鸦胆子苦木内酯类成分的TLC鉴别和HPLC含量测定

目的:建立鸦胆子苦木内酯类成分的薄层色谱(TLC)鉴别和高效液相色谱(HPLC)含量测定方法,对鸦胆子药材及饮片进行质量控制。方法:以石油醚-乙酸乙酯-冰醋酸(5∶8.5∶0.1)为展开剂,以10%硫酸乙醇为显色剂,采用GF254硅胶预制板对鸦胆子药材和饮片中鸦胆苦醇进行定性鉴别。采用CAPCELL PAK C18(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,以乙腈-水为流动相进行梯度洗脱,流速为1.0 ml/min,柱温为25℃,检测波长为280 nm,建立HPLC法测定鸦胆子药材及饮片中鸦胆苦醇、鸦胆素A的含量。结果:TLC鉴别显示鸦胆苦醇斑点清晰,与其他条带分离良好。HPLC含量测定表明鸦胆苦醇、鸦胆素A均能达到基线分离,线性范围分别为3.8~61.8μg/ml和4.2~29.9μg/ml,平均回收率分别为96.77%(RSD 0.90%)和97.80%(RSD 1.78%)。结论:所建立的方法特征性强,稳定可靠,重复性好,可用于鸦胆子药材及饮片的质量控制。     

鸦胆子苦素D通过PI3K/Akt信号通路抑制人乳腺癌MDA-MB-231细胞的能量代谢研究

目的研究鸦胆子苦素D对乳腺癌MDA-MB-231细胞能量代谢的影响及作用机制。方法通过MTT法检测鸦胆子苦素D对细胞活力的影响。通过试剂盒测定葡萄糖消耗量、乳酸生成量、ATP含量和己糖激酶(HK)、磷酸果糖激酶(PFK)、丙酮酸激酶(PK)、乳酸脱氢酶(LDH)活性。Western blotting检测鸦胆子苦素D对PI3K、Akt、p-Akt蛋白表达水平的影响。 结果鸦胆子苦素D可浓度依赖性地抑制MDA-MB-231细胞的增殖活性(P＜0.01)。与对照组相比,1、2、4 μmol/L鸦胆子苦素D均可降低MDA-MB-231细胞中ATP含量, 减少葡萄糖消耗量和乳酸生成量, 降低HK、PFK、PK和LDH的活性(P＜0.05);2、4 μmol/L鸦胆子苦素D可抑制细胞中PI3K、p-Akt蛋白的表达(P＜0.05)。 结论鸦胆子苦素D抑制人乳腺癌MDA-MB-231细胞PI3K/Akt信号通路,进而抑制有氧糖酵解过程,减少细胞能量供应。     

鸦胆子油乳对人非小细胞肺癌A549细胞增殖、迁移和自噬的影响及机制

目的：探讨鸦胆子油乳对人非小细胞肺癌A549细胞增殖、迁移和自噬的影响及机制。方法：以A549细胞 为研究对象,先采用不同浓度的鸦胆子油乳处理,并将其分为对照组和低、中、高剂量鸦胆子油乳组(0,2.5,5.0, 10.0 mg/mL);再采用5.0 mg/mL鸦胆子油乳或3-甲基腺嘌呤(3-methyladenine,3-MA)+5.0 mg/mL鸦胆子油乳处理,并将 其分为鸦胆子油乳组和3-MA+鸦胆子油乳组。采用细胞计数试剂盒(cell counting kit-8,CCK-8)和克隆形成实验检测细 胞增殖,划痕实验和Transwell实验测量细胞迁移;应用细胞免疫荧光和Western印迹分析细胞自噬。结果：与对照组 (0 mg/mL)相比,低、中、高剂量(2.5,5.0,10.0 mg/mL)鸦胆子油乳组的A549细胞增殖受抑制、细胞克隆形成数减 少、细胞迁移率降低、Transwell穿膜细胞数减少(均P<0.05),且呈现剂量依赖性(均P<0.05);与对照组(0 mg/mL)相 比,5.0 mg/mL鸦胆子油乳组的A549细胞微管相关蛋白轻链3(microtu-bule associated protein 1 light chain 3,LC3)绿色荧 光聚集、LC3-II/LC3-I比值增加,p62水平降低(均P<0.05);与鸦胆子油乳组(5.0 mg/mL)相比,3-MA+鸦胆子油乳组的 A549细胞增殖增加,细胞克隆形成数、细胞迁移率和Transwell穿膜细胞数增多(均P<0.05)。结论：鸦胆子油乳可诱导 非小细胞肺癌A549细胞自噬,可参与肿瘤细胞增殖和迁移的抑制作用。     

