叶酸分子靶向载顺铂磁性纳米药物制备及表征***

背景：醛基化海藻酸钠具有良好的水溶性和组织相容性,利用其改性Fe3O4磁性纳米颗粒可增加表面活性和稳定性,叶酸的修饰可赋予载体分子靶向性。 目的：制备具有叶酸受体靶向及磁靶向的载顺铂磁性纳米药物(CDDP-FA-ASA-MNPs)。 方法：采用高碘酸钠氧化法制备醛基化海藻酸钠,叶酸的羧基经二环己基碳二亚胺和N-羟基琥珀酰亚胺活化后合成FA与双端氨基聚乙二醇的耦连产物FA-PEG,化学共沉淀法制备Fe3O4,海藻酸钠侧链含有大量羧基,85 ℃下与Fe3O4纳米颗粒表面的羟基形成化学键结合,然后通过雪夫氏碱将FA-PEG与醛基化海藻酸钠相连接,最后根据配位络合的原理,顺铂分子中的-Cl被海藻酸钠的羧基取代,形成稳定的叶酸和醛基化海藻酸钠改性载顺铂磁性纳米复合物。 结果与结论：所制备的磁性纳米药物呈颗粒状,稳定分散于水溶液中,Fe3O4磁核平均粒径为(8.116±0.24) nm,流体力学直径为(110.9±1.7) nm,zeta电位为(-26.45±1.26) mV,最大饱和磁化强度为56.2 emu/g,顺铂包封率为(49.05±1.58)%,载药量为(14.31±0.49)%。体外实验证实,叶酸分子靶向载顺铂磁性纳米药物能被叶酸受体表达阳性的鼻咽癌细胞HNE-1和喉癌细胞Hep-2选择性摄取,而叶酸受体表达阴性的鼻咽癌细胞CNE-2则不摄取。提示所制备的CDDP-FA-ASA-MNPs具有良好的水溶性和稳定性,能被叶酸受体表达阳性的鼻咽癌和喉癌细胞摄取。     

米托蒽醌联合顺铂对脑胶质瘤U87细胞株的影响

目的 体外观察米托蒽醌(mitoxantrone,NVT)联合顺铂(cisplatin,CDDP)对脑胶质瘤U87细胞株的增殖抑制作用及可能的协同机制.方法 MTT法检测浓度分别为10、5、2.5、1.25、0.625、0.3125μg/mL NVT、CDDP以及两药物联合对U87细胞的增殖抑制作用.RT-PCR法检测CDDP、NVT及两药联合对U87细胞上Bcl-2和Bax基因表达的影响.结果 MTT法检测结果显示,NVT浓度为0.3125μg/mL联合相同浓度CDDP时,两药联合能明显增强其对U87细胞的增殖抑制作用(67.7%±1.5%);RT-PCR法检测显示,CDDP组Bax基因的表达明显高于正常对照组,但对Bcl-2基因无此作用;低浓度的NVT和两药联合Bcl-2基因的表达明显低于正常对照组及顺铂组.结论 胶质瘤U87细胞在化疗药物NVT和CDDP两药物联合作用下可通过诱导Bcl-2/Bax基因表达量的改变,协同发挥其促凋亡作用,从而增强肿瘤细胞对化疗药物的敏感性.     

