当归红芪超滤膜提取物对过氧化氢致PC12细胞氧化损伤的影响

目的观察当归红芪超滤膜提取物对过氧化氢(H2O2)致PC12细胞氧化损伤的影响。方法 H2O2诱导PC12细胞构建氧化应激损伤模型;不同剂量当归红芪超滤膜提取物(0.38、0.75、1.5 g/L)干预;MTT法测定细胞存活率;生化法检测细胞内MDA、LDH、SOD含量;双氯荧光黄乙酸乙酯(DCF-DA)染色,检测细胞内ROS含量。结果 200μmol/L H2O2作用6 h成功诱导PC12细胞氧化应激损伤;与空白对照组比较,H2O2模型组细胞存活率下降,细胞内LDH、MDA、ROS含量增多,SOD含量下降(P0.05);与H2O2模型组相比,当归红芪超滤膜提取物各剂量组细胞存活率明显上升,细胞内LDH、MDA、ROS含量降低,SOD含量增加(P0.05)。结论当归红芪超滤膜提取物可修复H2O2诱导的PC12细胞氧化损伤。     

挥发性有机物对永生化支气管上皮细胞的急性毒性

目的评估家装材料中典型挥发性有机物(VOCs)混合物体外条件下对永生化支气管上皮细胞(BEAS-2B)所致的急性毒性。方法选取装修材料中常见的12种挥发性有机物及其混合物作为研究对象,以液体染毒方式处理细胞,检测染毒后细胞的LC50、克隆存活、活性氧(ROS)产生和胞外乳酸脱氢酶(LDH)的变化,确定VOCs混合物的急性毒性。结果各VOCs作用于细胞后,其LC50值由0.70 g/L到22.80 g/L不等,而VOCs混合物细胞的LC50和克隆存活的LC50分别为0.82 g/L和0.30 g/L,毒性明显升高,展示出独特的化学性质和毒性特质,表明VOCs混合物的毒性效应是12种成分毒性效应的联合作用(协同、加强、超相加)的结果。同时VOCs混合物还诱导BEAS-2B细胞产生大量活性氧.OH和O2.-,使胞外LDH升高,且各效应与毒物作用剂量成正相关关系。结论VOCs混合物细胞毒性明显升高,表现为各成分的联合作用。它可诱导BEAS-2B细胞产生活性氧(ROS),引起细胞膜受损而死亡。且VOC混合物的急性毒性效应在高剂量时呈现细胞致死效应,较低剂量时呈现一种细胞转化效应。     

青石棉诱导后BEAS-2B细胞磷酸化EGFR的表达

目的:研究青石棉作用于人呼吸道上皮BEAS-2B细胞后表皮生长因子受体(EGFR)的表达。方法:青石棉刺激BEAS-2B细胞30min,用免疫荧光探针定位磷酸化EGFR;另取BEAS-2B细胞,分别以培养液(空白对照)、青石棉、EGF(阳性对照)刺激30min和120min,以Western blot法检测细胞裂解液中的总EGFR和磷酸化EG-FR的水平。结果:磷酸化EGFR主要定位于细胞膜表面。青石棉刺激BEAS-2B细胞30min和120min,磷酸化EGFR水平(7949.0±765.1,5286.7±162.4)高于空白对照组(163.0±67.8,881.7±162.0)(P<0.05),且120min时磷酸化EGFR水平较30min有所下降(P<0.05);而总EGFR水平无明显变化。结论:青石棉可激活BEAS-2B细胞膜表面受体EGFR的磷酸化。     

