麻黄-甘草药对研究进展

药对,又称对药,是临床上常用且相对固定的配伍形式,系历代医家临床用药经验总结.有的药对相须配伍以增强疗效,有的药对相畏配伍或相杀配伍来降低毒副作用.药对是连接单味中药与方剂的桥梁,是方剂的重要组成部分.一个药对也可以构成一个独立的方剂[1].麻黄辛温性燥,临床上常配伍甘草,以降低麻黄的毒副作用,还可以起到调和诸药的目的...     

麻黄-细辛药对提取物对哮喘模型小鼠气道重塑的影响

目的 探讨麻黄-细辛药对提取物对哮喘小鼠模型气道重塑的影响。方法 将30只Balb/c小鼠分为对照组、模型组、麻黄-细辛组，各10只。除对照组外，其他两组建立哮喘小鼠模型。建模后第18天起给予麻黄-细辛组麻黄-细辛药对提取物雾化吸入治疗，给予对照组和模型组小鼠等体积生理盐水雾化吸入。观察各组小鼠肺组织形态，检测各组小鼠增强呼气间歇值(Penh),肺支气管肺泡灌洗液(BALF)中各类白细胞比例，BALF和血清的白细胞介素(IL)-6和IL-17水平，以及肺组织的Yes相关蛋白(YAP)、YAP mRNA、转化生长因子β1(TGF-β1)蛋白、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达水平。结果 各组小鼠吸入相应浓度乙酰甲胆碱后，模型组小鼠Penh均高于对照组，麻黄-细辛组小鼠Penh均低于模型组(均P<0.05)。模型组小鼠的BALF中嗜酸性粒细胞、淋巴细胞、单核细胞及中性粒细胞比例，BALF和血清中IL-6及IL-17水平，以及肺组织中TGF-β1蛋白和α-SMA表达水平，YAP及其mRNA表达水平均高于对照组(均P<0.05);与模型组比较，麻黄-细辛组上述指标水平均降低(均...     

麻黄-甘草药对抑制Th2型变应性接触性皮炎的作用及机制探讨

目的研究麻黄-甘草药对对Th2型变应性接触性皮炎(Allergic contact dermatitis,ACD)的影响及机制。方法采用不同浓度异硫氰酸荧光素(FITC)诱导BALB/c小鼠建立Th2型ACD模型及诱导初期ACD模型。HE染色观察小鼠耳组织病理学变化,测量小鼠耳肿胀,ELISA法检测小鼠耳组织Th2细胞因子水平及胸腺基质淋巴细胞生成素(Thymic stromal lymphopoietin,TSLP)蛋白水平,用qPCR检测小鼠耳组织TSLP mRNA水平,Poly(I∶C)和TNF-α联合刺激HaCaT细胞,检测细胞分泌的TSLP蛋白水平。结果 Th2型ACD模型中,与模型组小鼠比较,麻黄-甘草2.34g/kg和7.02g/kg组均明显抑制小鼠耳肿胀,减少耳组织炎性细胞浸润;麻黄-甘草2个剂量组均显著降低耳匀浆中IL-4水平,麻黄-甘草7.02g/kg组明显降低IL-13水平。诱导初期Th2型ACD模型中,与模型组比较,麻黄-甘草药对显著降低耳匀浆TSLP的基因及蛋白表达,体外麻黄-甘草药对及其主要单体成分同样抑制TSLP的分泌。结论麻黄-甘草药对具有抑制过敏性炎症的作用,其作用机制可能是通过减少TSLP的分泌。     

哮喘气道重塑中上皮间质转化及其分子调控

哮喘是一种慢性气道炎症性疾病,反复的炎症损伤与组织修复可导致气道重塑。气道上皮间质转化 (epithelial mesenchymal transition,EMT)在哮喘的气道重塑中发挥了重要作用。转化生长因子β,核因子‐κB和溴结构域 蛋白4等多种细胞因子及信号通路参与了EMT的分子调控。     

