大鼠脑缺血后APE/Ref-1蛋白表达对神经元凋亡的影响

目的 探讨脑缺血后无嘌呤／无嘧啶核酸内切酶／氧化还原因子1（APE／Ref－1）蛋白表达变化与神经元凋亡之间的关系。方法 采用双侧颈总动脉阻断＋全身低血压法建立大鼠脑缺血模型。动物分假手术组、手术后存活1，2，3d组。用免疫组织化学方法分析各组APE／Ref-1蛋白的表达；用TUNEL染色观察脑缺血后海马CA1区神经元凋亡的情况。结果 免疫组织化学显示假手术组神经元广泛表达APE／Ref-1蛋白。在脑缺血10min后第1天海马CA1区APE／Ref-1阳性细胞开始减少，第2天明显减少。该区TUNEL阳性细胞在缺血第2天出现，第3天表现明显。APE／Ref-1和TUNEL双重染色提示丧失了APE／Ref-1免疫活性的细胞转变为TUNEL阳性细胞。结论 短暂性脑缺血后海马CA1区神经元表达APE／Ref-1蛋白减少，这种变化早于神经元凋亡，提示APE／Ref-1蛋白减少和DNA修复功能下降可能与短暂性脑缺血后发生神经元凋亡有关。     

亚低温对大鼠局灶性脑缺血神经元细胞凋亡及调控基因Bcl-2、Bax表达的影响

目的：研究不同时程的亚低温治疗对鼠大脑中动脉闭塞（MCAO）模型的神经元细胞凋亡及Bcl-2,Bax基因表达的影响，方法：采用Longa线栓法制作MCAO模型，缺血3h后再灌注，缺血后即刻分别进行不同时程（1／2h,1h,3h)的亚低温治疗，再灌注后24h断头取脑，连续切片作TUNEL染色及Bcl-2,Bax免疫组化染色。结果：（1）与对照组的Bcl-2细胞阳性率相比，亚低湿3h组增加。（2）与对照组的Bax细胞阳性率相比，亚低温1h,3h组均降低。（3）凋亡细胞阳性率与Bcl-2／Bax的比值呈负相关关系。结论：（1）亚低温1h以上有抑制细胞凋亡作用。（2）Bcl-2/Bax的比值能影响细胞凋亡的发生。     

亚低温对大鼠短暂性脑缺血后APE／Ref-1表达、神经元凋亡的影响

目的　 (1 )探讨短暂性脑缺血后无嘌呤 /无嘧啶核酸内切酶 /氧化还原因子 - 1 (APE/ Ref- 1 )在海马 CA1区的变化过程。 (2 )探讨短暂性脑缺血后海马 CA1区发生的神经元凋亡情况。 (3)探讨 APE/ Ref- 1在海马 CA1区的变化及其与该区神经元凋亡的内在联系。 (4 )探讨采取亚低温干预措施后APE/ Ref- 1与神经元凋亡在短暂性脑缺血后海马 CA1区的变化。 (5 )探讨亚低温干预后 APE/ Ref- 1的变化在亚低温脑保护中的作用。　方法　采用大鼠短暂性脑缺血模型及亚低温方法 ,通过神经元尼氏体染色、TU NEL 染色、APE/ Ref- 1蛋白免疫组织化学染色、APE/ Ref- 1蛋白免疫组织化学与TU NEL双重染色等方法 ,观察短暂性脑缺血后海马 CA1区神经元存活、凋亡、APE/ Ref- 1蛋白表达情况及亚低温的影响。　结果　 (1 )与假手术组相比 ,常温缺血组脑海马CA1区神经元缺失远较亚低温缺血组多 (P<0 .0 1 )。 (2 )常温缺血组及亚低温缺血组脑海马 CA1区均存在神经元凋亡。亚低温缺血组神经元凋亡出现的时间比常温缺血组迟 ,且凋亡数较常温组少 (P<0 .0 1 )。 (3)假手术组海马 CA1区神经元广泛表达 APE/ Ref- 1蛋白 ,常温缺血组及亚低温缺血组缺血后 APE/ Ref- 1蛋白表达均有下降 ,亚低温缺血组APE/ Ref- 1蛋白表达下降程度较常     