白藜芦醇对β淀粉样蛋白诱导星形胶质细胞氧化损伤的保护作用

目的 研究白藜芦醇对β淀粉样蛋白诱导星形胶质细胞氧化损伤的保护作用,从而探索其对中枢神经保护作用的可能机制.方法 采用不同浓度的白藜芦醇预处理星形胶质细胞12 h.继之用25 μmol/L浓度的β淀粉样蛋白进行损伤,然后检测细胞存活率、乳酸脱氢酶(LDH)以及采用DHE探针测定荧光强度间接反映胞内活性氧(ROS)含量,以评价白藜芦醇对细胞氧化损伤的保护作用.结果 受β淀粉样损伤的细胞存活率明显下降(P<0.05),而用10、100 μmol/L白藜芦醇预处理则能提高该细胞的存活率(P<0.05),但1μmol/L白藜芦醇预处理的细胞存活率并无明显变化;荧光检测显示,蛋白损伤使得荧光强度增高(P<0.05),1μmol/L白藜芦醇处理组荧光强度大于阳性对照组,其余各组荧光强度均小于阳性对照组(P<0.05);蛋白损伤可导致细胞LDH漏出量增加(P<0.05),1 μmol/L白藜芦醇使得LDH漏出增加(P<0.05),而10、100μmol/L白藜芦醇处理组,细胞LDH漏出量明显减少(P<0.05).结论 星形胶质细胞受到β淀粉样蛋白损伤后,白藜芦醇能减少LDH的漏出及有效降低胞内ROS水平,从而显示对星形胶质细胞具有保护作用.     

Exendin-4改善氧化应激减轻t-BHP诱导的HUVECs凋亡

目的 探讨Exendin-4对第三丁基过氧化氢(t-BHP)诱导人脐静脉内皮细胞(HUVECs)凋亡的影响.方法 在原代培养的HUVECs中,采用t-BHP(100 μmol/L)干预4 h,加用或不加用Exendin-4(100 nmol/L)预处理细胞24 h,分为:对照组(A组)、t-BHP处理组(B组)、Exendin-4处理组(C组)及Exendin-4+t-BHP组(D组).应用MTT比色法检测细胞存活率,DAPI染色荧光显微镜观察细胞凋亡率,活性氧(ROS)检测试剂盒检测ROS的产生.结果 与A组比较,100 μmol/L t-BHP作用4 h,B组的HUVECs存活率下降40%(P<0.001);DAPI染色荧光显微镜观察证实,t-BHP可以诱导HUVECs凋亡;加用Exendin-4预处理细胞24 h,D组的HUVECs存活率较B组增高(P<0.01).DAPI染色荧光显微镜观察细胞凋亡率提示,与B组比较,Exendin-4预处理可使D组的细胞凋亡率减少44%(P<0.05),并减少ROS的产生(P<0.05).结论 t-BHP能够诱导HUVECs凋亡,Exendin-4可减少t-BHP诱导的HUVECs凋亡.     

云南省宣威地区烟煤燃烧后的底灰对BEAS-2B细胞的体外毒性作用

目的评价宣威地区烟煤燃烧后的底灰对人正常支气管上皮细胞(BEAS-2B)的毒性作用。方法(1)应用X线荧光光谱分析法测定宣威地区烟煤燃烧后底灰中的多量元素含量,扫描电镜观察底灰中的固体物质形态;(2)应用MTT比色法检测实验组(宣威底灰处理组)、对照组(宜宾底灰处理组)和空白组的细胞成活率变化,分别测定经底灰刺激0～72 h后还原型谷胱甘肽(GSH)、细胞内活性氧化酶(ROS)和乳酸脱氢酶(LDH)含量变化。结果 (1)宣威地区烟煤燃烧后的底灰中硅(Si)、铝(Al)、铅(Pb)、砷(As)元素质量百分比高于宜宾地区(P<0.05),而硒(Se)元素质量百分比则低于宜宾地区(P<0.05)。通过扫描电镜分析,宣威烟煤燃烧后的底灰中含有大量的游离二氧化硅颗粒物,形态各异,粒径大小不一,部分为纳米级别;(2)BEAS-2B细胞成活率随煤灰暴露时间的延长而下降;BEAS-2B细胞培养基中的细胞内ROS升高,GSH下降,LDH升高,并随煤灰暴露时间延长而变化,相同时间点上实验组变化更显著(P<0.05)。结论 (1)宣威地区烟煤燃烧后的底灰中含有大量的游离二氧化硅颗粒物,形态各异,粒径部分为纳米级别;(2)宣威地区烟煤燃烧后的底灰对BEAS-2B细胞具有较强的氧化损伤作用,表现为时间-效应。     

