苦味酸-天狼猩红染色和MASSON染色评价心脏纤维化的比较

目的比较苦味酸-天狼猩红染色法和MASSON染色法在评价小鼠心脏纤维化中的异同。方法 10周龄BALB/c雄性小鼠给予皮下注射异丙肾上腺素（5mg/kg/d）共14天,诱导小鼠心脏纤维化模型,取心脏标本制备石蜡切片,分别行苦味酸-天狼猩红染色和MASSON染色,观察胶原纤维的沉积。结果苦味酸-天狼猩红染色法和MASSON染色法都能清楚地显示出胶原纤维,且其定位是一致的。两种染色方法显示出的纤维化面积,在统计学上无显著性差异（P〉0.05）。但苦味酸-天狼猩红染色法处理的切片能够在偏振光显微镜下清楚地区分Ⅰ型和Ⅲ型胶原纤维,而MASSON染色法却不能。结论苦味酸-天狼猩红染色法较MASSON染色法相比能够更好地评价心脏纤维化。     

伸膝制动骨关节炎动物模型软骨内胶原变化的观察

目的 对骨关节炎(OA)早期软骨内胶原变化进行动态观察，探时胶原变化与OA发病机制的关系。方法 采用兔膝关节伸直位制动OA模型，对制动10、20、30、40d的关节软骨进行透射电镜观察，Ⅱ型胶原原位杂交，I、Ⅱ、Ⅲ型胶原的免疫组织化学测定。结果 电镜观察显示OA关节软骨的破坏从切线层的细胶原纤维网开始，而切线层的细胶原纤维网不含细胞；原位杂交和免疫组织化学显示OA早期Ⅱ型胶原的表达和含量增加，而且增加主要发生在移行层和深层上部，二者染色灰度值随时间的变化是先递增，之后逐渐减少；OA关节软骨内有Ⅲ型胶原分泌，并呈增加趋势，但无I型胶原的分泌。结论 OA关节软骨的退变从切线层开始，切线层胶原破坏后难于修复可能是软骨退变重要原因。     

强直性脊柱炎棘上韧带组织病理学和超微结构观察

目的 观察强直性脊柱炎(AS)棘上韧带在脊柱骨性强直后发生的组织病理学及超微结构改变.方法 通过光镜下观察苏木素-伊红(HE)、苦味酸-天狼星红染色,并行电镜观察微观结构改变,与对照组进行比较.图像处理软件分析血管密度、胶原原纤维分布密度.采用t检验进行统计学分析.结果 实验组光镜下,胶原纤维排列紊乱,可见玻璃样变及脂肪浸润,大量血管增生,管径不一,有Ⅲ型胶原表达,电镜下胶原纤维分布稀疏,周期性横纹模糊,基质降解,可见基质小泡.对照组胶原纤维排列规则,无上述改变.实验组血管密度(6.8±0.7)/HP,对照组(1.0±0.4)/HP;实验组胶原原纤维分布密度(122±22)/μm2,对照组(218±10)/μm2,2组差异有统计学意义(P＜0.05).结论 棘上韧带在AS疾病进展过程中出现一系列的组织病理学改变.     

莪术油对大鼠血管损伤后Ⅰ、Ⅲ型胶原的影响

目的　研究莪术油注射液对大鼠球囊损伤血管新生内膜形成及血管重构的作用以及Ⅰ、Ⅲ型胶原的影响。方法　用球囊导管损伤大鼠左颈总动脉制成再狭窄模型 ,术后 14d用计算机图像分析系统分析形态学及组织学的变化 ,苦味酸天狼猩红偏振光显示法结合图像分析检测各组Ⅰ型及Ⅲ型胶原的变化。结果　术后第 14天 ,偏光显微镜下 ,模型组Ⅰ、Ⅲ型胶原较假手术组明显增多、增粗、变亮、紊乱 ,其分布以外膜为主 ,莪术油组与模型组相比 ,Ⅰ、Ⅲ型胶原明显增少、变细、变暗、排列较整齐 ,其分布也以外膜为主 ;模型组较假手术组腔面积、外弹力板周长、内弹力板周长明显减少 ,Ⅰ、Ⅲ型胶原的面积明显增加 ;莪术油组和模型组比较 ,最大内膜厚度、新生内膜面积及Ⅰ、Ⅲ型胶原面积明显减少 ,腔面积、外弹力板周长、内弹力板周长明显增加 ,与假手术组比较 ,差异无显著性 ;3组胶原Ⅰ /Ⅲ差异无显著性。结论　Ⅰ、Ⅲ型胶原排列的紊乱 ,含量的增加是再狭窄形成的重要机制 ,其比值可能并不重要。莪术油注射液显著抑制了球囊损伤大鼠颈动脉内膜增生和血管重构 ,作用机制可能与抑制Ⅰ、Ⅲ型胶原积聚有关。     

