食管鳞癌组织中V—ATPase的表达及其与化疗药物耐药相关性探讨

目的：探讨V—ATPase在食管鳞癌中的表达及其病理分级、TNM分期中的差异性;检测相应癌组织对化疗药物的敏感性,分析其与V—ATPase表达的相关性,为进一步研究V—ATPase耐药性及其机制提供依据。方法：采用免疫组化EnVinsion法检测V—ATPase在66例食管鳞癌中的表达,MTT法检测相应癌组织对化疗药物的敏感性,分析其与V—ATPase表达的相关性。结果：V—ATPase阳性表达主要定位于胞膜上和胞质中,总阳性率68．18％,病理分级和TNM分期三组间的表达差异性非常显著,P值各为0．003、0．000,分级各两组间的检验除Ⅱ与Ⅲ组间差异性不显著（P＝0．06）外,其余组间的P值均小于0．05;TNM分期中除Ⅱ。与Ⅲ问的差异性不显著外（P=0．368）,其余组间P值均为0．000。转移组与非转移组相比差异性非常显著（P=0．000）;环磷酰胺、5-氟尿嘧啶、吉西他滨、阿霉素、丝裂霉素、长春瑞滨、紫杉醇、羟喜树碱、顺铂、卡铂化疗药在食管鳞癌组织中药物敏感性试验结果与其相应组织V—ATPase表达相关检验,除丝裂霉素、紫杉醇外,其余P值均〈0．05,相关系数rs除紫杉醇外均小于-0．30,即除丝裂霉素、紫杉醇外都有较好的相关性。结论：V—ATPase在食管鳞癌中高表达,表达的高低与病理分级、TNM分期、淋巴转移相关联,很可能与食管鳞癌化疗药物耐药有关。     

Survivin在食管鳞癌中的表达及其与Smac的相关性研究

目的 探讨凋亡抑制因子Survivin及凋亡促进因子Smac在食管鳞癌中的表达及临床意义,并分析二者的相关性.方法 RT-PER法检测20例食管鳞癌及20例癌旁正常组织中Survivin及Smac基因的表达情况;免疫组化S-P法检测53例食管鳞癌及53例癌旁正常组织中Survivin及Smac蛋白的表达情况,分析其与食管鳞癌患者各临床病理指标的关系及两者表达的相关性.结果 食管鳞癌组织中Survivin基因表达水平(70.0%)明显高于癌旁正常组织(0%),Survivin蛋白在食管鳞癌组织中的阳性表达率为62.3%,而在正常食管组织无表达,免疫组化结果与RT-PCR结果一致;Survivin蛋白在食管鳞癌组织中的阳性表达率与浸润深度、分化程度及淋巴结转移均无相关性(P>0.05).RT-PCR结果显示,Smac基因在食管鳞癌组织巾的阳性表达率为40%(8/20),明显低于正常食管组织100%(20/20),此结果得到免疫组化的证实,Smac蛋白在食管鳞癌组织中的阳性表达率为41.5%,明显低于正常食管组织100%,而且Smac蛋白在食管鳞癌组织中的阳性表达率与组织分化程度、浸润深度及淋巴结转移密切相关(P<0.05).Survivin蛋白与Smac在食管鳞癌组织中的表达呈明显负相关(P<0.05).结论 抗凋亡蛋白Survivin和促凋亡蛋白Smac之间存在着相互拮抗,相互调节的关系,在食管鳞癌细胞凋亡过程中共同发挥作用.     

