羧甲基壳聚糖修饰阿霉素纳米脂质体的pH敏感性研究

目的:研究一种由羧甲基壳聚糖修饰的pH敏感阿霉素纳米脂质体,并考察羧甲基壳聚糖的分子参数对其敏感性的影响。方法:采用逆相蒸发-pH梯度法制备羧甲基壳聚糖修饰的阿霉素脂质体;用反透析-UV分光光度法测定包封率;用TEM和激光粒度仪分别考察脂质体形态与粒径分布;由药物渗漏实验考察pH敏感性。并研究羧甲基壳聚糖取代度、相对分子质量和质量分数对脂质体pH敏感性的影响。结果:所制纳米脂质体的包封率达87%,形态圆整,粒径分布为(74.7±11.5)nm;羧甲基壳聚糖的羧甲基取代度、相对分子质量、质量分数对修饰的纳米脂质体药物渗漏有不同程度的影响。结论:逆相蒸发-pH梯度法可成功制备羧甲基壳聚糖修饰pH敏阿霉素纳米脂质体;调变羧甲基壳聚糖的取代度、相对分子质量和质量分数均可实现羧甲基壳聚糖修饰阿霉素纳米脂质体的pH敏智能控释。     

CMCT-FA修饰阿霉素纳米脂质体的制备与体外pH敏感释放

利用1乙基3(3二甲基丙基)碳二亚胺 (EDC)介导反应合成了叶酸偶联的羧甲基壳聚糖（CMCTFA）,以阿霉素为模型药物,采用薄膜分散pH梯度法制备CMCTFA修饰的阿霉素纳米脂质体。考察了CMCTFA修饰阿霉素纳米脂质体的包封率、粒径、ζ电位以及在不同pH释药介质中的释放特性。结果表明：CMCTFA修饰阿霉素纳米脂质体的ζ电位较未修饰脂质体明显减小,但较CMCT修饰阿霉素纳米脂质体无明显差别;与阿霉素纳米脂质体和CMCT修饰的阿霉素纳米脂质体相比,CMCTFA修饰的阿霉素纳米脂质体在酸性条件下的药物释放速率和药物释放量均有明显提高。     

羧甲基壳聚糖修饰阿霉素纳米脂质体的制备及体外细胞实验

以羧甲基壳聚糖（CMCT）为修饰剂,采用薄膜pH梯度法制备具有pH敏感性的阿霉素纳米脂质体（CMCTDOXNL）,以增加抗癌药物在肿瘤部位的蓄积,同时增强抗癌药物向肿瘤细胞内的传递。结果表明：制备的CMCTDOXNL粒子形貌圆整,粒径分布均匀为 （38±221）nm,药物包封率为8883%;相比传统的阿霉素纳米脂质体（DOXNL）, CMCTDOXNL与Hela细胞的结合和摄取均有所提高,对细胞的杀伤作用更强; CMCTDOXNL的体外药物释放具有明显的pH敏感性,比普通的阿霉素脂质体更能促进阿霉素（DOX）向肿瘤细胞内的传递。     

阿霉素纳米脂质体的免疫毒性研究

目的探讨阿霉素纳米脂质体对实验小鼠的免疫毒性作用。方法小鼠经腹腔注射阿霉素纳米脂质体(按阿霉素有效治疗量6 mg/kg给药),注射5个周期后取血做血常规测定白细胞含量,测定免疫器官脏体比,淋巴细胞转化实验测刺激指数,免疫组化法检测脾脏细胞凋亡,ELISA法测IL-2、IL-1及TNF-α细胞因子含量,抗体及补体活性,选择测定小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能,测定迟发性超敏反应,常规病理观察主要脏器改变。结果阿霉素纳米脂质体实验组白细胞和淋巴细胞数量、胸腺和脾脏指数、脾脏淋巴细胞刺激指数、血清IL-1、IL-2含量、抗体(IgG、IgA、IgM和IgE)活性、补体C3、C4活性、巨噬细胞吞噬功能及迟发性变态反应均降低,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.01);实验组脾细胞Fas-L表达与对照组比较明显增强,细胞凋亡增加,差异具有统计学意义(P<0.01)。实验组胸腺及脾脏淋巴细胞均明显减少,对照组未见明显异常。而阿霉素纳米脂质体实验组TNF-α含量与对照组相比差异无统计学意义(P>0.05);结论阿霉素纳米脂质体对小鼠具有免疫毒性作用。     

