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相似文献
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1.
 目的:建立准确可靠、操作性强、适用于临床实际工作的免疫球蛋白重链(immunoglobulin heavy chain,IgH)基因单克隆重排检测方法,用于B细胞性非霍奇金淋巴瘤(B-cell non-Hodgkin lymphoma,B-NHL)的辅助诊断。方法:采用骨架区(framework region,FR)引物FR2、FR3和重链连接区 (joining region of heavy chain,JH)引物LJH、VLJH组合、A管+B管模式、半巢式聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)法对121例B-NHL、58例T细胞性非霍奇金淋巴瘤(T-cell non-Hodgkin lymphoma,T-NHL)和19例淋巴结反应性增生的石蜡组织进行IgH基因单克隆重排检测,分析IgH基因单克隆重排检出率在B-NHL组、T-NHL组和淋巴结反应性增生组中的差异,以及B-NHL中联合应用FR2和FR3与单独应用FR2、FR3之间IgH基因单克隆重排检出率的差异。结果:118例成功检测的B-NHL中,IgH基因单克隆重排检出率为81%(96/118);54例成功检测的T-NHL中,IgH基因单克隆重排检出率为4%(2/54);19例成功检测的淋巴结反应性增生中未检出IgH基因单克隆重排。B-NHL组与T-NHL组、淋巴结反应性增生组相比,IgH基因单克隆重排检出率差异具有显著性(P<0.05)。B-NHL中, FR2基因单克隆重排检出率为58%(68/118),FR3基因单克隆重排检出率为55%(65/118),联合应用FR2和FR3,IgH基因单克隆重排检出率为81%(96/118),联合应用FR2和FR3与单独应用FR2、FR3的检出率有显著差异(P<0.05)。结论:采用FR2、FR3、LJH及VLJH引物组合、A管+B管模式和半巢式PCR法进行石蜡组织IgH基因单克隆重排检测,简单易行,结果准确可靠,阳性率较高,可用于临床B-NHL的辅助诊断。  相似文献   

2.
目的探讨免疫球蛋白(Ig)基因重排检测在滤泡性淋巴瘤(follicular lymphoma, FL)不同分级中的应用。方法采用PCR-GeneScan法检测广东省人民医院病理科2016年9月~2019年2月收集的39例FL免疫球蛋白重链/轻链(IgH/L)基因重排,统计分析克隆性IgH/L基因重排与肿瘤分级的关系。结果 39例FL石蜡标本中29例IgH/L基因重排阳性,其中FL1基因重排的检出比例为8/15,FL2、FL3重排的检出比例分别为5/7、16/17。Spearman等级相关检验和χ2检验结果显示,IgH/L基因重排与FL的分级呈正相关(rp=0.376,P<0.001),IgH/L基因重排率随着肿瘤分级的增加而增加,FL1、FL2和FL3中表达差异有统计学意义(P<0.05)。结论利用Ig基因重排检测对于滤泡性淋巴瘤的诊断有辅助性作用,并且利用PCR-GeneScan法可提高重排检测的敏感性和特异性,对于滤泡性淋巴瘤的早期诊断有较高的价值。  相似文献   

3.
原发性睾丸恶性淋巴瘤克隆性IgH基因重排的检测   总被引:3,自引:1,他引:2  
目的:探讨原发性睾丸淋巴瘤克隆性IgH基因重排的检测方法。方法:用半巢式PCR方法和聚丙烯凝胶(PAGE)-银染法检测14例睾丸恶性淋巴瘤的IgH基因重排。结果:与免疫组化对照,PCR检测的睾丸原发性B细胞淋巴瘤FR3A检出测率为85.71%,FR2的检出率为64.29%,而二者的综合检出率为100%,互补性较强。结论:半巢式PCR方法及PAGE-银染法对于原发性睾丸细胞淋巴瘤IgH基因的检出率有较高的灵敏度,FR3A和FR2引物的共同应用可以有效提高综合检出率,在目前情况下,应用PCR方法来鉴别恶性淋巴瘤,必须结合HE形态和免疫表型等综合判断。  相似文献   

