喉癌DNA倍体、细胞周期分析与超微结构观察

目的 :研究喉癌 DNA倍体、细胞周期特征及超微结构 ,并分析其临床意义。方法 :采用流式细胞术(FCM)检测 30例冻存的喉癌标本及 5例声带息肉患者术中修复的喉部组织 ,同时观察其超微结构。结果 :喉癌标本与喉部粘膜的异倍体率分别为 6 0 .0 % (18/ 30 )、 G0 ,S期百分比分别为 2 0 .33± 6 .12及 12 .35± 3.81,DI值分别为 1.78± 0 .82及 1.0 7± 0 .0 4,PI值为 2 9.0 9± 6 .8及 11.75± 3.75。喉癌标本的异倍体率 ,DI值 ,PI值 ,S期的百分比明显高于正常组织 (P <0 .0 5 )。光镜下发现异倍体肿瘤分化差 ,核分裂相多 ,二倍体肿瘤分化好。电镜下发现异倍体肿瘤的核大 ,深染 ,畸形明显。结论 :喉癌的异倍体率与肿瘤的位置、细胞分化有关 ,流式细胞术在揭示喉癌的肿瘤生物学行为及指导临床治疗方面有重要的意义。     

神经酰胺在喉组织癌前病变向喉癌转化过程中的作用

目的探讨诱导凋亡的第二信使神经酰胺(ceramide)在喉组织癌前病变向喉癌转化过程中的作用。方法采用回顾分析的方法,取复旦大学附属眼耳鼻喉科医院1991-2001年间声带白斑的病例178例,找出相应的石蜡块,其中转化为喉癌的31例。采用流式细胞仪技术和免疫组化法分析这31例的喉正常黏膜标本(取自喉癌旁的正常组织)、癌前病变时的标本和喉癌组织标本中DNA倍体情况及神经酰胺的表达情况(400倍视野下染色阳性细胞计数×100)。结果31例喉正常黏膜标本均为DNA二倍体; 31个声带白斑标本中3个为DNA二倍体, 28个为DNA异倍体; 31个喉癌标本均为DNA异倍体。31例患者的喉正常黏膜、声带白斑、喉癌标本中神经酰胺的表达依次减少,分别为每400倍视野下阳性表达细胞数( x±s,以下同) ( 400±30 )个、( 180±20 )个、( 10±10 )个,t检验差异有统计学意义(P<0 01)。二倍体细胞内神经酰胺的阳性表达数(400±20)个,明显高于异倍体细胞内(150±10)个,t检验差异有统计学意义(P<0 01)。结论喉组织癌前病变向喉癌转化过程中,神经酰胺起到非常重要的作用。提示诱导凋亡的第二信使神经酰胺逐渐减少可能是喉组织癌变过程中的关键因素之一。     

人类喉癌ras癌基因产物P21蛋白表达及DNA倍体研究

本文对喉癌细胞的ＤＮＡ含量及ｒａｓ癌基因产物Ｐ２１蛋白的表达进行研究。结果，６７％的喉癌为异倍体，异倍体与肿瘤恶性度呈正相关，喉癌的增殖指数（ＰＩ）为２６．２２±４．６７，明显高于正常喉和声带息肉，声门上癌的ＰＩ值显著高于声门癌。喉癌Ｐ２１蛋白阳性率为５８％，早期喉癌阳性率显著高于晚期喉癌，二倍体喉癌Ｐ２１蛋白阳性率明显高于异倍体喉癌。     

