B7分子在肿瘤免疫中的作用

Ｂ７分子在肿瘤免疫中的作用广西肿瘤防治研究所郭建霞在大多数肿瘤免疫中，Ｔ细胞均起关键的作用。肿瘤细胞可以通过多种方式逃避机体的免疫监视，如肿瘤细胞特异性移植抗原（ＴＳＴＡ）的改变及封闭、低表达ＭＨＣ分子、改变其抗原加工途径不把特异性抗原提呈给宿主Ｔ细...     

B7分子在肿瘤免疫应答中作用的研究

将用Ｂ７基因转化的和末转化的乳腺癌细胞Ｂ７－ＭＤＡ４５３和ＭＤＡ４５３经丝裂霉素处理后，给大鼠尾静脉注射１＊１０＾７细胞连续３天，３天后取大鼠脾脏细胞在外体进行ＣＴＬ细胞毒试验，ＭＬＣ和ＣｏｎＡ刺激的脾细胞增殖试验。     

共刺激分子B7-1与汉坦病毒核蛋白基因共表达载体的构建及免疫调节作用

目的:探讨共刺激分子B7-1(CD80)对汉坦病毒核蛋白基因疫苗的免疫调节作用.方法:构建双启动子共表达B7-1基因和汉坦病毒核蛋白基因的真核表达载体pcDNA 3.1-B7-S,酶切鉴定后直接肌注免疫BALB/c小鼠,同时设对照组pcDNA 3.1 空质粒接种组、pcDNA 3.1-S接种组.ELISA法检测血清特异性抗体,MTT法检测T细胞增殖反应.结果:pcDNA 3.1-B7-S接种组鼠在抗体的产生水平及淋巴细胞增殖指数上均较pcDNA 3.1-S接种组明显增高.结论:接种B7-1基因和汉坦病毒核蛋白基因的共表达质粒优于注射单目的抗原基因表达质粒,为探索增强基因疫苗的免疫作用提供了新的途径.     

B7-同系物1分子的免疫功能及其在疾病中的作用

B7同系物1（B7-H1）分子是共刺激分子B7家族的重要成员,在淋巴细胞及大部分外周组织可以广泛诱导性表达.B7-H1可以和T、B细胞上程序性死亡-1（PD-1）受体及另一未知的刺激性受体结合,调节淋巴细胞的功能.B7-H1分子的表达与肿瘤、炎症、器官移植排斥以及病毒感染等疾病密切相关.通过调控B7-H1的表达水平来调节淋巴细胞的免疫功能,将为疾病的免疫治疗提供新的思路.     

携带B7-1基因的Hep-2细胞瘤苗诱导CIK细胞特异性抗肿瘤作用

目的探讨以转染B7-1基因的喉癌细胞Hep-2瘤苗刺激CIK细胞能否激活其特异性抗肿瘤杀伤活性。方法将以携带B7-1基因的重组腺病毒载体转染Hep-2细胞的瘤苗与CIK细胞共培养,检测CIK细胞的增殖率、表型改变、细胞毒活性。结果经21天培养后,对照组和转染组增殖倍数分别约为2216倍和5246倍,差异有非常显著意义(P<0.01);未转染组约为2299倍,与对照组相比差异无显著意义(P>0.05)。转染组CD3 CD56 细胞和CD3 CD8 细胞的百分含量明显高于对照组(P<0.01),而未转染组与对照组细胞表型改变无显著差异(P>0.05)。细胞毒杀伤实验中,在效靶比为40:1条件下,以Hep-2细胞为靶细胞时,转染组杀伤活性明显高于对照组(P<0.01),未转染组与对照组无显著差异(P>0.05),以K562细胞为靶细胞时,三组CIK细胞的毒性作用无明显差异(P>0.05)。结论转染B7-1的Hep-2细胞瘤苗与CIK细胞共培养,可提高CIK细胞对肿瘤细胞的杀伤活性。     

急性白血病细胞B7-1及MHC分子的表达

目的：探讨共刺激分子B7-1(CD80)及MHC分子在急性白血病(acute leukemia，AL)中的表达，方法：应用一组mAb，采用免疫荧光法对AL52例瘤细胞及34例正常人骨髓单个核细胞（BMMC)表面B7-1及主要组织相容性复合体(major histocompatibility complex，MHC)分子的表达进行了检测．结果：所有患瘤细胞及正常人BMMC上MHCI类分子表达强阳性，MHCⅡ类分子表达920k，阳性，而B7-1表达差异较大，急性单核细胞白血病(M5)表达阳性率最高(8／11)，而急性粒细胞白血病(M1，M2，M3)均无表达．结论：B7-1缺陷是白血病细胞逃避宿主免疫监视的重要原因，转染B7-1基因的瘤苗可能是免疫基因治疗的有效途径。     

