卵巢癌荷瘤裸鼠~(99m)TcCOC183B_2放射免疫显像结果分析

目的 :研究99mTc标记抗卵巢上皮癌单克隆抗体COC183B2 在荷瘤裸鼠体内的分布 ,并进行放射免疫显像 ,为临床应用提供依据。方法 :COC183B2 用预亚锡法标记后 ,经腹腔注入荷瘤裸鼠体内 ,在 2 4小时进行放射免疫显像 ,并观察裸鼠体内的生物学分布。结果 :与对照组相比 ,标记抗体在肿瘤组织中出现了特异性浓聚。获得清晰的显像 ,T/NT比值在 0 99～ 5 99之间 ,T/B比值为 1 19。结论 :说明COC183B2 可特异地与卵巢癌结合 ,具有导向卵巢癌的作用     

抗人胆管癌相关抗原单克隆抗体放射免疫显像的实验研究

目的 检验制备出的抗人胆管癌相关抗原单克隆抗体经同位素标记后用于胆管癌放射免疫显像诊断的特异性。方法 将纯化的抗人胆管癌相关原单克隆抗体经^131I标记后,注射于荷人胆管癌移植瘤的裸鼠体内,研究标记抗体在荷瘤裸鼠体内组织分布,并于不同时相点在SPECT下观察裸鼠移植瘤的放射免疫显像效果。结果 ①裸鼠移植瘤的放射免疫显像效果良好,在各时相点时,以96h时相点显像效果最佳;②注射放射性标记抗体96h后,肿瘤组织有标记抗体特异性浓聚,T/NT比值达到峰值。结论 制备出的抗人胆管癌相关抗原单克隆抗体在人体胆管癌的放射免疫显像诊断中具有良好的应用前景,值得进一步研究。     

99mTc-EGFR-McAb用于荷人肺腺癌裸鼠的放射免疫显像研究

目的:评价99mTc标记的表皮生长因子受体(Epidermal growth factor receptor,EGFR)单克隆抗体(Monoclone antibody,McAb)用于荷人肺腺癌裸鼠的放射免疫显像(Radioimmunoimaging,RII)效果,并进行相关比较分析.方法:①建立荷人肺腺癌裸鼠动物模型;②采用99mTc直接标记法标记抗EGFR的单克隆抗体,并对标记抗体的特性进行鉴定;③利用99Tc-EGFR-McAb进行荷人肺腺癌裸鼠模型的RII及体内分布研究.结果:99mTc对EGFR-McAb的标记率为91.5%±3.8%,标记抗体比活度为(2.8±0.2)MBq/μg,放射化学纯度为96.5%±3.2%.放射免疫显像结果显示,99mTc-EGFR-McAb对肿瘤组织有较高的亲和性,通过感兴趣区(Regional interest,ROI)技术测得T/NT比值为2.74±0.5,明显高于对照组(P＜0.05).标记抗体的体内分布结果与显像结果基本一致.结论:99mTc-EGFR-McAb用于荷人肺腺癌裸鼠的放射免疫显像能得到较理想的靶/非靶比值,EGFR是肺腺癌放射免疫显像研究值得推荐的目标抗原.     

抗卵巢上皮癌单克隆抗体COC 183 B_2肿瘤免疫显像定位诊断的初步观察

用本室制备卵巢癌单克隆抗体COC 183 B_2,按武汉生物制品所治疗用单抗要求;经~(131)I标记,按腹腔及皮下注射,分别应用于13例患者。腹腔注射组中,8例显像情况与手术所见完全符合。3例原发卵巢癌均显像,1例Krukenberg瘤转移卵巢不显像,另4例不显像者均为良性肿瘤;皮下注射组中只1例卵巢粘液性囊腺癌术后化疗后锁骨上淋巴结转移未显像,而瘤组织与COC 183 B_2免疫组化染色亦阴性。T/NT比值5.35～13.7,提示此单抗可用作放免显像、肿瘤定位,鉴别诊断、临床分期及追踪检测等。     

