对钒酸氧化法测定血清中胆红素的评价

目的 :评价钒酸氧化法测定血清中总胆红素和直接胆红素。方法 :钒酸氧化法的精密度、准确度实验及其重氮法相关和干扰因素实验。结果 :批内 CV总、直接胆红素分别为 0 .8%与 1 .3%。日间 CV为1 .8%与 1 .7% ,平均回收总胆红素为 1 0 1 .1 % ,直接胆红素 1 0 0 .1 %。与重氮试剂法相关 ( J- G法 )总胆为 Y(本法 ) =1 .0 1 5X(重氮法 ) - 0 .1 1 9,r=0 .998,直接胆红素为 Y(本法 ) =1 .1 0 1 x(重氮法 ) 0 .81 ,r=0 .952。相关良好 ,血红蛋白浓度和脂血分别高达 3g/L和 9.0 mmol/L不干扰。结论 :该法简单、快速、稳定 ,而且对溶血、乳糜等干扰因素的影响比重氮法小     

钒酸氧化法测定血清胆红素的实验评价

目的对钒酸氧化法测定血清胆红素进行方法学评价。方法收集40例高、中、低浓度的血清样本进行钒酸氧化法与重氮法的比对,分析钒酸氧化法的精密度、灵敏度、稳定性并做干扰实验。结果钒酸氧化法测定血清总胆红素（TBil）批内变异系数（CV）为1．58％,批间CV为2．94％;血清直接胆红素（DBil）批内CV为1．23％,批间CV为2．7％;平均回收率TBil为101．1％,DBil为100．1％。维生素C（Vit C）≤0．5g/L时对钒酸氧化法和重氮法均无干扰,三酰甘油≤6mmol／L时对钒酸氧化法无干扰,对重氮法有明显干扰。血红蛋白浓度≤8g/L时对钒酸氧化法无干扰,对重氮法有较大干扰。结论钒酸氧化法测定TBil和DBil是较理想的方法。     

钒酸氧化法测定血清总胆红素、直接胆红素的方法学评价

目的 :WAKO钒酸氧化法与改良J -G法测定胆红素的方法学比较。方法 :采用WAKO钒酸氧化法胆红素测定试剂盒同时测定血清中的总胆红素、直接胆红素 ,与改良J -G法测定胆红素的方法进行了比较 ,并对钒酸氧化法的重复性试验、线性试验、干扰试验、回收试验进行了评价。结果 :钒酸氧化法(Y)与改良J-G法 (X)有很好的相关性 (总胆红素 :Y =0 992 6X 2 2 344,r =0 9991 ;直接胆红素 :Y =0 9968X 1 1 694,r=0 9982 ) ;测定总胆红素的线性可达 684μmol/L ,直接胆红素的线性可达342 μmol/L ;测定总胆红素天内重复性变异平均为 1 1 7% ,天间重复性变异平均为 1 88% ,直接胆红素天内重复性变异平均为 1 88% ,天间重复性变异平均为 2 76% ;溶血、脂浊、维生素C对测定表现为较微的干扰。总胆红素的回收率平均为 98 7% ,直接胆红素的回收率平均为 1 0 2 0 %。结论 :钒酸氧化法是一准确、灵敏的、适用于实际工作的测定胆红素的方法。     

钒酸盐氧化法测定血清总胆红素、直接胆红素的方法评价

目的 对钒酸盐氧化法测定血清总、直接胆红素进行方法学评价。方法 采用钒酸盐氧化法测定血清总、直接胆红素，与重氮法测定血清总、直接胆红素进行了比较。结果 钒酸盐氧化法（Y）与重氮法（X）相关性良好，相关方程：YTBIL=1.184XTBIL-1.29(r=0.9954),YDBIL=0.982XDBIL 1.43(r=0.9947)；总胆红素批内、批间平均变异系数分别为1.67%、3．02%,平均回收率达98．3％，在0－628μmol/L范围内线性良好。直接胆红素批内、批间平均变异系数分别为1．72％、3．28％，平均回收率达97．6％，在0．229μmol/L范围内线性良好。标本中甘油三酯含量≤5mmol/L、维生素C含量≤0.5g/L时，对钒酸盐氧化法测定总、直接胆红素均无干扰，但对重氮法有明显干扰；血红蛋白对钒酸盐氧化法和重氮法测定总、直接胆红素均产生正干扰。结论 钒酸盐氧化法是一种准确、灵敏、特异性较重氮法高的方法，适用于常规自动化测定血清总、直接胆红素，但在抗血红蛋白干扰方面有待改进。     