阿霉素纳米脂质体的生物学效应研究

目的 系统研究阿霉素纳米脂质体的生物学效应.方法 通过形态学观察、MTT试验、检测阿霉素纳米脂质体作用后,体外培养的癌细胞增殖活性的改变来评价阿霉素纳米脂质体体外抗癌活性.建立移植肿瘤动物模型,现察阿霉素注射液和阿霉素纳米脂质体对肿瘤的抑制作用、对动物一般状态的影响,并检测肝功能和骨髓像改变以评价阿霉素纳米脂质体的体内抗瘤活性.结果 阿霉素纳米脂质体在浓度为10.0μg/mL时,对体外培养的S-180细胞,其抑制率79%,对其他癌细胞也有不同程度的抑制作用.阿霉素纳米脂质体,对小鼠实体瘤S-180的抑瘤率可达83.3%,生命延长率可达132.8%.结论 在体外,阿霉素纳米脂质体对多种癌细胞有一定的抑制作用且各浓度点比游离的阿霉素纳米脂质体的抑制率更高.体内抑瘤实验,阿霉素纳米脂质体与游离阿霉素元显著性差异.     

阿霉素纳米脂质体大鼠体内的药动学研究

目的 研究阿霉素纳米脂质体的动物体内药物动力学参数,为临床用药提供依据.方法 建立HPLC法测定血浆中的阿霉素药物浓度,测定动物体内药物动力学参数.结果 该试验采用的高效液相法具有较高的专属性,在血药浓度为0.25～25.00μg/mL范围内线性良好,有良好的相关系数(r=0.9996),回收率(RSD＜9%).阿霉素和阿霉素纳米脂质体在大鼠体内符合三室房室模型,阿霉素和阿霉素纳米脂质体的t1/2α分别为(0.031±0.012)h和(0.060±0.013)h,t1/2β分别为(2.57.±1.20)h和(5.45±0.72)h,AUC分别为(2 821.7±791.3)μg/L·h和(4012.2±804.8)μg/L·h.结论 阿霉素和阿霉素纳米脂质体均符合三室房室模型,但阿霉素纳米脂质体药时曲线下面积增大,有效作用时间延长,有利于抗肿瘤作用,降低心脏毒性.     

阿霉素纳米脂质体的制备及安全性评价

目的 制备阿霉素纳米脂质体,并研究其急性毒性和慢性毒性.方法 通过乙醇注入法结合pH梯度法,制备阿霉素纳米脂质体,并通过粒径仪测定其物理化学性质.阿霉素纳米脂质体的长期毒性和慢性毒性则通过昆明小鼠实验进行评价.结果 通过该方法制备的阿霉素纳米脂质体粒径为140～170 nm,包封率高达99.85％.急性毒性实验表明,阿霉素纳米脂质体的LD50为31.69mg/kg,病理结果提示,阿霉素纳米脂质体在0mg/kg和6mg/kg的剂量下未对小鼠各脏器产生明显的毒性;12mg/kg及以上剂量,对小鼠心、肺及肝组织都有一定的毒性,且与剂量大小相关;18mg/kg及更低的剂量下,未见其对小鼠肾脾组织有明显毒性.慢性毒性实验中,与空白对照组比较,6 mg/kg和9mg/kg剂量组小鼠体质量、RBC压积、平均RBC体积、PLT计数和嗜酸性粒细胞百分数及尿素氮含量(BUN)有显著影响(P＜0.05).结论 该方法制备的阿霉素纳米脂质体质量稳定,且对动物的毒性具有剂量依赖性.     