水飞蓟宾诱导人肝癌细胞HepG2死亡及机制研究

目的：探讨水飞蓟宾对人肝癌细胞HepG2的杀伤作用及其机制。方法不同浓度水飞蓟宾处理HepG2细胞,采用MTT法检测HepG2细胞增殖情况,流式细胞术检测水飞蓟宾诱导HepG2细胞的凋亡情况。利用ROS荧光探针二氢乙啶（DHE）检测水飞蓟宾是否诱导HepG2细胞ROS的产生,并用ROS抑制剂抗坏血酸预处理后检测水飞蓟宾对HepG2的杀伤活性及诱导凋亡的能力。结果水飞蓟宾可显著抑制HepG2细胞的增殖并诱导其发生凋亡。水飞蓟宾处理后HepG2细胞的ROS显著增高（P〈0.05,P〈0.01）,用抗坏血酸预处理后水飞蓟宾对HepG2的增殖抑制作用降低,并抑制水飞蓟宾诱导的凋亡。结论水飞蓟宾通过诱导ROS的产生引起人肝癌细胞发生凋亡。     

As2O3诱导NB4细胞凋亡的周期选择性与活性氧水平相关

目的研究三氧化二砷(As2O3)诱导NB4细胞凋亡的周期选择性与细胞活性氧(reactive oxygenspecies,ROS)水平的关系.方法以碘化丙啶(PI)标记DNA,流式细胞仪检测As2O3单独或联用二甲萘醌(DMNQ)作用后细胞周期的变化,以7-氨基放线菌素D(7AAD)标记DNA,双氢罗丹明123(DHR)或双氢-乙酰乙酸二氯荧光黄(DCFH-DA)捕获ROS,流式细胞仪双参数法检测细胞周期不同阶段ROS水平.结果 2μmol/L As2O3可选择性诱导NB4 G2/M期细胞凋亡,DMNQ可增强这一效应;G2/M期细胞ROS水平明显高于G1、S期.结论As2O3诱导NB4 G2/M期细胞凋亡与G2/M期ROS水平较高相关.As2O3诱导NB4细胞凋亡的周期选择性与细胞ROS水平有关.     

人β防御素3和γ干扰素在MAPK信号通路中的相互诱导及联合抗甲型流感病毒的机制

目的 探讨人β防御素3(HBD3)和γ干扰素(IFN-γ)在丝裂源活化蛋白激酶(MAPK)信号通路中相互诱导作用及体外联合抗甲型流感病毒(IAV)H1N1的作用。方法 不同剂量IFN-γ(12.5、25.0、50.0、100.0μg/L)或HBD3(0.25、0.50、1.00、2.00 mg/L)分别作用人支气管上皮细胞BEAS-2B 4、12、24、48 h,另设立p38 MAPK、ERK和JNK通路抑制剂预处理后、用IFN-γ(25.0μg/L)或HBD3(1.00 mg/L)处理BEAS-2B细胞4 h, qRT-PCR和ELISA检测HBD3及IFN-γ基因和蛋白表达,Western blot检测p-p38 MAPK、p-ERK、p-JNK蛋白表达;25.0μg/L IFN-γ、1.00 mg/L HBD3、HBD3 siRNA转染及IFN-γ中和抗体(0.50 mg/L)单独或联合作用BEAS-2B细胞、用5×TCID₅₀ H1N1感染,qRT-PCR和Western blot检测IAV核蛋白(NP)基因和蛋白的表达情况。结果 在BEAS-2B细胞中,...     