钒酸盐氧化法测定血清总胆红素、直接胆红素的方法评价

目的对钒酸盐氧化法测定血清总、直接胆红素进行方法学评价.方法采用钒酸盐氧化法测定血清总、直接胆红素,与重氮法测定血清总、直接胆红素进行了比较.结果钒酸盐氧化法(Y)与重氮法(X)相关性良好,相关方程:YTBIL=1.184XTBIL-1.29(r=0.9954),YDBIL=0.982XDBIL+1.43(r=0.9947);总胆红素批内、批间平均变异系数分别为1.67%、3.02%,平均回收率达98.3%,在0～628μmol/L范围内线性良好.直接胆红素批内、批间平均变异系数分别为1.72%、3.28%,平均回收率达97.6%,在0～229μmol/L范围内线性良好.标本中甘油三酯含量≤5mmol/L、维生素C含量≤0.5g/L时,对钒酸盐氧化法测定总、直接胆红素均无干扰,但对重氮法有明显干扰;血红蛋白对钒酸盐氧化法和重氮法测定总、直接胆红素均产生正干扰.结论钒酸盐氧化法是一种准确、灵敏、特异性较重氮法高的方法,适用于常规自动化测定血清总、直接胆红素,但在抗血红蛋白干扰方面有待改进.     

国产化学氧化法(综合氧化剂)测胆红素试剂盒的质量评估

目的 评价化学氧化法（综合氧化剂）测定血清中总胆红素和直接胆红素。方法 通过测定精密性、准确性、各种干扰和与钒酸试剂法的相关试验。结果 总、直胆精密度分别为批内CV1．01％与3．24％，日间CV为1．58％与2．31％；平均回收率总胆为100．8％，直胆为104．5％，与日本钒酸氧化法共测40例相关性为：总胆Y（综）＝1．05X（钒）－2．53，r=0.9992;直胆Y（综）＝1．19X（钒）－4．56，r=0.9985。Hb浓度＜300mg/dl，脂血在Intralipos指数5以下不受干扰。结论 该法简单、快速、稳定、完全适应临床使用。     

血清结合胆红素酶法测定在自动生化分析仪上的应用

目的　建立酶法测定血清结合胆红素的全自动分析方法 ,并在肝胆疾病患者中临床应用。方法　通过试剂的合理组合 ,分析参数和操作程序的设定 ,建立结合胆红素 (CB)的全自动分析方法 ,同时对总胆红素进行自动化酶法测定。结果　酶法CB测定 :精密度 ,批内n =2 0 , x =6 .4 8μmol/L ,s=0 .11,CV =1.7%和n =2 0 , x =77.9μmol/L ,s=0 .4 2 ,CV =0 .5 3% ;批间n =10 , x =9.4 6 μmol/L ,s=0 .17,CV =1.83%和n =10 , x =5 9.7μmol/L ,s=1.4 3,CV =2 .39% ;线性范围至少可达 340 μmol/L ;比对实验 :与Beckman重氮法试剂 (在BeckmanCX7型生化分析仪上 )比较 ,Y(酶法 ) =0 .75 9X1- 2 .82、r =0 .991,与IagnosticumRT重氮法试剂 (日立 76 0 0 0 2 0型分析仪 )比较 ,Y =0 .84 1X2 - 4 .39、r=0 .96 3。临床研究显示 :与重氮法直接胆红素值相比 ,本法测定CB值能够更灵敏地反映黄疸患者的胆红素分泌功能。结论　建立的CB全自动分析方法具有良好的分析特性 ,可在临床推广应用。     

钒酸氧化法测定血清总胆红素的方法学评价

目的对钒酸氧化法、二氯苯胺法和改良J-G法测定血清胆红素进行方法学评价,探讨溶血、脂血对钒酸氧化法测定血清胆红素的干扰影响。方法用钒酸氧化法测定血清总胆红素,按NCCLS评价方案系统评价其重复性、回收率、线性范围和溶血、脂血对血清胆红素测定的干扰影响,并与二氯苯胺法和改良J-G法测定血清总胆红素结果进行比较。结果钒酸氧化法与二氯苯胺法和改良J-G法有良好的相关性(Y1=1.06X-0.32,r=0.94;Y2=0.93X 3.26,r=0.98);钒酸氧化法测定总胆红素的线性可达684μmol/L,批内变异为1.25%,日间变异为3.14%,回收率为102.5%;血红蛋白和甘油三酯浓度分别达6.0g/L和8.0mmol/L,无明显干扰。结论钒酸氧化法测定血清胆红素不仅简单、快速、稳定,而且线性范围宽,能抵抗溶血、脂血干扰,值得推广应用。     

