用酶联免疫吸附试验评价不同华支睾吸虫成虫抗原在免疫诊断中的价值

用硫酸铵分段沉淀法将华支睾吸虫成虫粗抗原分离成为四种成分。以五种抗原制品(一种粗抗原制品和四种部分提纯抗原制品A、B、C和D)作为抗原,用微量酶联吸附试验(ELISA)检测华支睾吸虫病患者血清中相应抗体的存在。实验表明在五种抗原制品中,以抗原A在诊断华支睾吸虫病方面具有最高的阳性率,患者血清与正常人血清OD值的比值也最高。     

华支睾吸虫抗原定位,生化及免疫学特性初步分析

本文在制备了华支睾吸虫全虫粗抗原（ＣｓＡｇ）、代谢抗原（ＥｓＡｇ）、表膜抗原（ＭＡｇ）及其相应抗血清的基础上，应用石蜡和冰冻两种连续组织切片、ＩＦＡＴ、ＩＧＳＳ、ＰＡＰ三和免疫化学方法对华支睾吸虫抗原定位进行了较系统的研究。结果表明：虫体定位器官主要是肠管，睾丸，储精囊和虫卵卵黄膜。两种切片抗原定位的主要区别是虫体皮层，石蜡切片未见皮层有抗原性，而冰冻切片虫体皮层有抗原性性。在此基础上应用ＩＥ、Ｓ     

日本血吸虫与肝片吸虫之间的交叉反应性及其共同抗原研究

日本血吸虫与肝片吸虫之间的交叉反应性及其共同抗原研究福建省寄生虫病研究所尹怀志，林沐阳，黄爱明，林金祥福建省农业科学院陈少莺寄生虫种间显示交叉反应性可表明存在共同抗原，这不仅对寄生虫病免疫诊断有实用意义，而且对免疫保护也有重要意义。国外学者应用肝片吸...     

日本血吸虫未成熟卵可溶性抗原的初步分析

采用ＳＤＳ－ＰＡＧＥ和ＥＬＩＢ技术分析了日本血吸虫未成熟卵可溶性抗原（ＳＩＥＡ），并与可溶性成熟卵抗原（ＳＥＡ）进行比较，二者主要蛋白区带存在明显差异，同时，ＥＬＩＢ结果表明，ＳＩＥＡ中感染血清和免疫血清所识别的６５ｋＤａ、６２ｋＤａ、５０ｋＤａ、２８ｋＤａ和和２６ｋＤａ等抗原组分不出现于ＳＥＡ，推测其在ＳＩＥＡ诱导宿主产生抗雌虫生殖及抗卵胚发育免疫应答方面起作用。     

不同地区日本血吸虫成虫可溶性抗原免疫反应性的比较

应用酶联免疫印迹技术检测我国不同地区日本血吸虫雌、雄及雌雄合抱虫体可溶性抗原(AWA),结果上述三者与相应感染动物血清及慢性日本血吸虫病人血清反应,分别显示出4～20、6～34和3～29条反应带;一地日本血吸虫AWA与各地感染鼠血清反应呈明显相似,而不同地区虫体AWA与各感染鼠血清反应性之间则显示出大的差异性;与不同感染宿主血清(感染鼠、兔和病人血清)的反应带及其分子量互不相同;各地雌、雄虫之间也不同,一般雄虫较雌虫反应带多且强;不同宿主(兔和鼠)体内获取的江苏虫体AWA的反应性也存有差异。提示不同地区日本血吸虫成虫可溶性抗原的血清反应性存在着地区及性别间差异。     

蚯蚓与日本血吸虫间共同抗原的初步研究

目的初步探讨蚯蚓与日本血吸虫间共同抗原.方法用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳分析蚯蚓抗原(LtAg)和日本血吸虫成虫抗原(SjAg)的蛋白组分; 并将其蛋白组分分别与日本血吸虫病患者阳性血清和兔抗蚯蚓的免疫血清进行斑点酶联免疫吸附试验、免疫印迹试验.结果 LtAg和SjAg的蛋白组分间存在较多分子量相近的蛋白条带. LtAg抗原分子量在39～90 kDa范围内与日本血吸虫病患者血清的交叉反应尤其明显.SjAg也能与兔抗蚯蚓血清较好的结合.结论实验结果提示,LtAg与SjAg之间存在着至少3种具有免疫活性的分子量相近的蛋白组分.     