迟发性神经元死亡与脑缺血时间窗

1972年Kerr［1］描述了一种不同于坏死的细胞死亡方式,即凋亡（apoptosis）。研究表明,凋亡在迟发性神经元死亡（delayedneuronaldeath,DND）与半暗带的发展中具有重要作用。1迟发性神经元死亡与凋亡1．1凋亡在DND中的作用Shizego等［2］应用蛋白合成酶抑制剂明显降低了DND的发生,首先提出凋亡参与这一变化。Bcilharz等［3］对发育中的脑组织一侧缺血缺氧中DND机制进行研究,发现缺血15分钟再灌流3天,DND区细胞出现典型凋亡改变。缺血60分钟再灌流10小时即有凋亡细胞出现,但皮质区缺血60分钟后再通10小时,仅表现为坏死特征。…     

亚低温对脑缺血后延迟性神经元坏死的影响

研究亚低温对脑缺血后民神经元迟发性坏死的影响。方法沙鼠全脑再灌注模，脑缺血时间１０ｍｉｎ。分段手术组，常温组，亚低温组。亚低温持续时间６ｈ，在缺血后第７ｄ时处死动物进行海马ＣＡ１区锥体细胞计数。     

亚低温对大鼠短暂性全脑缺血后APE/Ref-1表达、神经元凋亡的影响

[目的]通过大鼠短暂全脑缺血模型来探讨亚低温对大鼠脑缺血后APE/Ref-1(apurinic/apyrimidimic endo-nuclase/redox factor 1,无嘌呤/无嘧啶核酸内切酶/氧化还原因子-1)蛋白表达及缺血性神经元凋亡的影响,揭示亚低温的部分神经保护机制。[方法]采用"双侧颈总动脉夹闭+低血压法"建立大鼠短暂性全脑缺血模型。实验动物分假手术组、手术后常温存活1 d、2 d、3 d组及手术后亚低温存活1 d、2 d、3 d组。用免疫组化方法检测各组APE/Ref-1蛋白的表达;用TUNEL染色观察全脑缺血后海马CA1区神经元凋亡的情况。[结果]免疫组化显示假手术组神经元广泛表达APE/Ref-1蛋白。在10 min全脑缺血后的1 d时,海马CA1区APE/Ref-1阳性细胞开始减少,2 d时明显减少。该区TUNEL阳性细胞在缺血后2 d时出现,3 d时表现明显。亚低温缺血组APE/Ref-1蛋白表达下降程度较常温缺血组明显减轻(P<0.01)且时间推迟;神经元凋亡出现的时间亦比常温缺血组迟,且凋亡数较常温组少(P<0.01)。APE/Ref-1和TUNEL双重染色提示丧失了APE/Ref-1免疫活性的细胞转变为TUNEL阳性细胞。[结论]亚低温对缺血后神经元具有保护作用,其机制可能为抑制缺血后APE/Ref-1下降,及减少神经元凋亡。     

Hemin对全脑缺血大鼠海马迟发型神经元死亡的影响

目的观察Hemin对全脑缺血大鼠海马迟发型神经元死亡的影响。方法 24只雄性Wistar大鼠采用4血管闭塞法制造大鼠全脑缺血或再灌注模型,低、高剂量的Hemin于脑缺血后给药,硫堇染色下对海马CA1区锥体神经元的迟发型死亡（DND）进行评估。结果全脑缺血再灌组CA1区发生明显DND。低高剂量Hemin治疗组海马CA1区神经元DND与全脑缺血或再灌组相比未见明显改善（P〉0.05）。结论治疗性给予Hemin不能有效发挥对全脑缺血或再灌注大鼠海马的神经保护作用。     

脑缺血后海马迟发性神经元死亡的研究进展

海马CA1区神经元对缺血极为敏感,Kirino采用沙土鼠短暂性脑缺血模型率先发现CA1区神经元呈迟发性死亡.近年,各国学者对迟发性神经元死亡(delayed neuronal death,DND)进行了不懈地研究,海马神经元的迟发性死亡表现为坏死与凋亡共存现象.文章综述了引起迟发性神经元死亡的诸多因素,如胶质细胞过度活化增殖、细胞周期调控、线粒体损伤、自由基过度生成及兴奋性氨基酸扩散性抑制等.     