16HBE细胞上皮间质转化模型建立以及麻黄-甘草药对对其影响

目的?体外诱导人支气管上皮细胞（16HBE）上皮间质转化（EMT）最适条件摸索以及探讨麻黄-甘草对EMT的影响。方法?以16HBE细胞株为研究对象,分别给予转化生长因子β1（TGF-β1）单一刺激以及血清饥饿联合刺激,运用Western blot法检测上皮及间质特征性蛋白的表达。运用免疫荧光检测E-Cadherin和N-Cadherin胞内表达分布情况。运用qPCR检测上皮及间质特征性基因的表达水平。血清饥饿联合TGF-β1刺激,给予麻黄-甘草药对干预,Western blot法检测上皮及间质特征性蛋白的表达水平。结果?TGF-β1可诱导16HBE细胞由结构规则、质密均匀的鹅卵石状向纺锤体状转化。TGF-β1单独刺激可诱导16HBE细胞N-Cadherin、α-SMA蛋白表达升高,对E-Cadherin、ZO-1蛋白表达未见明显影响。而当细胞密度为15%时,血清饥饿联合TGF-β1可诱导16HBE细胞N-Cadherin、α-SMA、Vimentin、Collagen Ⅰ蛋白、基因水平升高以及E-Cadherin、ZO-1蛋白、基因水平降低,并且E-Cadherin蛋白分布紊乱,上皮结构破坏。血清饥饿联合TGF-β1刺激,麻黄-甘草药对可抑制N-Cadherin、α-SMA的表达,并恢复E-Cadherin蛋白的表达,对ZO-1无明显影响。结论?血清饥饿联合TGF-β1能体外诱导16HBE细胞建立稳定可重复的EMT模型,可用于体外研究哮喘发生EMT相关机制。麻黄-甘草药对一定程度上可抑制16HBE细胞EMT过程。      

PD98059抑制哮喘中TGF-β1诱导的人支气管上皮细胞上皮间质转化进程

目的 探究PD98059对转化生长因子β1(TGF-β1)诱导人支气管上皮细胞BEAS-2B上皮间质转化(EMT)进程的影响及可能的分子机制。方法 本研究采用人支气管上皮细胞(BEAS-2B),使用TGF-β1诱导BEAS-2B上皮间质转化模型,使用ERK1/2抑制剂PD98059探究抑制ERK/MAPK信号转导是否影响EMT进程。通过免疫荧光检测BEAS-2B气道重塑模型α-SMA蛋白的表达及定位;CCK-8法检测各组细胞存活率;Edu实验检测各组细胞增殖能力水平;transwell实验检测各组细胞迁移能力水平;Western blot检测各组EMT标志蛋白表达及ERK/MAPK通路的激活情况。结果 与正常组相比,模型组α-SMA表达增加,α-SMA在BEAS-2B细胞胞质上表达。PD98059在40μmol/L浓度与5 ng/mL TGF-β1共处理抑制BEAS-2B细胞生长(P<0.05)。与三组Edu阳性率无显著差异(P>0.05)。与正常组相比,模型组迁移细胞数增加(P<0.05),上皮间质化标志蛋白表达增加(P<0.05),p-ERK蛋白表达增加(P...     

基于 ERK/MAPK 信号通路研究针刺对慢性哮喘小鼠气道重塑的影响机制

摘要:目的 基于气道重塑关键信号通路 ERK/MAPK 研究针刺大椎、肺俞、足三里穴位对慢性哮喘小鼠气道重塑 的影响机制。方法 腹腔注射卵清蛋白(OVA)+Al(OH)3 建立慢性哮喘小鼠模型,针刺大椎、肺俞、足三里穴位干预。 将动物随机分成5组:PBS组(对照组)、OVA 组(哮喘组)、OVA+Acu组(针刺治疗组)、OVA+PD98059组(抑制剂 组)、OVA+Sham 组(假针刺组)。使用 ELISA 法检测小鼠血清 OVA 特异性IgE 水平,HE 染色检测气道炎症程度, Masson染色和 PAS染色检测气道重塑程度,Westernblot检测小鼠肺组织上皮间质转化(EMT)相关蛋白和 ERK/ MAPK 通路关键蛋白表达情况。结果 ELISA 结果显示,与 OVA 组相比,OVA+Acu组和 OVA+PD98059组血清特 异性IgE表达水平降低(均P<0.05)。HE染色结果显示,与 OVA 组相比,OVA+Acu组和 OVA+PD98059组支气管 周围炎性细胞浸润减少。Masson染色结果显示,与 OVA 组相比,OVA+Acu组和 OVA+PD98059组支气管周围胶原 沉积减少。PAS染色结果显示,与 OVA 组相比,OVA+Acu组和 OVA+PD98059组杯状细胞增生减少。Westernblot 结果显示,与 OVA 组相比,OVA+Acu组和 OVA+PD98059组 E-cadherin蛋白表达增多(均 P<0.05),OVA+Acu组 (均P<0.05)和 OVA+PD98059组(均P<0.01)Vimentin及α-SMA 蛋白表达减少。此外 OVA+Acu组(P<0.01)和 OVA+PD98059组(P<0.05)相比于 OVA 组p-ERK 蛋白表达减少。结论 针刺大椎、肺俞、足三里可以改善慢性哮喘 小鼠气道重塑,其作用机制可能与抑制 ERK/MAPK 信号通路的激活相关。     