喉癌主癌灶手术切缘的临床观察

目的探讨喉癌手术的安全切缘,为临床治疗提供依据.方法对不同原发部位、不同分期、不同方位、不同距离手术切缘的167例喉癌患者作临床评价及病理学观察.结果声门区喉癌2mm、3mm、 5mm、10mm切缘其阳性切缘发生率及发生频率差异无显著性(P>0.05),声门上区及跨声门型2mm、3 mm与5mm、10mm差异有显著性(P<0.05),而2mm与3 mm 、5mm与10mm差异无显著性(P>0.05);晚期患者(T3+ T4)有淋巴结转移、分化程度低其阳性切缘发生率及发生频率较高(P<0.05);前连合、会厌前间隙以及浸润性喉癌深面切缘是易出现阳性切缘的部位.结论对声门区喉癌,距主癌灶2mm即可作为安全切线,对跨声门癌5mm可作为安全界限,对声门上区安全切缘应在5mm以外,最好达10mm.术前CT检查、术中准确的临床判断及治疗经验可减少阳性切缘的发生;声门区喉癌,常规切除前连合,声门上区喉癌手术应切除会厌前间隙、会厌谷,尤其是甲状软骨上段交角后方组织,对跨声门癌切缘深面切至甲状软骨内侧面,侵犯甲状软骨膜者则应切除同侧甲状软骨翼板,以保持足够的深面切缘.     

真核细胞翻译起始因子4E及基质金属蛋白酶-9在声门上喉癌和下咽癌转移淋巴结中的表达

目的：探讨声门上喉癌、下咽癌瘤体、周围组织及转移淋巴结真核细胞翻译起始因子4E（eIF4E）、基质金属蛋白酶9（MMP-9）的表达情况,以及2种分子标志物表达的相关性。方法：采用免疫组织化学SP法及图像分析,检测38例肿瘤瘤体及不同距离手术切缘组织、转移淋巴结中eIF4E、MMP-9的表达情况。结果：①在喉及下咽部鳞状细胞癌组织中MMP9阳性表达率为68．4％,表达强度与淋巴结转移、临床分期相关,而与肿瘤位置及病理分级无关。MMP-9在声门上喉痛、下咽癌瘤体及5mm、10mm切缘组织中的表达阳性率依次递减;②喉及下咽部鳞癌组织eIF4E表达阳性率为89％,表达强度与淋巴结转移、肿瘤病理分级、临床分期相关。eIF4E在声门上喉癌、下咽癌瘤体及5mm、10mm切缘组织表达阳性率依次递减;③MMP-9和eIF4E在正常淋巴结中均无表达,在转移淋巴结表达阳性率分别为28％和42％;④eIF4E与MMP9表达无相关性。结论：eIF4E、MMP-9在喉痛及下咽癌瘤体中的表达高于癌周正常组织,eIF4E在瘤体及癌周正常组织表达阳性率高于MMP-9。eIF4E可作为预测喉癌及下咽瘢浸润生长、转移的敏感标志物。     

晚期喉癌切缘组织流式细胞仪参数及PCNA表达的研究

目的:探索细胞增殖活性在晚期喉癌组织周围的变化规律,确定合理的晚期喉癌安全切缘。方法:用流式细胞仪及免疫组化检测晚期喉癌患者喉癌组织(A组)、癌旁0.5cm(B组)、1.0cm(C组)、2.0cm(D组)处组织细胞的DNA异质性、DNA含量、增殖指数及PCNA表达。结果:异倍体率:喉癌组织、0.5cm、1.0cm、2.0cm处组织分别为70.4％、14.8％、0、0。A与B组和B与C组间均有显著性差异;DI值:A、B、C对组分别为1.61±0.52、1.08±0.38、1.03±0.31、1.02±0.13,A与B组和B与C组间均有显著性差异;PI值(％)分别为26.06±6.73、12.27±3.78、11.37±2.86、11.01±1.92从组与B组间有显著性差异,但B组与C组、C组与D组间均无显著性差异;SPF值(％)分别为22.38±6.15、11.17±3.92、10.81±3.37、10.55±3.06,免疫组化PCNA指数(％)分别为67.8±12.25、12.76±4.36、11.33±3.25、10.89±3.13。结论:从晚期喉癌组织向周围正常组织移动过程中,肿瘤细胞的增殖指标、DNA含量逐渐趋向正常,于癌周0.5cm处接近正常,于1.0cm处基本正常;晚期喉癌旁0.5cm可作为手术的基本安全切缘,1.0cm可作为理想安全切缘。     