大鼠内侧隔区预损毁对海马迟发性神经元死亡的影响

目的：探讨乙酰胆碱（ACh)对短暂性全脑缺血再灌后海马迟发性神经元死亡（DND）的作用。方法：80只健康雄性Wistar大鼠随机分为5组。I组：手术对照组；Ⅱ组：单纯内侧隔区（MS）损毁组；Ⅲ组：单纯脑缺血再灌注组；Ⅳ组：MS假性损毁脑缺血再灌注组；Ⅴ组：MS预损毁脑缺血再灌注组，动物先行MS损毁，第15d再行血管阻断，使脑缺血20min，并于恢复灌注72h后处死，将脑采用常规石蜡包埋、切片，Nissle、HE和Tunel免疫组化染色，在光镜下观测计数海马的神经元数。结果：（1）DND细胞主要发生在各缺血再灌注组（Ⅲ，Ⅳ，Ⅴ组）的海马CA1区，其他各区未发现明显变化；（2）V组较Ⅲ，Ⅳ组DNA明显减轻，差异有统计学意义（P＜0．05）。结论：ACh参与短暂性全脑缺血再灌后海马CA1区迟发性神经元损伤过程，MS预损毁能使死亡细胞明显减少。     

短暂性脑缺血发作对脑缺血耐受影响的初步研究

目的 探讨短暂性脑缺血发作(TIA)与脑梗死间的相关性.方法 根据患者脑梗死前是否发生同侧TIA将所有研究对象分为TIA组和对照组,将2组人群脑梗死体积和临床神经功能缺损程度评分进行比较;同时观察TIA组患者TIA发作持续时间、发作次数等因索对脑梗死体积和临床神经功能缺损的影响.结果 先发TIA患者的脑梗死体积和临床神经功能缺损评分均显著低于对照组(P<0.05).结论 先发TIA有可能对后继脑梗死患者的脑细胞有一定的积极作用,并且脑梗死体积和临床神经功能缺损程度与特定的TIA发作持续时间、发作次数、同型半胱氨酸、超敏C反应蛋白显著相关.     

亚低温对大鼠局灶性脑缺血细胞凋亡的影响

目的　研究不同时程的亚低温治疗对大鼠大脑中动脉闭塞 -再灌注模型神经细胞凋亡的影响。方法　用Longa’s线栓法制作大脑中动脉闭塞 (MCAO)模型 ,缺血 3h后再灌注。缺血后即刻分别进行不同时程 (1/2h、1h、3h)的亚低温治疗 ,再灌注后 2 4h断头取脑 ,冠状切片作TUNEL染色。结果　①与假手术组的凋亡细胞阳性率相比 ,对照组增加 (P <0 .0 1) ;②与对照组的凋亡细胞阳性率相比 ,亚低温 1h、3h组降低 (分别为P <0 .0 5及P <0 .0 1)。结论　①细胞凋亡参与缺血性脑损伤的病理机制。②亚低温 1h以上有抑制细胞凋亡作用。     

