RP-HPLC法测定朱砂莲胶囊中马兜铃酸A的含量

目的 建立HPLC法测定朱砂莲胶囊中马兜铃酸A的方法。方法 采用RP-HPLC法测定。用MsphereC18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以甲醇-水-冰醋酸(59:40:1)为流动相,体积流量为1.0 mL/min,检测波长为315 nm,柱温为室温,进样量为20 μL。结果 马兜铃酸A的保留时间约为15 min,与其他峰的分离度大于1.5。马兜铃酸A的线性范围为1.33～26.6μg/mL,r=0.999 9,最低检测限为1.33 ng/mL,平均回收率为98.6％(n=5)。结论 该方法简便快速,结果准确可靠,可用于朱砂莲胶囊中马兜铃酸A的测定。     

朱砂莲提取物A1015对小鼠四氯化碳所致肝损伤保护作用研究

朱砂莲提取物A10 15对四氯化碳肝中毒小鼠血清SGPT升高具有降低作用     

益智胶囊对Aβ_(1-42)致阿尔茨海默病大鼠学习记忆障碍的影响

目的观察益智胶囊(管花肉苁蓉、刺五加、益智仁、丹参)对注射Aβ引起阿尔茨海默病大鼠学习记忆能力的影响,并对其可能的机制进行初步探讨。方法将SD大鼠随机分为7组。假手术组右侧海马单次注射生理盐水5μL,模型组、石杉碱甲组及益智胶囊各组分别右侧海马注射Aβ1-42(10μg),阳性药组和益智胶囊各组分别灌胃给予石杉碱和益智胶囊提取物。给药3周后,进行大鼠Morris水迷宫实验,连续10 d,训练期间继续给药;Western blot检测海马区Aβ、IL-18及凋亡相关基因Bax、Bcl-2、Caspase-3的蛋白表达。结果益智胶囊提取物能明显缩短阿尔茨海默病大鼠的游泳总路程及逃避潜伏期;抑制海马炎性因子IL-18的过度表达;降低Aβ、Bax和Caspase-3蛋白的表达水平,提高Bcl-2/Bax的比值。结论益智胶囊提取物能改善Aβ1-42引起阿尔茨海默病大鼠学习记忆障碍,其机制可能与抑制海马炎症因子的表达和减少神经元凋亡有关。     

三叶青提取物对肺癌A549细胞的体外抑制作用

目的:探讨三叶青提取物对肺癌细胞A549的体外抑制作用。方法:采用体外细胞培养技术,用MTT法观察三叶青提取物对肺癌细胞A549体外抑制作用的时效、量效关系;琼脂糖凝胶电泳检测细胞凋亡;RT-PCR法检测细胞凋亡相关基因BcL-2的表达。结果:三叶青提取物以1×10-3g·L-1的浓度与A549细胞共培养48 h,其细胞活性有显著降低;不同浓度的三叶青提取物和A549细胞共同培养,药物浓度为1×10-2、1×10-31、×10-4g·L-1的三叶青提取物对A549细胞活性有显著性抑制作用。琼脂糖凝胶电泳有明显的梯状条带;不同浓度三叶青提取物作用于A549细胞后,细胞BcL-2基因的表达随浓度的增加而降低。结论:三叶青提取物对A549细胞具有明显的体外抑制作用,其抑制作用与药物的浓度和作用时间呈明显正相关。     

贞芪扶正胶囊对大鼠肝细胞色素P450酶CYP1A2、CYP3A4、CYP2E1的影响

目的:研究贞芪扶正胶囊对大鼠肝细胞色素P450酶CYP1A2、CYP3A4、CYP2E1的影响。方法:用Cocktail探针药物法,将Wistar大鼠按体重随机分组,灌胃给予贞芪扶正胶囊溶液,以生理盐水为空白对照,诱导10天,股动脉插管,注射给予Cocktail探针药物咖啡因、氨苯砜、氯唑沙宗,通过HPLC检测各探针药物的代谢率来评价各组的CYP1A2、CYP3A4、CYP2E1亚型酶的活性;药动学计算采用DAS2.0软件完成。结果:给予贞芪扶正胶囊组大鼠CYP2E1的酶活性明显低于对照组,探针药物氯唑沙宗的t1/2显著延长;CYP1A2、CYP3A4的的水平没有显著变化。结论:贞芪扶正胶囊对大鼠CYP2E1有抑制作用,对大鼠CYP1A2、CYP3A4的影响不显著。     

红花中红花黄素A的分离工艺研究

目的:优选红花水提取物中有效成分红花素A的分离工艺.方法:以红花水提取物中进一步分离精制得到的红花黄素A的含量为指标,用HPLC法,并采用L9(34)正交试验优选红花黄素A的最优分离工艺条件.结果:红花水提取液,选用大孔吸附树脂H103,以上柱样品量与树脂量用量之比为1∶ 10(W∶ V),用去离子水洗脱,洗脱速度1.0 ml/min/cm2为最佳分离工艺.结论:本分离工艺条件稳定可行,可为红花水提取物进一步分离红花黄素A的生产工艺提供参考.     

