人结核分枝杆菌相关干扰素-γ释放酶联免疫法对结核病诊断价值的探讨

目的 评价人结核分枝杆菌相关干扰素-γ体外释放酶联免疫免疫法(quantitative diagnostic kit for mycobacterium tuberculosis IFN-γrelease assay,TB-IGRA)在结核病的诊断价值.方法 选择确诊肺内结核164例、肺外结核90例、肺部感染90例、结核性胸膜炎60例及体检正常人群107例为对照,分别采用TB-IGRA、结明三项等方法对结核分枝杆菌感染进行辅助诊断,并对全部病例进行血沉、CRP、血常规等项目的检测,对结果进行统计学分析评价,并通过ROC曲线评价特异性IFN-γ释放试验的辅助诊断价值.结果 结核患者外周血细胞经结核分枝杆菌抗原刺激后释放入血浆中的IFN-γ的含量明显高于肺部感染组和健康对照组,且肺内结核组略高于肺外结核组,差异均有统计学意义(P＜0.05).全部患者释放人血浆中IFN-γ的含量的高低与WBC、PLT计数无相关性,且与ESR和CRP水平呈负相关,但无统计学意义.用血清结核抗体检测试验诊断结核病的灵敏度为78.03％,特异性为37.06％,而TB-IGRA则为76.43％和84.77％.ROC曲线显示,以youden指数最大处的31.84pg/mL为诊断临界点,TB-IGRA诊断结核病的灵敏度为68.8％,特异性为93.4％.结论 TB-IGRA检测肺内、肺外结核病,特异性高,操作简便、快速,准确有效,值得临床推广应用.     

HIV感染者中结核杆菌ESAT-6蛋白特异性T细胞反应的检测

目的 检测结核杆菌抗原早期分泌抗原靶分子(ESAT-6)融合蛋白其在人类免疫缺陷病毒感染患者中特异性T细胞反应,从而为艾滋病合并结核杆菌感染的诊断方法的建立提供理论依据.方法利用重组表达结核杆菌ESAT-6蛋白做为抗原,通过酶联免疫斑点技术(ELISPOT)检测HIV感染者中特异性T细胞反应,并以正常健康者、无HIV感染的结核患者作为对照.结果 ESAT-6重组蛋白对结核患者外周血单核细胞ELISPOT方法检测证实其具有良好的抗原性,斑点形成单位数(SFU/106 PBMC)在结核组和HIV合并结核感染组中显著升高,并与无合并结核感染临床表现的HIV组以及健康对照组间均存在明显的差别.结论重组结核杆菌ESAT-6蛋白可以作为抗原通过ELISPOT方法检测HIV感染者中结核杆菌合并感染.     

嗜肺军团菌巨噬细胞感染增强蛋白的表达和纯化及其在血清学诊断中的应用

目的 表达和纯化出嗜肺军团菌巨噬细胞感染增强(MIP)蛋白,研究其在军团菌肺炎血清学诊断中应用价值.方法 将已构建成功的重组质粒pET-mip转化E.coli BL21感受态细胞,诱导MIP蛋白表达,运用SDS-PAGE分析和亲和层析法纯化.用DRG军团菌IgG/IgM/IgA的ELISA检测试剂盒筛出40份阳性血清和30份阴性血清,用纯化的MIP蛋白建立间接ELISA,同时与R＆D的ELISA IgG、IgM、IgA试剂盒分别检测已筛选血清中的IgG、IgM、IgA抗体,然后对这两种方法进行比较,通过敏感性、特异性以及不同检测结果的一致性,来评价该方法的应用价值.结果 诱导相对分子质量(Mr)大约40 000的MIP融合蛋白在E.coli BL21中表达并纯化.纯化蛋白建立的间接ELISA分别检测筛选血清中IgG、IgM、IgA抗体与国外ELISA试剂盒(R＆D)进行比较,IgG抗体的灵敏度88.5％,特异度95.5％,一致性Kappa值0.846(P ＜0.05),ROC曲线下面积0.927.IgM抗体的灵敏度89.3％,特异度97.6％,一致性Kappa值0.88(P ＜0.05),ROC曲线下面积0.947.IgA抗体的灵敏度90％,特异度95.2％,一致性Kappa值0.856(P＜0.05),ROC曲线下面积0.931.结论 成功诱导了嗜肺军团菌MIP蛋白稳定表达并纯化,运用MIP作为包被抗原的军团菌肺炎的血清学诊断方法具有较高的诊断价值.     

