胆碱能神经干细胞在阿尔茨海默病小鼠的移植研究

目的 观察胆碱能神经干细胞移植对阿尔茨海默病(AD)小鼠的治疗效果.方法 C57BL/6小鼠基底巨细胞核注射Ibotenic酸制成AD模型.4周后于额叶和顶叶皮质移植小鼠胚胎干细胞源性胆碱能神经干细胞.存移植术后12周,应用HE染色和且日碱乙酰转移酶-绿色荧光蛋白免疫双标染色观察神经干细胞存活和分化情况,以8方向迷宫试验评价小鼠近事记忆的改善程度.结果 胆碱能神经十细胞移植至AD小鼠顶叶和额叶皮质后主要分化为成熟胆碱能神经元,并移行和整合至移植区周围皮质,该区皮质β-淀粉样蛋白表达明显减少,且小鼠的近事记忆明显改善.结论 胆碱能神经十细胞移植可部分重建AD小鼠的胆碱能支配,改善近事记忆损害.     

成体神经干细胞和微环境

神经干细胞(neural stem cells,NSCs)是一种终身具有自我更新能力和多向分化能力的细胞,能分化产生神经系统的各类细胞。它具有以下特征:(1)可生成神经组织或来源于神经系统;(2)具有自我更新能力;(3)可通过不对称细胞分裂产生新的细胞[1]。目前已从胚胎及成年脑组织中分离、纯化出NSCs[2]。NSCs移植治疗能促进神经元的再生及脑组织的修复,重建神经网络,恢复已丧失的功能。然而,NSCs移植后,只有1%~3%的细胞长期存活。如果将这种现象简单归因于免疫排斥是不全面的,因为即使采用各种免疫移植药物,也不能显著延长细胞移植物的存活。同时,移…     

微环境信号与神经干细胞的定向诱导分化

重点阐述了胚胎神经干细胞在体内微环境及体外诱导条件下能够定向分化为多巴胺能神经元的可行性及神经干细胞移植治疗帕金森病亟待解决的问题。     

海马的病理改变与阿尔茨海默病

许多研究证据表明，在阿尔茨海默病（AD）发病初期及病程进展中，海马在形态结构，神经病理，神经生理，神经生化等方面发生一系列变化，因此，有理由相信，海马的各种变化很可能在AD的发病与发展中起着关键作用。本对AD患海马的影像学，神经病理学变化等方面的近期研究进展情况进行了综述，以期为AD的病因的探索以及AD的治疗开辟出一条有希望的途径。     

神经干细胞植入阿尔茨海默病鼠脑后的效果观察

神经干细胞移植治疗阿尔茨海默病鼠包括细胞替代治疗和基因治疗,神经干细胞移植阿尔茨海默病鼠脑后其组织形态学与行为学效应均可以得到不同程度的修复和改善。细胞替代治疗中,神经干细胞与神经营养因子联合移植效应优于单纯的神经干细胞移植,但目前对神经干细胞体内分化机制的不确定导致了神经干细胞移植治疗的盲目性,同时对影响其疗效的各种可能因素也缺乏比较研究。神经干细胞基因治疗具有细胞替代和基因治疗的双重作用,但尚处于研究的初期阶段,仍以NGF,BDNF,GDNF等单一营养因子基因修饰的神经干细胞移植治疗为主,且转基因神经干细胞移植入阿尔茨海默病鼠脑后外源基因表达效率、促分化、功能修复情况以及安全性的研究还很缺乏。目前神经干细胞移植治疗阿尔茨海默病鼠脑后的疗效检测技术手段比较单一,免疫组化方法与活体示踪技术的结合、形态学指标与功能学指标的综合检测是疗效检测的发展趋势。     