B7-1基因转染小鼠EL-4淋巴瘤细胞体外诱导免疫小鼠脾细胞产生的白细胞介素-2

目的　研究B7 1基因转染小鼠EL 4淋巴瘤体外诱导免疫小鼠脾细胞产生的白细胞介素 2。方法　以CTLL 2细胞检测EL 4B7 1 免疫小鼠的脾细胞与瘤细胞共育的MLTC培养上清中的IL 2活性。结果　EL 4B7 1 免疫小鼠的SPL经瘤细胞在体外刺激可诱生出明显的IL 2活性 ,而EL 4免疫小鼠的SPL则无此作用 ,两者具有较明显的差异 (P <0 0 1)。结论　B7 1基因转染小鼠EL 4淋巴瘤可在体外诱导免疫小鼠脾细胞产生较高水平的白细胞介素 2。     

B7-H1分子在肿瘤微环境中的特异表达及对调节性T细胞的诱导促进作用

目的通过分析人结直肠癌细胞表达B7-H1分子与肿瘤微环境中浸润的调节性T细胞的关系,探讨肿瘤性B7-H1信号参与肿瘤免疫逃逸的机制。方法采用免疫组化分析肠癌组织中B7-H1分子的表达及调节性T细胞的浸润情况,采用细胞培养和流式细胞术分析肿瘤性B7-H1信号对调节性T细胞分化的作用。结果 B7-H1异常高表达在肠癌组织中,正常组织不表达;肿瘤组织中B7-H1表达水平与调节性T细胞浸润数量成正相关（P〈0.01）,在TGFβ-的共同作用下,M435-B7-H1细胞可以显著促进Tregs的诱导。结论 B7-H1在肿瘤组织异常表达可通过诱导肿瘤微环境中调节性T细胞的分化参与肿瘤免疫逃逸。     

慢性乙型肝炎肝组织B7-1、Fas的表达

目的了解慢性乙型肝炎(chronichepatitisB,CHB)肝组织B7-1、Fas的表达特点及关系。方法采用免疫组织化学方法,对30例CHB患者肝活检组织B7-1、Fas的表达进行了对比观察。结果CHB肝组织B7-1、Fas的表达部位相似,Fas的表达强度与B7-1的表达强度呈显著正相关,其相关系数为:γ=0.79(P<0.01)。结论B7-1可能参与了CHB患者Fas/FasL介导的肝细胞凋亡过程。     

共刺激分子CD28和B7在关节炎发病中的作用

目的：探讨Ｂ７;ＣＤ２８共刺激信号在关节炎发病机制中的作用。方法：经牛Ⅱ型的（ＢⅡＣ）诱导ＳＤ大鼠建立关节炎动物模型,分析抗Ｂ７－１和抗Ｂ７－２抗体对关节炎大鼠临床症状和特异性免疫反应的影响。结果：抗Ｂ７－１抗体可阻止ＳＤ大鼠发生胶原诱地性关节炎,降低大鼠对ＢⅡＣ的体液免疫反应。结论：Ｂ７;ＣＤ２８共刺激信号在诱发Ｔ细胞介导的自身免疫疾病中起作用,抗Ｂ７－１抗体具有潜在的治疗作用。     

双表达B7-1、B7-2基因肿瘤疫苗治疗小鼠肝癌优于单表达疫苗的研究

目的:研究B7-1、B7-2基因对肿瘤的免疫治疗作用。方法:应用转染有B7-1、B7-2基因的肝癌细胞株H22/B7-1、H22/B7-2,建立小鼠肝癌模型,观察小鼠成瘤期、荷瘤小鼠存活期及肿瘤结节大小。结果:各实验组动物都发生肿瘤,接种H22/B7-1 H22/B7-2组成瘤率低,对照组动物肿瘤呈进行性生长;组间成瘤潜伏期不同,与对照组相比,凡接种有H22/B7-2的小鼠肿瘤形成有迟发性;接种转B7基因细胞的小鼠肿瘤生长都较对照组慢;同时接种H22/B7-1和H22/B7-的小鼠能负载大于107的肿瘤细胞。转基因细胞在体外刺激淋巴细胞增殖和诱导CTLs的能力明显增强。结论:B7-1、B7-2都能增强肝癌细胞的免疫原性。B7-2在抗肿瘤早期发挥作用,B7-1随后起放大和调节作用。B7-1与B7-2联用效果优于单一应用。     