溶组织内阿米巴与日本血吸虫并存感染实验观察

选用长爪沙鼠,分别经皮肤感染20条日本血吸虫尾蚴和盲肠内接种溶组织内阿米巴滋养体5×10~5个/0.5ml,建立溶组织内阿米巴与日本血吸虫并存感染的实验动物模型。结果表明,血吸虫感染可以促进肠阿米巴病的发生与发展,并使潜在的溶组织内阿米巴感染发展成侵入型肠阿米巴病。并存感染既有阿米巴感染和血吸虫感染的部分病理学特征,又有本身独特的病理学变化,机体的应激反应参与致病过程。病灶区经常可见滋养体与虫卵的粘附,两者之间似存在亲和性。     

非游离循环抗原组分对血吸虫感染宿主虫卵肉芽肿保护性免疫调节机制的研究

首次采用特殊方法从感染兔红细胞上分离、纯化两种血吸虫组分抗原SjR47和SjR12，实验结果证明，前者属卵源性抗原，后者为虫源性抗原．两次实验结果均表明，两种组分抗原能诱导出明显的抗病免疫力，实验1获得54．95％－72．36％的肝内减卵率，实验2获得52．57％－57.27％的肝内减卵率和50.73％－74．70％的成熟卵减少率，并均可使肝内肉芽肿病变明显减小，尤以SjR47效果显著．两种抗原诱导的抗肝内肉芽肿保护性免疫调节机制的研究结果表明，两者均能诱导小鼠产生高水平的IgG，测定IgG及其亚类动态显示，在感染后0－12wk时，免疫小鼠血清IgG和IgG_1水平均显著高于佐剂和感染对照组者（P＜0.01），特别是能反映保护性免疫力指标的IgG_1升高非常明显：SjR47免疫鼠的脾T淋巴细胞亚群表型动态研究显示，SjR47免疫鼠的CD4~＋和CD8~＋T细胞在感染4wk时均升高，随后下降．CD4~＋／CD8~＋比值也随时间延长而下降，呈现免疫下调，其变化趋势同肉芽肿病变减小相一致；SjR47免疫鼠的细胞因子水平动态观察结果表明，SjR47免疫鼠后可使TNF－α在小鼠体内的活性水平较平显著上升（成虫期前），减弱了TNF－α对虫卵肉芽肿形成的介导作用以及对雌虫排卵的促进作用，导致肝内肉芽肿病变减小和虫卵减少。本研究结果表明，两     

中国大陆日本血吸虫品系的研究：Ⅰ,幼虫—钉螺的相容性

本文进行了安徽贵池、湖北监利、广西桂平、四川天全、云南洱源及福建福清6地日本血吸虫和钉螺的人工交互感染实验。结果表明各地日本血吸虫与钉螺呈现不同的相容性。湖北、安徽两地的血吸虫幼虫与钉螺的相容性无差别。湖北、安徽两地血吸虫幼虫很难在云南、四川两地钉螺体内发育成熟逸出尾蚴:反之,云南、四川两地血吸虫幼虫与湖北、安徽两地钉螺却可相容。广西的血吸虫幼虫或钉螺与安徽的钉螺或幼虫亦可交互感染而相容,但尾蚴逸出前期均较感染本地钉螺的为长;广西的血吸虫幼虫与四川、云南、福建的钉螺并不相容。福建的钉螺与安徽、云南两地血吸虫幼虫均可相容。本文还提出了在研究日本血吸虫与钉螺的相容性时,必须包括逸出尾蚴的钉螺感染率和尾蚴逸出前期的数据,才能正确评价两者的相互关系。     

日本血吸虫与HBV协同致幽门螺杆菌感染的研究

目的　探讨ＨＢＶ对幽门螺杆菌（ Ｈｐ）感染的影响。方法　利用Ｈｐ 全菌抗原检测ＨＢＶ、日本血吸虫单独或合并感染者血清Ｈｐ ＩｇＧ抗体。结果　ＨＢＶ与血吸虫合并感染时,血清ＨｐＩｇＧ抗体检出率（８５－７％ ）明显高于ＨＢＶ或血吸虫单独感染（阳性率分别为４５－５％ 和７２－９ ％）,合并感染时血清ＨｐＩｇＧ抗体水平（０－８７±０－１０） 亦高于单独感染（０－７７±０－２０ ,０－７１ ±０－１７）,差异有显著性意义。而ＨＢＶ阳性者与ＨＢＶ阴性者之间Ｈｐ 感染率和抗体水平相近。结论　ＨＢＶ 对Ｈｐ 感染具有促进作用,ＨＢＶ和血吸虫对Ｈｐ 感染具有协同相加作用。     