喉癌细胞DNA倍体和超微结构研究

本文对48例喉癌标本进行了流式细胞术（flow cytometry,FCM)DNA含量观察并对22全镖 本进行了超微结构研究。探讨了其与预后的关系。结果显示，本组喉癌DNA指数范围在1.0-2.08，异倍体率为77.1%(37/48例），二倍体肿瘤分化好，全部为BroderI级或Ⅱ级，异倍体肿瘤大多为Ⅱ级或Ⅲ级，在电镜下，二倍体肿瘤和异倍体肿瘤细胞亦有不同超微结构改变，二倍体和近二倍体肿瘤的预后好，生存期长，异倍体肿瘤的预后差，生存期短，认为应用FCM分析癌细胞核的DNA含量，对癌的诊断及预后提供了重要的信息。     

声门上型喉癌局部浸润与淋巴结转移的关系

目的:探讨声门上型喉癌局部浸润与淋巴结转移的关系.方法:66例声门上型喉癌喉切除标本,经火棉胶包埋,制成连续切片,苏木精-伊红染色,光学显微镜下观察.结果:有淋巴结转移的声门上喉癌对会厌前间隙,声门旁间隙上、下区的侵犯率分别为100.0%(18/18)、83.3%(15/18)、44.4%(8/18),均高于无淋巴结转移声门上型喉癌,两者差异有统计学意义(P<0.05);有淋巴结转移声门上喉癌会厌前间隙全部受累率为55.5%(10/18),与无淋巴结转移喉癌29.1%(14/48)相比差异有统计学意义(P<0.05).淋巴结转移喉癌侵犯声门旁间隙上区的宽度及高度分别为(7.4±5.2)mm,(11.6±7.6)mm,侵犯声门旁间隙下区的宽度及高度分别为(2.9±3.8)mm,(2.4±3.7)mm,这两者均大于无淋巴结转移组喉癌,差异有统计学意义(P<0.05);淋巴结转移组声门上型喉癌声带活动良好、声带固定率分别为11.1%(2/18),44.4%(8/18),与无淋巴结转移喉癌相比,差异有统计学意义(P<0.05).结论:有淋巴结转移的声门上型喉癌具有较强的局部侵袭能力,对会厌前间隙及声门旁间隙的侵犯是其重要特征.     

喉癌组织内微血管密度的测定及其临床意义

目的 :探讨喉癌组织内微血管的形成情况及其临床意义。方法 :采用第 因子相关抗原免疫组化法定量观察 38例喉癌组织内微血管的形态和分布并计算微血管密度 (MVD)。结果 :1喉癌组织内血管形态不规则 ,血管分布具有异质性 ,在癌巢实质内存在几无血管的“空白区”。 2癌组织中的 MVD显著高于癌周正常组织 (P <0 .0 1)。 3颈部淋巴结转移组喉癌组织 MVD高于非转移组 (P <0 .0 1) ; 、 期喉癌组织 MVD高于 、 期 (P <0 .0 1)。 4声门上型喉癌组织 MVD与声门型相比较差异无显著性意义 (P >0 .0 5 )。 5喉癌组织内 MVD在高分化、中分化、低分化三组中分别为 (2 4.70± 6 .36 )、(2 8.6 4± 11.5 4)、(2 9.0 7± 7.84)个 / HPF。其差异无显著性意义。结论 :1喉癌组织内存在血管增生现象 ,增生血管主要位于肿瘤间质 ,分布具有异质性。 2喉癌组织内MVD与喉癌分型及组织学分级无明显关系。 3肿瘤血管的形成有利于肿瘤的侵袭转移 ,喉癌组织 MVD的测定可望作为评估预后的又一重要指标。     

