P物质及其神经激肽-1受体在慢性非细菌性前列腺炎大鼠L5~S2脊段的表达

目的:研究慢性非细菌性前列腺炎(CNP)大鼠模型不同造模时段L5~S2脊髓背角P物质(SP)及其神经激肽-1受体(NK-1R)的表达。方法:成年雄性SD大鼠40只,随机分成对照组、模型组(45 d组、60 d组和90 d组),每组10只。另取30只大鼠提取前列腺组织蛋白,模型组腹腔注射0.5 ml百白破疫苗,同时皮内多点注射1 ml前列腺蛋白提取液和弗式完全佐剂(1∶1)混合液造模,对照组注射同体积生理盐水。分别于造模后第45、60、90天测量大鼠抬腿反应阈值(PWT),ELISA法测定前列腺组织中TNF-α、IL-1β、IL-2和IL-10含量,光镜和电镜观察前列腺组织形态学变化,免疫组化检测L5~S2脊髓中SP和NK-1R的表达。结果:模型组大鼠疼痛敏感性增强,PWT 45 d组、60 d组、90 d组分别为(48.72±6.56)g、(42.16±4.3)g、(25.18±5.37)g,显著低于对照组的(73.65±6.68)g。与对照组比较,各模型组大鼠前列腺组织中TNF-α、IL-1β、IL-2和IL-10含量均显著增加(P均0.05),并且90 d组增加更显著(P均0.05)。免疫组化结果显示,SP和NK-1R主要表达于脊髓背角,呈棕黄色索状分布,其他部位不着色或呈淡黄色;SP和NK-1R的表达量各模型组显著高于对照组(P均0.05),同时90 d组也显著高于其他3组(P均0.05)。光镜下,对照组前列腺组织未见炎细胞浸润,随着造模时间的延长,前列腺组织出现明显水肿,淋巴细胞增加显著;透射电镜也显示模型组大鼠前列腺组织呈现明显的炎性改变,9 0d组管周间质水肿更加明显,管周细胞与上皮基底间隙增宽,成纤维细胞及周围胶原原纤维数量增多。结论:CNP大鼠L5~S2脊髓背角SP合成增多,受体上调。     

神经激肽 1受体在溃疡性结肠炎组织的表达和临床意义

目的 了解P物质受体-神经激肽1受体（NK-1R）在正常肠管和溃疡性结肠炎组织中的表达，探讨该受体在溃疡性结肠炎的病理生理过程中所起的作用。方法 21个溃疡性结肠炎标本取自因该病并发症而手术的患。正常肠管组织取自24个器官捐献，应用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）技术检测正常肠管和溃疡性结肠炎组织NK-1R的信使核糖核酸（mRNA)水平，应用Western blot技术检测NK-1R的蛋白水平，应用免疫组织化学方法（免疫组化）进行NK-1R的组织学定位。结果 与正常肠管相比，溃疡性结肠炎组织中NK-1RmRNA和蛋白都过度表达，免疫组化检查显示，NK-1R的表达主要位于溃疡性结肠炎组织的肠黏膜表面，黏膜固有层的单核细胞，黏膜下层的动，静脉和纵形与环形肌层等处。结论 溃疡性结肠炎组织中NK-1R的表达水平明显上调，扰乱了神经激肽的作用环节，加剧肠管的病理改变。     