4.
石蜡淋巴瘤组织中IgH FR3区基因重排引物分析   总被引:1,自引:0,他引:1  
目的 利用生物信息学方法分析免疫球蛋白重链(IgH)框架区(FR3)基因重排引物并探讨其在石蜡包埋非霍奇金淋巴瘤(NHL)组织中应用价值.方法 通过Chustal W 软件比较44条有效的IgH可变区和6条J区的基因片段,选取IgH FR3区3对(P1,P2,P3)基因重排引物,其中,P2为改进的引物.另选一对TCRγ脚引物作为T细胞淋巴瘤重排引物,通过PCR扩增,检测经形态学及免疫组织化学确诊的144例石蜡包埋组织标本,包括113例B细胞淋巴瘤、24例T细胞淋巴瘤和7例淋巴结反应性增生组织.以DG75淋巴瘤细胞系DNA作为对照组.结果 引物对P1、P2、P3在B细胞淋巴瘤检出阳性率分别为71.7%(81/113),82.3%(93/113)和76.1%(86/113),三者检出率差异无统计学意义;在T细胞淋巴瘤检出率分别12.5%(3/24)、12.5%(3/24)、16.7%(4/24).将P1和P2引物组合分析,B细胞淋巴瘤阳性检出率可以达到92.3%.以上重排引物在7例反应性淋巴结中均未检出.结论 3对IgH FR3区中,新改进的P2引物在B细胞淋巴瘤中的检出率最高(82.3%).2对IgH FR3区引物联合检测可明显提高石蜡组织中B细胞淋巴瘤的检出率.  相似文献   

5.
滤泡性淋巴瘤(FL)的遗传学特征为t(14;18)(q32;q21)染色体易位,导致肿瘤细胞BCL-2基因重排,BCL-2蛋白过表达。部分BCL-2蛋白阳性表达的FL中缺乏t(14;18)染色体易位,也有少数FL同时缺乏BCL-2蛋白表达及t(14;18)染色体易位。  相似文献   

6.
B淋巴细胞增生性疑难病例中IgH基因克隆性重排的分析   总被引:1,自引:0,他引:1  
目的 探讨IgH基因克隆性重排对B淋巴细胞增生性疑难病变的辅助诊断价值.方法 检测77例B淋巴细胞增生性疑难病例中IgH基因的克隆性重排情况,均采用BIOMED-2系统IgH克隆性试剂盒中FR1、FR2、FR3三组家族引物进行PCR及聚丙烯酰胺凝胶电泳,硝酸银染色后观察,并对照最终病理诊断进行分析.结果 77例病变的最终病理诊断:B淋巴细胞反应性增生12例,不能排除B淋巴细胞不典型增生或淋巴瘤20例,B细胞性淋巴瘤45例.三组中FR1、FR2和FR3至少有一个为阳性的比值分别为2/12、11/20(55%)和36/45(80%).B细胞性淋巴瘤中,FR1、FR2和FR3的阳性率分别为60%(27/45)、60%(27/45)、56%(25/45),其类型有边缘区B细胞性淋巴瘤20例(其中黏膜相关淋巴组织型结外边缘区淋巴瘤18例,结内边缘区淋巴瘤2例),弥漫性大B细胞淋巴瘤7例,滤泡性淋巴瘤7例,套细胞性淋巴瘤1例,Burkitt淋巴瘤1例,浆细胞瘤4例,不能分型5例.FR1、FR2和FR3三者检测均为阴性但仍诊断为淋巴瘤9例(20%),其中1例后来出现肝脏B细胞淋巴瘤.对IgH基因重排阳性的B淋巴细胞反应性增生和不典型增生14例的随访结果,4例重新取活检后诊断为B细胞性淋巴瘤,其中3例IgH基因重排检测为阳性.结论 联合检测IgH基因FR1、FR2和FR3克隆性重排对B淋巴细胞增生性疑难病变诊断有重要的辅助价值;对形态改变和免疫表型诊断淋巴瘤依据不足而基因重排阳性者,重取活检或随访有一定价值;对阴性病例有必要补充IgH基因重排及IgK和IgL基因重排的检测以提高检测敏感性.  相似文献   