甘草药对分析

甘草味甘、性平,归脾、胃、心、肺经,益气复脉、缓急止痛、润肺止咳、泻火解毒及调和诸药是其五大功效,为临床最常用的药物之一。通过对甘草药对配伍分析,使其合理应用于临床。     

黄连乌梅药对不同配伍比例的指纹图谱研究

目的:通过对比黄连乌梅药对的HPLC指纹图谱,探讨该药对的配伍原理。方法:以色谱柱:AgilentHC-C18柱(4.6mm×250mm,5μm);检测波长:230nm;柱温:25℃为色谱条件,流动相:乙腈(A)-0.02mol/L磷酸二氢钾0.2%磷酸(B)梯度洗脱;检测波长:230nm;柱温:25℃为色谱条件,建立黄连乌梅药对的指纹图谱。结果:以黄连、乌梅单煎液作为对照,确定了13个共有峰,建立了不同配伍比例的指纹图谱。结论:乌梅与黄连的配伍比例趋近于1时,黄连中的盐酸药根碱、巴马汀、小檗碱溶出率达到最大。     

普米克令舒对哮喘大鼠气道阻力及气道重构的影响

目的 观察雾化吸入普米克令舒对大鼠过敏性哮喘模型气道阻力和气道重构的影响.方法 将32只SD大鼠分为空白对照组、哮喘模型组、普米克令舒治疗组和生理盐水对照组,每组8只.致敏后第14天开始激发并予以相应的处理,第28天测定四组大鼠气道阻力,并对各组大鼠肺组织进行HE染色分析,就气道重构相关指标进行评估.结果 普米克令舒治疗组气道阻力明显低于哮喘模型组和生理盐水对照组(P<0.01),也明显低于空白对照组(P<0.01).普米克令舒治疗组气道壁炎性细胞计数、气道平滑肌面积、气道内壁面积等指标均明显低于哮喘模型组和生理盐水对照组(P<0.01),但明显高于空白对照组(P<0.01).结论 普米克令舒能明显降低哮喘模型大鼠的气道阻力,其机制仅部分与抑制气道重构作用有关.     

王净净教授临证常用药对举隅

王净净教授系湖南中医药大学博士生导师,曾任湖南省第二批老中医药专家学术经验继承工作指导老师,现任全国第五批老中医药专家学术经验继承工作指导老师、湖南省中西医结合学会常务理事.王老师从事教学、科研与临床近四十年,临床上擅长诊治中医脑病及内科疑难杂病,如,中风、痹证、眩晕、头痛、癫痫以及情志不遂引起的失眠、郁证等疾病,并且在用药方面善于运用中药药对,加减灵活,疗效确切.     

上皮间质转化与重度哮喘糖皮质激素抵抗的关系研究进展

上皮间质转化（epithelial-mesenchymal transition,EMT）即上皮细胞失去其功能及特性转化为间质细胞的表型,目前的大部分研究已经证实了EMT在支气管哮喘（哮喘）气道重塑和气道纤维化发展过程中的重要作用。气道炎症、气道高反应性和气道重塑是支气管哮喘的主要病理生理学特征。目前糖皮质激素（glucocorticoid,GC）是临床控制哮喘急性发作及延缓哮喘恶化的一线药物。但是仍有一部分哮喘患者即使是使用大剂量的GC,仍然不能控制哮喘发作。这部分哮喘患者几乎全部已经进展至重度哮喘阶段,其小气道的结构和功能不可逆转。本综述旨在以EMT作为切入点讨论EMT在重度哮喘GC抵抗诊断和治疗中的潜在价值。     

microRNA在气道变应性疾病中的研究进展

microRNAs(miRNAs/miRs)是一类非编码的、作用于mRNAs、对蛋白质翻译起调节功能的小片段RNAs分子,在许多疾病(如变应性疾病、肿瘤及感染等)的发病中起着十分重要的作用。气道变态反应性疾病是以气道变应性炎症反应及高反应性为特征的一组慢性气道炎性疾病。近年研究表明,多种miRNAs参与了气道变应性疾病的一系列病理生理过程,包括炎症细胞浸润、细胞因子分泌、气道高反应性及平滑肌细胞增生和表型变化等。因此,miRNAs有望成为治疗此类疾病的新靶点。本文总结了miRNAs在哮喘和变应性鼻炎中的作用及分子生物学机制。     