131I-OC125对荷人卵巢癌裸鼠肿瘤显像的实验研究

目的 探讨131碘-抗CA125单克隆抗体(131I-OC125)在荷人卵巢癌裸鼠中的分布,为131I-OC125临床应用提供依据.方法 用人卵巢癌上皮性腺癌细胞株NIH:OVCAR3分别于裸鼠腋窝、腹股沟及肩胛部皮下建立卵巢癌裸鼠皮下移植瘤模型,肿瘤长至0.5～2cm时尾静脉注射131I-OC125,对照鼠注射131碘-正常小鼠免疫球蛋白(131I-NMIgG),分别于注射后24、48、60、72、96、120h用针孔准直器行裸鼠显像,观察不同时段显像结果;每次显像结束后处死裸鼠,取各组织称重,测各组织放射性计数,计算单位质量组织的摄取率(%ID/g)及肿瘤组织与非肿瘤组织比值(T/NT).结果 18只实验鼠50个肿瘤病灶显像41个,显像率为82.0%.不同部位病灶显像率差异无统计学意义,但直径0.5～1.5cm病灶显像效果最好,显像率为88.6%(31/35);大于1.5cm病灶显像率为81.8%(9/11),但T/NT值小于直径0.5～1.5cm病灶的T/NT值;直径小于0.5cm病灶显像率为25.0%(1/4).18只对照鼠47个瘤灶无1个显像.注射131I-OC125组不同时段T/NT值略有不同,以给药后72h T/NT值最高,但所有时间段标记抗体在肿瘤部位分布均明显高于其他部位,差异有统计学意义(P<0.01);注射131I-NMIgG组不同时段T/NT值差异无统计学意义(P＞0.05).结论 131I-OC125能特异地浓聚于瘤组织中,可较好地用于卵巢癌放射免疫显像.     

99Tcm-EGFR-McAb及99Tcm-CD44-McAb单独及联合用于荷人肺腺癌裸鼠的显像研究

目的 评价99Tcm-EGFR-McAb及99Tcm-CD44-McAb单独及联合应用于荷人肺腺癌裸鼠的放射免疫显像效果.方法 建立荷人肺腺癌裸鼠动物模型;采用直接法99Tcm标记抗EGFR和CD44的单克隆抗体,运用柱层析法对标记抗体分离、纯化,并对标记、纯化后的抗体特性进行鉴定;利用99Tcm-EGFR-McAb及99Tcm-CD44-McAb单独及联合进行倚人肺腺癌裸鼠显像及体内分布研究.结果 99Tcm对EGFR-McAb和CD44-McAb的标记率分别为(91.5±3.8)%、(92.3±4.1)%,标记抗体比活度分别为(2.8±0.3)MBq/μl、(2.9±0.5)MBq/μl,放射化学纯度分别为(96.5±2.8)%、(96.2±3.1)%.放射免疫显像结果显示,肿瘤组织对2种标记抗体均有较高的摄取,2种标记抗体联合使用肿瘤部位的放射性浓聚明显高于2种标记抗体单独使用,通过ROI技术测得T/NT值分别为(5.58±0.46)、(2.72±0.22)、(2.30±0.18).标记抗体的体内分布规律与显像结果一致.结论 99Tcm-EGFR-McAb、99Tcm-CD44-McAb用于荷人肺腺癌裸鼠的放射免疫显像能得到较理想的靶/非靶比值,2种标记抗体的联合应用,可在一定程度上提高靶/非靶比值,优于一种标记抗体的单独使用.     

免疫学

020460抗人卵巢癌抗体可变区cDNA的克隆与scFv的构建和表达及放射免疫显像/刘广芝…//北京大学学报(医学版)一2001,33(4)一362一365 目的:为研究小分子抗体作为导向载体的作用,制备抗人卵巢癌单克隆抗体COC183B:的单链抗体(ScFv)并进行放射免疫显像(Rn)。方法:利用PCR技术从COCi83B:杂交瘤细胞中扩增COC183BZ重链可变区基因(VH)和轻链可变区基因(VL),并将其克隆人高效表达载体pTHA90中。重组子转化大肠杆菌TOP‘0,IPTG诱导表达SeFv融合蛋白,经改进氯化亚锡法进行’gmTc标记,在卵巢癌裸鼠皮下瘤模型上进行Rll。结果:(1)ScF…     

^99mTc标记单克隆抗体及片段对荷人结肠癌裸鼠的放射免疫显像研究

目的 探讨单克隆抗体ND1对大肠癌的诊断价值。方法 利用放射免疫法对荷人结肠癌裸鼠模型进行显像研究。结果 ^99mTc直接标记抗人结肠癌单克隆抗体ND1及F（ab)2片段,标记率为94%和87%,标记后抗体的免疫活性良好。注入荷人结肠癌裸鼠体内16小时后。肿瘤组织中出现较高的特异性浓聚,肿瘤轮廓显示清晰,F（ab)2片段的放射本底消除快,图像质量优于ND1。体内分布显示：ND1及F（ab)2片段可与移植瘤特异性结合。肿瘤与正常器官组织的放射比值（T/NT）、F（ab)2片段显高于ND1,ND1在肿瘤,血液及器官组织均有较高的放射性摄取,不利于放射性本底的消除。结论 ^99mTc-F(ab)2,对大肠癌的放射免疫显像图像清晰,优于^99mTc-ND1,为其临床应用提供了实验依据。     