顺铂在TRAIL/APO-2L致胶质瘤细胞凋亡作用中影响机制的研究

目的探讨TRAIL对胶质瘤细胞凋亡的影响,并进一步研究DNA破坏药物顺铂(CDDP)在与其联合作用诱导细胞凋亡中影响作用的机制。方法行人脑胶质瘤U251细胞株的培养,应用不同浓度TRAIL和CDDP作用于胶质瘤U251细胞,MTT法检测TRAIL和CDDP分别及联合作用于U251细胞后的存活率,并以亚毒剂量的TRAIL和CDDP联合作用后,流式细胞仪检测其凋亡率。Westernblot方法检测CDDP作用前后TRAIL受体DR5表达量的变化。结果MTT结果:在一定时间范围内,随着药物浓度增加,TRAIL和CDDP分别及联合作用皆使胶质瘤U251细胞存活率逐渐降低,其中两者的联合作用效果明显,与分别作用组差异有统计学意义(P<0.01)。亚毒剂量的TRAIL(50ng·ml-1)、CDDP(4μg·ml-1)分别及联合作用人脑胶质瘤U251细胞24h后,存活率分别为:72.43%,75.56%,23.45%。亚毒剂量的TRAIL(50ng·ml-1)、CDDP(4μg·ml-1)单独或联合作用组致胶质瘤细胞凋亡率分别为25.61%、20.59%、62.33%。单独应用组与联合组之间差异有统计学意义(P<0.01)。Westernblot法检测显示:CDDP作用后较作用前DR5表达有明显增高,随CDDP剂量增多,DR5表达量逐渐增加。结论TRAIL和CDDP联合作用能显著增强其对人U251胶质瘤细胞凋亡的诱导,其机制可能与CDDP能上调TRAIL死亡受体DR5的表达有关。     

肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体联合化疗药物对胶质母细胞瘤细胞的杀伤作用

目的研究肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(tumor necrosis factor related apoptosis-inducing ligand,TRAIL)及联合化疗药物对胶质母细胞瘤细胞的杀伤作用。方法培养GC427、GC125细胞,应用TRAIL及化疗药物顺铂及放线菌素D分别及联合作用于细胞后,ELISA方法检测细胞凋亡水平。结果 GC427、GC125细胞经TRAIL、顺铂、放线菌素D作用后,GC427对TRAIL抵抗,GC125对TRAIL稍敏感。顺铂与放线菌素D单独作用细胞,均可诱导两株细胞发生部分凋亡;TRAIL与顺铂或放线菌素D联合作用细胞,则可诱导细胞发生明显的凋亡反应,结果有统计学差异(P<0.05)。结论胶质母细胞瘤细胞经TRAIL与化疗药物联合作用后可发生协同效应。     

核酶诱导神经母细胞瘤凋亡的实验研究

目的 研究抗Bcl-2mRNA的锤头型核酶（RibozymeRZ)基因诱导神经母细胞瘤（SK－N－SH）凋亡以及增强化疗药物顺铂的敏感性,方法（1）应用电穿孔法,分别将整合有抗Bcl02mRNA核酶的缺陷性逆转录病毒载体pDOR-RZ和空载体pDOR-neo导入SK－N－SH细胞,（2）用免疫组化和间接免疫荧光染色法观察Bcl-2蛋白表达。（3）用流式细胞仪（FCM）检测细胞调率及细胞周期的变化。（4）电镜观察转染细胞形态变化。结果 （1）转染RZ组Bcl-2蛋白合成受到抑制,（2）细胞周期显示,转染RZ组可见凋亡峰,发生Go/G1期阻滞,电镜观察呈典型的凋亡形态改变。（3）顺铂增敏试验表明顺铂对转RZ组杀伤作用增强。结论 逆转录病毒介导的抗Bcl-2核酶基因可抑制肿瘤细胞内Bcl-2蛋白的合成,促进瘤细胞凋亡,并可增强其对化疗药物顺铂的敏感性。     