特异性免疫治疗变应性鼻炎疗效的动态评估及其对哮喘的影响

【目的】探讨变应性鼻炎患者特异性免疫治疗(SIT)效果及其在防治支气管哮喘中的意义。【方法】对167例螨过敏的持续性变应性鼻炎患者,进行免疫治疗,检测各治疗时期患者血清总免疫球蛋白E(TIgE)、特异性免疫球蛋白E(SIgE)和嗜酸性粒细胞阳离子蛋白(ECP)浓度,并评估其过敏症状的变化。【结果】变应性鼻炎特异性免疫治疗后症状改善(P<0.01);儿童变应性鼻炎SIT效果较成人好(P<0.01)。此外,观察期满3年的49例接受系统免疫治疗的患者与未系统治疗患者23例发现,前者继发哮喘的几率低于后者,两者比较差异有统计学意义(P<0.01);对合并有哮喘的AR患者经SIT后,哮喘症状体征有改善;患者血清TIgE、SIgE和ECP在SIT治疗后水平逐渐降低。【结论】对儿童变应性鼻炎患者有明确变应原者,免疫治疗应予以考虑;检测患者血清TIgE、SIgE和ECP可了解SIT的疗效;对变应性鼻炎进行SIT对防治哮喘有重要意义。     

特异性免疫治疗变应性鼻炎疗效的动态评估及其对哮喘的影响

【目的】探讨变应性鼻炎患者特异性免疫治疗（Sn）效果及其在防治支气管哮喘中的意义。【方法】对167例螨过敏的持续性变应性鼻炎患者．进行免疫治疗，检测各治疗时期患者血清总免疫球蛋白E（TIgE）、特异性免疫球蛋白E（SIgE）和嗜酸性粒细胞阳离子蛋白（ECP）浓度，并评估其过敏症状的变化。【结果】变应性鼻炎特异性免疫治疗后症状改善（P〈0．01）；儿童变应性鼻炎SIT效果较成人好（P〈0．01）。此外，观察期满3年的49例接受系统免疫治疗的患者与未系统治疗患者23例发现，前者继发哮喘的几率低于后者．两者比较差异有统计学意义（P〈0．01）；对合并有哮喘的AR患者经SIT后，哮喘症状体征有改善；患者血清，TIgE、SIgE和ECP在SIT治疗后水平逐渐降低。【结论】对儿童变应性鼻炎患者有明确变应原者，免疫治疗应予以考虑；检测患者血清，TIgE、SIgE和ECP可了解SIT的疗效；对变应性鼻炎进行SIT对防治哮喘有重要意义。     