7.
弥漫性大B细胞淋巴瘤t(14;18)易位及bcl-2基因扩增的检测   总被引:2,自引:0,他引:2  
目的探讨弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)t(14;18)染色体异位及bcl-2基因扩增在其分类及临床分期、疗效评估中的作用。方法先对60例DLBCL的标本进行显微切割,获取相对比较纯的肿瘤组织,再使用细胞核芯片荧光原位杂交(FISH)对标本进行t(14;18)易位及bcl-2基因扩增检测,采用免疫组织化学SP法在组织微阵列上同步观测CD20、CD10、bcl-6、MUM1的表达,进行生发中心样(GCB)和非生发中心样(non-GCB)分类;通过病例分析得出治疗效果及临床分期的信息,并统计分析以上各因素之间的关系。结果在60例DLBCL中,10例bcl-2/IgH阳性,18例bcl-2基因扩增;GCB29例(48.3%),non-GCB31例(51.7%)。经FISH检测t(14;18)阳性10例中,GCB8例,non-GCB2例,差异有统计学意义(P=0.031)。t(14;18)阳性及bcl-2基因扩增的病例bcl-2表达均增高。在36例正规CHOP治疗的病例中,bcl-2扩增13例,无扩增23例,bcl-2扩增的13例之治疗结果显效、部分有效、无效率分别为3例(23.1%)、4例(30.8%)和6例(46.2%);临床分期情况为Ⅰ-Ⅱ期1例(7.7%),Ⅲ-Ⅳ期12例(92.3%),这两项指标与bcl-2不扩增的相比差异均有统计学意义(P=0.019、0.046)。结论t(14;18)易位及bcl-2基因扩增均是引起DLBCL之bcl-2蛋白表达的原因,bd-2阳性者与预后有关的原因难以确定,可能是由于引起其阳性表达的原因不同所致;bcl-2基因扩增与治疗效果较差及临床分期较晚有关;FISH检测t(14;18)染色体易位可用于DLBCL的分类。  相似文献   

8.
目的探讨联合检测IgH基因单克隆性重排带及BCL-2IgH(MBR)融合基因,对B-NHL淋巴瘤诊断及化疗前、后微小残留灶克隆性变化监测的意义。方法采用上述两种靶基因突变检测的PCR方法各两种,检测B-NHL组患者及非淋巴瘤肿瘤组患者各30例,观察化疗前、后的检出阳性率及变化,同时设健康对照30例。结果联合两种方法对B-NHL淋巴瘤治疗前患者WBC基因组DNA中的IgH基因96.6%呈单克隆重排带,化疗后原来单克隆重排带者有1例转阴,2例转为2克隆性,2例转为3克隆性;两组对照阴性。B-NHL淋巴瘤患者中38.3%BCL-2/IgH(MBR)融合基因阳性,非淋巴瘤肿瘤组患者为10.0%,健康人为6.6%;联合两种方法对B-NHLBCL-2IgH(MBR)的总检出阳性率为38.3%。结论联合检测IgH基因重排及BCL-2/IgH(MBR)融合基因可提高B-NHL的诊断率,IgH基因单克隆重排带在B-NHL,化疗前后检测对监测B-NHL微小残留灶克隆性变化有一定意义。  相似文献   

9.
目的 采用凝胶扫描技术,力求对采用聚合酶链反应(PCR)检测非霍奇金淋巴瘤(NHL)抗原受体基因重排结果分析时建立量化标准,以利于临床医师应用时客观判断,并为其筛选随访病例提供依据。方法用PCR对96例B-NHL分别采用IgH FR3A及FR2A检测IgH基因克隆性重排。65例经IgH FR3APCR已证实为IgH基因克隆性重排B-NHL及8例良性病变淋巴组织和5例正常人外周血单核细胞,IgH FR3APcR产物8%变性聚丙烯酰胺凝胶电泳银染后图像行凝胶扫描,绘制曲线并计算h1/h2比值。结果(1)采用FR3A引物,克隆性IgH基因重排在96例B-NHL中检测率为68%,采用FR2A引物,检测率为61%,结合FR3A、FR2A引物,总检测率为83%。(2)凝胶扫描曲线示65例B-NHL的h1/h2均>3,而5例正常人外周血单核细胞曲线均表现为钟型,8例良性病变淋巴组织h1/h2比值均<1.5。结论非霍奇金淋巴瘤抗原受体基因重排检测的凝胶扫描分析曲线中,h1/h2峰高比值至少>3可提示为IgH基因克隆性苇排,<1.5可能提示IgH基因多克隆重排。比值介于1.5和3之间,提示有随访意义。联合FR3A,FR2A引物,可提高B-NHL IgH基因克隆性重排的检测率。  相似文献   

