温石棉对肺泡巨噬细胞的脂质过氧化作用研究

采用硫代巴比妥酸法，探讨了茫崖及涞源温石棉对肺泡巨噬细胞的脂质过氧化作用，结果表明，两种温石棉与巨噬细胞温育后，其反应体系中丙二醛水平升高，且与石棉剂量及温育时间有关。说明两者可致肺泡巨噬细胞脂质过氧化，柠檬酸铝可明显抑制两种温石棉对细胞的损伤，但对其脂质过氧化作用的抑制则较弱，提示脂质过氧化与温石棉的细胞损伤作用似无直接联系。     

柠檬酸铝对温石棉诱发巨噬细胞活性氧抑制作用的研究

利用电子自旋共振自旋捕获技术、细胞色素Ｃ还原法及酚红氧化法，分别探讨了茫崖及沫源温石棉诱发肺泡巨噬细胞活性氧及柠檬酸铝的抑制作用。结果表明，两种温石棉在一定条件下，均可刺激巨噬细胞产生ＯＨ、Ｏ＿２及Ｈ＿２Ｏ＿２，并具有剂量依赖关系。经柠檬酸铝溶液室温下浸泡１ｈ，茫崖及涞源温石棉诱发活性氧产生的能力明显减弱。     

温石棉对肺泡巨噬细胞膜Fc变体的影响

肺泡巨噬细胞可以一种或多种机制参与石棉相关疾病的发生过程。研究表明,巨噬细胞膜Fc受体与细胞的许多生物学功能有关,如花生四烯酸代谢及前列腺素的合成,触发细胞产生活性氧自由基及释放溶酶体酶。最近有人报道Fc受体还具有离子通道作用。因此,本研究拟就国产茫崖及涞源温石棉(简称茫棉及涞棉)对肺泡巨噬细胞膜Fc受体的影响进行了初步探讨。 1 材料与方法 1.1 温石棉的制备将来自茫崖及涞源石棉矿的长纤维石棉剪成1cm,置于冰冻切片机上切断,将切下的纤维置于60℃烤箱内烘干。用前以生理盐水稀释成一定浓度。     

Oncolyn对温石棉所致肺泡巨噬细胞氧化损伤的缓解作用

目的 探讨Oncolyn对温石棉所致肺泡巨噬细胞氧化损伤的影响。方法 应用支气管灌洗的方法获得大鼠肺泡巨噬细胞(AM),纯化后与终浓度50μg／ml的温石棉分别孵育2h和4h,在孵育的同时加入不同浓度的Oncolyn,检测AM中DNA损伤状况以及抗氧化酶SOD、GSH—Px的活性。结果 肺泡巨噬细胞与温石棉共同培养2h后,DNA损伤和SOD、GSH—Px活性增加,表现出彗星出现率和DNA迁移长度增加;当培养4h后,彗星出现率比培养2h更高,DNA迁移长度不再增加,而SOD、GSH-Px活性均下降。在AM与温石棉作用的同时加入不同浓度的Oncolyn后,DNA损伤减轻,抗氧化酶SOD、GSH—Px的活性上升。结论 Oncolyn对温石棉所致肺泡巨噬细胞的氧化损伤有一定的缓解作用。     