神经干细胞移植对阿尔茨海默病大鼠海马突触素表达和学习记忆能力的影响*

背景：前期实验已证实,移植入阿尔茨海默病大鼠脑内的神经干细胞能够存活、增殖,但其是否可替代损伤或坏死的神经细胞而重建神经通路,改善学习记忆能力尚不清楚。突触素是突触重建的重要标记之一。 目的：观察神经干细胞移植对阿尔茨海默病大鼠学习记忆能力及突触表达的影响。 方法：SD大鼠随机数字表法分为正常对照组、阿尔茨海默病模型组、2周移植组和4周移植组,除正常对照组外制备阿尔茨海默病模型。另取新生24 h SD大鼠海马齿状回分离、培养神经干细胞,经Hoechst33258标记后植入2周和4周移植组海马CA1区,行Y迷宫实验检测大鼠的学习记忆能力,然后取脑进行尼氏染色和突触素免疫组织化学染色。阿尔茨海默病模型组则以同样的方法、同样的位点注入等量无菌生理盐水。正常对照组不施以任何处理。 结果与结论：①2周和4周移植组海马CA1区细胞比阿尔茨海默病模型组增多,但仍少于正常对照组(P < 0.05),平均吸光度与正常对照组相比差异无显著性意义(P > 0.05)。②2周移植组和4周移植组大鼠海马结构内突触素吸光度值明显高于正常对照组和阿尔茨海默病模型组(P < 0.05)。③与阿尔茨海默病模型组相比,2周和4周移植组大鼠学习能力和记忆能力均显著增强,正确反应率明显提高(P < 0.05),而与正常对照组相比,差异无显著性意义(P > 0.05)。提示移植入脑内的神经干细胞可促进突触形成,改善学习记忆能力。     

阿尔茨海默病患者的临床病理研究

目的 探讨阿尔茨海默病(AD)患者的临床病理特点,研究神经胶质细胞(NGCS)在脑内的分布及其在AD病理机制中的作用。方法 对8例临床诊断的AD患者和5例非痴呆老人(ND)的大脑皮层以及海马和杏仁核分别进行Bielschowsky氏浸银染色和Holzer氏磷钼酸结晶紫染色,并对老年斑(SPs)神经纤维缠结(NFTs)以及NGCs进行定量对照研究。结果 ①AD患者上述部位可见大量的SPs及细胞内、外NFTs和神经纤维毡丝(NTs),其分布各有不同,ND大脑上述病理改变的程度远无AD患者严重。②AD患者脑内可见明显的以小胶质细胞和星形胶质细胞为主的胶质增生反应,NGCs主要分布在SPs附近甚至核心,其数量和突起均明显多于ND大脑。③NGCs的分布与SPs(而不是NFTs)的分布似乎关系更为密切。结论 AD患者大脑内存在广泛的以NGCs增生和活跃为特征的慢性炎症反应,NGCs可能在AD病理机制中起重要作用。     

神经干细胞移植治疗Alzheimer病

阿尔茨海默病是一种中枢神经系统进行性变性疾病,为痴呆的常见原因,其较明确的病理变化是前脑胆碱能投射系统胆碱能神经元变性、细胞数量减少。神经干细胞具有自我更新和多分化潜能属性,可分化成神经元、星形胶质细胞和少突胶质细胞。神经干细胞移植后可分化成胆碱能神经元,有潜力替代AD病程中丢失的细胞,从而达到治疗疾病的目的。     

复智散对阿尔茨海默病大鼠海马内源性神经干细胞增殖的影响

目的观察复智散（FZS）对Alzheimer病（AD）模型大鼠海马齿状回内源性神经干细胞增殖的影响。方法采用β淀粉样蛋白25—35（Aβ25—35）侧脑室注射制作AD大鼠模型。采用Morris水迷宫检测大鼠的学习记忆能力,免疫荧光检测大鼠海马5-溴脱氧尿嘧啶（BrdU）阳性细胞表达,免疫组化检测海马增殖细胞核抗原（PCNA）阳性细胞表达,并对海马齿状回下颗粒层、海马门、分子层分别进行BrdU、PCNA阳性细胞计数。结果与模型组比较,健康对照组、假手术组和FZS治疗组大鼠水迷宫实验中的平均逃避潜伏期缩短（P〈0．05）,齿状回颗粒细胞下层BrdU、PCNA阳性细胞数量明显增加（P〈0．05）,但后三组之间比较差异无统计学意义。结论FZS可促进AD模型大鼠海马齿状回内源性神经干细胞增殖。     