石墨碳纳米颗粒对体外培养细胞生长特性的影响

背景：有报道指出石墨碳纳米颗粒具有强大的吸附能力,只要尽可能将其控制在有效浓度范围内,石墨碳纳米颗粒会具有很好的细胞相容性及增敏效应。 目的：了解石墨碳纳米颗粒的形态特征,观察石墨碳纳米颗粒其对体外培养细胞增殖与超微结构的影响。 方法：取石墨碳纳米颗粒0.5 g,加100 mL三蒸水,振荡后微孔过滤,即为石墨碳纳米颗粒母液。取处于对数生长期的HepG2细胞、L02细胞、Hl7702细胞、3T3细胞,调整密度为5×107 L-1接种于6孔板,0.5 mL/孔,加入含胎牛血清、青霉素、链霉素的RPMI-1640培养基1.5 mL,培养24 h后弃去旧液,设1~5号孔为实验组,分别加入质量浓度为25,10,7.5,5,0.25 mg/L石墨碳纳米颗粒培养液2.0 mL,设6号孔为空白对照组,不加石墨碳纳米颗粒溶液,继续培养24 h后终止培养。用原子力显微镜测量石墨碳纳米颗粒的粒径,电子显微镜观察石墨碳纳米颗粒的形态特征;用细胞计数板在光学显微镜下计数不同浓度石墨碳纳米颗粒对细胞数量的影响;透射电镜观察7.5 mg/L石墨碳纳米颗粒对细胞超微结构的影响。 结果与结论：石墨碳纳米颗粒呈球形微粒,粒径约20 nm。与空白对照组比较,各浓度石墨碳纳米颗粒培养液组除HepG2细胞外,其余3种细胞数量基本都有所增加,其中7.5 mg/L石墨碳纳米颗粒培养液对L02细胞、Hl7702细胞、3T3细胞、HepG2细胞数量的影响最为显著(P < 0.05)。对7.5 mg/L石墨碳纳米颗粒作用后的细胞进行透射电镜观察,可见石墨碳纳米颗粒分布于细胞内部,如细胞质、细胞核、线粒体中,未见亚细胞结构受损及细胞凋亡坏死现象发生。证实石墨碳纳米颗粒对体外培养的细胞无损伤不良反应,且能够促进细胞生长增殖,其作用强度与质量浓度有关,7.5 mg/L为较佳质量浓度。 关键词：纳米石墨碳;人肝细胞株;人肝癌细胞株;超微结构;细胞生长 doi:10.3969/j.issn.1673-8225.2010.03.015     

阿霉素-透明质酸纳米颗粒对口腔鳞状细胞癌细胞的作用*★

背景：透明质酸具有与受体特异结合的特性，将其与阿霉素联合制成纳米粒，可以充分发挥药物靶向作用，降低药物的毒副作用。 目的：探讨阿霉素-透明质酸纳米颗粒于体外靶向杀伤口腔鳞状细胞癌的作用。 设计、时间及地点：体外对比观察实验，于2008-01/07在中国海洋大学药理学实验室完成。 材料：人舌癌T8113细胞株由上海第九人民医院陈万涛教授惠赠，阿霉素-透明质酸纳米粒由中国海洋大学海洋生命学院惠赠。 方法：在体外培养的口腔鳞状细胞癌细胞中分别加入阿霉素质量浓度为0. 5，1.0，5.0，10.0 mg/L的阿霉素-透明质酸纳米颗粒，利用体外细胞毒实验四甲基偶氮唑蓝法检测阿霉素-透明质酸纳米颗粒对肿瘤细胞的靶向杀伤作用；阿霉素质量浓度为5.0，10.0 mg/L时分别作用0，6，12，24，48 h后，利用流式细胞仪检测其对肿瘤细胞凋亡的作影响。 主要观察指标：①细胞生存率。②细胞凋亡率。 结果：24，48 h 细胞毒试验阿霉素-透明质酸纳米颗粒对肿瘤细胞的杀伤作用优于游离阿霉素(t=5.78~42.05, P < 0.01) 。相同浓度阿霉素-透明质酸纳米颗粒细胞凋亡百分率随时间增加而升高(F=4 200.40，4 775.36, P < 0.01)，相同作用时间凋亡率随浓度增加而升高(t=12.06~20.08，P < 0.05)。 结论：阿霉素-透明质酸纳米颗粒可特异性识别肿瘤细胞，并实现其杀伤作用，并随时间延长增加杀伤作用。     