血清HWP1检测在儿童皮肤念珠菌病诊断中应用研究

目的 分析讨论血清白色念珠菌菌丝壁蛋白1 (hyphal wall protein 1,HWP1)检测在儿童皮肤念珠菌病诊断中的灵敏度和特异性等诊断效力.方法 选取本院2014年1月至2016年12月期间收治的86例儿童皮肤病患者进行研究,所有患儿均接受血清HWP1检测,将检测结果与金标准诊断结果对比,分析血清HWP1检测诊断儿童皮肤病念珠菌感染的灵敏度、特异性、阳性诊断价值和阴性诊断价值.结果 本研究中86例患几经组织培养确诊为念珠菌感染的患儿41例,非念珠菌感染患儿45例,两性间血清HWP1抗体阳性率相比,差异无统计学意义(P＞0.05);念珠菌感染患儿血清HWP1抗体阳性率(85.37％)显著高于非念珠菌感染患儿(6.67％),差异有统计学意义(P＜0.05);血清HWP1检测诊断灵敏度85.37％,特异性93.33％,阳性预测值92.11％,阴性预测值87.50％,ROC曲线下面积为0.896.结论 血清HWP1能够为儿童皮肤病念珠菌感染筛查和鉴别诊断提供高价值信息,其灵敏度优良,特异性非常高,值得临床推荐.     

血清淀粉样蛋白A在儿童乙型流感早期诊断中的临床价值探讨

目的 探讨血清淀粉样蛋白A(SAA)、C反应蛋白(CRP)和血常规中白细胞(WBC)计数等指标,在协助儿童乙型流感早期诊断中的临床价值.方法 检测114例乙型流感组患儿和106例对照组儿童的SAA、CRP、血常规中白细胞(WBC)计数水平,计算SAA/CRP比值.分析两组间白细胞(WBC)计数、SAA、CRP、SAA/CRP比值的关系,并采用受试者工作特征曲线(ROC)评价各指标在判断乙型流感病毒感染方面的诊断效能.结果 乙型流感组SAA、SAA/CRP、WBC计数与对照组相比,差异有显著统计学意义(P<0.01).乙型流感组CRP与对照组相比,差异有统计学意义(P=0.01).ROC曲线分析显示,乙型流感组SAA、SAA/CRP的曲线下面积(AUC)均>0.8(P<0.01),灵敏度分别为85.10％、73.70％,特异性分别为80.20％、92.50％.结论 SAA、SAA/CRP比值可作为病毒感染的诊断指标,可以协助早期诊断儿童乙型流感病毒感染,对开展早期治疗具有指导意义,具有一定的临床价值.     

胶体金免疫层析试验在检测急诊患者血液传播疾病中的应用

目的 探讨胶体金免疫层析试验检测法(gold immunochromatography assay,GICA)在检测急诊病人乙型肝炎病毒表面抗原、丙型肝炎病毒抗体、人类免疫缺陷病毒抗体中的临床应用价值.方法 随机选择2010年2月至2013年2月在四川省双流县第一人民医院就诊患者1080人作为研究对象,采集患者血清标本进行GICA与酶联免疫吸附测定(enzyme-linked immuno sorbent assay,ELISA).以ELISA法检测结果为金标准,计算GICA检测乙型肝炎病毒表面抗原、丙型肝炎病毒抗体、人类免疫缺陷病毒抗体的灵敏度、特异度、漏诊率和准确性.结果 用GICA检测乙型肝炎病毒表面抗原的灵敏度为91.3％ (21/23),特异度为99.6％(1053/1057),漏诊率为8.7％ (2/23),准确性为99.4％(1074/1080);应用GICA检测抗丙型肝炎病毒抗体的灵敏度为57.1％(4/7),特异度为99.8％(1071/1073),漏诊率为42.9％(3/7),准确性为99.5％(1075/1080).应用GICA检测人类免疫缺陷病毒抗体的灵敏度、特异度和准确性为100.0％.结论 GICA可用于乙型肝炎病毒表面抗原和人类免疫缺陷病毒抗体的筛检,但对丙型肝炎病毒抗体的检测漏诊率高,不适宜用于丙型肝炎病毒抗体的筛检.     