神经干细胞与雪旺细胞共移植后对阿尔茨海默病大鼠行为学及脑组织形态学的影响

目的探讨神经干细胞与雪旺细胞共移植后对阿尔茨海默病（AD）大鼠行为学及脑组织形态学的影响。方法建立AD大鼠模型,分别将神经干细胞、神经干细胞与雪旺细胞以及等量的生理盐水注入AD模型大鼠脑内。1个月后,与正常组一起进行morris水迷宫实验观察实验大鼠学习记忆能力的改变。35d后,处死实验鼠,通过HE染色观察各组实验鼠脑组织形态学改变。结果细胞移植后AD大鼠的学习记忆能力明显改善,与生理盐水对照组相比差异显著（P＜0．01）,具有统计学意义。共移植组表现最为明显,与正常组相比无明显差异（P＞0．05）。与生理盐水对照组相比神经干细胞移植后海马与额叶受损细胞的恢复明显减轻,以共移植组的改变尤为明显,其形态学表现接近于正常组。结论雪旺细胞与神经干细胞共移植后AD大鼠的学习记忆能力增强,脑组织病理改变减轻,学习记忆能力明显改善,对AD大鼠的治疗作用优于神经干细胞单独移植组。     

阿尔茨海默病神经病理标志物的研究进展

阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)是一种缓慢进展的原发性退行性脑变性疾病,多起病于老年期,潜隐起病,缓慢不可逆进展,临床上以认知损害为主.     

神经干细胞荷载溶瘤病毒靶向调控肿瘤微环境治疗脑胶质母细胞瘤

胶质母细胞瘤(GBM)是临床中最常见的颅内原发性恶性脑肿瘤,预后差、病死率高,目前缺乏有效的治疗手段。作为新型免疫治疗的溶瘤病毒(OV)具有特异性裂解肿瘤细胞的特点,并能够通过调节肿瘤微环境发挥抗肿瘤免疫反应。由于机体预先存在针对病毒的免疫力,OV在肿瘤组织的扩散能力及穿透性不佳等原因限制了其治疗效果。神经干细胞(NSCs)的肿瘤“归巢”特性及在脑实质内良好的迁移能力,可以作为OV的理想载体。临床前研究及Ⅰ期临床试验均表明NSCs荷载OV对GBM具有明显的治疗效果。文中对NSCs荷载OV靶向调控肿瘤微环境,达到治疗GBM的可能和挑战性进行文献学习。     

脑源性神经营养因子修饰的神经干细胞移植对阿尔茨海默病大鼠的学习及p75表达的影响

目的研究脑源性神经营养因子(BDNF)修饰的神经干细胞(NSC)移植对阿尔茨海默病大鼠的学习及p75表达的影响。方法 36只SD成年大鼠被选为受试对象。采用Aβ1-40立体定向注射法制作阿尔茨海默病模型(AD),并将AD模型大鼠随机分为3组:BDNF修饰的神经干细胞(BDNF-NSC)移植组、神经干细胞移(NSC)植组和溶剂(Vehicle)对照组(n=6),然后分别向这3组大鼠的海马区注入500μl的BDNF-NSC悬液(5×105)、NSC悬液(5×105)和相同剂量的不含细胞的培养基。注射4w后,采用Y迷宫方法检测AD大鼠的空间学习和记忆能力,随之用过量麻醉的方法处死受试大鼠,立即取脑并分别采用免疫组织化学方法检测BDNF-NSC在海马区的表达和Western blot法检测p75蛋白在海马区的表达。结果 BDNF-NSC组大鼠的行为学能力较NSC组和Vehi-cle组明显提高(P<0.05),同时免疫组化检测显示在海马区的BDNF-NSC阳性细胞数明显增多而Western blot检测显示p75蛋白在该区的表达显著降低(P<0.05)。结论 BDNF修饰的神经干细胞能够通过抑制海马区p75表达来防止由Aβ1-40造成的神经损害。     