三种常规方法检测血清胆红素结果的可比性和偏倚评估

目的本研究对三种常规方法(重氮法、钒酸盐法和干化学法)检测血清胆红素进行检测结果的可比性及偏倚评估分析,为实验室检测结果一致性及标准化提供实验数据支持。方法按照美国国家临床实验室标准委员会EP9-A文件方案,以重氮法为比对方法,钒酸盐法和干化学法为待评方法,分别对40例新鲜血清样本进行平行检测,并对检测结果进行线性回归分析、计算医学决定水平处的方法间预期偏倚,以临床化学检验常规项目分析质量指标(WS/T403-2012)允许总误差范围的1/2为判断标准,判断偏倚的临床可接受性。结果总胆红素检测钒酸盐法和干化学法与重氮法的回归方程分别为:y=0.913 4x+1.367 3,r2=0.998 7;y=0.975x+10.234,r2=0.996 5;该两种方法在医学决定值水平处(25、50和340μmol/L)与重氮法的预期偏倚分别为:-0.80、-2.96和-28.08以及-2.39、-6.70和-56.76。直接胆红素检测钒酸盐法与重氮法检测结果回归方程为:y=0.8274x+1.9252,r2=0.997 8;两种方法在医学决定值水平处(6、35.5μmol/L)的预期偏倚分别为:0.98和-4.21。结论总胆红素与直接胆红素不同方法间均具有良好的相关性(r2均大于0.95),但不同方法间的预期偏倚随医学决定值水平的增高显著增加。与重氮法检测结果相比,钒酸盐法检测总胆红素预期偏倚可接受;干化学法检测总胆红素与钒酸盐法检测直接胆红素结果则仅有较低医学决定值水平预期偏倚可接受。     

M蛋白在重氮法与钒酸氧化法检测胆红素中的影响初探

目的通过对M蛋白阳性病例用重氮法、钒酸氧化法、干化学法测定胆红素浓度,探讨M蛋白在重氮法与钒酸氧化法胆红素测定中的影响。方法收集安庆市立医院2015年8月~2017年6月247例M蛋白阳性患者血清,分为多发性骨髓瘤(MM)组与非MM组,收集M蛋白阴性患者血清为对照组。三组均采用干化学法、重氮法、钒酸氧化法测定胆红素。以干化学检测结果为标准,对各组重氮法和钒酸氧化法胆红素的检测结果进行比较。结果 MM组和非MM组的组内重氮法和钒酸氧化法总胆红素检测结果的差异有统计学意义(P0.05),而对照组的组内重氮法和钒酸氧化法总胆红素检测结果的差异无统计学意义(P0.05)。MM组与对照组的重氮法与干化学法总胆红素检测结果的差值比较有统计学意义(P0.05);非MM组与对照组重氮法与干化学法总胆红素检测结果的差值比较有统计学意义(P0.05);MM组与非MM组重氮法与干化学法胆红素检测结果的差值比较有统计学意义(P0.05)。MM组与对照组钒酸氧化法与干化学法总胆红素检测结果的差值比较有统计学意义(P0.05);非MM组与对照组钒酸氧化法与干化学法总胆红素检测结果的差值比较有统计学意义(P0.05);MM组与非MM组钒酸氧化法与干化学法总胆红素检测结果的差值比较无统计学意义(P0.05)。结论 M蛋白影响重氮法和钒酸氧化法总胆红素测定,MM患者与非MM患者的M蛋白对重氮法胆红素测定的影响程度不同。     