流式细胞术检测中性粒细胞CD64指数在鉴别早期感染性疾病中的临床价值分析

目的 分析流式细胞术检测中性粒细胞CD64指数在鉴别早期感染性疾病中的临床价值.方法 选取我院2015年10月至2017年4月期间收治的感染性疾病患者200例,根据感染严重程度分为早期局部感染组(n=120)和脓毒血症组(n=80),另选同期入院体检的健康志愿者50例作为对照组.所有研究对象均于入院后24 ～ 48h内及治疗前进行血常规WBC检测和CRP测定,采用流式细胞仪多参数分析中性粒细胞CD64 (MESF)及中性粒细胞CD64指数,通过绘制受试者工作特征(ROC)曲线计算中性粒细胞CD64指数鉴别早期感染性疾病的灵敏度和特异性.结果 对照组、早期局部感染组、脓毒血症组中性粒细胞CD64及血清CRP、WBC水平依次显著升高,各组差异有统计学意义(P＜0.05).早期局部感染组中性粒细胞CD64指数与血浆CRP、WBC水平呈正相关(P＜0.05).中性粒细胞CD64指数、CRP、WBC的曲线下面积分别为0.896、0.757、0.629(P均＜0.05);与CRP、WBC相比,中性粒细胞CD64指数鉴别早期感染性疾病的灵敏度、特异性为97.39％、90.59％明显升高.结论 分析外周血中性粒细胞CD64指数对于早期感染性疾病的鉴别诊断有重要价值,其诊断效能明显优于血常规WBC和CRP检测.     

两种不同方法检测HIV抗体结果的比较

目的 对化学发光和酶联免疫法(ELISA)检测HIV抗体的方法进行评价,比较检测结果的差异,为HIV初筛的方法的选择和临床应用提供参考.方法 以HIV抗体确认实验结果为金标准,对3000例我院就诊的患者同时应用两种方法检测,对两结果进行比较,评价两种检测方法筛查HIV感染者的特异性、灵敏度.结果 ELISA检测法阳性率为0.93％,特异性为99.93％,灵敏度为89.66％,化学发光法阳性率为1.03％,特异性为99.93％,敏灵度为100％.结论 两种方法均适合HIV的初筛,都具有较高的特异性,化学发光法的灵敏度要优于ELISA方法.     

Value of Combined Detection of Interferon-γ, Vascular Endothelial Growth Factor, C-reactive Protein and Adenosine Deaminase in Differential Diagnosis of Tuberculous and Malignant Pleural Effusion

目的 探讨干扰素-γ(IFN-γ)、血管内皮生长因子(VEGF-C)、C-反应蛋白(CRP)及腺苷脱氨酶(ADA)在结核性与恶性胸腔积液鉴别诊断中的应用价值.方法 检测122例临床:确诊的胸腔积液患者(恶性胸腔积液56例,结核性胸膜炎48例,其他类型18例)胸水和血清中的IFN-γ、VEGF-C、CRP及ADA含量.结果 结核组的IFN-γ、CRP浓度及ADA活性明显高于恶性肿瘤组,差异有统计学意义(P＜0.01),根据受试者工作特征(ROC)曲线结果判断,以100ng/L为临界值,IFN-γ对结核性胸腔积液诊断的灵敏度、特异性分别为83.1％、92.3％;以45U/L为临界值,ADA对结核性胸腔积液诊断的灵敏度、特异性分别为85.6％、96.3％;以110mg/L为临界值,CRP对结核性胸腔积液诊断的灵敏度、特异性分别为79.1％、84.2％;三项指标联合检测,其灵敏度、特异性分别达到87.8％和86.0％.恶性胸腔积液中VEGF-C高于结核性及其他类型胸腔积液(P＜0.01);VEGF-C/ADA≥8对恶性胸腔积液诊断的灵敏度、特异性分别为86.3％、82.6％;VEGF-C/ADA≤3对结核性胸腔积液诊断的灵敏度、特性度分别为85.1％、87.1％.结论 联合检测IFN-γ VEGF-C、CRP及ADA可以提高结核性胸膜炎诊断的灵敏度及特异性,VEGF-C与ADA浓度比值对胸腔积液的鉴别诊断具有较好的临床价值.     