131I标记抗VEGF单抗在荷瘤膀胱癌裸鼠体内的生物学分布

目的研究131I-sc-7269在荷人膀胱癌裸鼠体内的生物学分布特性.方法 (1)Iodogen法标记抗-VEGF McAb(sc-7269),SephadexG-50柱层析分离纯化制备131I-sc-7269,体外细胞结合分析检测标记抗体的免疫活性;(2)荷瘤裸鼠131I-sc-7269体内分布实验.结果 (1)131I-sc-7269比活度为1.00MBq/μg(放射性浓度为18.30MBq/ml),放射性化学纯度为96.20%.体外131I-sc-7269与T24细胞结合率为59.12%;(2)体内分布实验显示131I-sc-7269在肿瘤组织中浓聚的峰时为注入标记抗体后96h,此时各组织T/NT比值为最高.结论 131I-sc-7269动物模型肿瘤/膀胱放射性峰时出现在96h,比值高达6.44,为应用131I-sc-7269放射免疫显像诊断人膀胱癌的实验和临床研究奠定了一定的实验基础.     

抗肝癌抗原单链抗体在荷人肝癌裸鼠体内的放射免疫显像效果

目的 :研究13 1I标记抗肝癌鼠源性单链抗体 (mouse derivedscFv2 5 ,mscFv2 5 )在荷人肝癌裸鼠体内放射免疫显像效果 .方法 :采用高效碘标法制备13 1I mscFv2 5 ,2 0只荷人肝癌裸鼠分别通过静脉和ip13 1I mscFv2 5后 1,4 ,8,16 ,2 4 ,2 8h进行裸鼠的体内分布和放射免疫显像研究 .结果 :2 0只荷肝癌裸鼠在 6～ 8h全部明确显像 ,对照组鼠瘤区未出现放射性浓聚 . 13 1I标记的mscFv2 5的瘤 /肝比值 2 4h为(9.6 3± 0 .0 5 ) .结论 :13 1I mscFv能提高瘤 /肝比值 (T/NT) ,缩短显像时间 ,有可能成为肝癌诊断的一项重要技术     

CENERATION AND CHARACTERIZATION OF THREE MONOCLINAL ANTIBODIES TO HUMAN OVARIAN EPITHELIAL ADENOCARCINOMAS

Three murine monoclonal antibodies COCL66-9, COC183A5 and COC183B2 were raised against human epithelial ovarian adenocarcinoma with soluble antigens. The monoclonal antibodies were stable after culture and stored under 80 C for 9 to 20 months. The subclass and titre were all examined and the reactivities were tested on various paraffin embedded tissue sectionism by immunoperoxidase stainings. The results of positive staining against ovarian epithelial adenocarcinoma were 77.7%, 87.2% and 75.6% for COC166-9, COC183A5 and COCL83B2 respectively. Human ovarian carcinoma xenograft in nude mice were radioimaged after 131I-COC183B2 administration. Gamma scintigraphy demonstrated specific localization of the radiolabeled monoclonal antibody on these tumors. The results showed a bright future for immunodiagnosis and immunotherapy.     

抗人卵巢癌抗体可变区cDNA的克隆与ScFv的构建和表达及放射免疫显像

目的:为研究小分子抗体作为导向载体的作用,制备抗人卵巢癌单克隆抗体COC183B2的单链抗体(single chain Fv,ScFv),并进行放射免疫显像(radioimmunoimaging,RⅡ).方法:利用PCR技术从COC183B2杂交瘤细胞中扩增COC183B2重链可变区基因(VH)和轻链可变区基因(VL),并将其克隆入高效表达载体pTHA90中.重组子转化大肠杆菌TOP10,IPTG诱导表达ScFv融合蛋白,经改进氯化亚锡法进行99mTc标记,在卵巢癌裸鼠皮下瘤模型上进行RⅡ.结果:(1)ScFv融合蛋白以包涵体形式获高效表达;(2)改进氯化亚锡法成功进行小分子抗体ScFv 99mTc的标记,标记率达98%;(3)应用99mTc标记ScFv融合蛋白进行RⅡ,肿瘤显像早,图像清晰.结论:应用单链抗体ScFv可改善RⅡ.     

