UPLC-MS/MS测定康艾注射液中5种主要成分含量

 目的 建立同时测定康艾注射液中黄芪甲苷、人参皂苷R_g1、R_e、R_f、R_b1含量的超高效液相-串联四级杆质谱方法。方法 多反应监测模式测定,以Waters ACQUITY UPLC BEH C₁₈进行分离,乙腈-20 mmol·L-1醋酸铵溶液梯度洗脱,流速：0.4 mL·min-1。离子化模式：ESI+。结果 黄芪甲苷线性范围在5.0～500.0 μg·L-1之间,人参皂苷R_e和R_g1线性范围在0.2～20.0 mg·L-1之间,人参皂苷R_f和R_b1线性范围在10.0～1 000.0 μg·L-1之间,r分别在0.991 5~0.995 2之间,检出浓度分别在1.57~67.4 μg·L-1之间,回收率分别在95.6%～107.0%之间。结论 该方法快速、准确、灵敏,可作为康艾注射中5种主要成分同时测定的方法。     

HPLC测定二巯丁二酸的有关物质

 目的 建立二巯丁二酸中有关物质的HPLC测定方法。方法 色谱柱为Ultimate XB-C₁₈（4.6 mm×150 mm,5 μm）;流动相A：硫酸氢四丁基铵磷酸盐溶液（含硫酸氢四丁基铵3.2 g·L-1、磷酸二氢钠6.5 g·L-1和乙二胺四乙酸二钠0.09 g·L-1）-甲醇（85∶15）,流动相B：甲醇;流速：1.0 mL·min-1;检测波长220 nm;线性梯度洗脱：0 min,100%A;10 min,100%A;20 min,80%A;50 min,80%A。结果 二巯丁二酸与丁炔二酸、各杂质峰之间分离良好。二巯丁二酸在14.0~112.0 μg·mL-1内线性良好,r=0.999 3,检测限为1.8 μg·mL-1;丁炔二酸在10.3~82.3 μg·mL-1内线性良好,r=1.000 0,检测限为0.4 μg·mL-1,丁炔二钠的平均加样回收率为98.3%。结论 本方法专属性强、准确度高,适合测定二巯丁二酸的有关物质。     

HPLC-荧光检测法测定大鼠血浆伊伐布雷定浓度

 目的 建立测定血浆中伊伐布雷定浓度的高效液相-荧光(FLU)测定方法,用于临床血浆伊伐布雷定浓度的测定。方法 血浆样品经Varian C₂柱固相萃取后采用HPLC-FLU法在Kromasil C₁₈柱分离,流动相采用乙腈-10 mmol·L - 1磷酸二氢钾（含0.3%10 mmol·L-1盐酸）（28∶72）,流速为1 mL ·min- 1,柱温为25 ℃,荧光检测波长：λ₁=328 nm,λ₂=283 nm。结果 内源性杂质不干扰测定,伊伐布雷定在0.5～50 μg·L-1内线性良好（r=0.999 6）,最低定量限为0.5 μg·L-1。萃取回收率为78.74%～90.77%（n=5）,批内和批间精密度（RSD%）分别为2.53～6.33（n=6）和6.38～8.91（n=3）。结论 建立的固相萃取-HPLC-FLU方法简便、灵敏、准确、所需血浆量少,可以用于临床血药浓度测定。     