干扰Nrf2可增强Hirsutanols A对肿瘤细胞增殖的抑制作用

目的探讨干扰Nrf2对HirsutanolsA抑制人结肠癌细胞SW480、肝癌细胞HepG2细胞增殖的影响。方法采用四甲基偶氮唑蓝比色法检测不同浓度Hirsutanols A对细胞增殖抑制作用。流式细胞仪检测细胞内ROS的含量;Annexin V-FITC/PI双染检测细胞凋亡;Western blot检测siRNA干扰NRF2蛋白表达的效果。结果 HirsutanolsA(1.25、2.5、5、10、20和40μmol/L)对SW480、HepG2细胞增殖有明显的抑制作用,并呈现剂量依赖关系;Hirsutanols A处理SW480(15μmol/L)、HepG2(30μmol/L)细胞后,诱导细胞中过氧化氢迅速增加,并引起细胞凋亡,用自由基清除剂N-乙酰半胱氨酸(5 mmol/L)预处理完全抑制HirsutanolsA诱导的ROS增加及细胞凋亡。siRNA有效地干扰Nrf2表达后可极大增强Hirsutanols A对肿瘤细胞的增殖抑制作用。结论Hirsutanols A通过增加细胞内ROS诱导其凋亡同时激活Nrf2,Nrf2在维持细胞氧化还原稳态中起重要作用,干扰其表达可增强Hirsutanols A的凋亡诱导作用。     

茶多酚抑制卷烟烟气对支气管上皮细胞氧化损伤的作用

目的观察茶多酚抑制卷烟烟气诱发支气管上皮细胞（BEAS-2B）氧化损伤的作用。方法细胞培养液中加入卷烟烟气吸收液造成损伤模型,并在培养液中加入茶多酚进行保护,通过检测细胞外过氧化氢、超氧阴离子和羟自由基的变化和乳酸脱氢酶的溢出观察细胞氧化损伤的情况。结果细胞经卷烟烟气染毒后,细胞内和细胞外自由基含量显著增高且呈剂量效应关系;且引起细胞内的乳酸脱氢酶溢出,茶多酚对卷烟烟气诱发的活性氧（ROS）增高及乳酸脱氢酶（LDH）溢出有明显的抑制作用。结论卷烟烟气能造成细胞的氧化损伤,茶多酚对其氧化损伤具有抑制作用。     

木犀草素显著减轻镉诱导的肺上皮Beas-2B细胞的损伤

目的 研究木犀草素（LUT）对镉（Cd）诱导的人肺上皮Beas-2B细胞损伤的保护作用。方法 用不同浓度的木犀草素（0~160 μmol/L）或镉（0 ~40 μmol/L）处理Beas-2B细胞24 h,用MTT法检测细胞活性。用木犀草素（0.25、0.50和0.75 μmol/L）和/或 镉（5 μmol/L）处理Beas-2B细胞24 h,用MTT法检测细胞活性;用LD-L 微板法检测细胞乳酸脱氢酶（LDH）活性;用Hoechst荧光染色法观察细胞核形态变化;用DCFH-DA法测定细胞ROS水平;用WST-8法测定细胞SOD水平;用TBA法测定细胞GSH水平;用DTNB法测定细胞MDA水平,用Western blot检测细胞Akt、p-Akt和核因子E2相关因子2（Nrf2）蛋白的表达水平。结果 木犀草素在一定浓度范围内（0~80 μmol/L）不影响Beas-2B细胞的存活率（P>0.05）,镉在5 μmol/L浓度水平时即可显著抑制Beas-2B细胞的生长（P<0.05）,半数抑制浓度为24.6 μmol/L。木犀草素干预可不同程度地减轻镉处理引起的Beas-2B细胞活力的降低（P<0.05）,减少镉处理组细胞LDH的释放量（P<0.05）,改善镉处理组细胞的凋亡情况,抑制镉处理组细胞ROS水平的升高（P<0.05）,增强镉处理组细胞SOD活性（P<0.05）和GSH含量（P<0.05）,减少镉处理组细胞MDA的产生（P<0.05）。此外,木犀草素（0.5和0.75 μmol/L）干预可上调镉处理组细胞p-Akt和Nrf2的蛋白表达水平（P<0.05）。结论 木犀草素可显著减轻镉诱导的Beas-2B细胞的损伤,其机制可能与p-Akt和Nrf2蛋白表达水平的上调有关。     