P物质与香草酸瞬时受体亚型1在慢性非细菌性前列腺炎大鼠神经痛中的作用研究

目的:探讨慢性非细菌性前列腺炎(CNP)疼痛的可能机制。方法:自身免疫法建立CNP大鼠模型;Von Frey丝检测机械刺激缩足阈(PWT);进行前列腺病理学检查和免疫组化检测前列腺与脊髓L5~S2节段P物质(SP)、香草酸瞬时受体亚型1(TRPV1)表达变化和相关性。结果:造模后大鼠PWT[(48.83±11.55)g]下降,与对照组[(67.98±5.44)g]相比差异有统计学意义(P0.05)。前列腺呈现显著炎症反应,病变范围、间质淋巴细胞浸润都较对照组反应程度有所加重,差异有统计学意义(P0.05)。与对照组相比,模型组前列腺与脊髓背角L5~S2中SP、TRPV1阳性表达均上调,差异有统计学意义(P0.05)。前列腺与脊髓中SP蛋白表达无相关关系(r=0.099,P=0.338);TRPV1蛋白表达亦无相关关系(r=0.000,P=0.5)。结论:SP、TRPV1可能通过脊髓L5~S2节段的表达上调参与了CNP大鼠疼痛的形成和维持。     

星形胶质细胞活化对慢性前列腺炎大鼠模型脊髓背角P物质的影响

目的:探讨星形胶质细胞活化对慢性前列腺炎模型大鼠脊髓背角P物质的影响。方法:SD雄性大鼠60只随机分为正常组(n=20)、疼痛组(n=20)、干扰组(n=20),完全福氏佐剂和3%角叉菜胶前列腺内注射造成慢性前列腺炎疼痛模型,脊髓插管给药胶质细胞活化抑制剂干扰慢性前列腺炎疼痛模型大鼠,免疫荧光法观察正常组、疼痛组、干扰组脊髓节段(L6和S1)背角星形胶质细胞的活化和P物质的分布,并用放射免疫法观察3组脊髓背角P物质的变化。结果:与正常组比较,脊髓背角星形胶质细胞活化阳性细胞数疼痛组明显增加(P<0.01),而干扰组较疼痛组明显减少(P<0.01),P物质主要表达于脊髓背角且疼痛组明显增多(P<0.01),干扰组明显减少(P<0.01)。结论:星形胶质细胞活化是慢性前列腺炎疼痛大鼠脊髓背角P物质变化的重要原因之一。     

黄体酮对雄性切口痛大鼠机械缩足反射阈值、脊髓神经激肽-1受体及血浆P物质表达的影响

目的:观察黄体酮对切口痛大鼠机械缩足反射阈值（paw mechanical withdraw threshold, PMWT）、脊髓神经激肽-1受体（neurokinin-1 receptor, NK-1R）、血浆P物质表达的影响,探讨黄体酮对疼痛影响的可能机制。方法:采用随机数字表法将24只健康成年雄性Wistar大...     

P物质、c-fos在慢性前列腺炎/慢性盆腔疼痛综合征大鼠脊髓中的表达

目的:探讨P物质(P物质(substance P,SP)、c-fos参与慢性前列腺炎/慢性盆腔疼痛综合征(CP/CPPS)疼痛的可能机制。方法:自身免疫法建立CP/CPPS大鼠模型;Von Frey丝检测机械刺激缩足阈(PWT);免疫组化检测前列腺与脊髓L5~S2节段背角SP、c-fos的表达变化和相关性。结果:造模后大鼠PWT下降,与对照组相比差异有统计学意义[(48.83±1.55)g vs(67.98±5.44)g,(P0.05)]。前列腺呈现显著炎症反应,在病变范围、间质淋巴细胞浸润程度方面都较对照组反应加重,差异有统计学意义(P0.05)。与对照组相比,模型组前列腺与脊髓L5~S2背角中SP、c-fos阳性表达均上调,差异有统计学意义(P0.05)。前列腺与脊髓中SP蛋白表达无相关性(r=0.099,P=0.338);c-fos蛋白表达亦无相关性(r=0.027,P=0.454)。结论:SP、c-fos可能通过脊髓L5~S2节段的表达上调参与了疼痛的形成和维持。CP/CPPS疼痛的发生过程中脊髓L5~S2节段背角的病理变化可能起着重要的作用。     