食管鳞癌组织中SPARC蛋白表达的临床意义

目的：探讨基质蛋白SPARC在食管鳞癌的增殖、侵润和转移中的作用。方法：应用免疫组化技术研究SPARC在食管鳞癌组织和其相邻的正常粘膜组织的表达差异，同时对蛋白表达进行定位。结果：36例食管鳞癌手术标本中30例SPARC蛋白表达阳性，正常食管上皮组织表达阴性（P〈0．01）。SPARC蛋白在不同分化程度的食管鳞癌组织中的表达阳性率基本相同（P〉0.05），有淋巴结转移的食管鳞癌组织与无淋巴结转移癌组织的表达间有显著差异（P〈0.05）。4例癌组织细胞核有表达，其余均为细胞浆表达。结论：SPARC和食管癌的发生与发展密切相关。食管癌出现转移时SPARC蛋白表达升高。     

MiRNA-381表达及其与食管鳞癌放疗敏感性的关系

目的:观察人食管鳞癌细胞及组织中miRNA-381的表达变化,探讨其与放射敏感性的关系.方法:采用RT-PCR法测定人食管鳞癌细胞TE-1、TE-10、TE-11及20例符合纳入标准的食管鳞癌组织中miRNA-381的表达.完成放疗后1个月接受影像学复查,分析患者的近期放疗疗效.采用克隆形成实验检测细胞的放疗敏感性.结果:入组患者根据近期疗效分为放疗抵抗组(6例)和放疗敏感组(14例),放疗抵抗组的miRNA-381表达显著低于放疗敏感组(P＜0.05).克隆形成实验结果显示细胞的放疗敏感性为TE-11＞TE-10 ＞TE-1,且有显著统计学差异(P＜0.05).RT-PCR结果显示放疗最敏感的TE-11细胞中miRNA-381表达量最高,而放疗抵抗的TE-1细胞中miRNA-381表达量最低.近期疗效和食管鳞癌组织中miRNA-381相对表达量的相关性分析显示miRNA-381相对表达量与近期疗效呈正相关(r=0.72,P＜0.05).结论:MiRNA-381在放疗敏感的食管鳞癌细胞及临床标本中的表达量显著高于放疗抵抗的细胞及组织.MiRNA-381相对表达量越高的食管鳞癌患者接受根治性放疗后的近期疗效越好.     

食管鳞癌组织Vav1表达水平及其与预后的相关性

目的:探讨Vav1(Vav guanine nucleotide exchange factor)在可手术切除的食管鳞癌患者组织中的表达水平及其与患者预后的相关性。方法:回顾性分析中国医科大学附属盛京医院2009年12月至2015年12月期间行手术治疗的81例食管鳞癌患者的临床资料。采用定量RT-PCR检测上述病例食管鳞癌标本中Vav1的表达水平,应用Kaplan-Meier方法进行单因素生存曲线分析Vav1表达水平与食管鳞癌生存的相关性,Log-rank法进行检验,采用Cox风险比例模型分析预后的独立影响因素。结果:食管鳞癌患者Vav1表达水平较高,生存分析显示Vav1高表达组生存期明显低于低表达组（P＜0.05）,Cox风险比例模型分析显示Vav1表达水平可作为食管鳞癌患者预后的独立影响因素。结论:食管鳞癌患者组织中Vav1表达水平高,Vav1表达水平高提示食管鳞癌患者预后不良。     

ABCG4在食管鳞癌中的表达及与化疗药耐药相关性的研究

[目的]探讨ABC膜转运蛋白ABCG4在食管鳞癌中的表达及与化疗药物耐药性的相关性。[方法]采用免疫组化检测ABCG4在66例食管鳞癌中的表达。用MTT法检测相应癌组织对化疗药物的敏感性。[结果]ABCG4表达总阳性率65．15％。在TNM分期Ⅱa、Ⅱb、Ⅲ期中阳性率分别为34．5％、90．5％、87．5％,3组间有显著性差异（P=0．000）。除紫杉醇外,9种化疗药物药物敏感性与ABCG4表达均呈负相关（rs〈-0．3．P〈0．05）。[结论]ABCG4在食管鳞癌的表达与TNM分期有相关性,并很可能与食管鳞癌化疗药耐药有关。     

