障等各项指标观测。结果　A组再生有髓神经纤维的数量和直径明显较B、C组的多而粗(P <0 .0 5 ) ,结缔组织增生较少,血—神经屏障恢复和电生理指标均优于B、C组。结论　bFGF复合降解膜有提高同种异体神经移植再生的作用。     

同种异体肌腱修复手部肌腱缺损优良率的Meta分析

目的通过Meta分析统计同种异体肌腱用于手部肌腱缺损移植修复优良率。方法检索1966年~2015年间异体肌腱用于手部肌腱缺损移植修复的相关文献,采用循证医学Meta分析对患者手部肌腱移植修复优良率进行综合分析。结果使用随机效应模型计算单组率的Meta分析,同种异体肌腱移植优良率75%(69%~82%)。进一步分层分析,8篇使用手指数为样本量单位的研究移植优良率为75%(66~83%),11篇以病例数为样本量单位的研究移植优良率为76%(68%~85%)。结论同种异体肌腱用于手部肌腱缺损移植的优良率约为75%。