石墨碳纳米颗粒对体外培养细胞生长曲线及周期的影响*

背景：有报道指出石墨碳纳米颗粒具有强大的吸附能力,只要尽可能将其控制在有效浓度范围内,石墨碳纳米颗粒会具有很好的细胞相容性、增敏效应。 目的：观察石墨碳纳米颗粒对体外培养细胞的生长增殖、细胞周期及凋亡的影响。 设计、时间及地点：细胞-材料学体外实验,于2007-01/2008-12在国家卫生部纳米生物技术重点实验室完成。 材料：石墨碳纳米颗粒由中南大学湘雅医院卫生部肝胆肠外科研究中心自制。人肝细胞(L02)、人肝细胞(Hl7702)、小鼠细胞(3T3)、人肝癌细胞(HepG2)购自湘雅医院中心实验室公司。 方法：取石墨碳纳米颗粒母液,稀释10倍后,采用激光粒度分析仪观察石墨碳纳米颗粒的大小及Zeta电位。取含胎牛血清的RPMI-1640培养基,设立11瓶,分别加入适量石墨碳纳米颗粒母液,使其含石墨碳纳米颗粒的浓度分别为100,75,50,25,20,15,12.5,10,7.5,5,0 mg/L。将L02细胞、Hl7702细胞、3T3细胞、HepG2细胞密度均调整为1× 109 L-1,接种后置37 ℃、体积分数为5%的CO2饱和湿度培养箱中,取处于指数生长期的细胞用于各项指标测定。 主要观察指标：MTT比色法测定细胞数量,流式细胞仪检测细胞周期,计算细胞凋亡率。 结果：石墨碳纳米颗粒的粒径约20 nm,带有负电荷,其电位值为-14.8 mV。与未加石墨碳纳米颗粒的空白对照组比较,除人肝癌细胞(HepG2)外,不同浓度的石墨碳纳米颗粒对其余3株细胞增殖均有促进作用,且浓度为7.5 mg/L时促细胞增殖作用最强。在石墨碳纳米颗粒浓度为7.5 mg/L条件下,4株细胞的凋亡率均明显低于空白对照组。石墨碳纳米颗粒作用24 h的L02肝细胞周期发生改变,G0期细胞数减少,更多的细胞进入到S期和G2期。 结论：石墨碳纳米颗粒能进入体外培养细胞内,并对细胞生长、增殖产生促进作用,不诱导细胞凋亡,其作用强度与浓度有关。     

光动力联合顺铂治疗大鼠脑胶质瘤的生存期观察

目的 探讨光动力（PDT）联合顺铂治疗大鼠脑恶性胶质瘤的杀伤效应、机制及对大鼠生存期影响.方法 健康Wistar雄性大鼠30只,体重280～300g,建立C6胶质瘤模型,2周后随机分为3组,对照组、顺铂治疗组、PDT联合顺铂治疗组,分别进行生存观察和生存分析.结果 大鼠平均生存时间：对照组（38.2±3.5）d,顺铂组（39.6±4.0）d,PDT联合顺铂组（41.9±4.0）d.联合顺铂组与对照组及顺铂组比较,生存分析曲线差异有显著性（P〈0.05）.结论 光动力（PDT）联合顺铂治疗对大鼠脑胶质瘤有明显的杀伤和抑制作用,光动力开放血脑屏障、血瘤屏障后为化疗药物有效作用于肿瘤组织提供新途径,延长大鼠生存期.     

可逆性血脑屏障开放对脑瘤化疗的临床意义

本文将20例恶性脑瘤患者分为两组。Ⅰ组:用20％甘露醇行可逆性血脑屏障(BBB)开放,继之经颈动脉灌注顺铂(CDDP);Ⅱ组:仅灌注同剂量CDDP。分别测定肿瘤及正常脑组织内 CDDP浓度。结果表明:用 20％甘露醇行可逆性BBB开放能显著增加肿瘤内药浓度,而正常脑组织内药浓度变化不明显。此技术对提高脑瘤化疗效果具有重要的临床价值。     