石英和温石棉致兔肺泡巨噬细胞谷胱甘肽过氧化物酶活性改变的比较研究

为了探讨石英、石棉对抗氧化酶活性的影响,利用改良Ｍｙｖｉｒｋ 法收集兔肺泡巨噬细胞进行体外培养,采用酶－ 底物反应形成有色物来测定巨噬细胞的细胞裂解液中谷胱甘肽过氧化物酶（ＧＳＨＰｘ）的酶活性。结果发现,随着粉尘浓度的增加,石英组和温石棉组巨噬细胞内的ＧＳＨＰｘ的酶活性相应降低,存在显著的剂量反应关系（Ｐ＜ ０．０１）。在不同的粉尘剂量组,温石棉组和石英组的ＧＳＨＰｘ 酶活性均显著低于二氧化钛组（Ｐ＜ ０．０５）,温石棉组低于石英组,但未发现显著的统计学差异。石英组和温石棉组的巨噬细胞死亡率均随粉尘浓度的增加而增大,存在着剂量反应关系,且温石棉组的死亡率高于石英组。石英组、温石棉组巨噬细胞内ＧＳＨＰｘ 酶活性和巨噬细胞的死亡率之间的相关系数分别为－ ０．９３１８ 和－ ０．８９８４,而二氧化钛组只有－ ０．３６３７。这说明石英、温石棉均可致巨噬细胞内ＧＳＨＰｘ 酶活性呈剂量反应关系的降低,使得胞内自由基Ｈ２Ｏ２ 不能正常消除,促使脂质过氧化加重,损害细胞;且温石棉的效应强于石英。提示ＧＳＨＰｘ 酶活性的降低在石英、温石棉致病中具有一定的作用     

温石棉对大鼠肺泡巨噬细胞膜脂质过氧化的研究

温石棉对大鼠肺泡巨噬细胞膜脂质过氧化的研究肖国兵，马藻骅，邱华士宁波市卫生防疫站３１５０１０众所周知，长期接触石棉尘可引起石棉肺、肺癌等，但其致病机制尚不明了。已有试验表明石棉纤维可增加巨噬细胞脂质样化［１］。肺泡巨噬细胞作为肺纤维化的主要反应细胞，...     

几种化合物对石棉诱发肺泡巨噬细胞产生一氧化氮的抑制作用

为了寻求一种适宜的石棉表面改性剂，利用体外细胞培养技术，通过测定培养液中亚硝酸根（ＮＯ－２）含量，观察了茫崖产温石棉对豚鼠肺泡巨噬细胞（ＡＭ）产生一氧化氮（ＮＯ）的诱导作用以及混合稀土、亚硒酸钠、柠檬酸铝对石棉诱发ＡＭ产生ＮＯ的影响。结果显示，温石棉纤维可使培养液中ＮＯ－２浓度升高，并呈明显的剂量反应关系；混合稀土、亚硒酸钠、柠檬酸铝均可抑制石棉诱发ＡＭ产生ＮＯ，而且随上述化合物浓度的升高，抑制作用增强。提示用混合稀土和亚硒酸钠拮抗石棉的致病作用有实际应用的可能。     

石棉对大鼠肺泡巨噬细胞毒作用的体外研究

本文研究了新康温石棉,加拿大(UICC)温石棉和石英粉尘,经5,10,15小时体外染尘对大鼠肺泡巨噬细胞的毒作用,结果表明各组细胞的存活率均随培养时间而下降,以石英组下降最快,加拿大组次之,各染尘组与对照组间有明显差异,染尘细胞的形态与功能有明显改变经光镜和电镜检查可见细胞迅速增大,内含多量不同大小的空泡,两石棉组不少细胞成锥形或梭形,肾形核双核和三核细胞明显增加,并有两巨噬细胞共吞长石棉纤维,三种粉尘均无例外地被吞噬,毒性有所差异以石英最大,认为此种差异由粉尘性质和形状不同所致.     

二氧化硅和青石棉对小鼠肺泡巨噬细胞的影响

肺泡巨噬细胞(PAM),在炎症及免疫反应中起着重要作用,是肺的第一道防御屏障。目前,对PAM的吞噬功能方面研究较多,而对PAM体外集落形成能力方面报道较少。本文通过对小鼠经气管注入致纤维化粉尘(SiO_2和青石棉)及非致纤维化粉尘(TiO_2)后,着重观察其PAM体外集落形成能力的变化,以阐明吸入物质对PAM的增殖与分化的影响。 材料和方法 1.动物 C_3H/HeN纯系、健康雌性小鼠,6～7周龄。由日本SLC实验动物场提供。 2.实验粉尘 SiO_2(Min-u-sil;美国宾夕     