Proteasome inhibitor MG-132 regulates the expression of VEGF in human bronchial epithelial cell line, BEAS-2B

Objective： To explore the effects of MG-132 on the expression of VEGF in bronchial epithelial cell line, BEAS- 2B. Methods： Semi-quantitive RT-PCR for VEGF mRNA and enzyme-linked immunosorbent assay （ELISA） for VEGF protein were performed. Results： MG-132 increased the expression of VEGF mRNA and protein BEAS-2B cells in time-and concentration-dependent manners. After 24-h stimulation, 25 ktmol/L MG-132 increased the maximal levels of VEGF protein in cell-conditioned medium. When the ceUs were stimulated with cycloheximide（CHX） before treatment with MG-132, the MG-132-induced production of VEGF protein was inhibited compared to the unstimulated cells. Supematant of condition-medium treatment with MG-132 enhanced the growth of HUVEC. Conclusion： MG-132 induces VEGF gene expression in human bronchial epithelial cells line, BEAS-2B, and the MG-132-induced expression of VEGF may modulate lung tissue injury due to airway inflammation.     

右美托咪定对谷氨酸所致PC12细胞损伤的保护作用及其机制

目的 研究右美托咪定(Dex)对谷氨酸所致PC12细胞损伤的保护作用及机制.方法 应用高浓度谷氨酸处理PC12细胞以建立细胞缺氧损伤模型.应用MTT法测定细胞存活率,采用试剂盒分别测定细胞培养液中乳酸脱氢酶释放量,细胞丙二醛含量和超氧化物歧化酶活力,DCFH-DA染色流式细胞仪检测细胞内活性氧水平,Fluo-8染色流式细胞仪检测细胞内钙离子含量,JC-1染色流式细胞仪检测细胞线粒体膜电位.结果 在0.01～100 μmol/L浓度范围内,Dex浓度依赖性地拮抗谷氨酸所致PC12细胞损伤,至100 μmol/L时,细胞存活率达到正常组的(86.6±2.2)％,显著高于模型组(P＜0.01),乳酸脱氢酶释放量为正常组的1.4±0.1倍,显著低于模型组(P＜0.01).1μmol/L Dex预处理谷氨酸损伤的PC12细胞,与模型组相比,能够显著降低丙二醛含量(P＜0.01),提高超氧化物歧化酶活力(P＜0.01),抑制胞内活性氧过度生成(P＜0.01),降低细胞内Ca2+浓度(P＜0.01),稳定细胞线粒体膜电位(P＜0.01).结论 Dex对谷氨酸所致PC12细胞损伤具有保护作用,其机制可能与Dex抗氧化和抑制细胞内钙超载,保护线粒体功能相关.     

脂氧素A4通过p38 MAPK及Nrf2通路调控气道炎症反应

目的：研究脂氧素A4（LXA4）对脂多糖（LPS）诱导的人正常支气管上皮细胞炎症反应的抑制作用及其机制。方法：将对数生长期的BEAS-2B细胞分为3组。对照组：不做任何处理;LPS组：100 ng/mL LPS刺激24 h;LPS+LXA4组：100 nmol/L LXA4预处理30 min,加入100 ng/mL LPS刺激24 h。qPCR法检测IL-6、IL-1β、血红素加氧酶-1（HO-1）、醌氧化还原酶（NQO-1）mRNA表达水平;流式细胞术测定胞内活性氧（ROS）水平;谷胱甘肽（GSH）试剂盒检测GSH水平。为进一步了解LXA4的作用机制,Western blot法检测各处理组p38的磷酸化水平以及Nrf2的核转位及磷酸化水平。结果：与对照组相比,LPS组IL-6、IL-1β mRNA以及胞内ROS表达水平升高（P＜0.05）,HO-1 mRNA水平下降（P＜0.01）,p38磷酸化水平上升（P＜0.01）,胞核中Nrf2相对表达量下降（P＜0.01）,总Nrf2磷酸化水平下降（P＜0.05）。经LXA4干预后,与LPS组相比,除上述改变逆转外（P＜0.05）,NQO-1和GSH水平显著上升（P＜0.05）。结论：LXA4可减轻LPS引起的BEAS-2B细胞炎症反应并促进炎症消退,其机制可能一方面与抑制p38 MAPK通路,减少促炎因子的分泌有关;另一方面与增强Nrf2的核转位以及磷酸化,减轻氧化应激损伤有关。     

