纸片法检测大肠菌群结果判断的实验研究

探讨纸片法检测大肠菌群的结果判断标准。对餐(饮)具消毒效果监测的大肠菌群检测纸片状况进行详细记录后，将纸片以无菌操作转入单料乳糖胆盐发酵管中，用发酵法来证实其大肠菌群的阴阳性。按GBl4934-94^[1]判断纸片法大肠菌群的阴阳性，其灵敏度为73．6％，特异度为98．8％；若按作者提出的标准进行判断，其灵敏度为98．2％。特异度为89．8％。二者比较灵敏度有显著性差异。消毒剂的残留可能是导致结果判断出偏差的主要原因。建议完善纸片法测大肠菌群的判断标准，以便更准确地反映大肠菌群的真实情况。     

总大肠菌群检测试剂盒在生活饮用水检测中的应用评价

目的评价总大肠菌群检测试剂盒应用于生活饮用水中总大肠菌群检测的准确性和价值。方法对124份生活饮用水水样,分别用总大肠菌群检测试剂盒法与国家标准认可的多管发酵法同时进行总大肠菌群检测,采用流行病学方法对检测结果进行准确性评价。结果以国标中的检测方法作为金标准比较,总大肠菌群检测试剂盒法的灵敏度为100%,特异度为98.18%,正确指数为98.18%。结论总大肠菌群检测试剂盒法具有很好的准确性,而且检测省时、省力,简便易行,适用于大批量样品快速检测,特别是突发事件时检验工作的开展。     

胶体金试纸法与酶联免疫吸附试验检测乙型肝炎病毒表面抗原的比较

目的对胶体金试纸法与酶联免疫吸附试验(ELISA)检测乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)做比较,了解胶体金试纸法的灵敏度和特异度。方法采用两种方法检测0~65岁人群血清标本3 578份。结果胶体金试纸法检测出HBsAg阳性标本189份,阳性率5.28%;ELISA法检测出阳性标本200份,阳性率5.59%;两种方法阳性检出率差异无显著统计学意义。胶体金试纸法与ELISA法检测标本符合率为97.74%。胶体金试纸法的灵敏度为77.00%,特异度为98.96%。结论胶体金试纸法操作简便、快速,检测的特异度较好,但其灵敏度有待提高。     

纸片法与ATP荧光检测法在餐饮具消毒中的一致性检验

目的对大肠菌群纸片法和ATP生物荧光检测法对餐饮具消毒效果评价进行一致性检验。方法采用大肠菌群纸片法和ATP生物荧光检测法对相同受检物品进行检测,分析比较检测结果的一致性。结果共采样156件,纸片法检测合格率是53.84%,ATP生物荧光法检测合格率是75.64%,经一致性检验,kappa值为0.5,两种方法的一致性一般。ATP法的灵敏度为51.4%,特异度为97.6%,假阳性率为2.4%,假阴性率为48.6%,符合率为76.3%。结论 ATP荧光检测法进行现场卫生监督时,应设定合适的限值,以提高其检测结果的准确度,从而提高卫生监督效率。     

PCR检验法和细菌培养法在阴道细菌检验中的效果对比

目的探讨聚合酶链式反应(PCR)检验法和细菌培养法在阴道细菌检验中的效果。方法选取2014年2月-2015年3月在咸宁市某医院就诊的57例细菌性阴道炎患者作为研究对象。采集患者阴道分泌物,分别用PCR检验法和细菌培养法进行细菌检测。比较2种检验方法的阳性检出率及特异度。结果 PCR检验法检出阳性标本51例,阳性检出率为89.47%,高于细菌培养法的阳性检出率(66.67%),差异具有统计学意义(χ2=8.66,P0.05)。PCR检验法检出加特纳菌40例,加特纳菌检出率为70.18%,明显高于细菌培养法的加特纳菌检出率(36.84%),差异具有统计学意义(χ2=12.73,P0.05)。结论 PCR检验法在女性阴道细菌检验中的检验效果明显优于细菌培养法,是一种集操作简单、精准度高、特异度高等众多优点为一体的检验方法,值得临床推广应用。     