戊己丸不同配比方对大鼠体外CYP3A1/3A2酶活性的影响

目的:研究戊己丸不同配比方对大鼠体外肝微粒体CYP3A1/3A2酶活性的影响,从"中药配伍-代谢"关系探讨戊己丸的配伍机制.方法:按L9(34)正交表,戊己丸的配比设计为9个受试复方,以睾丸酮为探针药,HPLC检测戊己丸对大鼠体外肝微粒体CYP3A1/3A2酶活性的影响.结果:黄连、吴茱萸、白芍各提取物及戊己丸1号～9号方抑制CYP3A1/3A2的IC50分别为38.96,871.96,15 519.17,43.17,60.47,276.12,133.40,118.08,88.47,64.36,35.13,39.91mg·L-1;黄连及戊己丸均可显著抑制CYP3A1/3A2酶活性,不同配比戊己丸抑制CYP3A1/3A2酶活性作用不同,有统计学差异;随着黄连在戊己丸方中剂量水平的增高,戊己丸组方抑制CYP3A1/3A2酶活性的能力增强,且戊己丸组方中吴茱萸和白芍配比不同可以影响方中黄连抑制CYP3A1/3A2酶活性的程度.结论:戊己丸配比不同,对CYP3A1/3A2酶活性的抑制作用不同,这种差异可能是不同配比戊己丸药效学、药动学差异的原因所在.     

白背叶提取物A的体外抗肿瘤活性研究

目的观察白背叶提取物A对肿瘤细胞增殖的抑制作用。方法采用四唑盐比色试验(MTT法),以半数抑制浓度(IC50)为评价抗肿瘤活性强度的指标,分别对HL60人白血病细胞、Hela人宫颈癌细胞、A375人黑色素瘤细胞、MCF7人乳腺癌细胞4种常见的人恶性肿瘤细胞进行抗肿瘤活性的筛选。结果白背叶提取物A在浓度为10μg/ml时对HL60(P<0.05)、Hela(P<0.05)、A375(P<0.05)、MCF7(P<0.01)即有明显抑制作用(P<0.05或P<0.01),其IC50分别为29.64,30.36,36.65,42.81μg/ml。结论白背叶提取物A对以上4种肿瘤细胞的增殖均有抑制作用。     

阿维A胶囊联合消银颗粒治疗寻常型银屑病

目的探讨阿维A胶囊联合消银颗粒治疗寻常型银屑病的有效性与安全性。方法治疗组口服阿维A胶囊,初始剂量20~30 mg/d,午饭时顿服,1周后根据反应情况维持原剂量或逐渐调整至50 mg,一般病情控制后减到维持量30 mg,同时加服消银颗粒3.5 g,3次/d。对照组仅口服消银颗粒3.5 g,3次/d。结果治疗组有效率89%,对照组70%,2组比较有显著性差异(P<0.05)。结论阿维A胶囊联合消银颗粒治疗寻常型银屑病安全、有效。     

白背叶提取物A对人肿瘤细胞增殖的抑制作用研究

目的 观察白背叶提取物A对肿瘤细胞增殖的抑制作用.方法 采用四唑盐比色实验(MTT法),以半数抑制浓度(IC_50)为评价抗肿瘤活性强度的指标,分别对4种常见的人恶性肿瘤细胞进行抗肿瘤活性的筛选.结果 白背叶提取物A在浓度为5 μg/ml时对人胃癌细胞SGC-7901,人肺癌细胞A549有明显抑制作用(P<0.05或P<0.01),其IC_50分别为27.14 μg/ml,33.08 μg/ml;在浓度为20 μg/ml 时对人结肠癌细胞LoVo有抑制作用(P<0.05),其IC_(50)为36.82 μg/ml;在浓度为40 μg/ml 时对人肝癌细胞Bel-7404有抑制作用(P<0.05),其IC_50为37.70μg/ml.结论 白背叶提取物A对以上4种肿瘤细胞的增殖均有抑制作用.     