激光治疗喉声门型癌手术切缘安全性研究

目的 分析喉声门型癌激光治疗的安全性。方法 喉声门型鳞状细胞癌50例(1996年8月-1998年10月),支撑喉镜下CO2激光切除肿瘤。喉癌标本常规石蜡包埋和连续切片,单数HE染色,双数行PCNA特异染色。切缘残留肿瘤用同样方法检查。结果 切缘安全26例,相对安全19例,阳性5例。T1a、T1b和T2的阳性率分别为3.6％(1/28),14.3％(2/14)和25.0％(2/8)(P<0.01)。免疫组化染色与常规HE染色切片观察切缘结果相同。激光手术切缘的组织病理学观察可见激光切缘有烧灼后的组织变性,激光切缘有4-8层细胞坏死。部分切除组织中可见软骨组织。50例患者观察5年以上,局部复发S例,其中切缘阳性4例,切缘相对安全1例。结论 激光手术切除的喉癌标本连续切片观察结果显示支撑喉镜下CO2激光手术切除早期喉声门型癌可获得安全切缘。     

雄激素受体mRNA基因在喉癌组织中的表达与研究

以探讨雄激素受体（ＡＲ） ｍＲＮＡ基因在喉鳞状细胞发展中的作用，应用Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交技术，以及喉癌组织的总ＲＮＡ分离、激光扫描等方法，观察、分析检测了ＡＲ基因在喉鳞状细胞组织中，以及癌旁正常组织中表达及意义。结果显示，２７例喉癌组织中及６例癌旁正常组织中均存在ＡＲ，且喉癌组织中ＡＲｍＲＮＡ基因的表达水平明显高于癌旁正常组织，通常情况下在癌旁正常组织中ＡＲｍＲＮＡ基因的表达水平明显高于癌旁正常组     

Study of Newcastle disease virus in the treatment of human laryngeal squamous carcinoma]

OBJECTIVE: To explore the biological value of newcastle disease virus in the therapy of human laryngocarcinoma. METHODS: Nude mice model bearing laryngocarcinoma were established using human laryngeal squamous carcinoma cell line (Hep-2). Large amounts of Newcastle disease virus(NDV) were injected into the tumor. Changes in carcinoma administrated with the NDV were observed under light and electron microscopes. Isolation of NDV was attempted and sera were examined using the method of enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). RESULTS: The difference between experimental and control groups was statistically significant, including the average weight of the mice: t' = 2.397 (P < 0.05), the average weight of the tumor tissue: t' = 2.852 (P < 0.05) and the average volume of the tumor tissue: t' = 6.058 (P < 0.01). In the experimental group, the NDV was isolated in the tumor tissue and ELISA was positive. The necrosis of the tumor cell and inflammatory cellular infiltration were found under light and electron microscopes. CONCLUSION: These results indicated that NDV was effective in the treatment of laryngocarcinoma and had no damage to normal tissue.     

Clinical significance of elevated serum sICAM-1 in patients with nasopharyngeal carcinoma]

OBJECTIVE: To study the expression of serum sICAM-1(soluble intercellular adhesion molecule-1) and tissue ICAM-1 in nasopharyngeal carcinoma and its clinical significance. METHODS: Expression of ICAM-1 in frozen sections of 20 normal nasopharyngeal mucosa and 54 nasopharyngeal carcinoma samples were studied with immunohistochemical technique, and levels of serum sICAM-1 in 54 patients with nasopharyngeal carcinoma (NPC group) and 32 healthy adults (normal group) by ELISA. RESULTS: Positive expression (45/54) of tissue ICAM-1 and levels (2,044.48 +/- 640.05) microgram/L of serum sICAM-1 in NPC group were significantly higher than that of 2/20 and (313.70 +/- 114.98) microgram/L in normal group (P < 0.01, respectively), and there was a positive relationship between the expression of tissue ICAM-1 and levels of serum sICAM-1 in nasopharyngeal carcinoma(P < 0.05). The levels (2,177.31 +/- 642.13) microgram/L of serum sICAM-1 in patients with III-IV stages were higher than those (1,847.25 +/- 308.15) microgram/L in I-II stages (P < 0.05), and those (1,678.89 +/- 685.01) microgram/L in patients with no lymph node metastasis lower than that (2,134.34 +/- 609.60) microgram/L in lymph node metastasis (P < 0.05). The levels of serum sICAM-1 decreased significantly from (2,211.42 +/- 717.59) microgram/L to (926.55 +/- 207.72) microgram/L in disappearance of tumor and metastatic lymph node after radiotherapy (P < 0.01). CONCLUSION: sICAM-1 might be involved in the cellular immunopathogenesis of nasopharyngeal carcinoma, and the measurement of the serum sICAM-1 may reflect ability of neoplasm cell in freedom from host immunological surveillance. Dynamic measurement of serum sICAM-1 may be a useful objective index to evaluate NPC prognosis and curative effects.     