日本血吸虫虫卵肉芽肿与肝纤维化关系的研究

目的从形态学角度来探讨日本血吸虫虫卵肉芽肿与肝纤维化之间的关系。方法用日本血吸虫尾蚴感染新西兰兔,观察虫卵肉芽肿大小、肝纤维化程度的动态变化,同时观察激活的肝星状细胞即肌成纤维细胞。结果感染后第4周α－SMA阳性细胞有表达（分级计分为1．13±0．33）,第6周出现虫卵肉芽肿（大小为129±55,单位：103μm2,下同）,在感染后第8周达高峰（202±86）,肉芽肿周围开始出现成纤维细胞,其后随时间的推移肉芽肿逐渐缩小,而肝纤维化程度逐渐加重,α－SMA阳性细胞表达也逐渐增加。结论提示肉芽肿与肝纤维化无直接关系,而是间接延伸,其中肝星状细胞起重要的桥梁作用。     

日本血吸虫抗原模拟表位免疫学活性的初步研究

目的　研究从噬菌体 12肽库中筛选得到的日本血吸虫抗原模拟表位的免疫学活性。　方法　以日本血吸虫急感患者血清免疫球蛋白 (Ig)作为靶分子 ,筛选噬菌体 12肽库。经过 3轮吸附 -洗脱 -扩增的淘筛过程 ,在筛选得到的阳性噬菌斑中随机挑取 42个扩增 ,用ELISA检测不同寄生虫病患者和正常人血清 ,以分析其敏感性和特异性。并进一步免疫昆明株小鼠 ,经日本血吸虫尾蚴攻击感染后剖检 ,计算减虫率和减卵率 ,以分析其在小鼠体内诱导的免疫保护性。　结果　在挑取的 42个阳性克隆中 ,有 9个与日本血吸虫急感患者血清有不同程度的结合 (6.2 5 %～ 10 0 % )。除其中 1个灵敏性较低的克隆与其它寄生虫病患者血清有一定的交叉反应外 ,其余均未发现。而经其免疫后的小鼠也分别获得了 2 9.3 %减虫率和 3 5 .9%减卵率。　结论　从噬菌体 12肽库中筛选到的日本血吸虫抗原模拟表位具有较高的特异性和敏感性 ,并能够在小鼠体内诱导一定的免疫保护力。     

斯氏按蚊和中华按蚊中肠免疫活性抗原的研究

目的　鉴别斯氏按蚊和中华按蚊中肠具有阻断疟疾传播作用的免疫活性蛋白， 并对斯氏按蚊雌蚊中肠免疫活性蛋白在中肠的分布进行定位。方法　应用酶联免疫电转移印迹技术 （ Ｅ Ｉ Ｔ Ｂ） 分析斯氏按蚊雌、雄蚊和中华按蚊雌蚊中肠的免疫活性抗原； 用间接荧光抗体技术 （ Ｉ Ｆ Ａ） 对斯氏按蚊雌蚊中肠免疫活性抗原进行定位。结果　斯氏按蚊雌、雄蚊蚊中肠抗原及中华按蚊雌蚊中肠抗原与斯氏按蚊雌蚊中肠抗血清作用， 分别显示９ 、９ 和６ 条蛋白带； 斯氏按蚊雌蚊中肠壁外侧出现较强的亮绿色荧光， 肠壁细胞核仅出现样弱的亮绿色荧光。结论　上述三种抗原间既有相同的免疫活性蛋白带， 也有各自特异的蛋白带， ７９ 、７６ 、６０ 、４６ｋ Ｄａ 的蛋白带为斯氏按蚊雌蚊中肠特异性免疫活性蛋白带； 斯氏按蚊雌蚊中肠免疫活性蛋白主要分布在中肠肠壁外侧， 仅有少量分布在肠壁细胞核。     

日本血吸虫成虫31/32 kDa蛋白的纯化及保护性免疫力的研究

本文采用制备型聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和电渗析方法分离纯化日本血吸虫成虫 31/32 kDa 蛋白(Sj 31/32蛋白)。SDS-PAGE、免疫印迹试验(EITB)和酶联免疫吸附试验(ELISA)检测结果表明采用该方法分离纯化的 Sj 31/32 蛋白纯度高,且具有较高的活性。用纯化的 Sj 31/32 蛋白加福氏佐剂免疫的小鼠,不仅可减少虫负荷(减虫率 28.1％),还可降低血吸虫成虫的产卵量(减卵率 71.4％),抑制虫卵肉芽肿的形成。结果提示:Sj 31/32 蛋白具有较高的减卵率,可望作为混合多价疫苗候选组分。