高效液相色谱法测定丹贝止咳喘胶囊中丹参酮ⅡA含量

应用 H PL C法测定丹贝止咳喘胶囊中丹参酮 A的含量 ,色谱条件为 ODS柱 ,以甲醇 :水 (2 5∶ 10 )为流动相 ,流量 0 .8m l/ m in,以 2 70 nm为检测波长 ,加样回收率为 97.4%。结果表明 ,方法简便、可行 ,可用于丹贝止咳喘胶囊的质量控制。     

海藻提取物A1和A2抑制肝癌和肺腺癌细胞增殖作用的实验研究

目的:用体外培养法研究海藻提取物A1和A2对肝癌740 2细胞、肺腺癌GLC -82细胞和胃癌MCG -80 3细胞生长的抑制作用。方法:采用MTT法进行研究。结果:海藻提取物A1和A2分别处理肿瘤细胞48h后,A1呈剂量依赖性抑制肺腺癌GLC -82和肝癌740 2细胞增殖,测得IC50 分别为2 2 61μg/mL和3 0 0 5 μg/mL ,而对胃癌MCG -80 3细胞增殖无明显抑制作用;A2对3种肿瘤细胞增殖无明显抑制作用。结论:海藻提取物A1对肝癌740 2细胞和肺腺癌GLC -82细胞的增殖有抑制作用。     

喜炎平注射液联合阿维A胶囊治疗寻常型银屑病26例

目的观察喜炎平注射液联合阿维A胶囊治疗银屑病的临床疗效。方法将48例患者随机分为治疗组和对照组。对照组22例,口服阿维A胶囊0.5mg/kg.d,每日1次;治疗组26例,在对照组基础上静脉点滴注射喜炎平注射液10ml/d,加入5%葡萄糖注射液或生理盐水250ml,每日1次,疗程1个月。结果对临床有效率进行分析,治疗组和对照组总有效率分别为84.6%、54.6%,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论喜炎平注射液联合阿维A胶囊治疗寻常型银屑病疗效佳。     

青木香和冠心苏合胶囊中马兜铃酸A的药动学研究

目的研究青木香及复方制剂冠心苏合胶囊中马兜铃酸A在小鼠体内的药动学特点及小鼠在ig给予含相同量马兜铃酸A的青木香和冠心苏合胶囊后,马兜铃酸A的吸收、分布规律的差异。方法采用RP-HPLC法测定血浆中马兜铃酸A的量。色谱条件色谱柱为DiamonsilTMC18柱(250mm×4.6mm,5μm),流动相为甲醇-水-冰醋酸(72∶27∶1),体积流量为1.0mL/min,检测波长为315nm,柱温为20℃。结果药动学实验结果显示小鼠分别ig给予青木香和冠心苏合胶囊(相当于2.5mg/kg马兜铃酸A)后,其体内的药动学房室模型均符合一室模型,青木香中马兜铃酸A主要药动学参数t1/2ka、t1/2ke,tmax、AUC、Cmax分别为5.103min、43.63min、17.89min、80.45(μg·min)/mL、0.9168μg/mL;冠心苏合胶囊中相应的参数分别为5.294min、43.50min、18.32min、33.08(μg·min)/mL、0.3818μg/mL。结论小鼠给予含马兜铃酸A相同剂量的青木香和冠心苏合胶囊后,冠心苏合胶囊中马兜铃酸A的Cmax明显低于青木香中的Cmax,说明复方配伍作用可减少马兜铃酸A的吸收。     

壮药白花九里明提取物中咖啡酸含量测定及对子宫平滑肌作用

目的:测定壮药白花九里明提取物(下称提取物A)咖啡酸的含量,并考察其对小鼠离体子宫平滑肌收缩的影响。方法:采用高效液相色谱法测定提取物A咖啡酸含量;选用健康未孕雌性成年小鼠,随机分15组,每组10只,即生理盐水组、缩宫素组、8种不同浓度九里明提取物A组、0.32 mg/ml提取物A联合用缩宫素、阿托品、心得安、乙酰胆碱组。结果:九里明提取物A中含有咖啡酸,咖啡酸在1.2μg/ml～1.95μg/ml范围内与峰面积呈良好线性关系,回归方程Y=12269X+150.99,R~2=0.9996。加样平均回收率99.75%,RSD为0.4%,提取物A测量得咖啡酸含量平均值为112.3μg/g。与生理盐水组比较,浓度在0.16 mg/ml～0.64 mg/ml九里明提取物A收缩活力、收缩频率和平均张力有明显变化,呈兴奋作用。提取物A随着浓度增大收缩活力明显增强,M受体阻断剂阿托品与0.32 mg/ml提取物A联用收缩活力和频率均明显小于单独0.32 mg/ml提取物A。β1和β2肾上腺素受体阻滞剂心得安与0.32 mg/ml提取物A联用收缩活力和频率均远小于单独0.32 mg/ml提取物A。M、N受体兴奋药乙酰胆碱与0.32 mg/ml提取物A联用收缩活力和频率均远大于单独0.32 mg/ml提取物A。结论:九里明提取物A中含具有止血作用的咖啡酸,含量平均值为112.3μg/g。提取物A能兴奋子宫平滑肌,可能是通过影响M受体或N受体,与非选择性的β受体而实现的。     