早期声门型喉癌的CO_2激光手术治疗

目的：探讨CO2激光手术治疗声门型喉癌的临床治疗效果。方法：112例声门型喉癌患者均在全身麻醉下经口气管插管,用支撑喉镜充分暴露声门,完全看清肿瘤后,显微镜下用CO2激光沿肿瘤外缘切除声门肿瘤,安全边界为3~5mm。术后随诊12~62个月。结果：112例支撑喉镜下CO2激光手术后8例局部复发,局部复发率7.14%,T1a复发率0.89%、T1b复发率0.89%、T2复发率5.40%,组间差异有统计学意义（χ2=5.306,P〈0.01）。病变侵犯前连合复发率7.14%,病变未侵犯前连合复发率7.14%,2组差异无统计学意义（χ2=0.000,P〉0.01）。1例患者术后当天出现喉腔大出血,经再次手术,应用带吸引单极电凝止血成功。结论：激光手术治疗早期声门型喉癌疗效可靠,喉功能保全好,是早期喉癌较为理想的治疗方式。     

喉癌垂直部分喉切除术疗效分析

目的 :评价垂直部分喉切除术治疗喉癌的效果。方法 :1979～ 1990年行手术加放疗 2 4例 ,单纯手术 1例 ;1991～ 1997年行单纯手术治疗 2 2例 ,术后放疗 3例。新声门重建采用甲状软骨外软骨膜修复 2 2例 ,单蒂胸骨舌骨肌修复 14例 ,创面直接对合重建声带 10例 ,游离皮片移植 2例 ,颈前皮瓣修复 1例 ,舌骨肌瓣修复 1例。结果 :拔管率为 98.0 % (47/ 4 8) ,有良好的发声和吞咽功能 ;3、5、10年生存率分别为 89.6 %、82 .9%、6 6 .7% ;局部复发死亡 4例 ,死于远处转移 1例 ,死于食管癌 1例 ,非肿瘤死亡 5例。结论 :垂直部分喉切除术是治疗喉癌的有效术式 ,麻醉方式、手术切除范围和修复方法的合理选择可进一步提高疗效     

喉癌组织中PD-L1的表达及意义

目的:探讨程序性死亡配体-1(PD-L1)在喉癌及癌旁组织中的表达及临床意义。方法:采用免疫组织化学和Western-blotting技术分别检测31例喉癌组织和24例癌旁组织中PD-L1的蛋白表达水平及差异。结果:PD-L1在喉低、低中分化鳞状细胞癌中的表达明显高于高分化癌组织,前者PD-L1主要表达于血管,瘤细胞少见,后者血管常呈弱表达而局部瘤细胞呈阳性表达;PD-L1的表达与淋巴转移相关。癌旁组织中PD-L1表达明显低于癌组织,然其表达水平与其对应癌组织呈正相关。结论:PD-L1可能在喉癌特别是低及低中分化喉癌的发生、发展和(或)转移中起到一定作用,有望成为喉癌尤其是低、低中分化喉癌治疗的一个新靶点。     