神经激肽1受体拮抗剂对大鼠创伤性脑损伤的影响

目的 研究大鼠创伤性脑损伤(Traumatic brain injury,TBI)后血P物质(Substance P,SP)的表达和神经激肽1受体拮抗剂对TBI的作用,探讨抑制神经源性炎症反应对创伤性脑损伤的影响.方法 建立大鼠自由落体创伤模型,药物组于创伤后立即尾静脉给予n-乙酰左旋色氨酸(n-acetyl-L-tryptophan,NAT)(25 μmol/kg).大鼠TBI后30分钟和6小时利用酶联免疫吸附法检测血SP的含量,TBI后24小时采用rotarod试验评估大鼠神经行为功能及干湿称重法检测脑组织含水量.结果 大鼠TBI后30分钟时血SP浓度出现明显升高(P＜0.01),6小时时血SP浓度降低.大鼠TBI后24小时脑组织含水量明显升高,其神经行为功能下降,NAT可减少TBI后24h脑组织含水量并改善神经功能损伤(P＜0.05).结论 大鼠TBI早期血SP浓度增高,NAT通过抑制神经源性炎症可减轻脑水肿及神经功能损伤.     

慢性前列腺炎疼痛中P物质作用与L_5～S_2脊髓中枢星形胶质细胞活化的关系

目的:观察大鼠慢性前列腺炎疼痛模型中L5～S2脊段背角P物质(SP)和P物质受体(NK-1R)表达及星形胶质细胞活化的变化,并在体外纯化培养大鼠脊髓星形胶质细胞的基础上进一步了解SP对星形胶质细胞活化的作用。方法:通过前列腺完全弗氏佐剂(CFA)注射制作大鼠慢性前列腺炎疼痛模型,对照组注射生理盐水,观察时间为0、14、28 d,用热甩尾实验进行疼痛模型鉴定,采用RT-PCR、Western印迹检测L5～S2脊段后角中SP mRNA、NK-1R、胶质原纤维酸性蛋白(GFAP)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)和诱导型NO合酶(iNOS)蛋白表达的变化,并通过体外培养大鼠脊髓星形胶质细胞,分为对照组和2个实验组,对照组仅加ITS培养液,实验组1施加SP刺激(SP浓度:10-9～10-6mol/L,时间:12 h),分别应用ELISA法、硝酸还原酶及比色法测定TNF-α、白介素-1β(IL-1β)、NO分泌水平及NOS活性的变化;实验组2施加SP刺激(SP浓度:10-7mol/L,时间:0、24、48、72 h),用Western印迹测定GFAP表达的变化。结果:慢性前列腺炎疼痛大鼠模型成功建立,并观察到L5～S2脊段背角中SP mRNA和NK-1R、GFAP、TNF-α、iNOS表达在14 d和28 d均明显高于各自的对照组(P<0.01),28 d和14 d组明显高于0 d组(P<0.01),GFAP 28 d组表达高于14 d组(P<0.05),10-7mol/L SP的作用下,脊髓星形胶质细胞GFAP的表达在0～72 h逐渐升高,与正常对照组相比差异有显著性(P<0.01);SP在10-9～10-6mol/L浓度范围内呈浓度依赖性促进脊髓星形胶质细胞分泌TNF-α、IL-1β、NO和NOS活性增强(12 h),与对照组有显著性差异(P<0.01或P<0.05),但IL-1β在SP 10-6mol/L浓度组下降,与对照组无显著性差异(P>0.05)。结论:慢性前列腺炎疼痛可以引起L5～S2脊段致痛递质SP合成增多,受体上调,并导致星形胶质细胞活化和炎性因子分泌增多,表明慢性前列腺痛可以通过SP的介导引起L5～S2脊髓中枢继发性的神经炎性痛,可能与前列腺炎疼痛的持续和泛化有密切关系。     

NK1受体在大鼠牙髓及牙周组织中的表达及意义

目的:观察NK1受体在大鼠牙髓及牙周组织中的表达情况。方法:采用冰冻切片和ABC免疫组化方法,检测NK1受体在大鼠牙髓及牙周组织中的表达。结果:NK1受体在大鼠牙周及牙髓组织内分布广泛,在牙周膜成纤维细胞、成牙骨质细胞、成牙本质细胞均呈强阳性表达;在牙髓成纤维细胞和牙槽骨细胞呈弱阳性表达;在牙齿根髓和冠髓内可发现染色阳性的血管样条索。结论:P物质可能直接作用于牙髓和牙周组织,细胞在牙髓及牙周炎症、修复反应中发挥作用。     