ELISA法与胶体金法在检测新型冠状病毒血清抗体中的应用探讨

目的 探讨酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)法与胶体金法检测新型冠状病毒(2019 novel coronavirus,2019-nCoV)血清抗体的诊断价值。方法 选取湖南省新型冠状病毒肺炎(简称新冠肺炎,COVID-19)确诊病例88例作为病例组,51例核酸检测阴性者作为对照组。采集研究对象血标本,采用ELISA法和胶体金法对所采集标本进行抗体检测,比较两种方法检出率差异;以核酸检测结果作为金标准,评估ELISA法和胶体金法的检验效能。结果 本研究结果显示,ELISA法和胶体金法检测2019-nCoV IgM 检出率均为20.97%,2019-nCoV IgG检出率分别为 43.55%、35.48%。不同采样时间ELISA法和胶体金法检测2019-nCoVIgM 检出率差异无统计学意义(均P>0.05)。发病-采样时间间隔≤7 d时,两种检测方法对2019-nCoV IgG检测结果差异有统计学意义(χ²=5.55,P=0.02),ELISA检出率(26.47%)高于胶体金法(5.71%)。通过对比不同发病-采样间隔发现,无论是ELISA法还是胶体金法,在一定时间内,间隔时间越长,2019-nCoV IgM和IgG检出率越高。以核酸检测结果为金标准,检测 IgG和IgM时,ELISA法和胶体金法的灵敏度、特异度、阳性预测值和阴性预测值差异均无统计学意义。结论 ELISA法与胶体金法检验效能相当,两者特异度高,但灵敏度上都存在局限性,不建议用于筛查,可以作为确诊的补充诊断手段或应用于聚集性疫情溯源。     

大肠菌群纸片法与发酵法检测食具的结果比较

目的探索大肠菌群纸片法与培养发酵法检测食具消毒的效果。方法 GB14934-94《食(饮)具消毒卫生标准》[1]中大肠菌群的检测提供了纸片法和发酵法两种检测方法。结果用国家标准判定大肠菌群指标,纸片法合格率为60.8%,发酵法合格率为62.4%,检测结果两法合格率差异无统计学意义,总符合率为93.6%。结论两种方法检测结果差异无统计学意义,但发酵法方法繁琐,用时较长,不适应快速检测的需要,而纸片法具有操作简便,基本不需要试剂,能够提高检测效率等优点。     

SN标准和3M Petrifilm法检测水产品卫生指标菌的比较

目的：探讨3M Petrifilm检测纸片法能否代替SN标准应用于出口水产品的检测。方法：采用SN标准和3M Petrifilm法同时对随机挑选的出口水产品样品进行细菌总数、大肠菌群和大肠杆菌的检测比对。结果：用两种方法检测水产品的细菌总数结果无显著性差异，而两种方法检测水产品的大肠菌群检出率有显著差异，大肠杆菌检出率有极显著差异。结论：3M Petrifilm法具有快速简便的优点，但检测成本高，检测大肠菌群、大肠杆菌的灵敏度不够。     

乐山市应用线性探针法快速检测耐药结核病研究

目的评价线性探针法在四川省乐山市结核耐药性检测中的应用效果。方法收集2017-04/2019-02乐山各县区疾控中心结核病实验室痰培养获得的270株结核菌株作为研究对象,同时采用线性探针法和标准方法比例法检测结核分枝杆菌对异烟肼和利福平的耐药情况,采用一致性检验和χ2检验进行分析,计算Kappa值评价线性探针法和比例法结果的一致性,以P0.05为差异具有统计学意义。结果 270株结核菌株标本中,使用线性探针法检测异烟肼耐药性的灵敏度为84.00%,特异度为97.54%,阳性预测值为77.78%,阴性预测值为98.35%,Kappa值为0.79;对利福平耐药性的灵敏度为95.83%,特异度为96.34%,阳性预测值为71.88%,阴性预测值为99.58%,Kappa值为0.80;对耐多药结核的灵敏度为80.00%,特异度为98.03%,阳性预测值为80.00%,阴性预测值为98.81%,Kappa值为0.73。与标准方法比例法相比,两者具有高度的一致性。结论线性探针法具有高度的特异性和敏感性,且高效、快速,能有效的弥补标准方法的不足,为乐山市耐药结核病的早发现、早治疗提供了有力的保障。     