SPE-LC-ESI-MS/MS测定人血浆中咪达普利拉浓度及其在药动学研究中的应用

 目的 建立测定人血浆中咪达普利拉浓度的固相萃取高效液相串联质谱电喷雾检测法(SPE-LC-ESI-MS/MS)。方法 以美国 Agilent Eclipse plus C₁₈（4.6 mm×150 mm,3.5 μm）为色谱柱,流动相为甲醇-水（含 0.005 mol·L-1 甲酸铵,含 0.1% 甲酸）（87∶13）;流速：0.5 mL·min-1;柱温：40 ℃。样品用Agilent C8固相小柱净化。经电喷雾离子源正离子化后,通过三重四级杆串联质谱仪,采用选择反应监测(SRM )对咪达普利拉(m/z 378.2→206.2)和内标依那普利拉(m/z 349.1→206.1)进行测定。结果 咪达普利拉的高(20 μg·L-1)、中(10 μg·L-1 )、低(1 μg·L-1。)3个质量浓度的方法回收率分别为102.44％,102.46％和105.69％,日内(n=5)、日间(n=3)RSD均小于15％;分析方法的最低定量限为0.5 μg·L-1。线性范围为0.5~25 μg·L-1,回归方程为y=0.480 7x+0.008 7×10-4,r=0.997 6（n=6）。结论 该方法灵敏、准确、简单、快速,可用于临床血药浓度监测和药动学研究。     

RP-HPLC同时测定槐角丸中4种有效成分的含量

 目的 建立同时测定槐角丸中槐角苷、黄芩苷、染料木素和汉黄芩素4种有效成分含量的HPLC方法。方法 采用Diamonsil C₁₈柱(4.6 mm×200 mm, 5 μm进行分离;流动相为乙腈-0.05%磷酸溶液,梯度洗脱(0～10 min,25%～37%乙腈;10～25 min,37% ～60% 乙腈;检测波长260 nm;柱温30 ℃;流速1.0 mL·min-1;进样量10 μL。结果 槐角苷、黄芩苷、染料木素和汉黄芩素的质量浓度与峰面积分别在11.6~116 μg·mL-1(r=0.999 6, n=6、33.5~335 μg·mL-1 (r=0.999 8, n=6、0.46~4.63 μg·mL-1 (r=0.999 8, n=6和1.54~15.4 μg·mL-1(r=0.999 7, n=6内呈良好的线性关系;平均加样回收率依次为99.3%、99.6%、99.6%和99.0%。RSD为1.1%、1.1%、1.4%和0.8%。结论 该方法快速、简便、重复性好,适合于同时测定槐角丸中槐角苷、黄芩苷、染料木素和汉黄芩素的含量。     

HPLC测定清肝活血方中4种黄酮的含量

 目的 建立HPLC同时测定清肝活血方中葛根素、黄芩苷、黄芩素和汉黄芩素含量的方法。方法 采用HPLC进行分析,色谱柱为Agilent Zorbax Eclipse XDB-C₁₈柱(4.6 mm×250 mm, 5 μm),流动相为甲醇-0.5%甲酸水梯度洗脱,流速为1.0 mL·min-1,检测波长为276 nm。结果 葛根素的线性范围为0.12~1.98 g·L-1(r=0.999 8),平均回收率为99.87%,RSD=2.04%;黄芩苷的线性范围为0.24~3.82 g·L-1(r=0.999 9),平均回收率为99.74%,RSD=1.84%;黄芩素的线性范围为0.01~0.14 g·L-1(r=0.999 6),平均回收率为99.64%,RSD=1.96%;汉黄芩素的线性范围为0.007~0.12 g·L-1(r=0.999 5),平均回收率为100.83%,RSD=2.37%。结论 本方法操作简便,测定结果准确可靠,可用于清肝活血方的质量控制。     

盐酸纳美芬注射液在健康人体中的药动学研究

 目的 研究中国健康志愿者单剂量静脉推注0.25、0.5、1.0 μg·kg-1盐酸纳美芬注射液后的药动学行为,并评价药动学参数在0.25~1.0 μg·kg-1内剂量相关性。 方法 12名健康志愿者,随机三交叉试验,分别单剂量静脉推注盐酸纳美芬注射液0.25、0.5、1.0 μg·kg-1;测定给药后48 h内的血药浓度。结果 单剂量静脉推注0.25、0.5、1.0 μg·kg-1盐酸纳美芬注射液后,纳美芬的消除半衰期大约为13~15 h,血浆药物浓度(ρ_max)随剂量增加呈线性增加[（104.4±61.9)~(330.6±152.5) pg·mL-1]。另外,曲线下面积（AUC）在0.25~1.0 μg·kg-1内也呈线性增加[AUC_0-t（301.4±86.8）~（1 023.1±214.2）pg·h·mL-1, AUC_0-∞：（337.1±82.7）~（1 115.2±302.3） pg·h·mL-1]。结论 在0.25~1.0 μg·kg-1内纳美芬呈线性药动学,ρ_max、AUC的升高与剂量成正比。t_max、t1/2、AUC_0-t、CL/F、V_d/F性别间无统计学差异,但是ρ_max有明显统计学差异。     