胰高血糖素样肽-1可改善高糖环境下人脐静脉内皮细胞的氧化应激

目的：探讨胰高血糖素样肽-1（GLP-1）对高糖培养的原代人脐静脉内皮细胞（HUVECs）氧化应激情况的影响。方法体外分离、培养原代人 HUVECs ,分为对照组、高糖组（30 mmol/L ）及 GLP-1预处理组（GLP-1100 nmol/L预处理1 h后30 mmol/L高糖培养）。检测细胞上清乳酸脱氢酶（LDH）漏出量,进行细胞毒性作用定量分析;化学发光法检测细胞内活性氧族（ROS ）水平、黄嘌呤氧化酶法检测超氧化物歧化酶（SOD ）活力了解细胞内氧化应激状态。结果（1）GLP-1可以改善高糖环境对人脐静脉内皮细胞的毒性作用,高糖组LDH漏出量为对照组的1．8倍,GLP-1预处理组的LDH漏出量为对照组的1．3倍（P＜0．05）。（2）高糖组细胞内ROS荧光强度较对照组增强1倍以上,而GLP-1预处理组ROS荧光强度可抑制至对照组水平（P＜0．05）;与对照组比较,高糖组细胞内SOD酶活性无明显改变;但与高糖组比较,GLP-1预处理组SOD酶活性升高了64．64％（P＜0．05）。结论 GLP-1可以改善高糖对 HUVECs的细胞毒性作用,其机制可能是通过减轻细胞氧化应激来实现的。     

甲基环戊二烯羰基锰对PC-3M细胞损伤作用

目的：确定甲基环戊二烯羰基锰（MMT）对人前列腺细胞系PC-3M的损伤作用。方法：利用MTS法确定MMT对PC-3M细胞诱导的时间和浓度曲线;分光光度法检测MMT诱导的细胞活性氧（ROS）、乳酸脱氢酶（LDH）、过氧化物歧化酶（SOD）和丙二醛（MDA）的变化。结果：MMT可明显降低PC-3M细胞的存活率并与诱导时间及浓度呈正相关,其中2mmol/L MMT诱导细胞24h后,细胞存活率降为48.55%（P＜0.01）;在诱导过程中,细胞ROS及LDH释放量明显上升（P＜0.01）,SOD活性被抑制（P＜0.01）,MDA生成量增加（P＜0.01）。结论：MMT可对PC-3M细胞造成氧化损伤,使细胞存活率下降。     