10.
非霍奇金淋巴瘤的IgH和TCRδ基因重排   总被引:9,自引:0,他引:9  
目的:探讨非霍奇金淋巴瘤(NHL)免疫球蛋白重链(IgH)和T细胞受体δ链(TCRδ)基因重排情况。方法:用半重叠式聚合酶链反应(PCR)方法检测IgH及TCRδ基因重排。结果:57例NHL中41例(72%)发生IgH基因重排,30例(53%)出现TCRδ基因重排。结论:检测克隆性基因重排可以作为诊断NHL有效基因标志,NHL中存在系列不忠实现象。  相似文献   

11.
目的 分析眼附属器淋巴组织增生性病变的临床病理特点,探讨其分子遗传学特征及其意义.方法 收集1995-2007年37例眼附属器淋巴组织增生性病变石蜡组织标本(其中5例为反应性增生性病变,32例为淋巴瘤),依据2001年WHO肿瘤分类标准对32例淋巴瘤标本重新诊断分类.采用IgH、MALT1、bcl-6、c-Mye、bcl-2、CCND1、bcl-10、FOXP1双色分离重排探针、IgH/bcl-2双色融合易位探针和18号染色体着丝粒探针,利用间期荧光原位杂交(FISH)的方法 检测眼附属器淋巴组织增生性病变的分子遗传学特点.结果 32例淋巴瘤均为非霍奇金B细胞淋巴瘤.其中,黏膜相关淋巴组织结外边缘区B细胞淋巴瘤(MALT)淋巴瘤28例(87.5%),滤泡性淋巴瘤2例,弥漫性大B细胞淋巴瘤2例.60.7%(17/28)的眼附属器MALT淋巴瘤携带分子遗传学异常.其中,IgH基因断裂1例,但未找到与其发生相互易位的伙伴基因;基因3拷贝者16例,其中MALT1基因、bcl-6基因和c-Myc基因3拷贝的发生率分别为25%(7/28)、43%(12/28)和7%(2/28).16例基因3拷贝病例中,两种基因3拷贝合并存在者5例,其中bcl-6基因合并MALT1基因3拷贝者4例,bcl-6基因合并c-Myc基因3拷贝者1例.进一步研究显示,MALT1基因3拷贝者均存在18号染色体三体.2例滤泡性淋巴瘤都携带t(14;18)(q32;q21)/IgH-bcl-2.2例弥漫性大B细胞淋巴瘤均存在遗传学异常,1例表现为bcl-6基因3拷贝合并18号染色体三体,另1例表现为bcl-6基因3拷贝合并IgH和c-Myc基因双断裂.5例反应性淋巴组织增牛性标本均未见分子遗传学异常.结论 MALT淋巴瘤是眼附属器最常见的淋巴瘤类型;间期FISH有助于淋巴组织增生性病变的良恶性鉴别及淋巴瘤的分类;MALTI基因3拷贝者由18号染色体三体所致;18号染色体三体和bcl-6基因3拷贝(可能为3号染色体三体所致)是眼附属器MALT淋巴瘤常见的分子遗传学异常.  相似文献   