硫化氢抑制顺铂致人骨髓间充质干细胞的损伤

背景：在使用顺铂进行化疗时,常因造血干细胞损伤造成严重的骨髓抑制,而目前临床上还没有一种有效的化疗细胞保护剂来减轻其不良反应。 目的：探讨硫化氢对顺铂致人骨髓间充质干细胞损伤的保护作用。 方法：应用硫氢化钠作为硫化氢的供体,用不同浓度的硫氢化钠与顺铂同时作用于人骨髓间充质干细胞48 h后,甲氮甲唑蓝法(MTT)检测细胞存活率,Hoechst33258染色检测细胞凋亡,Western blot检测蛋白的表达。 结果与结论：MTT检测发现顺铂可降低骨髓间充质干细胞的存活率,硫氢化钠可呈浓度依赖性的对抗顺铂对人骨髓间充质干细胞生长的抑制作用,0.5,1 mmol/L 硫氢化钠与20 mg/L顺铂共同作用人骨髓间充质干细胞48 h后会引起NF-κB(p65)上调和IκB-α的下调,1 mmol/L 硫氢化钠与20 mg/L顺铂在作用6 h后磷酸化蛋白激酶1/2明显上调。结果提示,硫化氢可能通过蛋白激酶-NF-κB信号通路来抑制顺铂致人骨髓间充质干细胞的损伤作用。     

3种牙科金属材料对小鼠成纤维细胞凋亡的影响

背景：有关磁性附着体外包裹不锈钢材料引起的细胞凋亡,经检索CNKI数据库未见报道。 目的：观察磁性附着体的3种外包裹牙科金属材料钴铬合金、钛合金及奥氏体不锈钢对L-929细胞凋亡的影响。 设计、时间及地点：对比观察,实验于2007-06/12在中国医科大学中心实验室完成。 材料：选用对数生长期的小鼠成纤维细胞L-929,由中国医科大学附属第一医院肿瘤研究所提供。钴铬合金由贺立氏古莎齿科有限公司提供;钛合金由日本森田公司提供;奥氏体不锈钢由中国科学院金属研究所提供。 方法：将钛合金、奥氏体不锈钢和钴铬合金3种金属材料制成圆片形,放置于24孔板中,按浸提液体积与试件表面积比值为0.1 mL/cm2放入RPMI-1640培养液,即得到材料浸提液。实验分为5组：钛合金组、奥氏体不锈钢组和钴铬合金组分别将L-929细胞接种于含不同质量浓度(250,500 g/L,1 kg/L)钛金属、奥氏体不锈钢和钴铬金属的浸提液中;阴性对照组：RPMI 1640培养的L-929细胞;阳性对照组：100 mg/L丝列霉素处理的L-929细胞。 主要观察指标：流式细胞仪检测各组不同质量浓度浸提液干预24 h对L-929细胞凋亡的影响。 结果：除250 g/L质量浓度钛合金与阴性对照组之间细胞凋亡率无显著差异(P > 0.05)外,其他各组材料同一质量浓度或同一材料不同质量浓度之间细胞凋亡率相比,差异均有显著性意义(P < 0.01)。 结论：3种金属材料对细胞凋亡率均有显著影响,凋亡率大小依次为：钛合金组<奥氏体不锈钢组<钴铬合金组     

体外联合应用CD80和CD28/CpG ODN共刺激活化人外周血单个核细胞★

背景：启动维持并调节活化级联反应，决定了T细胞是活化增殖或转变为无反应状态甚至凋亡。B7分子与CD28的结合能有效协同T细胞受体途径活化T细胞，增强T细胞的增殖活性。 目的：初步分析CD80和CD28/含CpG的寡脱氧核苷酸(CpG containing oligodeoxynucleotides，CpG ODN)共刺激活化的人外周血单个核细胞对胃癌细胞株MKN45的杀伤作用。 方法：Ficoll密度梯度离心法分离人外周血单个核细胞，加入白细胞介素2及CD28，CpG ODN共刺激活化培养1~5 d。取MKN45细胞，设立4组：CD28/CpG ODN共刺激组、CD80联合CD28/CpG ODN共刺激组、单纯CD80组、空白对照组。以MTT法检测细胞杀伤率，电镜观察凋亡的MKN45细胞超微结构，流式细胞仪检测MKN45细胞凋亡率。 结果与结论：单纯CD80组对MKN45细胞无明显杀伤作用；与CD28/CpG ODN共刺激组比较，CD80联合CD28/CpG ODN共刺激组对MKN45细胞的杀伤作用显著增强(P < 0.05)，效应细胞与靶细胞之比达15︰1时即可达到半数杀伤率。电镜下效应细胞作用24 h，MKN45细胞就部分发生坏死，部分细胞可见凋亡。与空白对照组比较，单纯CD80组MKN45细胞凋亡率显著升高(P < 0.01)。提示CD80与共刺激活化的外周血单个核细胞合用，可提高活化的外周血单个核细胞对MKN45细胞的靶向性杀伤作用。     