尼卡地平对脑缺血再灌注后海马CA1区细胞凋亡的影响

目的　研究沙土鼠短暂性脑缺血再灌注后细胞凋亡及尼卡地平处理的影响。方法　实验动物随机分为正常组、假手术组、对照组、尼卡地平处理组。正常组不进行手术操作 ,不进行脑缺血 ;假手术组只进行手术操作 ,不进行脑缺血 ;对照组阻断双侧颈总动脉 15min造成完全性前脑缺血模型 ;尼卡地平处理组在脑缺血前 30min给予腹腔注射尼卡地平 2mg/kg。用TdT介导的原位末端标记 (TUNEL)法来检测死亡神经元的DNA片段。HE染色计数海马CA1区 1mm长度内正常的锥体细胞数。结果　 (1)缺血再灌注后 2～ 4d ,对照组海马CA1区正常锥体细胞数比假手术组明显减少 (P <0 .0 1)。 (2 )缺血再灌注后 2～ 4d ,尼卡地平处理组海马CA1区正常锥体细胞数明显比对照组多 (P <0 .0 1)。 (3)尼卡地平处理组明显减少缺血再灌注后海马CA1区细胞凋亡 (P <0 .0 1)。结论　完全性前脑缺血再灌注后存在细胞凋亡 ;尼卡地平可抑制脑缺血再灌注后海马CA1区细胞凋亡。     

硫酸镁联合亚低温治疗对大鼠局灶性脑缺血的保护作用

目的　探讨硫酸镁对SD大鼠局灶性脑缺血损伤的保护作用。方法　将 4 0只大鼠随机分成模型对照组、硫酸镁治疗组、亚低温治疗组、硫酸镁联合亚低温治疗组。采用线栓法建立大鼠局灶性脑缺血模型。通过计算大鼠神经功能缺陷评分 ,测量脑梗死体积 ,观察神经元超微结构改变 ,评定硫酸镁联合亚低温治疗作用。结果各治疗组大鼠神经功能评分及脑梗死体积均显著低于对照组 (P <0 0 5 ) ,联合治疗组大鼠明显低于对照组 (P<0 0 1) ;联合治疗组神经元超微结构改变轻微。结论　硫酸镁联合亚低温治疗对大鼠局灶脑缺血有明显保护作用     

亚低温对脑缺血后细胞凋亡及基因表达的影响

亚低温对缺血脑组织具有保护作用,其机制目前尚未阐明。脑缺血与细胞凋亡关系密切,可以引起神经元凋亡及其相关基因的表达。亚低温影响细胞凋亡过程,细胞凋亡过程受基因表达严格调控,目前已知凋亡相关基因多达数十种,其中对p53、Bcl-2、Bax以及caspase-3等研究较多。本文从亚低温对脑缺血后细胞凋亡及其相关基因表达的影响方面介绍了亚低温的研究进展。     

双氟甲基鸟氨酸抑制大鼠脑缺血后迟发性神经元死亡的研究

观察阻断脑血流１０ｍｉｎ后腹腔注射双氟甲基鸟氨酸（ＤＦＭＯ）大鼠海马ＣＡ１区域迟发性神经元死亡（ＤＮＤ）现象的变化。结果显示：ＤＦＭＯ对大鼠海马ＣＡ１区神经元有明显的保护作用，并且在一定范围内与ＤＦＭＯ的剂量有正相关关系。ＤＦＭＯ的上述作用只有在脑缺血后及时给药才能出现。实验还提示：多胺及其代谢限速酶鸟氨酸脱羧酶（ＯＤＣ）在ＤＮＤ的产生中具有一定作用。     

亚低温对大鼠视网膜缺血再灌注损伤保护作用的电镜观察

目的 观察亚低温对缺血再灌注大鼠视网膜超微结构的影响,了解亚低温对视网膜缺血再灌注损伤是否有保护作用。方法 ２４只ＳＤ大鼠随机分正常组、缺血再灌注组和亚低温缺血再灌注组,每组８只。采用提高眼压法造成视网膜缺血后,恢复眼压形成血流再灌注。用透射电镜观察各组视网膜的超微结构。结果 缺血再灌注视网膜损伤主要表现在视细胞和节细胞。视网膜视细胞外节膜盘肿胀,排列紊乱,部分膜盘脱落,椭圆体内部分线粒体肿胀,节细胞的胞浆淡而空,节细胞水肿明显,多数线粒体肿胀、空泡化,滑面内质网扩张,部分粗面内质网扩张、脱粒;少数节细胞胞膜破裂、胞浆流失。亚低温缺血再灌注视网膜的视细胞外节膜盘略见疏松,椭圆体内线粒体正常;节细胞胞膜完整,包浆内可见肿胀线粒体,但肿胀较轻,其他细胞器未见明显改变。结论 亚低温可减轻缺血再灌注视网膜病变程度,对视     