鸦胆子苦醇调节Nrf2/SLC7A11/GPX4信号通路对皮肤鳞癌细胞铁死亡的影响

目的：探讨鸦胆子苦醇调节核因子E2相关因子2(nuclear factor erythroid-2 related factor 2,Nrf2)/溶质载体家族7成员11(solute carrier family 7 member 11,SLC7A11)/谷胱甘肽过氧化物酶4(glutathione peroxidase 4,GPX4)信号通路对皮肤鳞癌（cutaneous squamous cell carcinoma,cSCC）细胞铁死亡的影响。方法：CCK-8法检测0、100、250、500、700、900 nmol/L鸦胆子苦醇处理后人cSCC细胞系A431细胞增殖率,筛选出合适的鸦胆子苦醇作用浓度。体外培养的A431细胞随机分为对照组、鸦胆子苦醇低剂量组、鸦胆子苦醇高剂量组、特丁基对苯二酚（tert-butylhydroquinone,TBHQ;Nrf2激活剂）组、鸦胆子苦醇高剂量+TBHQ组,以鸦胆子苦醇和TBHQ分组处理后,采用CCK-8法、Hoechst 33342染色法检测各组A431细胞增殖与凋亡;采用试剂盒检测各组A431细胞抗氧化因子[谷胱甘肽（glutathi...     

鸦胆子中的细胞毒:鸦胆子苦内酯

许多鸦胆子苦内酯,包括从B.antidy-senteriea分离到的鸦胆丁和鸦胆丁醇,对实验肿瘤系统如体外9-KB系统和体内P-388白血病,具有明显的抑制活性。本文报告对从斐济得到的鸦胆子(B.javanica(L.)Merr,异名:B.amarissima Desv.ex Gomes,B.sumatrana Boxb.)中的鸦胆子苦内酯的研究。用对小鼠TLX-5淋巴细胞的细胞毒试验,指导植物提取物中鸦胆子苦内酯的分离。根和果实中的主要鸦胆子苦内酯,通过PMR和MS鉴定是鸦胆因A,小鼠TLX-5淋巴细胞实验ID_(50)为0.031微克/毫升。还分离到一个新鸦胆子苦内酯,其结构经PMR和MS推断为去     

得自斐济的鸦胆子中的鸦胆子苦内酯类和脱氢鸦胆子苦内酯类

鸦胆子(Brucea javanica(L)Merr)分布广范并且包括以前分别列于化学文献中的B.amarissima Desv.ex Gomes和B.sma-trana Roxb二种。鉴于该种在植物上和地理上的差异以及鸦胆苦内酯类(Bruceolides)具有抗肿瘤活性,对斐济的植物原料进行了研究。通过柱层析配合制备性薄层层析分离了鸦胆子苦内醋类。各组分通过检定它们对     

鸦胆子油乳注射液体外抑制肺腺癌耐药株A549/DDP增殖作用的研究

目的 探讨鸦胆子油乳注射液对肺腺癌顺铂(cisplatin,DDP)耐药株(A549/DDP)体外增殖作用的影响.方法 体外培养A549/DDP细胞,MTT法检测鸦胆子油乳注射液对人A549/DDP细胞的抑制作用.流式细胞仪检测鸦胆子油乳注射液对A549/DDP细胞周期和凋亡率的影响.结果 MTT法表明鸦胆子油乳注射液对A549/DDP的细胞抑制率呈剂量依赖性.流式细胞仪证明鸦胆子油乳对其增殖,细胞周期及凋亡率有明显抑制效果.结论 鸦胆子油乳注射液能抑制A549/DDP耐药细胞株的增殖,引起细胞周期阻滞,诱导凋亡.     

鸦胆子油自微乳剂对肺癌A549细胞增殖的抑制作用

鸦胆子[Brucea javanica (L.) Merr.]为苦木科植物鸦胆子的干燥成熟果实,是一种常用中药,主要分布在我国福建、云南、广东等地及台湾地区.《医学衷中参西录》中写道:“鸦胆子,性善凉血止血,兼能化疲生新.凡痢之偏于热者用之皆有捷效,而以治下鲜血水之痢,则尤效,又善清胃腑之热,胃院有实热充塞,噤口不食者,服之即可进食”.鸦胆子油主要成分为脂肪酸,内含少许挥发油.鸦胆子油对多种肿瘤的生长有一定的抑制作用而少有肝功能损伤[1-2],临床应用亦证实在原发和转移性肿瘤的治疗中,鸦胆子油制剂也显示出较好的疗效[3].本实验利用体外培养肺癌A549细胞的方法,研究新型制剂鸦胆子油自微乳剂对人肺癌细胞株A549增殖的影响,为临床应用提供新的治疗思路和实验依据.     