FLIP蛋白抑制顺铂诱导大鼠C6胶质瘤细胞凋亡

目的探讨自杀相关因子（Fas）相关死亡结构域样白介素1（IL-1）β转化酶抑制蛋白（FLIP）对于顺铂（CDDP）诱导大鼠脑胶质瘤细胞（C6细胞株）凋亡的抑制作用,为进一步研究胶质瘤的耐药性奠定分子生物学基础。方法利用由Ad—Max腺病毒包装系统成功构建的携载大鼠FLIP基因的腺病毒表达载体Ad—FLIP感染大鼠C6胶质瘤细胞,24h后经逆转录酶一多聚酶链反应（RT—PCR）及Westernblot检测感染组及对照组细胞中FLIP基因的mRNA及蛋白表达水平;分别给予Ad—FLIP感染组及对照组细胞不同浓度的CDDP（0,1,2,4,8mg／ml）,药物处理48h后,经流式细胞仪（FCM）分析细胞凋亡状况;四唑蓝显色法（MTF）测定并比较两组细胞活力。结果Ad—FLIP感染组细胞与对照组细胞相比,FLIPmRNA和蛋白表达水平明显增高;流式细胞仪检测结果显示Ad—FLIP感染组细胞凋亡率明显低于对照组。MTT法结果提示经CDDP处理后,Ad—FLIP感染组与对照组细胞活力均有下降,但FLIP蛋白具有明显的抑制作用。结论FLIP蛋白在大鼠c6胶质瘤细胞中具有抵抗化疗药物的作用。     

负载胶质瘤抗原的树突状细胞激发T细胞功能的实验研究

目的 对胶质瘤可溶性抗原和凋亡细胞抗原两种不同的抗原制备的DC疫苗活性进行研究,比较两种疫苗激发CTL功能的效能差异.方法 对手术切除的人脑胶质瘤细胞进行原代培养,冻融法制备可溶性抗原,紫外线照射制备凋亡细胞抗原,并取该患者的外周血进行细胞培养诱导DC,与可溶性抗原、凋亡细胞抗原、自体肿瘤细胞致敏DC后,用三种疫苗及正常DC诱导的CTL在体外对培养的胶质瘤细胞进行体外杀伤实验,对培养结果 进行统计学处理.结果 可溶性抗原制备的DC疫苗活性最强,其诱导的CTL的杀伤率达到88%,其次是凋亡细胞组的DC疫苗,其诱导的CTL的杀伤率达到72%,2组差异无统计学意义(P＞0.05).与自体肿瘤细胞共同培养的DC组杀伤率为31%,正常DC组(即RPMI-1640 DC组)杀伤率为21%,2组之间同样无明显差异(P＞0.05),两实验组分别与两对照组对比,杀伤率则有显著差异(P＜0.01或P＜0.05).结论 DC在负载抗原后诱导CTL杀伤活性显著提高,而DC与肿瘤细胞一起培养对CTL杀伤活性无明显影响.     

5000/磁性纳米颗粒-Pluronic携带神经节苷脂-1对急性完全横断性脊髓损伤修复的影响(英文发表)