P物质预先给药对去甲肾上腺素诱导大鼠离体心肌细胞β1受体表达的影响

目的 探讨P物质(SP)预先给药对去甲肾上腺素(NE)诱导大鼠离体心肌细胞β1受体表达的影响.方法 出生1～3 d SD大鼠,分离心肌细胞后培养72 h.取15孔心肌细胞随机分为5组:C1组不加任何药物,NE1-4组分别给予10-9、10-8、10-7、10-6 mol/L NE,每组3孔.另取12孔心肌细胞随机分为C2组、NE组、SN组和NSN组,每组3孔,NE组加入10-7 mol/LNE,SN组加入10-6 mol/LSP后30 min加入10-7 mol/L NE,NSN组加入NK-1受体拮抗剂S3144后30 min加入10-6 mol/L SP,30min后加入10-7 mol/L NE.加入NE后3 h时采用流式细胞仪检测心肌细胞β1受体表达.结果 与C1组比较,NE1～3组心肌细胞β1受体表达上调,NE3组β1受体表达上调最明显(P＜0.05);与C2组比较,NE组心肌细胞β1受体表达上调(P＜0.05);与NE组比较,SN.组心肌细胞β1受体表达下调(P＜0.05).结论 SP预先给药可抑制NE诱导的大鼠离体心肌细胞β1受体表达上调,其机制可能与NK-1受体激活有关.     

Laparoscopic spinal fusion of L4-L5 and L5-S1

Background: Patients with degenerative disc disease were treated by laparoscopic spondylodesis. Clinical outcome and quality of life were then analyzed in a retrospective study. Methods: Thirty patients with a mean age of 43 years (range, 26-63) who suffered from instability of levels L4-L5 (n = 23), L5-S1 (n = 3), or both (n = 2) underwent surgery. Spondylodesis was achieved with two BAK cylinders. After ?6 months, all patients completed a questionnaire designed to assess satisfaction with the operative outcome. Results: After a median follow-up of 2.3 years (range, 0.9-3.5), 23 patients were free of pain or greatly improved. Complications included bleeding (n = 2), cage displacement (n = 1), retrograde ejaculation (n = 3), and postoperative ileus (n = 1). Good improvement was reported in daily activities and quality of life. Conclusion: Laparoscopic spondylodesis has a good clinical outcome with a low rate of morbidity. Notable improvements can be achieved in terms of daily activities and quality of life; however, these improvements are moderate in degree, and patient activity remains somewhat limited.     

Nitrous oxide decreases substance P receptor binding in the rat spinal cord

Synaptic transmission of substance P (SP) in the spinal cord during nitrous oxide (N2O) exposure was examined in rats. In the analgesia study, 75% N2O significantly increased tail-flick latency by 57% during the first 2-h N2O exposure and by 19% after a second 2-h N2O exposure, suggesting development of acute tolerance. In the SP content study, SP in the dorsal part of the spinal cord significantly increased by 120% at the end of first N2O exposure, but returned to the control level by the end of second N2O exposure. In the receptor binding study, N2O significantly decreased the [I]Bolton-Hunter-SP ([I]BH-SP) binding (SP-P) in laminae I-II of the dorsal horn by 19, 18, and 18% at the end of first N2O exposure, at the end of the second N2O exposure, and at 4 h after the second N2O exposure, respectively, as compared to the control. This decrease in the [I]BH-SP binding became statistically insignificant by 12 h after the second N2O exposure. In contrast, [I]Bolton-Hunter-eledoisin binding (SP-E) remained unchanged. In the equilibrium binding study, the number of SP-P receptor (Bmax) in laminae I-II of the dorsal horn significantly decreased by 24, 38, and 30% at the end of the first and at the end of the second N2O exposure, and at 4 h after the second N2O exposure, respectively, without significant changes in the affinity (Ka). The present study demonstrated that tolerance to N2O analgesia occurred during the two repeated N2O exposures. SP receptor binding decreased and remained decreased 4 h after discontinuation of N2O. This evidence is the first demonstration of the functional changes caused by N2O in SP synaptic transmission of the spinal cord.     