复方鸦胆子油软胶囊质量标准及初步药效学研究

目的:建立复方鸦胆子油软胶囊的质量控制方法,观察复方鸦胆子油软胶囊制剂对S180肿瘤模型小鼠的治疗作用。方法:采用薄层色谱法对复方鸦胆子油软胶囊中的鸦胆子和蟾皮进行定性鉴别,采用气相色谱法对复方鸦胆子油软胶囊中的油酸进行含量测定,采用高效液相色谱法对复方鸦胆子油软胶囊中脂蟾毒配基和华蟾酥毒基总含量进行测定;通过S180腹水型肿瘤细胞建立肿瘤模型,以抑瘤率、胸腺指数和脾脏指数为考察指标,观察复方鸦胆子油软胶囊对肿瘤小鼠的治疗作用。结果:TLC鉴别方法分离度良好、斑点清晰;油酸在0.270 4 mg/mL~1.622 4 mg/mL范围线性关系良好,平均回收率95%~105%;脂蟾毒配基和华蟾酥毒基在0.005 6 mg/mL~0.061 6 mg/mL范围线性关系良好,平均回收率95%~105%;用S180腹水型肿瘤可以成功地制备小鼠肿瘤模型,复方鸦胆子油软胶囊具有治疗作用。结论:本方法专属性强、结果准确、耐用性好,可很好地控制复方鸦胆子油软胶囊的质量,值得进一步开发研究。     

基于网络药理学的鸦胆子活性成分抗肿瘤分子机制

目的 利用网络药理学方法探索鸦胆子抗肿瘤有效成分、潜在靶点及通路,探讨其“多成分-多靶点-多通路”的抗肿瘤作用机制。方法 ①从中药系统药理学数据库和分析平台中筛选出鸦胆子潜在的15个活性成分,根据DrugBank获取这15个活性成分的158个潜在靶分子。②利用String数据库构建这些靶分子的蛋白质-蛋白质相互作用网络,其中节点度值最高的基因JUN定义为核心基因,利用癌症和肿瘤基因图谱分析其在多个肿瘤中的作用。③利用R语言Cluster profiler包将这些靶分子进行基因功能分析和基因功能富集分析。结果 获取了鸦胆子潜在的15个活性成分,158个潜在靶分子及活性成分-靶蛋白网络,并发现了其在多种肿瘤、多种成分、多种通路有着不同的比重和作用。结论 网络药理学方法可为解析鸦胆子多成分、多靶点、多通路、多肿瘤的关系网络,阐述其抗肿瘤的分子机制提供思路和方法,为其临床应用提供相应的理论依据。     

鸦胆子油乳注射液对胶质瘤细胞侵袭性的影响及其可能机制

目的 探讨鸦胆子油乳注射液降低胶质瘤细胞侵袭性的作用与hosphatidylinositol 3 kinase / protein kinase B（PI3K/AKT）信号通路之间的关系。方法 采用鸦胆子油乳注射液处理培养的C6胶质瘤细胞,MTT法检测胶质瘤细胞的抑制率,Western blot法检测胶质瘤细胞内PI3K、AKT及核因子（NF）-κB蛋白的表达水平,结晶紫染色法观察透过Transwell下室面的胶质瘤细胞数。结果 鸦胆子油乳注射液可以抑制PI3K、AKT及NF-κB的蛋白表达水平,且分别于鸦胆子油乳注射液作用30 min、60 min和120 min时抑制程度最高。而鸦胆子油乳注射液作用180 min时对C6胶质瘤细胞增殖的抑制作用最强,且此时Transwell下室面的胶质瘤细胞数最少。结论 鸦胆子油乳注射液可能是通过抑制PI3K/AKT信号传导通路抑制胶质瘤细胞的增殖,进而降低胶质瘤细胞的侵袭性。     

鸦胆子油乳膀胱内灌注预防浅表性膀胱癌术后复发

目的评价鸦胆子油乳膀胱灌注预防浅表性膀胱癌术后复发的疗效和安全性。方法对365例浅表性膀胱癌患者行TURBT或膀胱部分切除术,术后1周给予10%鸦胆子油乳60 m l膀胱内灌注,药物于膀胱内保留2 h,每周1次,连续6周,以后每月1次,连续12个月。定期做血、尿常规、肝肾功能及膀胱镜检查,并记录每次膀胱灌注后的全身及局部反应。结果365例均未见全身性药物不良反应,随访9-36个月,平均23个月,复发35例,复发率9.6%。结论鸦胆子油乳膀胱灌注防止浅表性膀胱癌术后复发疗效满意,安全性好。     

复方鸦胆子油微乳处方工艺研究

[目的]制备复方鸦胆子油口服微乳。[方法]通过溶解度实验和伪三元相图的绘制,以形成微乳区域的大小为指标,筛选油相、乳化剂、助乳化剂的最佳搭配与处方中鸦胆子油的配比,研究最佳处方比例。[结果]该微乳的处方质量比为:MCT8%、鸦胆子油4%、RH4021%、无水乙醇7%、水60%。[结论]所制备的复方鸦胆子油微乳理化性质稳定。     