背景：温度敏感性磁性纳米颗粒即磁性纳米颗粒-Pluronic具有温度响应药物控制释放能力,并能穿透血脑屏障。 目的:实验检测其携带神经节苷脂(GM-1)能力及在活体组织中药物释放能力,以及对脊髓损伤修复再生的影响。 设计、时间及地点：随机对照动物实验,于2006-09/2007-02在首都医科大学北京神经科学研究所和中国科学院过程工程研究所完成。 材料：神经节苷脂由阿根廷Trb Pharma药厂生产。磁性纳米颗粒-Pluronic的制备及其负载神经节苷脂由中国科学院过程工程研究所制备。 方法:将20只SD大鼠制作急性完全横断脊髓损伤模型,随机分为4组:①治疗组:于脊髓断端间注射磁性纳米颗粒-Pluronic-GM-1 100 μL+纤维蛋白胶100 μL。②对照组1:于脊髓断端间注射磁性纳米颗粒-Pluronic 100 μL+纤维蛋白胶100 μL。③对照组2:于脊髓断端间注射纤维蛋白胶100 μL。④空白组:单纯横断不予以任何治疗。 主要观察指标：4周后,应用免疫组织化学方法结合图像分析方法,对脊髓横断处远端、近端进行神经纤维计数及胶质细胞网格框架结构定量分析,以了解神经再生情况。 结果:20只大鼠均进入结果分析。①脊髓横断区神经纤维数量:治疗组近端、远端均高于其他3组(P < 0.05),2个对照组高于空白组(P < 0.05),对照组2高于对照组1(P < 0.05)。②脊髓横断区胶质纤维面积比:治疗组近端、远端均高于其他3组(P < 0.05),2个对照组近端明显高于空白组(P < 0.05),对照组2远端高于空白组(P < 0.05)。 结论:磁性纳米颗粒-Pluronic具有药物携带及释放作用,其携带神经节苷脂对脊髓损伤具有一定程度的修复及促进神经再生的作用。     

血清体积分数对人细胞因子诱导杀伤细胞增殖的影响

背景：细胞因子诱导的杀伤细胞的培养多采用体积分数10%的血清,但关于血清体积分数对其生长特性的影响少有报道。 目的：观察细胞因子诱导的杀伤细胞在不同血清体积分数培养液中的增殖情况。 方法：分别配制血清体积分数为10%,20%和30% +重组人白细胞介素2等细胞因子的完全培养液培养人细胞因子诱导的杀伤细胞,使用流式细胞仪分析血清体积分数对细胞周期的影响,通过MTT法检测细胞因子诱导的杀伤细胞在不同血清体积分数培养液中的增殖,并观察细胞因子诱导的杀伤细胞的生长状态。 结果与结论：细胞因子诱导的杀伤细胞在体积分数10%血清培养液中增殖速率和增殖指数均最低,在体积分数30%血清培养液中最高,3组细胞的不同时间点的增殖速率差异均有显著性意义(P < 0.05或P < 0.01)。结果证实,体外培养的细胞因子诱导的杀伤细胞的增殖具有血清体积分数依赖性,高血清体积分数培养液的促细胞因子诱导的杀伤细胞增殖效应明显。     

纳米纤维介导的紫杉醇/阿霉素序贯联合治疗SHg-44胶质瘤

摘要 背景：纳米纤维技术可同时担载多种药物，避开血脑屏障限制实现脑胶质瘤的序贯联合化疗。 目的：用乳液电纺法制备同时担载紫杉醇和阿霉素的聚乙二醇-聚乳酸共聚物纳米纤维并实现两种药物的序贯释放，探讨纳米纤维介导的紫杉醇和阿霉素序贯联合治疗SHg-44胶质瘤的效果及机制。 方法:实验分为4组，1640培养液对照组，1%阿霉素组，1%紫杉醇组，5%(阿霉素+紫杉醇)组。采用高效液相色谱法测定紫杉醇和阿霉素的体外释放情况。四甲基偶氮唑盐法检测纳米纤维介导的紫杉醇和阿霉素序贯治疗对SHg-44胶质瘤细胞的增殖抑制率；流式细胞仪检测法检测紫杉醇和阿霉素序贯治疗对SHg-44胶质瘤细胞的凋亡诱导作用。 结果与结论：纳米纤维介导的紫杉醇和阿霉素序贯治疗对SHg-44胶质瘤细胞具有明显的生长抑制及促凋亡作用,且作用效果好于单独药物应用。提示聚乙二醇-聚乳酸纳米纤维作为一种药物载体能提高紫杉醇和阿霉素对SHg-44胶质瘤细胞增殖抑制和诱导凋亡作用。 关键词：胶质瘤；紫杉醇；阿霉素；序贯化疗；细胞凋亡 doi:10.3969/j.issn.1673-8225.2011.12.022     