柠檬酸铝多相脂质体的制备及抗大鼠实验性矽肺的观察

本文报告用成膜法结合机械分散制成一种抗矽药物新剂型——柠檬酸铝多相脂质体,并讨论了该制剂的组成、制备方法和治疗大白鼠实验性矽肺的疗效。结果表明,柠铝多相脂质体制备简便,原料易得,对实验矽肺有减少用药剂量,提高疗效的特点。而柠铝乳剂不见增强疗效。空白脂质体(未包封药物)无抗矽肺作用。     

石英粉尘所致豚鼠肺泡巨噬细胞化学发光的改变

本研究测定了石英粉尘对豚鼠肺泡巨噬细胞化学发光的影响,以二氧化钛粉尘为阴性对照粉尘,所采用的粉尘剂量分别为50、100和200μg/10~6细胞。结果表明,石英粉尘引起肺泡巨噬细胞化学发光强度随粉尘剂量增加而增强,有明显的剂量反应关系。石英组由低剂量到高剂量化学发光强度峰值分别为15.70、23.08及46.46(mV),对照组为10.25(mV)。而二氧化钛粉尘仅在200μg剂量组化学发光反应增强,峰值为18.83(mV)。值得注意的是,石英粉尘200μg剂量组在加尘后3分钟反应迅速达到高峰,而后随粉尘作用时间延长,发光强度明显减弱,至测定的60分钟,接近低剂量组水平。巨噬细胞化学发光的测定可以反映粉尘毒性大小和细胞的早期损伤,这对探讨尘肺的发病机理有重要意义。     

石英尘对肺泡巨噬细胞膜性质影响的实验研究

采用体外细胞实验方法,观察了石英尘对DPH和ANS标记的肺胞巨噬细胞膜流动性和荧光性质的影响,同时测定了肺泡巨噬细胞活性氧的产生。结果表明,石英尘可以使DPH和ANS标记的肺泡巨噬细胞膜流动性降低,增加ANS标记的肺泡巨噬细胞膜复合物的荧光强度,在200～1000μg石英尘之间呈剂量反应关系,进一步分析其原因,表明石英尘通过增加ANS在肺泡巨噬细胞膜上的结合量而使其荧光强度增加。肺泡巨噬细胞在石英尘作用下活性氧增加,可能与肺泡巨噬细胞膜性质的改变和活性氧对细胞膜结构的影响有关。     

铁矿尘对肺泡巨噬细胞影响的实验研究

采用大鼠肺泡巨噬细胞（ＡＭ）体外培养的方法,对铁矿积尘进行毒性研究。染尘浓度为０、０．２、０．６和１．２ｍｇ／ｍｌ,染尘１、５、２０小时后,通过对大鼠ＡＭ功能、形态、细胞膜通透性变化以及脂质过氧化、抗氧化等的观察,初步探讨了铁矿尘对ＡＭ的毒作用及其机理。结果表明,染尘后ＡＭ吞噬酵母菌能力降低;随铁矿尘浓度增高和染尘时间延长,细胞培养液中ＬＤＨ活性升高,细胞内ＡＣＰ活性降低,Ｋ＾＋水平降低,说明铁矿     

营养缺乏及补充维生素A对大鼠肺巨噬细胞功能的影响

采用Ｗｉｓｔａｒ大鼠，从怀孕１６天进行限食喂养直到生后４５天，干预组从生后第３６天及第４２天分别给予维生素Ａ灌胃，每次２０００ＩＵ。结果表明，补充维生素Ａ可明显增加大鼠的胸腺重量、肺巨噬细胞的数目、巨噬细胞的吞噬功能及ＮＯ－２的分泌。维生素Ａ可部分纠正营养缺乏导致的免疫缺陷、胸腺萎缩，活化肺巨噬细胞功能，其作用机制有待于进一步研究。     