亚低温对大鼠局灶脑缺血皮质神经元p53蛋白表达及凋亡的影响

目的 观察亚低温对大鼠局灶脑缺血再灌注后皮质神经元p53蛋白表达及凋亡的影响，探讨亚低温脑保护机制。方法采用改良法建立成年SD大鼠大脑中动脉闭塞（MCA0）局灶脑缺血再灌注模型，缺血时间2h。将实验大鼠随机分成常温组和亚低温组，2组再随机分成2％氯化2，3，5-三苯四氮唑（TTC）组和凋亡组2个亚组。各亚组再分成假手术组，再灌注6，24，72h组。TTC染色检测脑梗死体积、TUNEL染色观察细胞凋亡、免疫组织化学染色观察p53蛋白的表达水平。结果 与常温组相比，亚低温组大鼠脑梗死体积小、缺血灶周围皮质神经细胞凋亡少、p53蛋白表达下降。结论亚低温神经保护机制涉及下调p53蛋白表达，从而抑制神经元凋亡．缩小大鼠脑梗死体积，减轻神经功能缺损体征。     

亚低温对脑梗死患者的脑保护作用研究

目的　观察亚低温对脑梗死患者血清NO、SOD及LPO含量的影响。方法　随机将脑梗死患者分为亚低温组和对照组各 2 0例 ,亚低温组在药物治疗的基础上加用亚低温治疗 ,对照组为单纯的药物治疗。二组均在治疗前及治疗后 2 1d进行神经功能缺损评分 ,并在第 1d、第 3d、第 7d测定血清NO、SOD及LPO含量变化。结果　治疗 2 1d后亚低温组神经功能明显低于对照组 (P<0 .0 1)。血清SOD明显升高 ,NO和LPO下降 (P <0 .0 1)。结论　亚低温治疗具有升高血清SOD和降低NO和LPO水平的作用 ,从而表明血清NO、SOD及LPO含量变化是亚低温发挥脑保护作用机制的重要途径之一。     

脑心通胶囊治疗短暂性脑缺血发作的临床研究

目的:观察脑心通胶囊对短暂性脑缺血发作的治疗效果。方法:将47例短暂性脑缺血发作患者随机分成脑心通治疗组27例和肠溶阿司匹林对照组20例,前者给予脑心通胶囊4粒,每日3次,后者给肠溶阿司匹林75mg,每日1次,两组疗程皆为30d。治疗后观察病人临床症状改善情况及血液流变学变化。结果:治疗组疗效优于对照组。结论:脑心通胶囊治疗短暂性脑缺血发作具有良好的效果。     

亚低温对鼠脑缺血ICAM-1表达的影响

目的观察亚低温对大鼠局灶性脑缺血ICAM-1表达的影响,探讨亚低温对脑缺血性损害的神经保护作用机制。方法采用穿线法阻断大鼠右侧大脑中动脉制作局灶性脑缺血动物模型,设实验组和对照组,分别置于冰毯机上和常温操作台上,使其肛温分别保持在(34±0．5)℃和(37±0．5)℃。12h后断头取脑,采用免疫组化方法检测缺血区ICAM-1阳性血管数目。结果实验组ICAM-1的表达较对照组下降。结论亚低温可降低大鼠局灶性脑缺血的ICAM-1表达,推测亚低温降低ICAM-1表达是亚低温减轻脑缺血性损害的神经保护作用机制之一。