Carba plus纸片法检测肠杆菌科细菌碳青霉烯酶的性能评估

目的评估Carba plus纸片法检测碳青霉烯酶类型的能力和临床价值。方法收集陆军军医大学大坪医院2017年1月-2017年12月临床分离的77株耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌(carbapenem-resistant Enterobacteriaceae,CRE)为实验组,同时选取84株碳青霉烯敏感肠杆菌科细菌(carbapenem-sensitive Enterobacteriaceae,CSE)作为对照组,所有菌株进行耐药基因检测和Carba plus纸片法检测,以耐药基因检测结果作为碳青霉烯酶类型的金标准,同时对Carba plus纸片法检测碳青霉烯酶类型的相关性能指标进行统计分析。结果 77株CRE中经耐药基因序列分析结果KPC阳性51株,MBL阳性22株,OXA-48阳性4株。Carba plus纸片法检测结果KPC阳性42株,MBL阳性26株,OXA-48阳性5株,其余4株未检测出产酶基因型。Carba plus纸片法预测KPC酶的灵敏度为82.3%,特异度为100.0%,阳性预测值为100.0%,阴性预测值为92.4%,准确度为94.4%;预测MBL酶阳性的灵敏度为100.0%,特异度为97.1%,阳性预测值为84.6%,阴性预测值为100.0%,准确度为97.5%;预测产OXA-48酶的灵敏度为100.0%,特异度为99.4%,阳性预测值为80.0%,阴性预测值为100.0%,准确度为99.4%。结论 Carba plus纸片法对CRE菌株产酶类型可进行快速、准确、便捷地鉴定,在基层微生物实验室有很大的发展前景,可作为表型确认试验和耐药监测的一种主要手段。     

基于cDNA-AFLP检测不明RNA病毒方法学研究

目的建立cDNA扩增限制片段长度多态性技术(cDNA-AFLP)方法,提高少发或新发病病原体检测灵敏度,为应对可能发生的突发公共卫生事件提供技术储备。方法参考相关文献,分3部分建立cDNA-AFLP方法,包括:标本前处理;两步RT-PCR制备cDNA;cDNA多态长度片段扩增。以Real-time PCR方法为金标准,评价cDNA-AFLP检测乙型流感病毒和EV71的灵敏度与特异度。结果 7件Real-time PCR检测乙型流感病毒阳性标本,2件经cDNA-AFLP检测阳性,灵敏度为28.57%,特异度为100.00%。7件Real-time PCR检测EV71阳性标本,3件经cDNA-AFLP检测阳性,cDNA-AFLP灵敏度为42.86%,特异度为100.00%。结论 cDNA-AFLP能有效检测不明RNA病毒,其灵敏度受标本内病毒载量影响,对CT值小于25的标本检出率较高。该方法不需要特异引物,不需要新投入大型仪器设备,覆盖病原体类别广,成本低,应该成为常规传染病监测项目的必要补充。     

生活饮用水总大肠菌群两种不同检验方法对比研究

目的:探讨生活饮用水总大肠菌群纸片法与多管发酵法两种不同检验方法的操作过程及不同时段的检验效果。方法:从2017年1月-2018年1月收集的生活饮用水标本中选出80份,开展水总大肠菌群实验,将其分为不同检验方法的两组,分别为观察组40份和对照组40份,观察组采用多管发酵法检验,对照组采用纸片法检验,比较两种检测方法应用下2018年1月总大肠杆菌的检出率以及2018年6月总大肠杆菌的检出率。结果:在2018年1月进行的检验中,采用纸片法检验的对照组标本检出阳性29例,检出率为72.5%,低于采用多管发酵法检验的观察组标本的37例和检出率的92.5%,P0.05。在2018年6月的检验中,观察组标本检验阳性为32例,检出率为80%,依旧高于对照组标本的22例和55%,P0.05。结论:针对生活饮用水开展的检验总大肠菌群的实验中,采用多管发酵法进行检验,其检出率明显比采用纸片法检验的检出率更好,能够提高检验结果的准确性与科学性,更能确保生活饮用水的安全,值得在实验室检验工作中广泛应用。     