胎鼠神经干细胞移植对阿尔茨海默病模型大鼠脑的保护作用

背景: 迄今为止阿尔茨海默病（AD）的发病机制尚不明了。没有任何药物可以阻止疾病的发展,这就需要人们发现新的方法来对其进行治疗。神经干细胞（NSCs）是具有自我再生能力的细胞。人们希望通过NSCs移植来治疗AD。我们的实验将对此进行研究。目标：通过实验对胎鼠NSCs移植对AD模型大鼠的保护效应进行研究。设计,时间及地点：体外培养、体内移植及蛋白质组学等实验均在吉林大学第一临床医院完成（时间2007.07-2009.03）。材料：细胞培养基及神经生长因子均来自sigma。方法：NSCs是从胎鼠海马中获得。通过切断双侧海马制备AD模型大鼠,此后2周,将NSCs移植入AD模型大鼠脑内进行试验。主要方法：通过蛋白质组学对不同实验组（正常组、移植组、模型组）海马的蛋白水平进行测定。同时应用原位杂交技术和免疫组织化学方法对实验鼠海马及额叶的胆碱乙酰转移酶（Chat）mRNA,胶质纤维酸性蛋白(GFAP)和S100β进行测定。结果：蛋白质组学方法发现,通过不同实验组间对比GFAP、热休克蛋白90(Hsps90)、热休克蛋白70(Hsps70)、丝状肌动蛋白(F-actin)及肌动蛋白(actin)等均发生改变。所有结果显示,与AD模型组大鼠相比ChatmRNA、 Hsps、 F-actin和Actin的表达在NSCs移植组均升高;而在相同区域GFAP和S100β的阳性细胞表达在NSCs移植组却相对减少。结论：我们的试验结果显示NSCs对损伤的海马产生重要的影响。     

EGF对神经干细胞迁移的影响

目的研究表皮生长因子(EGF)对神经干细胞迁移的影响。方法取孕13—14dSD大鼠胚胎纹状体行神经干细胞培养，7d后取悬浮神经球制成单细胞悬液再培养，EGF作用下连续培养14d后分为实验组和对照组，继续培养，观察：EGF对神经干细胞迁移的影响。结果原代培养的细胞球是神经干细胞，EGF传代培养14d时细胞球大小约100个细胞左右，实验组观察到第14d细胞球增殖变慢，细胞球长出突起与邻近的细胞球相接触，14—17d观察到神经干细胞迁移，17d后细胞迁移现象消失；对照组中未观察到细胞迁移。结论：EGF在某一特定时间内能够诱导神经干细胞迁移。     

肿瘤微环境对胶质瘤干细胞影响机制的研究进展

胶质瘤干细胞（GSCs）是具有干性特征和功能的胶质瘤细胞,近些年来受到广泛关注。与普通胶质瘤细胞相比,GSCs具有很强的成瘤、侵袭、化疗放疗抵抗能力,可能是导致转移和肿瘤复发的主要因素。随着研究不断深入,人们逐渐发现肿瘤微环境（TME）在GSCs的形成中发挥重要作用,并且TME能够促进GSCs表型的维持。该文将围绕TME对GSCs的影响和机制的前沿进展进行讨论;并详细介绍TME中缺氧、酸性、损伤相关分子模式（DAMP）如高迁移率族蛋白B1（HMGB1）以及外泌体对GSCs的具体作用及机制。     