鸦胆子油乳注射液联合普通放疗对C6胶质瘤细胞作用的实验研究

目的探讨鸦胆子油乳注射液联合普通放疗对C6胶质瘤细胞增殖的影响。方法体外培养大鼠C6胶质瘤细胞,用MTT比色法检测鸦胆子油乳注射液联合普通放疗对C6胶质瘤细胞的抑制作用。用免疫组化检测鸦胆子油乳注射液联合普通放疗对C6胶质瘤细胞caspase-3表达的影响。结果 MTT比色法显示鸦胆子油乳注射液联合放疗对C6胶质瘤细胞抑制率高于单次普通放疗;免疫组化显示鸦胆子油乳注射液联合放疗使C6胶质瘤caspase-3表达效果高于单次普通放疗。药物作用呈剂量依赖性。普通放疗联合鸦胆子油乳注射液与单纯用药相比对肿瘤细胞抑制率及肿瘤细胞caspase-3表达无明显差异（P〉0.05）。用药后行普通放疗对C6胶质瘤细胞的抑制率及细胞caspase-3表达低于用药前行放疗。结论体外鸦胆子油乳注射液能增加C6胶质瘤细胞凋亡基因caspase-3表达,抑制细胞增殖。鸦胆子油乳注射液联合普通放疗对C6胶质瘤细胞抑制作用高于普通放疗。药物联合放疗与单独用药对C6胶质瘤细胞作用无明显差异。放疗后用药优于放疗前用药。     

鸦胆子油乳注射液对C6胶质瘤细胞增殖影响的实验研究

目的 探讨鸦胆子油乳注射液对C6胶质瘤细胞增殖的影响.方法 体外培养大鼠C6胶质瘤细胞,MTT法检测鸦胆子油乳注射液对C6胶质瘤细胞增殖的抑制作用;免疫细胞化学染色法和western blot法检测鸦胆子油乳注射液对C6胶质瘤细胞caspase-3蛋白表达的影响.结果 MTT法显示,鸦胆子油乳注射液对C6胶质瘤细胞增殖的抑制具有剂量依赖性.免疫细胞化学染色和western blot检测显示,随着鸦胆子油乳注射液浓度增加,caspase-3蛋白表达明显上调.结论 鸦胆子油乳注射液能通过促进凋亡基因caspase-3蛋白表达的上调,从而抑制C6胶质瘤细胞增殖.     

鸦胆子油乳注射液联合GP方案治疗晚期非小细胞肺癌临床研究

目的:探讨鸦胆子油乳注射液联合GP方案治疗晚期非小细胞肺癌的临床疗效和对生存质量的影响。方法:将96例非小细胞肺癌患者随机分为治疗组48例和对照组48例。对照组采用GP方案治疗,治疗组在GP方案化疗的同时给予鸦胆子油乳注射液静脉滴注,比较两组患者临床疗效和生存质量改善情况。结果:治疗后,治疗组有效率为81.25%,对照组有效率为66.67%,两组比较,差异有统计学意义(P0.05)。生存质量比较,治疗组明显优于对照组,差异有统计学意义(P0.05)。结论:鸦胆子油乳注射液联合GP方案化疗治疗晚期非小细胞肺癌临床疗效显著。     

高脂饲料和鸦胆子油对长爪沙鼠血清脂类的影响

本实验首次经酶学方法观察给予高脂肪、高胆固醇饲料和鸦胆子油的长爪沙鼠血清总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇及其亚组分与甘油三酯含量变化。结果提示高脂饲料影响沙鼠血脂成份明显,易形成高脂血症,鸦胆子油有一定程度的降血脂作用。     

鸦胆子油乳联合化疗治疗中晚期非小细胞肺癌临床观察

目的:探讨鸦胆子油乳与化疗联合应用在中晚期非小细胞肺癌患者中的应用效果。方法:74例中晚期非小细胞肺癌(NSCLC)患者随机分为观察组与对照组每组37例,均给予艾素+顺铂化疗,同时观察组给予鸦胆子油乳注射液治疗,对比两组患者治疗效果。结果:观察组有效率为64.9%显著高于对照组的40.5%(P<0.05);治疗后观察组在体能状态、精神状态以及总体生活质量方面评分(QOL)均显著高于对照组(P<0.01);观察组骨髓抑制发生率显著低于对照组(P<0.05),而恶心呕吐发生率比较无统计学差异(P>0.05)。结论:鸦胆子油乳联合化疗治疗NSCLC可增强抗癌药物对肿瘤的杀伤作用,同时对于减轻药物毒副作用,减轻骨髓抑制造成的白细胞减低具有重要作用。