抗人F蛋白单克隆抗体的制备和鉴定

Ｆ蛋白是存在于哺乳动物肝细胞质中的一种水溶性不稳定的单链蛋白质,相对分子质量（Ｍｒ）为４４０００。正常人肝组织中大约含Ｆ蛋白２７４ｍｇ／ｇ〔１,２〕,而血清中仅含０．２ｍｇ／Ｌ,提示血清Ｆ蛋白作为判断肝损伤程度的可能性。为对Ｆ蛋白进行深入研究,并提高对其检测的灵敏度,１９９５年以来,我们先后制备了３株抗人Ｆ蛋白的单克隆抗体（ｍＡｂ）,并进行了初步鉴定。１材料和方法１．１材料人Ｆ蛋白抗原的制备〔３〕：取肝外伤手术切除的新鲜肝组织５０ｇ,剪成约５ｍｍ３的组织碎块后,置于含有１ｇ／ＬＩＶ型胶原酶（Ｓｉｇｍａ）…     

抗人Fas单克隆抗体的制备及鉴定

Ｆａｓ／Ａｐｏ１／ＣＤ９５抗原的发现,始于对两株单克隆抗体（ｍＡｂ）的功能观察,即抗Ａｐｏ１ｍＡｂ和抗ＦａｓｍＡｂ〔１,２〕。由于二者都能识别细胞膜上ＣＤ９５蛋白抗原,且能诱导敏感细胞凋亡,才导致今天对Ｆａｓ抗原的生物医学研究。制备抗ＦａｓｍＡｂ对于Ｆａｓ抗原的深入研究,尤其是对Ｆａｓ抗原信号传导机制的阐明,以及生物医学应用都有重要的意义。本文利用Ｆａｓ＋的细胞作为免疫原,制备了１株鼠抗人ＦａｓｍＡｂ２Ａ１。１材料和方法１．１材料１．１．１细胞系Ｓｐ２／０小鼠骨髓瘤细胞、Ｊｕｒｋａｔ人Ｔ淋巴…     

抗人甲胎蛋白单克隆抗体的制备及鉴定

利用细胞融合技术建立了５株分泌抗人甲胎蛋白（ＡＦＰ）单克隆抗体（ＭｃＡｂ）的杂交瘤细胞株，快速酶联免疫分析法测得其亲和常数为５×１０７～２×１０９Ｍ－１之间；单抗的Ｉｇ亚类１Ｄ６和１Ｅ６为鼠ＩｇＧ２ａ（κ），３Ａ８、５Ａ７和７Ｈ１１为ＩｇＧ１（κ）。免疫组化中５株单抗均在肝癌细胞的胞浆显色，３Ａ８和１Ｄ６还能结合在肝癌细胞膜上。应用方阵配对实验初步证实，５株单抗至少针对ＡＦＰ分子上３个不同表位，并分析了单抗在ＥＬＩＳＡ反应中的特性。     

抗人NGF单克隆抗体的制备及初步鉴定

神经营养因子（　ｎｅｕｒｏｔｒｏｐｈｉｃ　ｆａｃｔｏｒｓ，　ＮＴＦｓ）是一类对中枢和外周神经系统均有营养活性的蛋白质，其主要功能是促进神经系统的发育，保护并修复受损神经元，以及促进生长和增进认知记忆过程中神经元之间的连结［］。神经生长因子（ｎｅｒｖｅ　ｇｒｏｗｔｈ　ｆａｃｔｏｒ，　ＮＧＦ）是发现最早、研究最多的一种ＮＴＦ。制备抗ＮＧＦ单克隆抗体（ｍＡｂ）可为研究其在体内组织中表达及分布提供一种工具，并可为基因工程制备ＮＧＦ提供检测方法。我们受澳大利亚Ｆｌｉｎｄｅｒ大学周兴福教授委托，研究制备了分…     

抗人gp130分子单克隆抗体的制备和鉴定

ｇｐ１３０可与许多细胞因子受体（ＩＬ－６Ｒ,ＩＬ－１１Ｒ,ＯＳＭＲ,ＬＩＦＲ,ＣＮＴＦＲ和ＣＴ－１Ｒ）组成受体复合物,并在这类细胞因子的信号转导中的起着重要的作用。方法以痘苗病毒为载体构建获得的可溶性ＣＤ１３０（ｓＣＤ１３０）为免疫原,通过融合的方法。得到４株稳定分泌抗ＣＤ１３０单克隆抗体（ｍＡｂ）Ｌ２,Ｌ４ａ,Ｌ４ｂ和Ｌ５）的杂交瘤细胞株。结果本组ｍＡｂ对靶细胞具有识别特异性,不但可识别相对分子     