肿瘤化疗药物诱导性周围神经病的临床横断面研究

目的:分析抗肿瘤药物导致的周围神经病(CIPN)临床特征及其发病时的药物累积剂量。方法:连续收集2009年3月至2010年2月于化疗后发生周围神经损害的84例肿瘤患者。对纳入的患者进行周围神经病量表(MNSI、MDNS、FACT/GOG-NTX)评估和肌电图检查。按责任药物将患者分为:奥沙利铂组、顺铂组、紫杉醇组、长春新碱组、沙利度胺组和联合用药组(紫杉醇+卡铂,紫杉醇+顺铂),分析不同责任药物所致CIPN的特征及其与累积剂量的相关性。结果:84例患者临床主要表现为肢体远端感觉障碍,少数患者伴疼痛和(或)肌力减退,肌电图结果异常者占82.14%。84例患者中使用奥沙利铂者60例,累积剂量(1089.26±310.31)mg/m~2;长春新碱8例,累积剂量(5.14±1.07)mg/m~3;紫杉醇4例,累积剂量(640.00±306.17)mg/m~2;顺铂3例,累积剂量(360.00±120.00)mg/m~2。奥沙利铂组周围神经病量表分值与药物累积剂量呈正相关。结论:CIPN具有剂量依赖性特点,常见的责任药物为奥沙利铂、长春新碱、紫杉醇、顺铂。     

聚(左旋乳酸-己内酯)/ Fe3O4取向超细纤维的制备及生物相容性

背景：在静电纺过程中利用磁场效应的方法更适合制备载有磁性纳米粒子的取向纤维。但当前的研究多限于水溶性聚合物材料的电纺。 目的：通过相转移方法制备均匀分散有Fe3O4磁性纳米粒子的聚(左旋乳酸-己内酯)溶液,在外加磁场作用下通过静电纺技术制备聚(左旋乳酸-己内酯)/Fe3O4定向排列复合纤维,体外接种猪髋动脉内皮细胞,初步观察细胞相容性。 设计、时间及地点：对比观察实验,于2008-06/2008-10在东华大学化学化工与生物工程学院生物科学研究所生物材料与组织工程实验室完成。 材料：聚(左旋乳酸-己内酯)无规共聚物(50∶50,Mw30~40万)由日本 Nara Medical University提供;猪髋动脉内皮细胞由中国科学院细胞所提供。 方法：采用相转移法将水相中的Fe3O4磁性纳米粒子转移至有机溶剂中,制备聚(左旋乳酸-己内酯)/ Fe3O4的溶液,利用磁场对Fe3O4磁性纳米粒子的牵引作用,静电纺制备取向超细纤维。 主要观察指标：通过扫描电镜对纤维进行表面形态、取向度进行分析,采用透射电镜分析Fe3O4磁性纳米粒子在纤维中分散和分布情况。在复合Fe3O4磁性纳米粒子的聚(左旋乳酸-己内酯)静电纺纤维膜上体外接种猪髋动脉内皮细胞,采用 MTT法检测纤维膜上细胞的黏附和增殖能力以评价其生物相容性。 结果：通过添加乳化剂油酸钠成功得到分散均匀的Fe3O4磁性纳米粒子三氯甲烷溶剂。扫描电镜结果表明在磁场的影响下,静电纺得到的纤维表面光滑、无明显珠状物分布;排列方向沿磁场磁力线分布,取向度良好。透射电镜结果显示Fe3O4磁性纳米粒子在静电纺超细纤维中分散度良好。细胞生物相容性结果显示制备的载有磁性纳米粒子的聚(左旋乳酸-己内酯)静电纺超细纤维细胞黏附率优于纯聚(左旋乳酸-己内酯)纤维;其细胞增殖率与纯聚(左旋乳酸-己内酯)静电纺超细纤维接近。 结论：含有一定浓度的Fe3O4磁性纳米粒子的聚(左旋乳酸-己内酯)溶液,在外加磁场的作用下,静电纺得到的纤维排列方向沿磁场磁力线分布,取向度极佳,且具有良好的细胞相容性。