~(131)I标记VEGFR-3高亲和融合多肽对荷人卵巢癌裸鼠靶向治疗的实验研究

目的观察131I标记血管内皮生长因子受体-3(vascular endothelial growth factor receptor-3,VEGFR-3)高亲和融合多肽(phage-SHSWHWLPNLRHYAS)对荷人卵巢癌小鼠移植瘤的靶向治疗作用。方法用Iodogen法合成131I-多肽及131I-单抗,体外分别与人淋巴管内皮细胞(LEC)共培养,MTT法检测其对LEC细胞生长的抑制作用;体内44只裸鼠经皮下接种卵巢癌细胞株,成瘤后2周,将20只荷瘤小鼠按随机数字表法分成4组,每组5只。分别经尾静脉注射,Ⅰ组:多肽4.4μg/只,Ⅱ组:131I-多肽7.4MBq/只,Ⅲ组:131I-单抗7.4MBq/只,Ⅳ组:生理盐水0.2ml作为对照组。干预后每周测量1次小鼠肿瘤的长径及短径,观察4周。余24只荷瘤鼠瘤体达1cm后行SPECT显像。结果体外131I多肽组对LEC细胞的生长抑制率在72h达到最高,131I单抗组对LEC细胞的生长抑制率在96h达到最高;72h及96h131I多肽组与131I单抗组及多肽组比较抑制率差异均有统计学意义(P0.05);体内4周治疗结束时,Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组小鼠肿瘤的体积分别为(723±164)、(291±68)、(457±88)、(792±112)mm3,其中Ⅱ、Ⅲ组与Ⅳ组肿瘤体积相比差异有统计学意义(P0.05),而Ⅰ组治疗结束时肿瘤体积与Ⅳ组比较差异无统计学意义(P0.05),Ⅱ、Ⅲ组的抑瘤率分别为63%和44%。结论131I标记高亲和融合多肽对荷人卵巢癌小鼠移植瘤的生长具有显著抑制作用。     

Radiolocalization of human hepatoma with anti-human hepatoma monoclonal antibodies and its F(ab')2 in tumor-bearing nude mice

This paper reports the results and procedures for the radiolocalization of human hepatoma by murine MAb (HAb 18) and its F (ab')2 in animal model. 131I-labelled HAb 18 IgG and 125I-labelled its F(ab')2 were intravenously injected respectively to human hepatoma bearing nude mice. Clear tumor imaging manifested 48 hrs. after injection of 125I-labeled F(ab')2 and 120 hrs. after 131I-labeled intact MAb. The animals were killed 48, 72, 120, and or 168 hrs. after injection respectively. Bound radioactivity was counted in a variety of solid organs. Tumor: liver ratios for intact MAb or its F(ab')2 were greater than those for unrelated MAb at each time points, the differences being greatest after 168 hrs. (ratio intact MAb 5.15 +/- 0.64, ratio unrelated MAb 0.93 +/- 0.16) and after 48 hrs. (ratio F(ab')2 14.47 +/- 2.35, mean +/- sd). The amount of I-MAb bound was greater in the tumor than in any other solid organ. The clearance rate of F(ab')2 was faster then that of intact MAb. It was shown that HAb 18 MAb may be of value as an immunodiagnostic agent for hepatoma.     

抗人AFP－R－LCA McAb在裸鼠人肝癌模型中放免显像及治疗

放射性核素~（１３１）Ｉ标记的抗人小扁豆凝集素结合型甲胎蛋白异质体（ＡＦＰ－Ｒ－ＬＣＡ）ＭｃＡｂ，注入荷瘤裸鼠腹腔后，能在裸鼠人肝癌模型肿瘤区积聚，其放射性核素浓度是裸鼠肝脏的５．２倍；而~（１３１）Ｉ标记的正常小鼠ＩｇＧ（ｍＩｇＧ）及游离~（１３１）Ｉ却无肿瘤区积聚，且在荷瘤裸鼠体内呈均匀分布。~（１３１）Ｉ－ＡＦＰ－Ｒ－ＬＣＡＭｃＡｂ组γ照像均显示出裸鼠人肝癌的阳性定位。用~（１３１）Ｉ－ＡＦＰ－Ｒ－ＬＣＡＭｃＡｂ治疗裸鼠人肝癌，肿瘤生长受到明显抑制（８５．０％），优于~（１３１）Ｉ－ｍＩｇＧ及游离~（１３１）Ｉ（４６．０％、２０；１％，Ｐ＜０．０５）．结果表明：ＡＦＰ－Ｒ－ＬＣＡＭｃＡｂ对人肝癌细胞有较强的亲和力和特异性，有希望成为肝癌导向研究的理想载体。     