尿沉渣指标对阿尔茨海默病相关神经丝蛋白检测水平的影响

目的 探讨不同性别人群尿常规指标对阿尔茨海默病相关神经丝蛋白（AD7c-NTP）检测水平的影响。方法 纳入 2021 年 7— 10 月在桂林医学院附属医院进行健康体检的 314 名受试者,采集尿液标本进行 AD7c-NTP 酶联免疫吸附剂测定,收集年龄、性别及尿沉渣检测指标数据,分析不同性别人群的尿沉渣指标对 AD7c-NTP 水平的影响。结果 不同红细胞、白细胞、上皮细胞、小圆上皮细胞、管型、类酵母菌、结晶水平的男性受试者尿液中的 AD7c-NTP 水平比较,差异无统计学意义（P＞ 0.05）;男性受试者低电导率、中电导率和高电导率之间的 AD7c-NTP 水平比较［（0.68（0.48,1.40））ng/ml 比 0.50（0.32,1.06）ng/ml 比 0.34（0.31,0.51）ng/ml］,差异有统计学意义（Z=-3.823,P＜ 0.05）。不同红细胞、白细胞、上皮细胞、小圆上皮细胞、管型、类酵母菌、电导率水平的女性受试者尿液中的 AD7c-NTP 水平比较,差异无统计学意义（P＞ 0.05）;高结晶水平的女性受试者尿液中的 AD7c-NTP 水平低于低结晶水平的女性受试者［0.51（0.33,0.62）ng/ml 比 0.65（0.42,1.18）ng/ml］,差异有统计学意义（Z=-2.331,P＜ 0.05）。结论 男性尿液电导率和女性尿液结晶可能对 AD7c-NTP 检测水平产生影响。     

神经干细胞移植对192-IgG-saporin阿尔茨海默病模型鼠基底前脑神经元p75NGFR阳性神经元和行为学的影响

神经干细胞能够在体外持续扩增,具有较强的增殖能力和较强的可塑性,能够在成年宿主中枢神经系统中存活、迁移、分化以及与宿主组织整合较好。 目的：分析神经干细胞移植对侧脑室注射192-IgG-saporin 老年性阿尔茨海默病模型鼠基底前脑神经元p75NGFR阳性神经元和行为学的影响。 方法：24只SD大鼠随机数字表法均分为3组：对照组、模型组、移植组。10只新生SD鼠(<24 h)用于神经干细胞分离培养。模型组及移植组192-IgG-saporin侧脑室注射SD大鼠建立阿尔茨海默病模型。造模后,移植组行基底前脑神经干细胞移植。4周后行Y迷宫检测,结合图像分析技术观察大鼠基底前脑p75NGFR阳性神经元数目和形态学参数的变化。 结果与结论：注射192-IgG-saporin 1个月,模型组损伤侧基底前脑内侧隔核和斜角带垂直支p75NGFR阳性神经元数明显减少(P < 0.01),移植组分别恢复到对照组的74.85%和71.66%,与模型组损伤侧相比较,差异显著(P < 0.01)。Y迷宫测试结果显示,移植组大鼠的空间学习能力和记忆能力有改善(P < 0.05),基底前脑p75NGFR阳性神经元细胞数与大鼠的空间学习记忆能力呈正相关。提示,神经干细胞移植对注射192-IgG-saporin致阿尔茨海默病鼠基底前脑胆碱能神经元有明显的补充和保护作用,可改善大鼠的学习记忆能力。     

积极开展神经干细胞的研究

干细胞的研究是当前生命科学的热点 ,《Ｓｃｉ ｅｎｃｅ》将干细胞研究评为 2 1世纪最重要的十项研究领域之首 ,为世人瞩目。正是因为干细胞的特殊科学意义及在医学上的应用前景 ,世界各国对此都投入了大量的人力、财力进行有关干细胞的研究及应用。美国国家健康研究院 (ＮＩＨ)于今年制定出干细胞研究指南 ,日本把干细胞研究列入“千年世纪工程”中的四个重点之一 ,英国议会通过了应用人胚胎进行干细胞研究的议案 ,我国国家科技部及自然科学基金委员会把“人干细胞的研究”做为2 0 0 1年《国家重点基础研究发展规划》的重要支持方向。干细…