激动素对肝纤维化大鼠肝脏胶原变化的作用研究

目的:观察激动素(kinetin)对肝纤维化大鼠肝脏Ⅰ、Ⅲ型胶原含量的作用。方法:将实验大鼠随机分为3组,模型组用CCl4诱导形成肝纤维化模型;激动素组造模同时给予0.1%激动素溶液5ml·kg-1·d-1;对照组仅给予生理盐水皮下注射,均治疗12周。应用苦味酸天狼猩红偏振光法和图像分析技术对3组中的胶原含量及分布特点进行观察。结果:激动素组Ⅰ型胶原与Ⅲ型胶原含量分别为(2.107±0.833)%和(1.114±0.413)%,分别较模型组(4.473±2.311)%和(1.964±0.854)%显著降低(P<0.01)。结论:激动素能使肝纤维化大鼠肝脏Ⅰ、Ⅲ型胶原含量显著降低。     

自发性高血压大鼠胸主动脉外膜胶原分布及含量的变化

目的自发性高血压大鼠(SHR)胸主动脉外膜胶原分布及含量的变化。 方法天狼猩红染色法观察不同周龄组(4W、8W、24W)大鼠胸主动脉外膜胶原的分布,氯胺T氧化法测定不同周龄组胸主动脉外膜胶原含量,组织块贴片法进行血管外膜成纤维细胞的培养,并采用细胞免疫化学法检测血管外膜成纤维细胞Ⅰ、Ⅲ型胶原的表达。 结果大鼠胸主动脉胶原主要分布于血管外膜;自发性高血压大鼠胸主动脉外膜胶原含量在8周、24周高于对照京都种Wistar大鼠(WKY);血管外膜成纤维细胞Ⅰ、Ⅲ型胶原免疫细胞化学染色呈阳性。 结论胸主动脉外膜胶原的沉积可能参与高血压血管重塑过程,血管外膜成纤维细胞可合成Ⅰ、Ⅲ型胶原。     

自发性高血压大鼠胸主动脉外膜胶原分布及含量的变化

自发性高血压大鼠（SHR）胸主动脉外膜胶原分布及含量的变化。方法：天狼猩红染色法观察不同周期龄（4W、8W、24W）大鼠胸主动脉外膜胶原的分布,氯胺T氧化法测定不同周龄组胸主动脉外膜胶原含量,组织块贴片法进行血管外膜成纤细胞的培养,并采用细胞免疫化学法检测血管外膜成纤维细胞Ⅰ、Ⅲ型胶原的表达。结果：大鼠胸主动脉胶原主要分布于血管外膜,自发性高血压大鼠胸主动脉外膜胶原含量在8周、24周高于对照京都种Wistar大鼠（WKY）;血管外膜成纤维细胞Ⅰ、Ⅲ型胶原免疫细胞化学染色呈阳性。结论：胸主动脉外膜胶原的沉积可能参与高血压血管重逆过程,血管外膜成纤维细胞可合成Ⅰ、Ⅲ型胶原。     

非酒精性脂肪性肝炎及肝纤维化动物模型的建立

目的通过胆碱缺乏饮食及乙硫氨酸的联合作用构建非酒精性脂肪性肝炎(non-alcoholic steatohepatitis,NASH)及肝纤维化动物模型。方法选择雄性C57BL/6J小鼠给予含60%高脂的胆碱缺乏饲料,并在第1周的饮水中辅以0.165%的乙硫氨酸加重打击。于第4周、第8周和第16周各随机处死5只小鼠。分离血清,取肝脏组织分别进行HE染色、油红O染色及天狼猩红染色,应用图像分析法对天狼猩红染色结果进行胶原含量半定量分析。结果造模第4周,血清中ALT、AST及TG的含量明显上升,油红O染色显示肝脏组织已经出现大量的脂滴堆积,HE染色可见大量空泡,但无病理性纤维化发生。造模第8周,肝脏组织除可见大量脂滴,天狼猩红染色观察肝组织中央静脉及汇管区周围胶原纤维少量增生。造模第16周,天狼猩红染色在窦周隙内可见成细丝状乃至索状的胶原纤维分布。结论经改良方法后,成功建立小鼠NASH及肝纤维化的模型。     