自制双试剂测定血清胆红素的探讨

目的；建立准确的自动生化分析测定血清胆红素的方法。方法：采用双试剂测定，以尿素咖啡因及Ｔｒｉｔｏｎ－Ｘ１００组成的加速剂作为第一试剂，重氮试剂为第二试剂测定总胆红素，以对氨基苯碘酸溶液为第一试剂，亚硝酸钠浓度为１．４５ｍｍｏｌ／Ｌ的重氮试剂为第二试剂测定直接胆红素。结果：总胆红素回收率为９９．８５％，批内艰０．８２％，批间ＣＶ为１．５４％，与咖啡因法比较ｒ＝０．９９９９。ｔ＝１．３２３，Ｐ〉０．２     

三种直接胆红素检测系统的性能评价

目的对钒酸盐氧化法、改良J-G法和3,5-二氯苯重氮四氟硼酸盐法（3,5-DCB-4FB）检测直接胆红素（DBil）进行性能评价,探讨3,5-DCB-4FB法是否适用于DBil检测。方法用钒酸氧化法、改良J-G法和3,5-DCB-4FB法分别测定血清DBil,探讨3种方法的精密度、线性、敏感性、抗干扰性和回收率。并分别与Doumas法（手工）进行比较。结果 3种方法平均精密度均在1%～5%之间;平均回收率为103.28%、99.04%、100.69%;线性范围（敏感性）为1.06～335.10μmol/L（1.06）、1.01～310.00μmol/L（1.01）、0.76～310.00μmol/L（0.76）。钒酸盐氧化法抗血红蛋白（Hb）干扰能力优于后2种方法;3种方法与Doumas法进行比较具有良好相关性（r2〉0.975）,医学决定水平处的系统误差（SE）分别为-9%、-7%、-1.1%。结论 3,5-DCB-4FB法具有良好的精密度、敏感性、抗干扰能力、线性范围和相关性,与改良J-G法具有很好的一致性。3,5-DCB-4FB法适用于临床常规检测。     

Colorimetric determination of potassium in whole blood, serum, and plasma

This spectrophotometric method for the direct determination of potassium in serum or plasma is based on the selective complexing of potassium by a specific macrocyclic polyether, with the subsequent formation of an ion-pair with a colored anion. The colored anion is extracted into an organic solvent, clarified by centrifugation, and then measured at 415 nm. The absorbance of the chromogen varies linearly with [K+] to at least 15 mmol/L. Results of this colorimetric method (y) correlate well with the results obtained by a flame-photometric method (y = 1.04x - 0.22, r = 0.97, n = 81), with CVs ranging from 2 to 4%. We observed no interferences from lipemia, added bilirubin, or various electrolytes. We also evaluated the use of this reagent in a new automated blood analyzer developed by Abbott, a two-dimensional centrifugal system (Clin Chem 31:1457-1463, 1985). Potassium determined with this system (y) correlated well with results by flame photometry: y = 1.02x + 0.02 (r = 0.94, n = 168). With this system one can use whole-blood specimens in measuring potassium.     

Evaluation of a radioimmunoassay for estradiol in unextracted serum

We describe the performance of a commercial (Steranti/EIR) RIA reagent kit for measuring 17 beta-estradiol directly in serum. Day-to-day precision data for control sera were as follows: mean = 102.8 ng/L, CV = 6.8%, n = 20; mean = 231.1 ng/L, CV = 5.3%, n = 21; mean = 747.7 ng/L, CV = 9.4%, n = 21. Analytical recovery of added estradiol from seven different serum pools from men, to which three different concentrations of estradiol had been added, was (mean +/- SD): 98.6 +/- 7.0% at 107.5 ng/L added; 98.8 +/- 4.7% at 322.5 ng/L added; 108.2 +/- 4.8% at 645 ng/L added. Overall recovery of estradiol in these experiments (mean +/- SD for 21 determinations) averaged 101.9 +/- 7.0%. Assay of 32 serum specimens from women by both the direct (y) and an extraction method (x) gave the following linear regression statistics: y = 1.12x - 1.3, r = 0.998, Sy/x = 30.2 ng/L, mean y = 438.2 ng/L, mean x = 391.4 ng/L. Hemoglobin, bilirubin, and moderate lipemia do not interfere. Sensitivity of the direct assay was 2.6 ng/L. Compared with the extraction assay, the direct estradiol assay has advantages of speed and simplicity.     