检测抗HIV-1/2型抗体的双抗原夹心方法的建立及其试剂盒的研制

目的 建立更敏感的检测人免疫缺陷病毒（HIV）抗体的方法,并研制检测试剂盒。方法 根据HIV－1／2型的基因序列及其所编码氨基酸结构,采用固相法合成了HIV－1型的gp41.1、gp41.2、gp120、p24和HIV－2型的gp36五条多肽,混合包被酶标板作为固相抗原。用辣根过氧化物酶标记以上多肽抗原作为标记物,建立检测血清中抗HIV－1／2抗体的双抗原夹心ELISA法。同时,应用该方法制备检测HIV抗体的试剂盒,并检测三批中国卫生中药品和生物制品检定所HIV诊断试剂国家参比品。结果 建立了检测HIV－1／2抗体的双抗原夹心法。用检定所参比品检测,该方法特异性、灵敏度均为100％,变异系数小于10％。与间接法相比较其灵敏度、特异性均高于间接法（P＜0．05）。检测210份其他病种患者血清均为阴性。与GBI公司的HIV抗体诊断试剂比较,检测40份卫生部药品和生物制品检定所提供的质控参比品（阳性20份,阴性20份）,GBI试剂阴、阳性符合率及总符合率分别为100%(20/20)、85％（17／20）及92．5％（37／40）,而应用该方法所研制的诊断试剂盒、阳性符合率及总符合率为100％。该试剂已通过国家卫生部质检。与雅培公司HIV诊断试剂比较检测90份献血员血清和88份HIV－1／2型感染者血清,符合率为100％。试剂盒于37℃放置4d后的检测结果的阴、阳性判定不受影响。结论 本法特异性强、灵敏度高、稳定性好,适用于献血员的筛选和临床HIV感染的检测。     

Tuberculosis

The incidence of tuberculosis in Japan is the highest among developed countries, with approximately 42,000 new cases reported in 1997, marking the first increase in 38 years. The growing incidence among the elderly and group infections among young adults may be responsible for this increase. Infection with tubercle bacilli(TB) occurs via airborne transmission, which involves dissemination of either airborne droplet nuclei on evaporated droplets that may remain suspended in the air for long periods of time. Microorganisms carried in this manner can be dispersed widely by air currents, therefore, special air handling and ventilation are required to prevent airborne transmission. Patients with infectious TB must be placed in a single room with negative pressure and a ventilation rate of 6 or more air changes per hour. Health care workers must wear an N95 mask when entering the room, and if an incident involving possible TB infection occurs in the hospital, the concerned people should be examined for Tuberculin reaction. Two to 12 weeks after the TB infection has occurred, the tuberculin reaction converts to positive. However, most Japanese people have been vaccinated with BCG, so assessment of the results is difficult. A comparison of the diameter of erythema before and after the potential infection may be the most confirmatory. If latent TB infection is suspected, preventive therapy with isoniazid must be considered. Special biohazard systems in the clinical laboratory and autopsy room have also been proposed to prevent TB dispersal. DOTS(Directly Observed Treatment, Short-course) is useful to prevent the emergence of multi-drug-resistant TB. In some areas of Japan that have low levels of compliance with TB therapy, trials of DOTS have been started.     

肺结核合并气管支气管结核危险因素及诊断

气管支气管结核是肺结核的一种特殊类型，其临床表现及影像学特征不典型，容易导致漏诊、误诊，晚期可能出现气道狭窄甚至闭塞、毁损肺等严重并发症。近年来多项研究指出女性、症状持续时间大于4周、合并糖尿病、职业为肺结核合并气管支气管结核常见危险因素，本文通过对相关危险因素进行综合分析，并对气管支气管结核诊断现状进行总结，以期控制结核病流行并为气管支气管结核防治措施提供新思路。     

Therapy of Tuberculosis

Despite its great decline in recent years as a cause of death, tuberculosis remains a curable and preventable disease. Remarkable progress has been made in understanding the pathogenesis and management of both pulmonary and extrathoracic disease. With the availability of multiple bactericidal drugs the length of treatment has been considerably shortened, while maintaining the high cure rate and low relapse rate. With the transfer of the treatment from the sanitoriums and specialized hospitals to mainstream outpatient medicine, it is incumbent upon all physicians who treat tuberculous patients to understand the actions of each drug and the most effective combinations.     

Tuberculosis of patella

Osteoarticular tuberculosis is rare and affects the knee in about 8% of cases and the patella in less than 0.1%. This study reports a series of five patients who were immunologically competent but living in an endemic area for tuberculosis. Treatment with antituberculous therapy and early mobilization of the knee joint led to a successful outcome in all cases without patellectomy or arthrodesis.