肝细胞生长因子对犬急性心肌梗死后左心室重构的影响

目的探讨肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor,HGF)对急性心肌梗死后左心室重构的影响。方法将12只杂种犬结扎左冠状动脉前降支,复制急性心肌梗死模型,随机分为2组:对照组和治疗组,每组6只。治疗组于梗死心肌周围注射pc-DNA3-HGF基因1 ml,对照组给予等量的生理盐水。分别于术后1、4、8周进行超声心动图检查,检测心功能、左心室重构指标。术后8周取心肌组织行HE染色及天狼猩红染色,图像分析系统测定Ⅰ、Ⅲ型胶原含量。结果术后4周时,治疗组左心室射血分数(LVEF)明显高于对照组(P<0.05)。8周时,LVEF明显升高,左心室舒张末容积较对照组降低(P<0.05)。对照组组内比较显示左心室后壁厚度显著降低(P=0.04)。HE染色可观察到治疗组梗死心肌周围毛细血管较对照组增多,而对照组瘢痕形成明显。天狼猩红染色显示治疗组Ⅲ型胶原含量高于对照组,Ⅰ/Ⅲ型胶原比例低于对照组(P<0.05)。结论HGF可能通过减少胶原的沉积及促进血管增生,减少心肌坏死及瘢痕形成,从而改善心功能及急性心肌梗死后的左心室重构。     

氯沙坦干预病毒性心肌炎恢复期,慢性期心脏胶原表达及心？…

目的 观察病毒性心肌炎恢复期，慢性期心脏间质胶原表达及其对心功能的影响，并初步探讨药物干预的效果，为临床干预心肌纤维化提供实验依据。方法 建立恢复期，慢性病毒性心肌炎小鼠模型，通过阻抗微分法观察心排血量，Ｈ．Ｅ。染色及苦味酸天狼猩红胶原特异染色偏振光显像进行心脏间质胶原的组织化学观察，ＲＴ－ＰＣＲ观察心脏Ｉ型胶原ｍＲＮＡ表达的变化，并与氯沙坦干预后比较。     

补益肾气法对自发性高血压大鼠胶原含量影响的实验研究

目的 观察补益肾气法对自发性高血压大鼠（SHR）主动脉胶原含量及表达的影响。方法行Masson氏三色法和siriusred苦味酸染色法染动脉胶原、免疫组化法（SP）观察Ⅰ型、Ⅲ型胶原分布，结果输入计算机SPSS软件作统计学处理。结果实验显示此法能使主动脉胶原含量及表达减少，Ⅰ型、Ⅲ型胶原表达减少。结论该法能有效抑制胶原合成，改善血管弹性。     

晚期血吸虫病患者肝脾Ⅰ、Ⅲ型胶原含量的变化

目的　研究晚期血吸虫病(晚血)患者肝、脾组织Ⅰ型胶原(CⅠ)和Ⅲ型胶原(CⅢ)的含量变化。　方法　对55例晚血患者肝活检标本和脾切除标本进行常规病理检查,肝、脾纤维化程度分期,经天狼猩红染色后,于偏光显微镜观察CⅠ、CⅢ分布情况。用图像分析仪计算CⅠ、CⅢ含量。5例正常肝、脾标本作对照。　结果　患者肝组织CⅠ、CⅢ含量明显增加(P<0.01),肝窦中也明显增加(P<0.01),CⅠ/CⅢ比值明显降低(P<0.01)。随着肝纤维化程度的升高,肝窦CⅠ、CⅢ含量呈下降趋势,CⅠ/CⅢ比值则呈上升趋势。脾索CⅠ、CⅢ含量明显增加,CⅠ/CⅢ比值降低(P值均<0.01)。随着脾纤维化程度的升高,CⅠ、CⅢ含量呈上升趋势,CⅠ/CⅢ比值则呈下降趋势。　结论　晚血患者肝、脾组织CⅠ、CⅢ含量增加,以CⅢ增幅较大     

老年高血压左心室肥厚患者心肌胶原纤维的病理改变特点

目的观察老年高血压左心室肥厚(LVH)患者心肌胶原纤维的病理改变特点。方法从解放军总医院1954年3月～2001年2月的3520例连续尸体解剖标本中,选取年龄≥65岁的126例的心脏标本,并依据诊断分为高血压组101例,其中LVH 0级15例,LVHⅠ级36例,LVHⅡ级28例,LVHⅢ级22例;对照组25例,对2组标本进行HE、苦味酸天狼星红和Ⅰ、Ⅲ型胶原纤维免疫组织化学染色,运用光镜和偏振光观察胶原纤维的分布特点,采用全自动图像分析计算心肌间质胶原容积分数(CVF)、Ⅰ型CVF和Ⅲ型CVF及Ⅰ型/Ⅲ型比值。结果与对照组比较,高血压组LVH 0级心肌胶原纤维无明显改变(P>0.05);与LVH 0级比较,高血压组LVHⅠ级患者心肌CVF、Ⅰ型CVF显著增高(P<0.01),而Ⅲ型CVF、Ⅰ型/Ⅲ型比值无明显改变(P>0.05);高血压组LVHⅡ级和LVHⅢ级患者心肌各项指标均显著增高(P<0.01)。结论随着高血压LVH程度的加重,Ⅰ型CVF明显升高,提示舒张功能受损愈重。     