肺腺癌多药耐药细胞株SPCA1／ADM的建立及中药方剂提取物A2的逆转作用研究

目的：研究中药方剂提取物A2与肿瘤多药耐药之间的关系。方法：建立多药耐药细胞系SPCA1／ADM，通过MTT法测定细胞耐药性及耐药性的逆转作用，用流式细胞技术性的逆转作用，用流式细胞技术检测P－糖蛋白（－glycoprotein,P-gp)的表达，用荧光法测定细胞内ADM的积累。结果：A2本身具有抑癌作用，且其无或低细胞毒浓度（50μg/ml、100μg/ml）可增加SPCA1／ADM对阿霉素的敏感性29．5倍及40．5倍。10μg/mlA2 异搏定（Verapamil,VLP)10μg/ml，使SPCA1／ADM的敏感性收29．5倍增至45．5倍。提示两者有协同作用。A2可抑制P－gp的表达，并明显增加SPCA1／ADM细胞中浓度来逆转SPCA1／ADM的多药耐药。     

HPLC测定大黄提取工艺产物番泻苷A的含量

目的:测定大黄溶剂萃取工艺提取物与SFE-CO2工艺提取物中番泻苷A含量.方法:以甲醇超声振荡提取番泻苷A;选用Allitima RP C18分析柱(250×4.6 mm,5μm),流动相为0.1%TFA-HCN(44: 56),流速为1.0 ml/min,检测波长为280 nm,参比波长为600 nm,柱温25℃.结果:从番泻苷A的转移率来看,溶剂萃取工艺优于SFE-CO2工艺.     

从毛鸡骨草中分离得到具有保肝作用的同分异构体，Abrusamide A和B

作者从毛鸡骨草叶片中分离得到同分异构体,Abrusamide A and B,并通过细胞增殖抑制试验评估了化合物1和化合物2的肝脏保护作用。
　　毛鸡骨草干燥叶子(1 kg),用水提取。提取物经真空浓缩得到浓缩的水溶液(1000 ml)。浓缩水溶液用2倍量的95%乙醇沉淀24 h,真空浓缩得到水溶液(500 ml),再依次经三氯甲烷、正丁醇分配层析,得到三氯甲烷(12 g)和正丁醇提取物(80 g)及水溶液(180 g)。正丁醇提取物(80 g)经硅胶柱色谱分离,用三氯甲烷/正丁醇-甲醇洗脱,分别得到Fr A和Fr B。Fr B(30 g)经聚酰胺柱色谱分离,用水/乙醇-水/水(pH＝9)洗脱,分别得到3个部分Fr B1～B3。Fr B3(3 g)经反相C18硅胶柱色谱分离,用甲醇/水梯度洗脱,用甲醇/水重结晶得到化合物1(50 mg)、2(12 mg)和3(15 mg)。Fr B2(10 g)经反相C18硅胶柱色谱分离,用甲醇/水梯度洗脱,得到红豆碱(15 mg)和色氨酸三甲基内盐(10 mg)。     

一种真菌菌丝体甲醇提取物—A7的抗肿瘤活性研究

目的 研究一种真菌菌丝体甲醇提取物－A7的抗肿瘤活性。方法 MTT法观察A7对人BEL－7402肝癌细胞、HCT－8结肠癌细胞、SPC-A－1肺腺癌细胞、GLC－82肺腺癌细胞和EC－109食管癌细胞的生长抑制作用；以小鼠移植性肿瘤S180模型，观察A7的体内抗肿瘤作用。结果 A7对前述癌细胞的半数抑制浓度（IC50）分别为0．8，1．7，4．7，5．0，7．6μg/mL，均小于10μg/mL。动物实验表明，50mg/kgA7对S189实体肉瘤的抑制率达46．8％（P＜0．001）。结论 A7在体外和体内都具有一定的抗肿瘤活性。     

三叶青脂溶性提取物对A375细胞增殖及黑色素合成的影响

目的探讨三叶青三氯甲烷提取物对人恶性黑色素瘤A375细胞增殖、酪氨酸酶活性及黑色素合成的影响。方法采用MTT比色法,测定不同浓度三叶青三氯甲烷提取物对A375细胞体外抑制作用;比色法测定酪氨酸酶活性和黑色素含量;采用光学显微镜法观察其对细胞形态的影响。结果三叶青三氯甲烷提取物在6～500μg/ml浓度范围内对A375细胞增殖有显著的抑制作用(P<0.01),且呈时间-剂量依赖性;浓度小于50μg/ml时,对酪氨酸酶活性和黑色素合成抑制有增加趋势;在100～500μg/ml时,对A375肿瘤细胞有较强的抑制作用;光学显微镜下可见典型凋亡细胞形态学改变。结论三叶青三氯甲烷提取物对A375细胞增殖、酪氨酸酶活性及黑色素合成具有抑制作用。