抗重组人血管生长素单克隆抗体的制备及鉴定

制备不同类型抗重组人血管生长素的单克隆抗体,为进一步研究抗ｒｈＡＮＧ抗体对ＡＮＧ的中和作用以及对ＡＮＧ依赖型肿瘤的抑瘤实验打下基础。方法：利用杂交瘤技术以ｒｈＡＮＧ免疫Ｂａｌｂ／ｃ小鼠,制备二株,能够稳定分泌抗ｒｈＡＮＧ抗体的杂交,并对上清进行、双扩散,免疫印迹等鉴定。     

抗GST单克隆抗体的制备和鉴定

ＰＧＥＸ4Ｔ是原核表达系统中常用的表达载体,其表达产物为目的蛋白(肽段)与谷胱甘肽转硫酶(ＧＳＴ)所形成的融合蛋白。本文制备了抗ＧＳＴ的单克隆抗体(ｍＡｂ),为上述融合蛋白的辅助检测、鉴定和纯化奠定了基础。1　材料和方法11　ＧＳＴ抗原　利用基因重组技术制备的Ｇ...     

抗rhG-CSF单克隆抗体的制备和初步鉴定

<正> 粒细胞集落刺激因子(G-CSF)是一种造血调控因子,为鉴定、检测和纯化人G-CSF,制备了四株特异识别人G—CSF的单克隆抗体(单抗,McAb)。1 材料和方法1.1 rhG-CSF和rhG-CSF融合蛋白 均由本实验室克隆、表达和纯化。纯化后的样品经SDS—PAGE鉴定,纯度大于95％。1.2 单抗制备 以rhG-CSF融合蛋白为抗原,按常规方法制备单抗。1.3 单抗识别抗原表位鉴定试验 用15μg/ml的抗原包被检测板(50μl/孔),对杂交瘤细胞的培养上清及其系列倍比稀释液进行间接ELISA检测,找出使抗原饱含的各McAb的最大稀释度。     

小鼠抗天花粉蛋白单克隆抗体的制备和鉴定

<正> 天花粉蛋白Tian Hua Fen,THF或Trichosanthin Protein是从葫芦科植物栝楼根Trichosanthes Kirilowii Maxim中提取的有效引产成份,对所有滋养叶细胞来源的疾病也有治疗作用。近年来还发现该蛋白     

抗人CD100单克隆抗体的制备与初步鉴定

目的：研制可识别天然CD100分子的单克隆抗体（mAb)。方法：采用真核表达的CD100分子免疫BALB/c小鼠，以间接ELISA法筛选阳性杂交瘤，并分别用人急性T淋巴细胞性白血病细胞系MOLT-4，猿T淋巴细胞系MLA-144及猴EB病毒转化的B淋巴细胞系（BLCL），进行间接免疫荧光染色和流式细胞术鉴定mAb的特异性。结果：共获得7株可稳定分泌mAb的杂交瘤细胞株。所有mAb均可识别人和猴细胞系的膜表面天然CD100分子，其中6株可识别猿细胞系膜表面的天然CD100分子，结论：成功地制备了7株抗CD100分子的特异性mAb。为研究人和猿，猴CD100分子的结构与功能提供了新的手段。     

一株抗人血管内皮细胞单克隆抗体的制备与鉴定

一株抗人血管内皮细胞单克隆抗体的制备与鉴定赵永革高旭陈辉树刘会齐钱冠清（中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所，天津３０００２０）血管内皮细胞具有多种生理功能，参与机体的凝血、免疫、物质转运和生物学活性物质的释放等重要生命活动［１］。因为血管内...     

鼠抗人Fas单克隆抗体的制备及鉴定

采用Ｊｕｒｋａｔ细胞Ｂａｌｂ／ｃ小鼠制备１株抗人ＦａｓｍＡｂ２Ａ１,它能特异性识别Ｊｕｒｋａｔ,Ｒａｊｉ,ＴＨＰ－１细胞膜表面５０ＫＤ左右的蛋白,并能与ＳｒＦａｓ标准蛋白反应,其识别的细胞膜蛋白与单抗特异性抗人Ｆａｓ ＰｃＡｂＮ－１８相一致。ｌｅｑ     

抗TPO单克隆抗体的制备及初步鉴定

抗ＴＰＯ单克隆抗体的制备及初步鉴定徐荣佳，刘军权，方蕾，姚仁南，陈晓英，徐广奎，陈复兴甲状腺过氧化物酶（ＴＰＯ）现已证明是甲状腺微粒体（ＴＭ）的主要抗原成份［１］。国外就其分子已作了较为深入的研究，并重组了其分子和产生了单克隆抗体。它对研究甲状腺自身...     