重组2型腺相关病毒-转化生长因子β3对实验性肝纤维化大鼠肝脏组织病理学和Ⅰ型胶原表达的影响

目的 通过重组2型腺相关病毒(rAAV2)和基因转导,探讨转化生长因子(TGF)β 3对人鼠肝纤维化的影响. 方法构建并验证rAAV2-TGF 3.实验人鼠随机分为正常对照组、模型组、阴性对照组和TGF β 3干预组.40%的四氯化碳复制大鼠肝纤维化模型.在四氯化碳诱导前l周,将rAAV2 TGF β 3 注入大鼠尾静脉,造模8周后处死人鼠,取肝脏组织做HE染色观察肝脏组织学改变,Masson染色观察胶原纤维分布,免疫组织化学染色观察Ⅰ型胶原的表达,对胶原纤维的阳性面积比和Ⅰ型胶原的平均吸光度值进行半定量分析.多组数据问比较采用单因素的方差分析,若各组总体方差齐同,采用SNK-q检验,若方差不齐,采用Durmett'S T3检验. 结果 HE染色结果显示,rAAV2-TGF β3干预后,肝组织纤维间隔增生减少;Masson染色结果显示,人鼠胶原纤维主要分布在血管和汇管区及狄氏间隙,TGF β 3干预组大鼠肝内的胶原纤维阳性面积比为7.7%±1.5%,明显低于模型组的13.2%±2.2%和阴性对照组的12.3%±1.5%(q值分别为9.456和8.217,P值均<0.01).免疫组织化学染色结果显示,Ⅰ型胶原主要表达在血管和汇管区及狄氏间隙,TGF β 3干预组大鼠肝内的Ⅰ型胶原的表达为0.185±0.033,明显低于模型对照组的0.252±0.042和阴性对照组的0.230±0.029(口值分别为6.228和4.346,P值均<0.01).结论 TGF β 3可明显减轻实验人鼠的肝纤维化程度和组织学损伤,降低Ⅰ型胶原的表达.     

莪术油注射液对大鼠损伤血管的防治作用及胶原表达的影响

目的 :研究不同剂量莪术油注射液对大鼠球囊损伤血管新生内膜形成及血管重构的作用以及Ⅰ、Ⅲ型胶原的变化。方法 :术后 1 4d,计算机图像分析球囊导管损伤大鼠左颈总动脉形态学及组织学的变化 ,苦味酸天狼猩红 偏振光显示法结合图像分析检测各组Ⅰ型及Ⅲ型胶原的变化。结果 :模型组及莪术油小剂量组Ⅰ、Ⅲ型胶原较假手术组明显增多、增粗、变亮、紊乱 ,莪术油大剂量组较模型组则明显减少、变细、变暗、排列较整齐 ,各组Ⅰ、Ⅲ型胶原的分布均以外膜为主。模型组及莪术油小剂量组较假手术组腔面积、外弹力板周长、内弹力板周长显著减少 (P <0 .0 1 ) ,Ⅰ、Ⅲ型胶原的面积显著增加 (P <0 .0 1 )。莪术油小剂量组与模型组比较 ,差异无统计学意义 (P >0 .0 5 )。莪术油大剂量组和模型组比较 ,最大内膜厚度显著减少 (P <0 .0 1 )、新生内膜面积及Ⅰ、Ⅲ型胶原面积显著减少 (P <0 .0 5 ) ,腔面积、外弹力板周长、内弹力板周长显著增加 (P <0 .0 1 ) ;与莪术油小剂量组比较 ,差异有统计学意义 ;与假手术组相比 ,差异无统计学意义 (P >0 .0 5 )。结论 :Ⅰ、Ⅲ型胶原排列的紊乱、含量的增加是再狭窄形成的重要机制。大剂量莪术油注射液可能通过影响Ⅰ、Ⅲ型胶原合成显著抑制球囊损伤大鼠颈动脉内膜增生和血管重构     