CpG寡聚脱氧核苷酸对变应性联合气道疾病气道重塑的影响研究

背景　激素是变应性联合气道疾病（ACAD）常用的治疗方法,但慢性ACAD出现气道重塑,可能影响其疗效,故有必要寻找与激素联合并有协同作用的新型免疫治疗。前期研究发现CpG寡聚脱氧核苷酸（CpG-ODN）抑制ACAD气道炎症,但对气道重塑的效果有待研究。目的　探讨CpG-ODN对慢性ACAD小鼠模型气道重塑的影响。方法　本研究时间为2016年4月-2018年3月。30只清洁级雌性BALB/c小鼠采用随机数字表法分为正常对照组（Control组）、ACAD组、变应性联合气道疾病CpG-ODN干预组（ACAD/CpG-ODN组）、变应性联合气道疾病布地奈德干预组（ACAD/BUD组）、变应性联合气道疾病CpG-ODN+BUD联合干预组（ACAD/CpG-ODN+BUD组）。实验动物腹腔卵清蛋白（OVA）或磷酸盐缓冲液（PBS）致敏,鼻腔OVA/PBS 3周激发,随之6周雾化气道激发。ACAD/CpG-ODN组、ACAD/BUD组和ACAD/CpG-ODN+BUD组分别给予CpG-ODN、BUD和CpG-ODN+BUD滴鼻,其他组给予PBS滴鼻。每次鼻腔或气道激发后10 min内,对小鼠抓鼻和喷嚏次数进行计数。HE和PAS染色观察小鼠鼻腔组织的病理特点。HE、AB-PAS和Masson's染色观察小鼠肺组织病理变化,并行气道炎症评分。免疫组化检测肺组织转化生长因子β1（TGF-β1）和α平滑肌肌动蛋白（α-SMA）,应用Image-Pro Plus图片分析软件定量评估,并进行症状评估。结果　各组小鼠抓鼻次数和喷嚏次数比较,差异均有统计学意义（P<0.01）;其中ACAD组抓鼻次数和喷嚏次数均多于Control组,ACAD/CpG-ODN组、ACAD/BUD组、ACAD/CpG-ODN+BUD组抓鼻次数和喷嚏次数均少于ACAD组（P<0.05）。HE和PAS染色显示,ACAD/CpG-ODN组和ACAD/BUD组鼻黏膜病理改变较ACAD组减轻,而ACAD/CpG-ODN+BUD组进一步减轻。HE、AB-PAS和Masson's染色显示,ACAD/CpG-ODN组和ACAD/BUD组肺组织病理改变较ACAD组减轻,而ACAD/CpG-ODN+BUD组进一步减轻。各组气道炎症评分比较,差异有统计学意义（P<0.01）;其中ACAD组气道炎症评分高于Control组,ACAD/CpG-ODN组、ACAD/BUD组、ACAD/CpG-ODN+BUD组气道炎症评分均低于ACAD组（P<0.05）。各组肺组织中TGF-β1和α-SMA表达水平比较,差异均有统计学意义（P<0.01）;其中ACAD组TGF-β1和α-SMA表达水平均高于Control组,ACAD/CpG-ODN组、ACAD/BUD组、ACAD/CpG-ODN+BUD组均低于ACAD组（P<0.05）。结论　CpG-ODN、布地奈德抑制慢性ACAD模型鼻部炎症和支气管肺组织气道重塑,两者可能具有协同作用。     

心身并治变应性鼻炎_哮喘综合征临床研究

目的：观察心身并治变应性鼻炎_哮喘综合征（ combined allergic rhinitis and asthma syndrome,CARAS）的临床疗效。方法：通过汉密尔顿焦虑量表（ Hamilton anxiety scale,HAMA）与汉密尔顿抑郁量表（ Hamilton depression scale,HAMD）评定,选取存在焦虑、抑郁情绪的患者,共62例。随机平均分为研究组与对照组。对照组给予自拟内服中药汤剂,并以布地奈德鼻喷剂喷鼻;研究组在对照组治疗基础上进行心理治疗,疗程均为4周。比较两组治疗前后哮喘控制测试（ asthma control test,ACT）评分,鼻炎症状评分,HAMA评分,HAMD评分。结果：两组治疗前后比较,ACT评分、鼻炎症状评分,HAMA评分,HAMD评分均有改善（P<0.05）,但研究组改善更显著（P<0.01）。研究组和对照组比较,除了ACT评分,没有显示差异（P>0.05）,其他三项均有显著差异（ P<0.05）。结论：心身并治CARAS临床疗效显著。     

镁在支气管哮喘豚鼠气道重塑中的作用

目的 探讨镁在支气管哮喘豚鼠气道重塑中的作用.方法 将50只雄性豚鼠随机分为正常对照组(A组)、哮喘模型组(B组)、哮喘模型延续组(B<,1>组)、高镁组(B<,2>组)、低镁组(B<,3>组).用卵清蛋白复制哮喘气道重塑模型.观察血清镁离子浓度和气道壁各层厚度.结果 ①B组血清镁离子浓度明显低于A组(P<0.05),气道壁各层厚度明显大于A组(P<0.05,<0.01).②B<,1>组血清镁离子浓度明显低于B组(P<0.05),气道壁各层厚度明显大于B组(P<0.05,<0.01).③B<,2>组气道壁各层厚度小于B<,1>组(P<0.05);④B,组气道壁各层厚度大于B<,1>组(P<0.05).结论 镁在豚鼠哮喘气道重塑中起调节作用.