Tiam1基因表达与鼻咽癌浸润转移的关系

目的:探讨Tiam1基因表达与鼻咽癌浸润转移的关系。方法:应用RT-PCR技术,对41例鼻咽癌组织和20例正常鼻咽部组织进行Tiam1mRNA表达水平的检测。结果:41例鼻咽癌组织的Tiam1mRNA平均表达水平(1.83±0.73)明显高于正常鼻咽部组织(0.87±0.45)(P<0.01);鼻咽癌组织中Tiam1mRNA高表达率与临床分期、T分级呈正相关;有淋巴结转移者Tiam1mRNA高表达率为59.3%(16/27),无淋巴结转移者为21.4%(3/14),二者之间差异有统计学意义(P<0.05)。结论:Tiam1基因在鼻咽癌组织中的表达明显高于正常鼻咽部组织,其过表达与鼻咽癌浸润转移呈正相关。     

CT anatomic measurement of the optic canal and its clinical significance]

OBJECTIVE: To probe into the normal anatomy of the optic canal and its clinical significance. METHODS: The optic canals of 200 normal subjects were examined by thin layer CT scan in axial nd coronal positions. The distance and anatomic relationship with circumferentral structure were measured. RESULTS: In average: (1) The transverse diameter of the optic canal was (3.57 +/- 0.61) mm, the longitudinal diameter was (4.82 +/- 0.38) mm, the length of the inner wall was (12.62 +/- 2.59) mm, the length of the outer wall was (10.18 +/- 2.19) mm, and the length of the optic canal was (11.46 +/- 2.35) mm. The angle between optic canal and the middle line of the skull was 34.34 degrees +/- 6.48 degrees, the angle between optic canal and the intraorbital optic was 10.69 degrees +/- 6.48 degrees. The thickness of the inner wall was (0.68 +/- 0.46) mm. It showed no significant difference between the two sides of the optic canal in diameters(P > 0.05). (2) The optic canal, the superior orbital fissure and the inferior orbital fissure were respectively shown as track, crack and gorge type in CT axial pictures, while in the coronal pictures, they were respectively shown as butterfly eyes, horizontal fissure and vertical fissure type. (3) The relationship of the posterior ethmoid sinus and the optic canal was: anterocanal(42.00%), semicanal(27.5%), whole-canal(18.75%), sella turcica(9.75%) and circumcanal(2.00%). (4) The relationship of the position of the sphenoidal sinus and the optic canal was: I degree sphenoidal sinus(20%), II degree (63%) and III degree (17%). (5) The incidence of the bony defect of the inner optic canal wall was 25.5%. The range of the defect was (5.07 +/- 2.52) mm. CONCLUSION: It's a reliable way to show the relation of the optic canal and circumcanal by CT, and it is of important value in operation.     

喉癌组织中程序性细胞死亡因子4的表达及临床意义

目的:探讨程序性细胞死亡因子4(PDCD4)基因在喉鳞状细胞癌中的表达情况及PDCD4蛋白表达水平与喉癌临床病理学特征的关系。方法:应用Westernblot检测8例喉鳞状细胞癌患者喉癌组织及癌旁正常鳞状上皮组织中PDCD4蛋白的表达水平。应用免疫组织化学SP法检测PDCD4蛋白在54例喉癌组织及部分癌旁正常组织中的表达情况及PDCD4蛋白在这些组织中的细胞定位,观察PDCD4蛋白表达情况与喉癌临床病理学参数之间的关系。结果:PDCD4蛋白在癌旁正常组织中呈高表达,在喉癌中呈低表达或缺失(P<0.05)。PDCD4蛋白在喉正常鳞状上皮细胞核、细胞质表达,在喉癌组织中呈细胞质表达甚至缺失。PDCD4蛋白表达水平在喉癌病理分级各组间不相等(P<0.05),肿瘤分化程度越高,PDCD4蛋白表达越高(P<0.05)。结论:PDCD4基因是抑癌基因,其表达和缺失与喉癌的发生、肿瘤细胞的分化有关,有望成为喉癌基因治疗的新靶点。