VEGF在食管鳞癌组织中的表达及其与临床病理参数的相关性

目的:评价VEGF在食管鳞癌组织中的表达情况及其与相关临床病理参数之间的关系。方法:取265例资料完整的食管鳞癌术后切除标本为研究对象,免疫组化方法检测VEGF、EGFR、COX-2等相关蛋白的表达。采用χ2检验评估VEGF的表达水平与不同临床病理参数、EGFR及COX-2表达水平之间的关系。结果:VEGF蛋白在食管鳞癌组织中的阳性表达率和高表达率分别为87.9%（233/265）和57.7%（153/265）。VEGF蛋白的高表达与食管鳞癌分期、淋巴结转移、外膜浸润、血管侵犯、EGFR表达及COX-2表达均具有统计学相关性。结论:食管鳞癌组织中VEGF蛋白的表达水平与肿瘤分期及侵袭和浸润可能密切相关,可作为预测其生物学行为的重要参考指标。     

食管鳞癌组织中TIMP的表达

目的，探讨组织金属蛋白酶抑制剂（TIMP）在食管鳞癌中的表达及其临床意义。方法免疫组化法分别检测41例食管鳞癌患者的癌及相应正常组织中MMP-9和TIMP的表达变化。结果食管鳞癌组织中MMP-9的表达率升高且显著高于TIMP。结论MMP-9与食管鳞癌的侵袭转移有关，其机制可能与食管鳞癌组织中的MMP／TIMP平衡失调有关；MMP与TIMP联合检测有助于食管鳞癌生物学行为的判断。     

食管鳞癌组织VEGF表达及临床意义研究进展

正我国食管癌发病率和死亡率均居恶性肿瘤第四位,组织类型主要为鳞状细胞癌。由于患者确诊时多为中晚期,或已发生转移,所以食管鳞癌(esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)治疗缓解率低、易复发,预后较差,5年生存率仅为20%～30%。食管鳞     

食管鳞癌组织中Ezrin、VEGF-C的表达及其意义

 摘要 目的：探讨Ezrin、VEGF-C在食管鳞癌组织中的表达及其与临床病理的关系。方法:采用免疫组化法检测49例食管鳞癌组织及其周围正常食管组织中Ezrin、VEGF-C的表达。结果: Ezrin在食管鳞癌及其周围正常食管组织中表达率为85.7%(42/49)和26.5%(13/49)；VEGF-C在食管鳞癌及其周围正常食管组织中表达率为59.2%(29/49)和12.2%(6/49)；统计学有意义（P<0.05）。Ezrin、VEGF-C的表达程度与食管鳞癌的临床分期、淋巴结转移有关（P<0.05），与食管鳞癌的分化程度、浸润深度无关（p>0.05）。结论: Ezrin与VEGF-C的联合检测可能成为食管鳞癌转移与预后的重要指标。     

eIF4E在食管鳞状细胞癌中表达及其与预后关系的研究

目的：研究真核细胞翻译起始因子4E（eukaryotic translation initiation factor 4E,eIF4E）在食管癌的表达及其与预后的关系。方法：采用RT-PCR及免疫组化SP法检测食管癌组织及正常食管黏膜组织中eIF4E的表达,分析其表达与食管癌临床病理特征及预后的关系。结果：eIF4E mRNA在食管癌及癌旁组织中相对表达量分别为0.561±0.079,0.442±0.061（P〈0.05）;不同分化的食管鳞癌eIF4E表达量不同（P=0.012）,多重比较显示低分化鳞癌的表达量高于高分化鳞癌的表达（P〈0.05）;不同浸润深度的eIF4E mRNA的表达量不同（P=0.003）,多重比较显示在深肌层和纤维膜的表达量高于黏膜层的表达量（P〈0.05）。eIF4E蛋白在食管癌和正常食管黏膜中的阳性表达率分别为75.00%、30.80%（P=0.001）;与病理学分级呈正相关（rs=0.228,P〈0.05）;不同浸润深度的eIF4E蛋白表达量不同（P〈0.05）。而两者均与食管癌的患者年龄、性别、淋巴结转移和临床分期等临床病理学特征无关（P〉0.05）。eIF4E蛋白高表达组及低表达组5年累积生存率分别为31.8%、53.3%（P〈0.05）。Cox模型分析得出eIF4E蛋白不能作为判断食管鳞癌预后的独立指标（P＝0.211）。结论：eIF4E表达与食管鳞状细胞癌的发生密切相关,其可能参与了肿瘤的浸润和发展,并可以和其他指标共同判断预后。     