An assay for separating and quantifying four bilirubin fractions in untreated human serum using isocratic high-performance liquid chromatography

BACKGROUND: The quantification of serum bilirubin fractions has been widely performed with both the diazo-method and an enzymatic method; however, the accuracy of these methods has not been evaluated because quantitative fractional high-performance liquid chromatography (HPLC) reference methods have yet to be established. METHODS: Samples were analyzed using HPLC and Shodex Asahipak GS-320HQ columns. Human serum was subjected to HPLC using direct injection, then eluted with acetonitrile: 0.3 mol/l phosphate buffer (pH 6.5) containing 1% Brij 35 and 0.08% sodium ascorbate (30:70, v/v). RESULTS: Serum bilirubin was separated into 4 fractions; retention times of 9.24, 19.92, 24.07, 35.75 min were identified as delta bilirubin, bilirubin diglucuronide, bilirubin monoglucuronide, and unconjugated bilirubin, respectively. Mean recovery was 93.0%-99.2%. Total precision of peak retention time, height and area exhibited <4.26% variation. Detection range was 3.1 to 348 mg/l. Hemoglobin (6 g/l) and immunoglobins produced a small positive interference. beta-carotene (20 mg/l), vitamin-B2 (370 microg/l) and B(12) (9.5 microg/l) did not interfere with this analysis. Results (n=30) with this method were closely correlated to those by Adachi's HPLC method as r=0.9941 to 0.9960, slope=0.88 to 1.27, intercept=-3.2 to +4.9, for each fraction. CONCLUSIONS: Since this method was a precise quantitative HPLC method for serum bilirubin fractionation, it might be used to evaluate the accuracy and the characteristics of various routine methods for bilirubin measurement.     

应用国产血清胆红素钒酸盐氧化法试剂盒自建检测系统及其评价

目的比较分析上海科华钒酸盐氧化法测定血清总胆红素(TBil)、直接胆红素(DBil)试剂盒及配套校准品在Roche Modular及CL-7300全自动生化分析仪上建立的检测系统与Roche Modular可溯源的参考检测系统检测患者血清TBil、DBil结果间的可比性及临床可接受性。方法依据美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)EP9-A文件对3个自建检测系统与Roche Modular参考检测系统检测患者新鲜血清TBil、DBil浓度,并进行线性回归与相关及偏差分析。结果3个自建检测系统与Roche Modular参考检测系统的血清TBil、DBil检测结果具有较好的可比性,其相关系数(r)>0.99,平均相对偏差<15%;而各自建检测系统间血清TBil、DBil检测结果可比性明显优于与参考系统间的比较,平均相对偏差<6%,r=1.00。结论3个自建检测系统血清TBil、DBil检测结果与Roche Modular可溯源的参考检测系统相比可被临床接受,但具有一定系统负偏差,而此系统偏差主要与TBil、DBil测定方法有关,可能与校准品及仪器的选择无明显关系。在仪器上输入回归方程,结果可比性明显提高;Roche cfas可作为钒酸盐氧化法测定血清TBil、DBil的校准品。     

Enzymatic assay for conjugated bilirubin (Bc) in serum using bilirubin oxidase (BOD).

We described an automated enzymatic assay for conjugated bilirubin (Bc) in serum using the Iatro D-Bil kit, with bilirubin oxidase (EC 1.3.3.5 BOD) from Myrothecium species. The specificity of the enzyme in the Iatro D-Bil kit was examined by analyzing unconjugated bilirubin (Bu), delta bilirubin (Bdelta), and Bc with high-performance liquid chromatography (HPLC), before and after the enzymatic reaction using BOD. The within-assay coefficients of variation (CV) of this method were 0.58 to 5.00% (n = 20) at 1.4 to 155.8 micromol/L. Day-to-day Cvs ranged from 1.61 to 7.14% at 1.2 to 182.1 micromol/L. The analytical recovery was 96 to 101%. The presence of ascorbic acid, reduced glutathione, L-cysteine, uric acid, urea, creatinine, glucose, lipemic material, anticoagulants, hemoglobin, or human serum albumin did not affect this assay system. The correlation coefficient between values obtained with the Iatro D-Bil kit (y) and HPLC method as reference for conjugated fractions (x) was; r = 0.983, y = 0.952x + 8.851 micromol/L, Sy/x = 11.97 (n = 56). We studied serum Bc levels, not including Bu and Bdelta, in patients with hepatic diseases or autoimmune hemolytic anemia. Levels of Bc obtained by the proposed method changed more rapidly than did those of direct bilirubin (D-Bil) obtained by diazo-dye method during the course of the diseases.