肺泡巨噬细胞对石英、石棉等粉尘吞噬作用的扫描电镜研究

本文报道了兔肺泡巨噬细胞对石英、石棉等粉尘吞噬作用的扫描电镜研究,结果表明,吞噬石英粉尘的巨噬细胞表现膜皱褶疏密不一,出现泡状结构,伪足消失。濒死前的细胞膜呈光滑均质或呈大小不等的凹陷,细胞固缩。吞噬石棉尘的巨噬细胞出现膜改变时间较迟。扫描电镜所观察到的生物膜改变对尘肺防治措施提供科学依据。     

温石棉对细胞膜脂质流动性及通透性的影响

用荧光探针ＤＰＨ标记肺泡巨噬细胞，观察到随温石棉剂量增加，茫棉及涞棉均可增加细胞膜脂质的流动性，表现为膜脂质荧光偏振度及脂区徽粘度的降低。茫棉及涞棉亦可增加膜通透性，使胞内Ｋ＋含量下降，该作用存在剂量一效应关系。茫棉及涞棉所致膜脂质流动性改变与膜通透性改变存在明显相关关系。因此，两种温石棉所致的膜脂质流动性增加可能与膜通透性增加一样与细胞受损有关。     

硒镁联合作用对SiO2致肺泡巨噬细胞NO、NOS水平变化的影响

[目的]观察亚硒酸钠(Na2SeO3)与硫酸镁(MgSO4)单独及联合作用对二氧化硅(SiO2)致肺泡巨噬细胞(AM)一氧化氮(NO)、一氧化氮合酶(NOS)水平变化的影响,寻找二者的最佳剂量组合.[方法]采用大鼠肺灌洗法纯化获得肺泡巨噬细胞(1×109个/L),同时加入SiO2及不同浓度的MgSO4溶液、Na2SeO3溶液、Na2SeO3 MgSO4溶液,37℃,5%CO2条件下培养18h后,检测NO含量与NOS活性.[结果]与SiO2组比较,Na2SeO3与MgSO4单独及联合使用在体外均可以降低巨噬细胞NO水平及NOS活性(P<0.05),Na2SeO3与MgSO4的交互作用具有统计学意义,且以1.0μmol/L Na2SeO3与1.0μmol/L MgSO4联合作用效果最好.[结论]Na2SeO3与MgSO4二者联合应用在体外可明显降低SiO2粉尘所致AM的NO水平和NOS的活性.     

“克矽风药酒”抗细胞膜损伤作用的实验研究

采用体外细胞实验方法，观察了“克矽风”药酒对染尘大鼠肺泡巨噬细胞（ＡＭ）细胞膜流动性、通透性、存活率和红细胞溶血率的影响。实验结果表明，该药酒具有降低ＡＭ膜流动性、通透性及红细胞溶血率，提高ＡＭ存活率等作用。此研究为克矽风药酒疗效机制提供了实验依据。     

六种生物膜稳定剂抑制石英对巨噬细胞膜破坏作用的体外实验

本文观察了六种生物膜稳定剂抑制石英对肺泡巨噬细胞膜的破坏作用。将家兔麻醉,无菌操作,行肺灌洗获取健康家兔的肺泡巨噬细胞。将细胞配制成10×10~5cells/ml悬液,置于CO_2孵育箱中培养。与临床治疗矽肺的药物(矽肺宁)作对比。通过测定细胞内外酸性磷酸酶(ACPase)含量变化,筛选五种试剂对膜具有最大稳定的浓度。分析结果表明,膜保护作用由强到弱的排列顺序是Zn~(++),Se,矽肺宁,VE,Mg~(++),Ca~(++)。本文结果提示,石英直接损伤肺泡巨噬细胞的生物膜,故任何能保护生物膜的试剂,对煤工矽肺的防治均可能有意义。