共刺激分子B7-H1在肾透明细胞癌中的表达及意义

目的探讨共刺激分子B7-H1在人透明细胞癌组织中的表达及其意义。方法运用免疫组织化学ABC法检测B7-H1在45例肾透明细胞癌组织中的表达,并对其表达水平与临床病理参数之间的关系进行相关性分析。结果B7-H1分子在肾透明细胞癌组织中的阳性表达显著高于癌旁正常肾组织（P〈0.05）;B7-H1在肾透明细胞癌组织中阳性表达率为68.9%,与患者性别、年龄无关（P〉0.05）,而与病理分级、临床分期及是否转移显著相关（P〈0.05）。结论B7-H1在肾透明癌组织中高表达,可能在肿瘤的发生、发展中起到一定作用,有望成为肾透明细胞癌免疫治疗的一个新靶点。     

过敏性紫癜患儿外周血单个核细胞共刺激分子B7-1、B7-2与CD28的表达及意义

目的 探讨免疫共刺激分子B7-1、B7-2和CD28在过敏性紫癜患儿外周血单个核细胞（PBMc）中的表达及其意义。方法 应用流式细胞仪（FCM）从蛋白质水平检测了38例过敏性紫癜（HSP）患儿（其中11例诊断为紫癜性肾炎）和20例正常儿童PBMC中B7-1、B7-2和CD28的表达，并分析其与24h尿微量白蛋白的关系。结果 过敏性紫癜患儿B7-2蛋白和CD28蛋白的表达水平（相对平均荧光强度，RMFI）均高于正常对照组（P〈0．05），各组间B7-1蛋白表达水平的差别无显著性意义（P〉O．05）。18例24h尿微量白蛋白（24hUMA）增高的HSP患儿共刺激分子B7-2、CD28蛋白的表达与24hUMA呈等级正相关。结论 过敏性紫癜患儿PBMC共刺激分子B7-2、CD28表达异常增加，可能参与HSP的起病，而且B7～2、CD28蛋白的表达与24h尿微量白蛋白呈等级正相关，提示可以作为监测HSP患儿病情以及检测早期肾脏损害的免疫学指标。     

雷公藤多甙对哮喘大鼠支气管细胞间黏附分子-1和核因子-κB表达作用的研究

目的:观察哮喘大鼠支气管细胞间黏附分子-1(ICAM鄄1)和核因子-κB(NF鄄κB)的表达、炎性细胞浸润的变化,探讨雷公藤多甙干预后的影响。方法:18只Wistar大鼠分为哮喘组(A组),雷公藤多甙治疗组(T组)和正常对照组(C组),采用免疫组化方法分别观察ICAM鄄1、NF鄄κB在3组大鼠支气管上皮的表达。结果:①哮喘组支气管上皮ICAM鄄1、NF鄄κB的表达显著高于对照组(P<0.05);②治疗组支气管上皮ICAM鄄1、NF鄄κB的蛋白表达与哮喘组相比显著降低(P<0.05);③哮喘大鼠支气管NF鄄κB与ICAM鄄1蛋白表达比较呈显著正相关(r=0.832,P<0.01)。结论:哮喘大鼠模型支气管NF鄄κB对于ICAM鄄1蛋白表达具有重要的调控作用。雷公藤多甙对于哮喘的治疗机制之一可能通过下调受NF鄄κB调控的ICAM鄄1表达,减少肺组织中炎性细胞的浸润而实现。     

人B7-1 cDNA的克隆及鉴定

目的:克隆人B7-1全长cDNA以构建相应腺病毒表达载体。方法:根据B7-1基因序列设计并合成可扩增B7-1 cDNA的特异性引物,用RT-PCR法从骨髓细胞总RNA中扩增B7-1 cDNA,并克隆至pGEM-T载体中,经酶切鉴定后再行序列分析。结果:逆转录多聚酶链反应扩增产物长度与预期的889 bp一致;用M13正、反向引物行序列测定,证实克隆出的序列与GenBank的B7-1 cDNA序列完全一致;人B7-1全长cDNA被成功地插入到质粒pGEM-T中。结论:克隆人B7-1全长cDNA为构建相应腺病毒表达载体及应用B7-1行肿瘤免疫基因治疗提供了可能性。     