5-羟色胺1A受体激动剂改善脊髓损伤大鼠排尿功能障碍的实验研究

目的 研究5-羟色胺-1A(5-HTlA)受体激动剂对慢性脊髓损伤(spinal cord injury,SCI)大鼠排尿障碍的改善作用. 方法 雌性SD大鼠14只,体质量175 ～ 200 g.随机分为2组:实验组7只显微镜下大鼠T10棘突水平行脊髓离断建立脊髓损伤模型,正常对照组7只.8周后乌拉坦(1.3 g/kg)麻醉下,2组大鼠颈静脉和膀胱内置管,连接压力感受器,记录膀胱最大容量、残余尿量、排尿量和尿道外括约肌的肌电活动.静脉注入5-HTI A/7受体激动剂8-羟基-丙胺-四氢萘(8-OH-DPAT,0.03 ～1.00 mg/kg),得出剂量—效应曲线后再给予5HTIA受体抑制剂WAY-100635 (0.3g/kg).观察比较2组大鼠用药前后尿动力学指标的变化. 结果 随着8-OH-DPAT剂量增加,SCI大鼠膀胱容量从(33.2 ±8.3)ml降至(22.8±2.4) ml,排尿量从(0.14±0.08)ml增至(0.38 ±0.09) ml,残余尿量从(3.68±1.36)ml降至(1.84±0.21)ml,而膀胱最高压力从(27.1±3.6)mm Hg(1 mm Hg=0.133 kPa)降至(22.8±2.4) mm Hg,用药前后差异均有统计学意义(P＜0.05).对照组大鼠用药前后排尿情况变化差异无统计学意义.肌电图显示8-OH-DPAT引起SCI大鼠尿道外括约肌强直收缩中出现阶段性的松弛,正常对照组大鼠作用无明显改变. 结论 8-OH-DPAT可以剂量依赖性地部分恢复SCI大鼠的尿道外括约肌协调性松弛,从而降低膀胱容量,增加排尿量,减少残尿量,增加排尿效率,改善排尿障碍.     

P物质在异氟烷诱发脊髓损伤大鼠神经源性肺水肿中的作用

[目的]探讨吸入异氟烷的大鼠急性脊髓损伤后血清和肺泡灌洗液中P物质含量的改变与神经源性肺水肿的关系.[方法]成年雄性SD大鼠30只,体重300～330 g,随机分为1.5%异氟烷组、水合氯醛组和假手术组,每组10只.在T8水平球囊扩张造成脊髓压迫,压迫结束10 min后处死大鼠.检测各组大鼠血清和肺泡灌洗液中P物质含量和蛋白浓度,计算肺通透指数.[结果]1.5%异氟烷组大鼠血清和肺泡灌洗液中P物质高于水合氯醛组(P<0.05),明显高于假手术组(P<0.01);肺通透指数1.5%异氟烷组也高于水合氯醛组和假手术组(P<0.05).水合氯醛组和假手术组的P物质及肺通透指数均没有明显差异(P>0.05).[结论]1.5%异氟烷可能通过刺激P物质的大量释放参与急性脊髓损伤后肺水肿的形成过程.     