12.
目的 探讨荧光原位杂交(FISH)检测在淋巴瘤诊断中的价值,为淋巴瘤的准确诊断提供依据.方法 以前瞻性非随机分组模式,采用三组IgH/bcl-2、IgH/CCNDl、API2/MALT1探针,对临床初诊为淋巴瘤的74例活检新鲜样本的瘤细胞进行FISH,检测其相应t(14;18)、t(11;14)及t(11;18)染色体易位,将检测结果与组织病理诊断进行比较评价.结果 74例中8例(10.8%)检测到染色体易位,分别为t(14;18)和t(11;14)各4例.62例组织病理诊断为淋巴瘤者中7例检测到染色体易位,分别为t(14;18)3例(组织病理诊断2例为滤泡性淋巴瘤、1例为结节硬化型霍奇金淋巴瘤);t(11;14)4例(组织病理诊断2例为套细胞淋巴瘤、1例滤泡性淋巴瘤,1例小淋巴细胞淋巴瘤).在组织病理未诊断为淋巴瘤的12例中,仅检测到1例t(14;18),而其组织形态显示为淋巴组织增生活跃,经FISH检测更正诊断为滤泡性淋巴瘤.25例弥漫性大B细胞淋巴瘤未检测到t(14;18).在其他有基因数目异常者56例(75.7%)中恶性病变52例(92.9%),与4例(7.1%)良性病变比较,病变性质与基因数目异常之间差异有统计学意义(P=0.011).结论 FISH技术检测淋巴瘤特异的遗传学异常对于复核组织病理诊断、鉴别其类型、亚型及病变的良、恶性有重要参考价值.  相似文献   

13.
利用PCR技术和免疫组化方法,对28例滤泡型淋巴瘤和18例反应性滤泡增生进行了bcl-2/IgH融合基因和bcl-2蛋白表达的检测。结果发现不仅57%的滤泡型淋巴瘤中t(14:18)易位,而且在33%的滤泡反应性增生也存在这种易位。二者经X ̄2检验无显著性差异(P>0.05)。在本实验中仅采用mbr引物对的条件下,bcl-2蛋白异常表达与bcl-2/IgH融合基因的形成之间并无相互对应的关系。在肿瘤性滤泡与反应性滤泡中bcl-2蛋白表达的不同分布,有助于对两者的鉴别诊断。  相似文献   

14.
Composite lymphoma is a rarely reported entity, defined as two or more morphologically distinct types of lymphoma at the same anatomic site, occurring either synchronously or metachronously. Since 1978, about 100 case reports of composite lymphoma have been cited, many involving combinations of low-grade B-cell lymphomas. To our knowledge, no cases of large-cell transformation of composite lymphoma have yet been described. We report the case of a patient who presented with diffuse large B-cell lymphoma (DLBCL) fifteen years after successful treatment for a mature B-cell lymphoma. Reassessment of the patient's lymph node from 1995, using techniques not previously available, resulted in a revised diagnosis of composite lymphoma, comprising both follicular lymphoma (FL) and small lymphocytic lymphoma (SLL). Analysis of B-cell gene rearrangement studies using BIOMED-2-based PCR, and of t(14;18) rearrangements by both FISH and PCR, provided evidence that the DLBCL evolved from transformation of the composite lymphoma, specifically from its FL component. B-cell gene rearrangement studies also supported a clonal relationship between the FL and SLL components of the composite lymphoma.  相似文献   

15.
ObjectiveTo explore the clinical value of immunoglobulin (Ig) and T cell receptor (TCR) gene rearrangement in the diagnosis of non-Hodgkin lymphoma.MethodsUsing the standardized BIOMED-2 multiplex PCR strategy to detect IgH, IgK and TCR in 272 cases of mature B-cell lymphoma, 55 cases of mature T-cell lymphoma, 21 cases of extranodal NK/ T-cell lymphoma, nasal type, and 20 cases of lymphoid tissue reactive hyperplasia.ResultsAmong all mature B-cell lymphomas, the sensitivity of Ig gene rearrangement was 91.18% (248/272), IgH and IgK gene rearrangement was 76.47% (208/272) and 75.00% (204/272), respectively, meanwhile the sensitivity of TCRγ rearrangement was 3.68% (10/272). In the 55 cases of mature T-cell lymphoma, the sensitivity of the detection of TCRγ was 76.36% (44/55), at the same time the sensitivity of Ig gene rearrangement was 14.55% (8/55), IgH and IgK gene rearrangement was 7.27% (4/55) and 12.73% (7/55), respectively. In 21 cases of extranodal NK/T cell lymphoma, nasal type, and 20 cases of reactive lymphoid hyperplasia, no gene rearrangement was found in the samples of IgH, IgK and TCR. The sensitivity of gene rearrangement in Ig/TCR in B and T-cell lymphoma was significantly different from that in the control group (P < 0.05).ConclusionThe Ig/TCR gene rearrangement of BIOMED-2 multiplex PCR strategy has important auxiliary value in the diagnosis of B/T-cell non-Hodgkin lymphoma respectively, however, a few B-cell lymphomas may company TCR gene rearrangement as well as a few T-cell lymphomas may accompany Ig gene rearrangement, it must be comprehensively judged with the combination of morphology, immunohistochemistry and clinical features.  相似文献   