趋化因子和B7分子联合应用抗肿瘤的研究进展

肿瘤免疫基因治疗为肿瘤治疗研究提供了新的途径,趋化因子和B7分子在肿瘤免疫基因治疗中发挥着重要的作用。B7分子是重要的共刺激分子,通过与相应受体结合,为T细胞激活提供第二信号;趋化因子则通过趋化免疫活性细胞。部分趋化因子还可抑制肿瘤血管生成,而产生抗肿瘤效应。联合基因治疗是目前肿瘤免疫基因治疗的趋势,研究表明共转染趋化因子和B7分子主要通过“招引一活化”的机制,产生更强的抗肿瘤效应。现就趋化因子和B7分子在肿瘤基因治疗中的联合应用做一综述。     

不明原因习惯性流产患者体内B7-1及B7-2绒毛共刺激分子表达的研究

目的探讨B7-1、B7-2在不明原因习惯性流产（UHA）中的表达,并总结B7-1、B7-2在预防不明原因习惯性流产中的价值。方法选择35倒不明原因习惯性流产患者为观察组,并分别选择50例正常孕妇和50例正常女性为对照组和正常组。使用贝克曼库尔特Epics-XLⅡ型流式细胞仪测定B7-1、B7-2的表达。结果观察组B7-1和B7-2表达分剐为11.56±1.23和25.83±1.24。观察组B7-1和B7-2与对照组和正常组相比,差异有统计学意义（P〈0.05）。经Spearman秩相关分析,发现B7-1与不明原因习惯性流产呈正相关的关系（r=0.832,t=5.632,P=0.012）,B7-2与不明原因习惯性流产呈负相关关系（r=-0.745,t=6.032,P=0.009）。B7-1和B7-2均是不明原因习惯性流产的独立危险因素。结论在不明原因习惯性流产患者中,B7-1表达要高于正常孕妇和正常女性,B7-2的表达则要低于正常孕妇和正常女性。在临床检测中,要注意B7-1、B7-2的表达,并可以通过减弱B7-1表达、增强B7-2表达,以降低不明原因习惯性流产发生风险。     

重组B7-1/B7-2逆转录病毒载体的构建及其在小鼠肝癌基因治疗中的应用

目的构建表达Ｂ７－１／Ｂ７－２的重组逆转录病毒载体，并观察Ｂ７－１／Ｂ７－２的表达对体内外抗小鼠肝癌免疫反应的影响。方法粘端定向克隆构建重组逆转录病毒载体ＬＸＳＮ－ｍＢ７－１和ＬＸＳＮ－ｍＢ７－２，依次转导包装细胞系ＰＥ５０１和ＰＡ３１７，并用重组病毒上清感染小鼠肝癌细胞系Ｈｅｐａｌ－６，流式细胞术检测Ｂ７－１／Ｂ７－２的表达，并用Ｂ７－１／Ｂ７－２表达阳性的Ｈｅｐａｌ－６在体内外诱导抗肿瘤免疫反应。结果１．表达Ｂ７－１／Ｂ７－２阳性的Ｈｅｐａｌ－６致瘤性明显降低；２．单独Ｂ７－１／Ｂ７－２基因转染仅能诱导部分细胞毒性和部分保护性免疫反应；３．Ｂ７－１／Ｂ７－２基因转染与细胞因子处理联合应用则能诱导强烈的细胞毒性和完全的抗Ｈｅｐａｌ－６保护性免疫反应。结论Ｂ７－１／Ｂ７－２共刺激分子在小鼠肝癌的表达是激活抗肿瘤免疫所必需的但不是充分的条件，而Ｂ７基因转染联合ＩＦＮ－γ等细胞因子处理能诱导彻底的抗肿瘤免疫反应     

B_7分子在肿瘤免疫应答中作用的研究

将用B7基因转化的和未转化的人乳腺癌细胞B7-MDA453和MDA453经丝裂霉素处理后，给大鼠尾静脉注射1×107细胞连续3天．3天后取大鼠脾脏细胞在外体进行CTL细胞毒试验、MLC和ConA刺激的脾细胞增殖试验。结果证明．经B7－MDA453处理的大鼠所引发的CTL细胞毒作用、MLC和ConA刺激的脾细胞增植试验明显较MDA453处理组高，说B7分子在肿瘤免疫应答中发挥了重要作用。