抗人FKBP52分子单克隆抗体的制备和鉴定

目的；研制抗人FKBP52单克隆抗体（mAb)，并分析其免疫生物学特性。方法：采用纯化的人FKBP52蛋白免疫BALB／c小鼠。用ELISA法鉴定mAb的特异性；用Western blot鉴定制备的9株mAb所识别的抗原相对分子质量（Mr)及结合人FKBP52分子的功能区。结果：共获得9株分泌抗人FKBP52 mAb的杂交瘤细胞。抗人FKBP52 mAb可识别相对Mr为52000在原核系统中表达的人FKBP52蛋白，也可识别Jurkat细胞浆中Mr为52000的天然FKBP52蛋白。两株mAb均可识别人FKBP52分子中的第2功能区。其余7株mAb可识别人FKBP52分子中的第3功能区。结论：成功地制备了抗人FKBP52分子mAb。     

抗HBeAg单克隆抗体的制备及初步鉴定

为获得能替代抗ＨＢｅＡｇ多克隆酶标记抗体做ＥＬＩＳＡ,我们用纯化的ＨＢｅＡｇ阳性血清,免疫Ｂａ１ｂ／ｃ小鼠,采用杂交瘤技术,获得８株能稳定分泌小鼠抗ＨＢｅＡｇｍＡｂ的杂交瘤细胞。对其特性进行了初步鉴定,并就这些单克隆抗体（ｍＡｂ）在ＥＬＩＳＡ反应中的特性进行了分析。１　材料和方法１－１　材料　ｅ抗原阳性的人血清经亲和层析纯化的ＨＢｅＡｇ,由本室收集并纯化。Ｂａ１ｂ／ｃ小鼠,购自上海西普尔－必凯实验动物有限公司。小鼠Ｓｐ２／０骨髓瘤细胞,由中国科学院上海细胞生物学研究所提供。１－２　杂交瘤细胞株的…     

抗PAA合成肽单克隆抗体的制备与鉴定

抗ＰＡＡ合成肽单克隆抗体的制备与鉴定王振明吴轰（湖南医科大学附属第二医院中心实验室，长沙４１００１１）ＴＡＮＧＨｏｎｇ，ＪｉｎＳａｎ（ＺｙｍｅｄＬａｂ．ＩＮＣ，ｓｏｕｔｈｓａｎｆｒａｎｃｉｓｃｏ，ＣＡ９４０８０，ＵＳＡ）以组织病理形态学法，检测肿...     

抗红细胞生成素单克隆抗体的制备及初步鉴定

红细胞生成素（ｅｒｙｔｈｒｏｐｏｉｅｔｉｎ，ＥＰＯ）是一种主要由肾小管内皮细胞产生的酸性糖蛋白，正常人血浆和尿中含量甚微。ＥＰＯ的主要生理功能是通过刺激骨髓多能干细胞进入红细胞系，并促进其增殖、分化而调节外周血液中红细胞的数量。ＥＰＯ用于治疗慢性肾衰...     

抗CD34单克隆抗体HI273的制备和鉴定

ＣＤ３４抗原可选择性地表达于不成熟的造血干／祖细胞、血管内皮细胞和一些组织的成纤维细胞上。这一发现 ,不仅有利地促进了对造血干／祖细胞识别、发育、增殖和分化的研究 ,而且大大推动了临床上应用ＣＤ３４ 细胞回输体内治疗某些血液病和恶性肿瘤的开展。目前 ,抗ＣＤ３４ｍＡｂ已成为研究造血调控、识别、分离富集造血干／祖细胞 ,以及分析白血病细胞表型的非常有用的工具。国际上 ,经ＨＬＤＡ命名的抗ＣＤ３４ｍＡｂ近４０株〔１ ,２〕。国内仅于１９９５年见舒翠玲等〔３〕报道的用表达ＣＤ３４抗原的重组痘苗病毒为抗原 ,制备的４…