游泳运动与药物综合治疗对慢性非细菌性前列腺炎大鼠TNF-α、IL-1β和IL-6水平的影响

目的:观察游泳运动与药物综合治疗对慢性非细菌性前列腺炎(CAP)大鼠前列腺组织中TNF-α、IL-1β和IL-6水平的影响。方法:成年雄性健康SD大鼠40只,随机分为正常对照组、CAP模型对照组、药物治疗组、运动治疗组及运动与药物综合治疗组,每组8只。注射消痔灵制备CAP大鼠模型,造模期7 d后药物治疗组和综合治疗组每天给予前列舒通胶囊水溶液(0.016 g/ml)灌胃治疗(剂量为20 ml/kg);运动治疗组和综合治疗组每天于固定时间进行1次游泳运动,第1天35 min/次,每天递增5 min,直至50 min/次,每周6 d,持续4周;正常对照组、CAP模型对照组及运动治疗组给予无菌生理盐水灌胃(剂量同上)。于治疗过程中的第14、28天分别处死各组大鼠4只,并提取前列腺,观察组织病理学改变,制作组织匀浆;采用ELISA法检测组织匀浆内TNF-α、IL-1β、IL-6的水平。结果:第14天时,正常对照组、CAP模型对照组、药物治疗组、运动治疗组及综合治疗组大鼠前列腺组织匀浆内TNF-α水平依次为(20.36±1.82)、(183.08±8.07)、(118.49±8.06)、(169.63±10.64)、(107.82±7.81)pg/ml,IL-1β依次为(14.64±1.91)、(57.55±3.53)、(42.64±4.64)、(50.45±5.71)、(40.35±6.93)pg/ml,IL-6依次为(70.58±2.09)、(256.15±13.95)、(200.74±9.33)、(245.23±6.49)、(187.04±10.85)ng/L,后面4组的TNF-α、IL-1β和IL-6水平均明显高于正常对照组(P0.05);第28天时,综合治疗组的TNF-α、IL-1β、IL-6水平依次为(29.30±3.78)pg/ml、(16.91±1.24)pg/ml、(88.65±6.74)ng/L,药物治疗组依次为(39.67±3.19)pg/ml、(26.27±3.49)pg/ml、(110.26±6.33)ng/L,综合治疗组的TNF-α、IL-1β、IL-6水平显著低于药物治疗组(P0.05),并逐渐接近正常对照组[依次为(19.34±1.76)pg/ml、(13.68±1.06)pg/ml、(71.34±2.50)ng/L]水平。在治疗过程的14~28 d,正常对照组大鼠的前列腺病理学检查未见明显变化;模型对照组大鼠前列腺组织表现为明显的慢性炎症的病理变化;各治疗组大鼠前列腺慢性炎症改变均有不同程度缓解,其中综合治疗组的慢性炎症明显减轻。结论:游泳运动能够降低CAP大鼠炎症程度,与药物并用综合治疗可有效降低CAP大鼠TNF-α、IL-1β和IL-6水平,并改善组织学损伤。     

吗啡耐受大鼠脊髓NR2B与mGluR5的相互作用

目的 评价吗啡耐受大鼠脊髓含2B亚基的NMDA受体(NR2B)和代谢型谷氨酸受体5(mGluR5)的相互作用.方法 雄性SD大鼠,体重220～280 g,取鞘内置管成功的大鼠16只,随机分为2组(n=8).对照组(C组)鞘内注射生理盐水10 μl;吗啡组(M组)鞘内注射吗啡10 μg(10 μl).每日给药2次,连续7 d.于给药前和给药后30 min采用热水缩尾法测定痛阈,计算最大镇痛效应百分比(MPE).最后1次痛阈测定结束后第2天,处死大鼠,取L4-5,脊髓背角,采用Western blot法测定NR2B和mGluRS蛋白表达水平;应用免疫共沉淀技术,NR2B抗体沉淀提取蛋白,Western blot法检测沉淀物.结果 与C组比较,给药1～5 d时M组MPE升高(P<0.01),给药7 d时差异无统计学意义(P>0.05).与C组比较,M组NR2B蛋白表达差异无统计学意义(P>0.05),mGluRS蛋白表达上调(P<0.01).免疫共沉淀法证实NR2B与mGluR5存在相互作用.结论 吗啡耐受大鼠脊髓NR2B与mGluR5存在相互作用.