LC-MS/MS测定人血浆中长春西汀体内代谢物阿朴长春胺酸

 目的 建立人血浆中长春西汀体内代谢物阿朴长春胺酸的LC-MS/MS分析测定方法。方法 采用Diamonsil C₁₈ 色谱柱(4.6 mm×200 mm,5 μm);流动相为2 mmol·L-1醋酸铵-甲醇（8∶92）;采用三重四极杆串联质谱以多反应离子检测(MRM)方式进行负离子检测。结果 阿朴长春胺酸的定量下限为10.61 μg·L-1,线性范围为10.61~424.40 μg·L-1(r=0.999 3, n=7),日内、日间精密度均小于6.8%,平均方法回收率为97.48%。结论 所建方法灵敏、精密、准确,可用于阿朴长春胺酸的药动学研究。     

大鼠血浆中伊伐布雷定及其活性代谢物的HPLC测定法和药动学研究

 目的 建立HPLC-荧光检测法来同时测定大鼠血浆中伊伐布雷定及其活性代谢物N-去甲基伊伐布雷定的浓度,研究单剂量口服伊伐布雷定在大鼠体内的药动学。方法 以盐酸曲马多为内标,采用C₂柱固相萃取法处理血浆。色谱条件：色谱柱： Kromasil-C₁₈色谱柱（4.6 mm×250 mm,5 μm）;流动相：乙腈-10 mmol·L-1的磷酸二氢钾溶液（含0.1%的1.2 mol·L-1盐酸）（22∶78）;流速：1.8 mL· min-1;柱温：25 ℃;荧光检测波长：激发波长λ_ex=283 nm,发射波长λ_em=328 nm。大鼠灌胃给予伊伐布雷定水溶液1.5 mg·kg-1后,按规定时间点取血并测定血浆中的伊伐布雷定及代谢物N-去甲基伊伐布雷定的浓度,绘制药-时曲线,采用DAS 2.0软件计算药动学参数。结果 伊伐布雷定及其活性代谢物N-去甲基伊伐布雷定的血药浓度线性范围分别为0.5～80,0.8～100 μg·L-1;相关系数（r）均大于0.999,最低定量限分别为0.5和0.8 μg·L-1;方法回收率分别为96.67%～103.47%,90.5%～101.25%;批内精密度分别为9.34%～13.73%,9.14%～12.35%;批间精密度分别为5.9%～10.42%,4.18%～11.39%。伊伐布雷定及其活性代谢物N-去甲基伊伐布雷定在大鼠体内的血药浓度-时间曲线符合二室模型,其主要药动学参数：t_1/2分别为（2.84±1.43）和（5.732±2.89） h,ρ_max分别为（217.83±86.04）和（9.76±2.79）μg·L-1,t_max分别为（0.57±0.16）和（0.54±0.13）h,AUC_0-t分别为（534.46±179.20）和（25.93±4.34）μg·h·L-1。结论 本实验所建立的同时测定血浆中伊伐布雷定及其活性代谢物N-去甲基伊伐布雷定的HPLC-固相萃取-荧光测定的方法简便、快速、灵敏、准确、可靠,能够满足血药浓度和药动学研究的需要。     