人食管鳞状细胞癌组织中GRP78的表达及其与肿瘤生物学行为的关系

目的：探讨葡萄糖调节蛋白78（glucoseregulated proteins 78,GRP78）在食管鳞状细胞癌组织及正常鳞状上皮组织中的表达情况,并分析其与临床病理特征的关系。方法: 取自2007年10月至2008年11月在山东大学附属济南中心医院胸外科手术切除的新鲜食管鳞状细胞癌标本59例及距癌组织5 cm以上的手术远端切缘的正常食管鳞状上皮组织20例,RTPCR检测GRP78 mRNA的表达,应用Western blotting检测GRP78蛋白的表达,并从mRNA和蛋白水平分析GRP78的表达与患者性别、肿瘤长度、浸润深度、分化程度、病理分期及淋巴转移等临床病理特征之间的关系。结果：食管鳞状细胞癌组织中GRP78的表达在mRNA和蛋白水平均明显高于食管正常鳞状上皮组织（均P<0.01）。GRP78在食管鳞状细胞癌组织中的高表达与食管鳞状细胞癌的浸润深度（P<0.05或P<0.01）、分化程度（P<0.05或P<0.01）、病理分期（pTMN, P<0.01）及淋巴转移密切相关（P<0.01）,而与患者性别及肿瘤长径无关（P>0.05）。结论: GRP78参与了人类食管鳞状细胞癌的发生、发展,表达水平随着食管鳞状细胞癌组织恶性程度的增高而增高,其可作为衡量食管鳞状细胞癌恶性程度的一种有潜在价值的分子标志物。     

RICTOR expression in esophageal squamous cell carcinoma and its clinical significance

Esophageal cancer is one of the most common malignant tumors in the world, and its incidence is the eighth highest; meanwhile, its fatality rate is the sixth highest. The PI3K/Akt/mTOR signaling pathway plays a required role in human cancer, including cell survival, metabolism and migration. As a kind of important scaffold protein in mTORC2, RICTOR has showed over-expression in several malignancies like melanoma and endometrial cancer. In this research, we selected 201 cases of paraffin specimens from patients diagnosed as esophageal squamous cell carcinoma after surgical treatment and then estimated the RICTOR expression in each esophageal squamous cell carcinoma tissue by using the immunohistochemical streptavidin–peroxidase technique. Then, we analyzed the association among the clinicopathological parameters, the prognosis and the expression of RICTOR. Eventually, we found that the percentage of RICTOR-positive expression in 201 ESCC samples is 70.6% (142/201) and the figure for RICTOR-negative or RICTOR-doubtful-positive expression is 29.4% (59/201). RICTOR expression positively correlated with ESCC patients’ AJCC stage (P = 0.011) and showed an opposite trend with survival (P = 0.007). Based on univariate and multivariate Cox proportional hazards regression analysis, RICTOR-positive expression, AJCC staging III or IV and nodal metastasis are prognostic factors and the former two are independent risk factors for ESCC. In conclusion, our study showed potential that targeting RICTOR may represent new effective inhibitors for treating ESCC.     