酶底物法检测生活饮用水中大肠菌群的探讨

目的对酶底物法检测生活饮用水中大肠菌群的方法和结果进行探讨。方法用51孔和97孔定量盘共检测生活饮用水196份,其中出厂水112份,末梢水84份,检测项目为总大肠菌群、耐热大肠菌群、大肠埃希菌。结果 196份水样用51孔定量盘检测的合格率为33.7%,97孔定量盘检测的合格率为31.6%,对2种定量盘检测合格率进行χ2检验,差异无统计学意义;对51孔和97孔定量盘检测的总大肠菌群、耐热大肠菌群和大肠埃希菌合格率分别进行了χ2检验,差异无统计学意义;对51孔和97孔定量盘阳性结果 MPN值在1~200.5的总大肠菌群、耐热大肠菌群和大肠埃希菌进行配对t检验,差异有统计学意义;对大肠埃希菌在36.5℃和44.5℃2种温度下得到的MPN值进行配对t检验,差异无统计学意义。结论 51孔和97孔定量盘在对水活饮用水定性检测上没有差异,结果是等效的;97孔定量盘有更好的定量范围和灵敏度,适用于生活饮用水大肠菌群MPN法检测;酶底物法在36.5℃和44.5℃检测大肠埃希菌的结果没有差异。     

大肠菌群纸片法在食具消毒效果检测中应用的探讨

大肠菌群检测一般采用多管发酵标准方法测定^[1]。自1985年Forg建立了纸片法^[2]，因其具有快速，简便等优点已在食具消毒效果中广泛应用，但有时纸片结果会模糊不清，不易判断。为了提高其检测结果的准确性以便在实际工作中更好的利用方法，本实验对大肠菌群纸片法与常规发酵法在食具消毒效果中进行比较试验。结果表明，对出现可疑结果的纸片放入乳糖胆盐培养液中再按常规发酵法的程序进行大肠菌群检测。可提高纸片法的灵敏度。增加与常规发酵法的阳性符合率。     

液体饮品大肠菌群纸片法检测效果评价

[目的]观察纸片法对液体饮品大肠菌群的检测效果,评价其在实际检测工作中的应用价值.[方法]以国标试管发酵法为对照,对各种液体饮品检样进行大肠菌群平行检测,比较两法反应结果.[结果]纸片法检测液体饮品中大肠菌群与试管发酵法结果符合率为94.44%,其差异无统计学意义(P＞0.05).[结论]纸片法作为简便易行的新方法可用于检测液体饮品中大肠菌群.     

基因芯片法检测宁波地区结核分枝杆菌耐药性的研究

目的评价基因芯片法检测结核分枝杆菌(MTB)对利福平和异烟肼耐药性的效能。方法纳入痰液涂片阳性肺结核病患者278例,采用基因芯片法检测MTB对利福平和异烟肼的耐药性,对检测效能进行评价。结果基因芯片法检测涂阳肺结核患者利福平耐药性的灵敏度、特异度分别为68.18%、95.73%,与液体培养法差异无统计学意义(P>0.05),检测灵敏度随着涂阳等级差异无统计学意义(χ²_趋势=3.39,P=0.066)。检测异烟肼耐药性的灵敏度、特异度分别为45.45%、99.00%,与液体培养法差异有统计学意义(P<0.05),特别是≤3+涂阳等级的患者。检测耐多药的灵敏度、特异度分别为57.50%、97.48%,与液体培养法差异有统计学意义(χ²=4.35,P=0.035)。结论基因芯片法检测涂阳肺结核患者利福平耐药性的真实性和可靠性较好,但对异烟肼耐药性和耐多药的效果不佳,特别是涂片阳性等级较低者容易发生漏检。     

巢式PCR与ELISA筛查HCMV病原感染的比较研究

目的:评估巢氏-PCR和ELISA在巨细胞病毒(HCMV)感染筛查诊断中的价值。方法:以巢式PCR检测新生儿HCMV-DNA为标准,评估ELISA方法检测HCMV-IgG和IgM的诊断价值。结果:采用巢氏PCR方法,患病新生儿HC-MV-DNA检出率为63.900%。以巢式PCR为标准,ELISA-IgM法检测HCMV的灵敏度为3.030%,特异度为100.000%,阳性预测值为100.000%,阴性预测值为29.670%;ELISA-IgG法检测HCMV的灵敏度为36.620%,特异度为42.110%,阳性预测值为70.270%,阴性预测值为15.090%。结论:巢式PCR是筛检HCMV感染的灵敏方法,目前市场上ELISA试剂盒的灵敏度有待提高。     