16.
Recent evidence suggests that nodular lymphocyte predominance Hodgkin's disease (NLPHD) is a distinct entity that may be related to progressively transformed germinal centers, abnormal B-lymphoid hyperplasia, and low-grade B-cell lymphoma. bcl-2 is a marker for the translocation t(14;18)(q32;q21), which occurs in most follicular-derived B-cell lymphomas. Eleven cases of NLPHD and 19 cases of Hodgkin's disease of nodular sclerosis (NSHD) and mixed cellularity (MCHD) type were analyzed for immunoglobulin JH gene rearrangement. bcl-2 translocation was determined with Southern blot analysis and the polymerase chain reaction using biotin labeled probes to the major breakpoint region and the alkaline phosphatase reaction. All cases of NLPHD were negative for JH gene rearrangement and bcl-2 translocation. Cases of NSHD and MCHD were similarly negative for bcl-2, although three cases exhibited clonal JH gene rearrangements. These results confirm that a clonal B-cell population is not detected in NLPHD. Cases of NLPHD differ from most low-grade follicular B-cell lymphomas in that they lack bcl-2 gene rearrangement and t(14;18) translocation at the major breakpoint region.  相似文献   

17.
OBJECTIVE: To study the lymphoid clonality on Tunisian B-cell lymphomas cases by polymerase chain reaction (PCR)-based techniques using DNA from paraffin-embedded tissues. MATERIAL AND METHODS: Here we conducted a retrospective PCR clonality study on 73 cases of B-cell lymphomas and 12 reactive lymphoid tissues. The quality of DNA extracted was tested by beta-globin PCR. Consensus primers directed at the FRIII-VH and FRII-VH regions of the immunoglobulin heavy chain (IgH) gene were used to detect clonality. RESULTS: The results showed that 52 of 73 (71%) B-cell lymphomas exhibited good quality of amplifiable DNA. Clonality was found in 77% of cases using the set of primers FRIIIa/LJH/VLJH and in 65.5% using the set of primers FRIIa/LJH/VLJH. Lymphomas derived from pregerminal centre showed a high rate detection of clonal IgH gene rearrangement (100%) compared to other group of tumors derived from germinal centre or postgerminal centre (74.5%). None of the polyclonal controls gave a clonal pattern. CONCLUSION: This is the first large series of PCR clonality study of IgH gene rearrangements on B-cell lymphoma from Tunisia. Our results were similar to other reports in terms of sensitivity and specificity of these techniques and confirm the interest of that PCR for detecting clonal IgH gene rearrangements in lymphoma.  相似文献   

18.
目的 探讨BIOMED-2聚合酶链反应(PCR)在成熟非霍奇金B细胞淋巴瘤(B-NHL)诊断中的价值.方法 收集成熟B-NHL组织标本72例,其中弥漫性大B细胞淋巴瘤37例,黏膜相关淋巴组织结外边缘区淋巴瘤35例为研究对象,并以反应性增生病变25例作为对照.提取以上组织的DNA,并以PCR来检测其完整性和可扩增性,选取质量合格的DNA.85.6%(83/97)的样品DNA长度>300 bp,其中60例成熟B-NHL和23例反应性增生可用于BIOMED-2 PCR检测免疫球蛋白重链(IgH)和kappa轻链(IgK)基因重排的克隆性.结果 利用BIOMED-2 PCR检测的60例成熟B-NHL中,57例存在Ig基因的克隆性重排,其检测敏感性为95%,23例反应性增生病例中未出现Ig基因的克隆性重排,其检测特异性为100%.结论 BIOMED-2 PCR适用于石蜡包埋组织.该方法具有很高的敏感性和特异性,对成熟B-NHL诊断的辅助价值很高.  相似文献   

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