HO-1在食管鳞癌组织中的表达及与临床病理学特征的相关性

目的:探讨HO-1(heme oxygenase-1)在食管鳞癌组织中的表达及其与患者临床病理学特征的相关性。方法:采用免疫组化SP法检测HO-1在45例食管鳞癌中的表达。结果:HO-1阳性表达主要定位于细胞核中,在食管鳞癌中的强阳性表达率为73.33%。HO-1的阳性表达随淋巴结的转移和肿瘤分化程度的降低而表达增加(P<0.05),但是在不同年龄、性别、TNM分期及不同部位之间差异无统计学意义(P>0.05)。结论:HO-1在食管鳞癌中高表达,表达的高低与淋巴结转移与否及肿瘤分化程度高低有关,可能与食管鳞癌发生发展、转移和化疗药物耐药密切相关。     

基质窖蛋白-1在食管鳞癌中的表达及与自噬的关系

目的 探讨基质窖蛋白-1(caveolin-1,Cav-1)在人食管鳞癌组织中的表达以及与自噬标志物——微管相关蛋白轻链3B(microtubule associated protein light chain 3B,MAP-LC3B,简称LC3B)的关系及其临床病理意义.方法 利用量子点免疫荧光组织化学技术检测基质Cav-1和LC3B蛋白在76例食管鳞癌组织和15例非癌变食管黏膜上皮组织中的表达.结果 基质Cav-1和LC3B蛋白在食管鳞癌组织的阳性表达率分别为28.9％和64.5％,与非癌变食管黏膜上皮组织比较,差异均有统计学意义(P＜0.05).基质Cav-1的阳性表达与食管鳞癌TNM分期和淋巴结转移均显著相关(P＜0.05),而与其他临床病理参数均无关(P＞0.05).LC3B与肿瘤浸润范围、TNM分期和淋巴结转移均显著相关(P＜0.05).基质Cav-1和LC3B蛋白在食管鳞癌中的表达呈正相关(r=0.353,P=0.002),二者缺失表达能更好地预示淋巴结的转移.结论 基质Cav-1和LC3B表达缺失可协同促进食管鳞癌的形成和恶性进展.     

ABCG2在食管癌中的表达及其临床意义

目的:检测ABCG2蛋白在67例食管鳞癌中的表达,分析其表达率与分级、临床TNM分期、转移间的关系,为研究ABCG2对食管癌的耐药性提供临床证据.方法:采用免疫组织化学EnVinsion法检测ABCG2蛋白在食管鳞癌中的表达,统计学分析其分级与临床TNM分期的关系.结果:免疫组化结果显示ABCG2阳性表达主要位于胞质中.食管鳞癌总阳性率67.2%,病理分级Ⅰ-Ⅱ、Ⅱ、Ⅱ-Ⅲ、Ⅲ阳性率分别为50.0%、60.8%、70.0%、100.0%,3组间的差异性非常显著P=0.043(Kruskal-Wallis H检验),各两组间的Mann-Whitney检验,Ⅰ-ⅡvsⅢ, Ⅱ-ⅢvsⅢ有统计学意义, P分别为0.004,0.027. TNM分期Ⅱa、Ⅱb、Ⅲ阳性率分别为34.6%、83.4%、89.5%, 3组间的差异性非常显著P=0.000,各两组间检验:Ⅱa vsⅡb,Ⅱa vs Ⅲ,P均为0.000.淋巴结转移组与非转移组差异性非常显著,P=0.000.结论:ABCG2在食管鳞癌中高表达,表达的高低与病理分级、临床TNM分期及转移有一定关联.     

食管鳞癌组织MTSS1表达及其与转移潜能相关性研究

目的:探讨食管鳞癌组织中转移抑制基因1(MTSS1)表达与临床病理因素的关系,以及与食管鳞癌细胞迁移和侵袭的关系。方法:蛋白质印迹法和免疫组化检测106例食管鳞癌及癌旁正常组织以及食管鳞癌细胞系中MTSS1的表达;Transwell法检测MTSS1高表达细胞系的迁移和侵袭,观察用小分子干扰RNA(siRNA)敲降MTSS1后对迁移和侵袭的影响。结果:MTSS1在食管组织中表达为0.756±0.101,明显高于食管鳞癌组织的表达(0.596±0.110),差异有统计学意义,t=3.011,P=0.009。MTSS1在食管癌组织中表达与有无淋巴结转移相关,χ2=10.9,P<0.01;MTSS1高表达食管鳞细胞系KYSE180转染MTSS1-siRNA后48h,在mRNA水平的抑制率为(91.96±1.72)%,在蛋白水平的抑制率为(90.40±0.70)%,均能显著降低MTSS1的表达。体外实验发现,MTSS1能够抑制食管鳞癌细胞的迁移和侵袭,降低MTSS1表达后,KYSE180细胞的迁移数从(1 521±122)个升高至(2 122±111)个,P=0.003;侵袭细胞数从(1 297±137)个升高至(1 983±81)个,P=0.002。结论:MTSS1与食管癌的淋巴结转移呈负相关,并且能抑制食管鳞癌细胞的迁移和侵袭。MTSS1可能是食管鳞癌的转移抑制基因。     