白藜芦醇对过氧化氢诱导人动脉平滑肌细胞的影响及其机制

目的：探讨白藜芦醇（Res）对过氧化氢（H2O2）诱导的人动脉平滑肌细胞的影响及其可能机制。方法：在人动脉平滑肌细胞中加入不同浓度（20、100、500umol／L）H2O2处理24h,建立动脉平滑肌细胞氧化损伤模型。不同终浓度（2、10、50umol／L）的Res单纯作用或分别与100umol／LH202共同作用于动脉平滑肌细胞24h。应用MTT比色法检测细胞存活率,黄嘌呤氧化酶法检测超氧化物歧化酶（SODl的活力,硫代巴比妥酸比色法检测丙二醛（MDA）含量,2,7-二氯荧光黄双乙酸盐（DCFH—DA）染色荧光显微镜照相检测细胞内的活性氧簇（ROS）水平,流式细胞术检测细胞凋亡百分率。结果：20、100、500umol／LH2O2处理人动脉平滑肌细胞24h后,动脉平滑肌细胞存活率和培养基上清液SOD活力均呈剂量依赖性地下降,细胞蛋白裂解液MDA含量活性则呈剂量依赖性地升高（P〈0．05）。2、10和50txmol／LRes与100umol／LH2O2共同作用动脉平滑肌细胞24h后,可呈剂量依赖性地抑制H2O2诱导的细胞存活率、SOD活力的下降以及MDA含量的升高,其中10和50umol／LRes＋100umol／LH202处理组与100umol／LH2O2模型组比较,差异均有统计学意义（均P〈0．05）。10和50umol／LRes＋100Ixmol／LH202处理组DCF荧光强度均显著低于100txmol／LH2O2模型组（P均〈0．05）。10和50btmol／LRes＋100umol／LH2O2处理组人动脉平滑肌细胞的凋亡率分别为（20．7±3．0）％和（13．2±1．5）％,均显著低于100umol／LH2O2模型组的（27．2±3．6）％（均P〈0．05）。结论：Res可对抗H2O2诱导的动脉平滑肌细胞氧化损伤,其机制可能与其减少ROS生成以及降低动脉平滑肌细胞凋亡率有关。     

亚甲基蓝类似物抗谷氨酸诱导HT22细胞氧化损伤及其机制

目的：探讨亚甲基蓝（MB）类似物[2-氯吩噻嗪（2-C）、天青A（A-A）、天青B（A-B）、中性红（NR）]抗谷氨酸（Glu）诱导HT22细胞氧化损伤及其作用机制。方法：采用MTT法检测MB、2-C、A-A、A-B、NR在HT22细胞中的毒性；采用MTT法、LDH法检测各个化合物对Glu诱导HT22 细胞氧化损伤模型的保护作用；采用 H2DCF-DA染色剂检测各组细胞中ROS水平；采用siRNA干扰技术，抑制HT22细胞内MEF2D表达；采用Western blot法检测各个化合物对HT22细胞中肌细胞增强因子2D（MEF2D）、NADH脱氢酶6（ND6）、Akt、GSK-3β蛋白变化情况。结果：根据MTT实验结果计算各个化合物LD50：MB（50.66 μmol/L）、2-C（175.90 μmol/L）、A-A（152.40 μmol/L）、A-B（140.40 μmol/L）、NR（73.19 μmol/L）。除NR外，其余化合物均对Glu诱导的HT22 细胞氧化损伤具有显著的细胞保护作用，随后计算各个化合物EC50值得出：MB（42.13 nmol/L）、2-C（34.32 nmol/L）、A-A（48.96 nmol/L）、A-B（44.42 nmol/L）；ROS染色结果显示：100 nmol/L的MB、2-C、A-B和A-A能显著降低Glu诱导的HT22细胞中ROS水平，而NR对Glu诱导的HT22细胞中ROS水平上升无明显作用；Western blot检测结果证明MB、A-B和A-A明显提高HT22细胞内MEF2D的蛋白水平（P ＜0.05）；采用siRNA干扰技术抑制HT22细胞内MEF2D表达后，MTT结果显示抑制MEF2D表达能部分取消化合物MB、2-C、A-B和A-A对 Glu诱导HT22细胞损伤的保护作用（P ＜0.05）；MB、2-C、A-B和A-A能够激活Akt，增加GSK-3β磷酸化（P ＜0.05），使GSK-3β失活，这可能与其激活MEF2D进而提高ND6活性有关。结论：2-C与MB相比具有更低的细胞毒性，且其抗Glu诱导细胞损伤作用效价强于MB；具有吩噻嗪结构的化合物：MB、2-C、A-B和A-A可能通过调节Akt/GSK-3β通路，提高MEF2D/ND6活性，改善线粒体呼吸链功能，进而产生抗Glu诱导的神经细胞氧化损伤作用。