口服小剂量螺内酯抗高血压大鼠心肌纤维化

目的观察口服小剂量螺内酯对自发性高血压大鼠(SHR)血压、心肌间质和血管周围胶原沉积的干预,探讨螺内酯在高血压心肌纤维化进展期对心脏的保护作用。方法20只雄性SHR随机分为螺内酯组(10只)和安慰剂组(10只),另设Wistar-kyoto鼠7只(WKY组)。Western blot方法分析Ⅰ型胶原的表达;天狼猩红-苦味酸染色观察心肌胶原容积分数(CVF)和血管周围胶原面积(PVCA)。结果与安慰剂组比较,螺内酯组Ⅰ型胶原含量、CVF、PVCA显著降低(P<0.01),收缩压、舒张压、平均动脉血压、血K+、心脏重量指数、左心室重量指数、心率未见明显差异。结论口服小剂量螺内酯通过减少Ⅰ型胶原的沉积,起到抗高血压大鼠心肌纤维化的作用。     

克山病心肌胶质重构的形态学研究

本文以本室克山病尸检材料为基础，应用苦味酸－天狼星红染色和偏振光显微镜观察技术，结合图像分析仪测定，系统地研究了克山病心肌胶原的变化。结果显示，在新鲜瘢痕灶内，Ⅲ型胶原比例增加，陈旧性瘢痕灶内Ⅲ型胶原比例减少，Ｉ型胶原比例增加。在心肌非病变区域胶原含量明显高于对照组，出现间质纤维化。肌外膜及血管周围的胶原含量明显高于对照组。这些结果表明，在克山病心肌细胞变性坏死的同时伴随着胶原代谢的紊乱，使心肌间     

罗格列酮抗日本血吸虫病小鼠肝纤维化的实验研究

目的 研究PPARy配体罗格列酮抗日本血吸虫病肝纤维化作用。方法 应用HE染色、免疫组化法及多媒体病理图文定量分析，观察罗格列酮治疗血吸虫病肝纤维化小鼠肝脏的病理改变及Ⅰ、Ⅲ型胶原表达的变化。结果罗格列酮治疗组小鼠肝脏纤维组织的增生明显减少，Ⅰ、Ⅲ型胶原的含量明显低于对照组及吡喹酮治疗组。结论 PPARy配体罗格列酮有抗日本血吸虫病肝纤维化作用，能明显减少肝脏Ⅰ、Ⅲ型胶原的含量。     

MSCs对豚鼠光老化皮肤组织中Ⅰ型胶原表达的影响

目的观察Ⅰ型胶原在骨髓间充质干细胞(MSCs)修复光老化皮肤的表达。方法采用密度梯度离心法分离培养MSCs,利用UVB灯管照射豚鼠制备皮肤光老化模型,实验分为正常组、模型组及治疗组。HE染色观察皮肤病理变化,免疫组织化学染色检测I型胶原表达。结果模型组豚鼠表皮厚度明显增加,真皮厚度急剧减少,胶原纤维异常增生且排列紊乱,皮肤附件也出现明显的增生;治疗组皮肤结构完整且清晰,表皮及真皮层均未见明显增厚,表皮非常光滑,横纹肌与真皮之间未见异常增生的胶原纤维。模型组Ⅰ型胶原蛋白的表达显著增加,明显高于正常组与治疗组。治疗组Ⅰ型胶原蛋白的表达接近于正常组。结论 MSCs对皮肤光老化有治疗作用。     

肾血管性高血压大鼠左室Ⅰ,Ⅲ型胶原变化及卡托普利治疗的影响

目的采用两肾一夹肾血管性高血压大鼠（２Ｋ１Ｃ－ＲＨＲ）模型，探讨Ⅰ、Ⅲ型胶原在心肌纤维化形成过程及卡托普利治疗时的变化。方法建立２Ｋ１Ｃ－ＲＨＲ模型并随机分组，高血压６周组探讨模型６周时心肌胶原纤维的变化，高血压１２周探讨１２周时情况，卡托普利组治疗组６周组胶原纤维的改变。对照组为相应的假手术组。ＶａｎＧｉｅｓｏｎ染色和计算机图象分析作心肌胶原总定量测定。免疫组化作Ⅰ、Ⅲ型胶原半定量分析。结果高血压６周组和１２周组胶原总量增加，６周组以Ⅰ型胶原为主，１２周Ⅲ型胶原亦增加。治疗６周组Ⅰ型胶原减少，总胶原量亦减少，Ⅲ型胶原无显著变化。结论高血压组以Ⅰ型胶原增加为主，Ⅲ型胶原出现在后几周。卡托普利治疗６周有减少Ⅰ型胶原形成作用，但对Ⅲ型胶原作用不明显。