Gli1在食管鳞状细胞癌中的表达及与预后的关系

目的:探讨Hh信号通路关键因子Gli1在食管鳞状细胞癌(ESCC)中的表达及临床意义,并分析其与预后的关系.方法:食管鳞状细胞癌组织及癌旁正常食管组织各88例,采用免疫组织化学法检测Gli1的表达,另用Western-blot方法检测其中30例ESCC的Gli1的表达,Pearson卡方检验分析Gli1表达与临床病理特征之间的关系.单因素Kaplan-Meier法分析Gli1表达与预后的关系.Cox比例风险回归评估Gli1表达与预后的关系.结果:食管鳞状细胞癌组织中Gli1的表达在蛋白水平明显高于食管正常鳞状上皮,Gli1在ESCC中免疫组化阳性表达率为71.59％ (63/88),Gli1在癌旁正常食管鳞状上皮中免疫组化阳性表达率为6.82％ (6/88),差异有统计学意义(P＜0.05).Western blot法证实Gli1蛋白在ESCC组织中表达上调,与癌旁正常食管组织中的表达比较,差异有统计学意义(P ＜0.001).Gli1高表达与肿瘤病理分期及淋巴结转移密切相关(P＜0.05).单因素分析Kaplan-Meier法提示Gli1阳性表达组与阴性表达组生存率之间的差别有统计学意义(Log-rank test,P=0.005).结论:食管鳞状细胞癌中Gli1的表达比较普遍,与ESCC的预后密切相关,可作为预测转移潜能和预后判断的有价值的指标.     

V-ATPase在非小细胞肺癌中的表达及与耐药相关性的临床意义

目的: 探讨V-ATPase在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达及其在病理分类、分级中的差异性;检测相应癌组织对化疗药物的敏感性,分析其与V-ATPase表达的相关性,为进一步研究V-ATPase耐药性及其机制提供依据。 方法: 采用免疫组化EnVinsion法、免疫荧光法检测V-ATPase在92例NSCLC中的表达,激光共聚焦观察其定位,统计学分析差异性;用MTT法检测相应癌组织对化疗药物的敏感性,分析其与V-ATPase表达的相关性。 结果: V-ATPase阳性表达主要定位于胞膜上和胞质中,鳞癌阳性率71.43%、腺癌阳性率83.72%,两者表达差异性非常显著(P=0.000);鳞癌Ⅱ阳性率58.33%、Ⅱ-Ⅲ阳性率84.00%,差异性显著(P=0.014);腺癌中高分化阳性率76.7%、低分化为100.0%,差异性显著(P=0.012)。环磷酰氨、吉西他滨、阿霉素、紫杉醇、顺铂化疗药在NSCLC组织中药物敏感性试验结果与其相应组织V-ATPase表达相关性检验,P值均<0.05,相关系数rs分别为-0.697、-0.654、-0.598、-0.216、-0.604,其中鳞癌中rs分别是-0.584、-0.512、-0.544、-0.269、-0.306,腺癌分别为-0.742、-0.607、-0.63、-0.349、-0.707。 结论: V-ATPase在非小细胞肺癌中高表达,表达的高低与病理分类、分级有关,并很可能与NSCLC化疗药物耐药有关。