LC-MS/MS方法同时测定人血浆和尿液中乌头碱与次乌头碱的含量

 目的 建立同时测定血浆和尿液中乌头碱（aconitine）与次乌头碱（hypaconitine）含量的LC-MS/MS分析方法。 方法 采用Phenomenex Gemini C₁₈柱 (4.6 mm×150 mm,5 μm) 为色谱柱,以甲醇-0.1%甲酸（70∶30）为流动相,流速为0.5 mL·min-1,以乙醚提取血浆和尿液中乌头碱与次乌头碱。样品经电喷雾离子源正离子化后,通过API3200三重四级杆串联质谱仪,采用多反应离子监测（MRM）对乌头碱(m/z 646.3→105.2)与次乌头碱(616.3→105.2)进行测定。结果 生物样品中乌头碱在0.5~40 μg·L-1内、次乌头碱在0.25~25 μg·L-1内线性关系良好;乌头碱与次乌头碱最低定量限分别为0.5和0.25 μg·L-1,在尿液中的平均提取回收率76.54%~81.25%,血浆中的平均提取回收率73.22%~80.31%;日间和日内精密度均小于15%。结论 本方法简便、灵敏可靠,适用于血浆、尿液中乌头碱与次乌头碱的分析。     

LC-MS/MS测定碘海醇及其注射剂中有关物质的研究

 目的 建立液相色谱-串联质谱联用方法,对碘海醇及其注射剂中两种有关物质进行分离和测定。方法 色谱柱：Agilent C₁₈分析柱（4.6 mm×150 mm,3.5 μm）,流动相为0.05%的甲酸水溶液(A)和乙腈(B),进行梯度洗脱,流速0.25 mL·min-1,柱温为30 ℃,采用ESI离子化-串联质谱选择离子监测（SRM）正离子模式检测,喷雾电压：3 500 V,鞘气流速：30 L·min-1,辅助气流速：5 L·min-1,毛细管温度：325 ℃,离子选择通道分别为m/z 747.8/528.9（有关物质A）、m/z 705.8/614.9（有关物质B）和m/z 328.2/237.3（内标）。结果 该方法中有关物质A、有关物质B分别在0.281 7～11.27 mg·L-1（r=0.999 4）和27.00～1 080 μg·L-1（r=0.996 3）内线性关系良好,有关物质A、有关物质B在高、中、低3个浓度的平均回收率分别为103.2%（RSD为4.4%）、105.4%（RSD为7.8%）。结论 该方法可同时测定碘海醇及其注射剂中的两种有关物质。     

HPLC-MS/MS测定人体内齐墩果酸血药浓度

 目的 建立快速、灵敏的高效液相色谱-串联质谱（HPLC-MS/MS）法测定人血浆中的齐墩果酸。方法 血浆样品定量加入内标液,经乙酸乙酯液液萃取后,以甲醇-0.1%醋酸铵缓冲溶液（93∶7）为流动相,采用Zorbax Extend-C₁₈（4.6 mm×250 mm, 5 μm）柱分离。使用电喷雾离子化,负离子SRM检测。用于定量的离子反应分别为m/z 455.1→455.3（齐墩果酸）;m/z 469.1→469.3（内标甘草次酸）。结果 测定血浆中齐墩果酸的线性范围为0.1～40.0 μg·L-1,定量限为0.1 μg·L-1,批内、批间精密度（RSD）均小于20.0%,方法学回收率94.0%～102.0%,符合相关规定。单个样品的分析时间为6.5 min。本法已用于齐墩果酸口服制剂的人体生物等效性研究。结论 本方法灵敏度高,选择性强,分析测试时间较短,适用于人血浆样品中齐墩果酸的测定。     

UPLC-MS/MS测定降糖类中药制剂及保健品中8种化学药的研究

 目的建立一种测定降糖类中药制剂及保健品中违禁添加8种化学药的超高效液相-串联四级杆质谱方法。方法使用超高效液相-串联四极杆质谱的多反应监测(MRM)模式测定。结果8种化学药测定的线性范围在0.5～200.0μg·L^-1之间,r分别在0.9971～0.9998之间;盐酸二甲双胍、盐酸苯乙双胍、格列奇特、盐酸吡格列酮、格列吡嗪、格列美脲、格列苯脲和格列喹酮的检出限分别为5.2,1.1,5.4,0.2,5.1,0.2,0.7和3.1μg·kg^-1;3个水平的回收率分别在84.3%～121.1%间。结论该方法快速、准确、灵敏,可用于降糖类中药制剂及保健品中违禁添加8种化学药的测定。