^131I标记抗CEA、TPS及混合单抗在荷人乳腺癌裸鼠体内放射免疫显像及生物学分布

目的 研究^131I标记抗CEA、TPS单抗及混合单抗（CEA＋TPS）在荷人乳腺癌裸鼠体内的分布，为放免显像（RII）及临床应用提供依据。方法 荷瘤鼠分为3组，每组尾静脉分别注入^131I标记的抗CEA，TPS及混合单抗3．7MSq／0．1ml，于注射后2，4、48、96、120h行SPELT，于48、96、120h分批处死，测定肿瘤和血、肝、肺等重要脏器的单位放射性比值（T／NT）。结果 标记单抗注射后24～120h内，肿瘤部位出现放射性浓聚，T／NT比值120h最高达21．31。SPECT阳性率分别为50％、58％、91％。结论 混合单抗组在T/NT比值、SPECT阳性率方面明显优于对照组。单抗的混合使用有望成为RⅡ的首选方法。     

抗乙型肝炎表面抗原Fab片段联合抗细胞核单抗为载体的肝癌放射免疫治疗实验研究

目的 探讨核素标记人源化抗(乙型肝炎)乙肝表面抗原Fab片段(抗HBsAg Fab)联合核素标记抗细胞核单克隆抗体(chTNT)瘤内注射治疗荷人肝癌移植瘤裸鼠的可行性和优越性,为临床应用核素标记多种不同性质的单克隆抗体进行放射免疫治疗肝癌提供实验依据.方法 荷瘤裸鼠分为五组,分别瘤内注射131I-抗HBsAg Fab、131I-chTNT、131I-抗HBsAg Fab联合131I-chTNT、131I-无关抗体(131HgG)及PBS.治疗后行SPECT显像观察标记抗体在肿瘤内的浓聚,并澍量肿瘤大小变化,计算肿瘤抑制率.结果 研究发现2种标记抗体联合应用组的肿瘤抑制率为73.09%,呀显高于131I-抗HBsAgFab组的47.8%和131I-chTNT组的54.26%.联合应用组标记抗体在肿瘤组织/非肿瘤组织内的放射活度比值(T/NT值)大于单独应用组.结论 131I-抗HBsAg Fab联合131I-chTNT瘤内注射放射免疫治疗可增加标记抗体在肿瘤组织内的浓聚.并能提高放射免疫治疗效果.     

~(125)Ⅰ标记铁传递蛋白作移植性人肝癌LTNR_1裸大鼠的扫描

以移植性人肝癌LTNR_1裸大鼠为模型,观察肝癌组织对碘标记铁传递蛋白(~(125)I-t_f)的摄取。结果表明从尾静脉注射~(125)I-T_f后48～72h,肝癌组织对~(125)I-T_f的摄取比同一动物肝脏及其他各组织显著增高。肝癌/肝放射强度比平均为3.58,肝癌/血放射强度比为1.80。肝癌与其他各组织的放射强度比,除甲状腺、肺、脊椎较低外,均在3以上。注射~(125)I-T_f后,自24h起,每隔24h对癌鼠作全身γ-闪烁显象,阳性显象以72h最清晰。     

131 I标记壳聚糖/明胶-拓扑替康载药膜对SK-OV-3腹腔荷瘤鼠的治疗效果

目的制备京尼平交联的~(131)I标记壳聚糖/明胶-拓扑替康膜,并研究复合膜对SK-OV-3荷瘤裸鼠的治疗效果,为同步放化疗载药膜剂的肿瘤治疗等相关研究提供基础。方法制备SK-OV-3腹腔荷瘤裸鼠模型,并手术植入复合膜到荷瘤裸鼠腹腔中,观察各组裸鼠的生存周期、转移瘤及血性腹水重量,考察复合膜对腹腔荷瘤裸鼠的治疗效果。结果 SK-OV-3腹腔荷瘤裸鼠经手术植入复合膜后观察各组生存天数、腹腔转移瘤及血性腹水量可知,同时应用拓扑替康及~(131)I的~(131)I+TPT组疗效优于单独使用拓扑替康或~(131)I,稍次于顺铂对照组,明显优于空白对照组。结论 ~(131)I标记的壳聚糖/明胶拓扑替康载药膜对SK-OV-3腹腔荷瘤裸鼠有一定疗效,能延长荷瘤裸鼠的生存天数并抑制腹腔转移瘤及血性腹水的形成。