四格表资料多种χ~2检验准确性比较

[目的]对四格表资料几种χ2检验准确性进行分析,为教学和科研选择检验方法提供科学依据。[方法]用Basie语言编制计算程序,随机抽取检验样本含量,用计算机同时计算Pearsonχ2检验,Yates校正χ2检验,新校正法χ2检验的χ2值和概率以及Fisher精确计算概率,以Fisher精确计算根率法为金标准,分别计算各法的灵敏度、特异度、正确判断指数,判断符合率以及误判率(第Ⅰ类误差的概率)和漏判率(第Ⅱ类误差的概率)。[结果]Pearsonχ2检验灵敏度较高,而特异度最低(63.30%),准确判断指数较低(0.626),误判率(第Ⅰ类误差)较高(36.70%)。Yates连续校正准确判断指数也较低(0.716),误判率(第Ⅰ类误差概率)和漏判率(第Ⅱ类误差概率)都比较高,分别为17.02%和11.39%,新校正法灵敏度和特异度分别为99.38%和96.28%,准确判断指数为0.9576(95.76%),判断符合率为98.60%,误判率(第Ⅰ类误差概率)和漏判率(第Ⅱ类误差的概率)分别为3.32%和0.62%。[结论]新校正法χ2检验灵敏度、特异度、正确判断指数及判断符合率都比较高,第Ⅰ类误差和第Ⅱ类误差的概率最小,判断稳定性好。新校正法是四格表资料最好的检验方法。     

细胞DNA定量分析技术在宫颈癌筛查中的应用

目的探讨细胞DNA定量分析技术在宫颈癌筛查中的应用。方法选取2013年1月—2015年12月本院收治有活检结果的628例患者。所有患者分别采用液基细胞学检查和细胞DNA定量分析技术进行阴道镜活检,并以病理结果为金标准,进行灵敏度和特异度的计算。计量资料比较采用t检验,计数资料比较采用χ~2检验,P0.05为差异有统计学意义。结果液基细胞学检查技术的灵敏度为76.92%(110/143),特异度为88.04%(427/485);细胞DNA定量分析技术的灵敏度为79.02%(113/143),特异度为92.99%(451/485)。细胞DNA定量分析技术的灵敏度高于液基细胞学检查技术,但差异无统计学意义(χ~2=0.183,P0.05);不同检测方法的特异度比较,差异有统计学意义(χ~2=6.917,P0.05)。结论细胞DNA定量分析技术在宫颈癌筛查中效果显著,灵敏度高,特异度好,适用于宫颈癌疾病的早期检查。     

基因芯片技术在雅安市结核分枝杆菌耐药检测中的应用

目的评价基因芯片技术在雅安市结核分枝杆菌耐药检测工作中的应用价值。方法收集2016-06/2018-11雅安市结核病可疑患者痰培养分离株190株进行基因芯片菌种鉴定、耐药检测和比例法药敏试验。以比例法药物敏感试验为金标准,分析基因芯片技术检测结核分枝杆菌对利福平、异烟肼和耐多药诊断的敏感度、特异度、正确指数。采用McNemar检验比较两方法有无差异;采用Kappa检验比较两方法的一致性。两方法有差异的部分样本用基因测序的方法进行比对。结果基因芯片技术进行菌种鉴定,190株分离株中,有186株为结核分枝杆菌,4株为非结核分枝杆菌。以传统比例法药敏试验为金标准,186株结核分枝杆菌对利福平检测的敏感度和特异度为90.0%和96.6%,正确指数为0.866;对异烟肼检测的敏感度和特异度分别为89.5%和99.4%,正确指数为0.889;对耐多药的敏感度和特异度分别75.0%和99.4%,正确指数0.744。两种检测方法比较差异均无统计学意义(McNemar检验,P值分别为0.125、1.000和1.000)。两种检测方法具有较高的一致性(Kappa值分别为0.701、0.910、0.792)。基因芯片技术检测利福平耐药相关rpoB基因突变率最高的位点为531;异烟肼耐药相关katG基因主要突变位点为315。结论基因芯片技术与比例法药敏试验具有较好的一致性,灵敏度高、特异性好,是一种值得推广的耐药结核病诊断方法,在地市级结核病检测中具有重要的应用价值。