光敏纳米脂质体制备及其特性研究

目的制备聚丁二炔光敏纳米脂质体并对其特性进行研究。方法采用反相蒸发法制备聚丁二炔纳米脂质体。原子力显微镜观察脂质体形态，激光粒度分析仪测定脂质体粒径与表面电位。结果制备的光敏纳米脂质体形状规则，平均粒径（78．3±1．4）nm。结论采用反相蒸发法制备的聚丁二炔纳米脂质体，达到设计要求。     

大黄素纳米脂质体的制备和质量评价

1　材料和方法1.1　材料　ＲＥ 5 2旋转蒸发仪 (上海亚荣生化仪器厂 ) ;ＫＱ 2 5 0超声波发生器 (江苏昆山淀山湖检测仪器厂 ) ;ＵＶ 2 6 5紫外分光光度计 (日本岛津 ) ;ＬＣ 10Ａｖｐ高效液相色谱仪 (日本岛津) ,ＫｒｏｍａｓｉｌＣ18色谱柱 (4 .6ｍｍ× 15 0 .0ｍｍ ,5 μｍ) ;ＴＥＭ 2 0 0 0ＥＸ透射电子显微镜 (日本电子 ) .胆固醇 (上海生化试剂公司 ) ,磷脂 (注射用 ,上海太伟药业有限公司 ) ,大黄素 (ｅ ｍｏｄｉｎ,自制 ) ,无水乙醇、氯仿、葡萄糖均为分析纯 .1.2　方法　精密称取处方量的大黄素、胆固醇、磷脂于 2 5 0ｍＬ园底烧瓶…     

磁性纳米脂质体的制备及特性研究

目的 制备具有超顺磁性和强磁性的纳米脂质体.方法 制备磁性脂质体,并测定其体外磁场响应性、粒径分布及磁性.结果 成功制备具有良好磁性的纳米脂质体.结论 该实验制备的磁性纳米脂质体具有体外磁场响应性好、粒径分布均匀、具有超顺磁性和强磁性的特点.     

温度和pH双重敏感聚氨酯膜材料的制备及其性能

以4, 4’-二苯基甲烷二异氰酸酯（MDI）、聚己内酯二元醇（PCL）、N-甲基二乙醇胺（MDEA）等为主要原料,通过两步溶液聚合法和湿法转相技术成功制备了一种对温度和pH具有双重响应功能的聚氨酯膜材料。采用FT-IR、DSC、SEM、水滴角测试仪、电子拉力机以及孔隙率和水通量测试对聚氨酯膜材料的结构和性能进行了表征。研究结果表明：MDEA已经成功嵌入到了聚氨酯分子链中;4种聚氨酯膜都显示了一个相似的结晶熔融峰,分别对应于各自的软段结晶熔融转变;聚氨酯膜截面呈现了皮层、指状大孔层和海绵状层的3层结构;随着易离子化基团（—N(CH3)—）引入量的增加,聚氨酯膜的孔隙率增大,膜表面水接触角减小,力学性能降低;当温度从低温提高到各自的软段结晶熔融温度以上时,聚氨酯膜的水通量明显变大,显示了温度敏感性。当pH从8.5升高到10时,聚氨酯膜的水通量明显变大,显示了pH敏感性。     

紫外光接枝改性磺化聚醚砜微孔膜及其pH敏感性

用紫外光接枝聚合方法将丙烯酸(AA)接枝到磺化聚醚砜(SPES)微孔膜上,得到具有pH敏感性的分离膜.接枝膜采用衰减全反射(ATR-IR)附件进行了表征,接枝膜表面及断面形态采用扫描电子显微镜(SEM)进行观察,并同时通过接枝率、水渗透通量和截留率的测定研究了接枝膜的接枝程度、渗水性能和pH敏感性.通过紫外光接枝聚合的方法,在磺化聚醚砜微孔膜的膜表面和孔内接枝上了丙烯酸接枝层作为pH感应型开关;当丙烯酸质量分数为0.05,光照20 min时,接枝率达到8.40%,pH=2时的纯水渗透通量约为中性时的20倍;当牛血清蛋白(BSA)渗透液的pH小于其等电点4.7,pH为2～4时,截留率发生显著变化,表现出明显的pH敏感性.     

磁性阿霉素聚氰基丙烯酸正丁酯纳米粒的制备及药代动力学分析

目的:通过磁性阿霉素聚氰基丙烯酸正丁酯纳米粒(ADM-PBCA-MNPS)的制备,研究ADM-PBCA-MNPS的理化性质并分析该微粒药代动力学特点。方法:乳化聚合法合成磁性阿霉素聚氰基丙烯酸正丁酯纳米粒,观察纳米粒的物理形态;检测纳米粒的饱和磁化强度和药物的包封率、载药量,通过体内外实验探讨磁性纳米微粒的释药性。结果:合成的磁性阿霉素聚氰基丙烯酸正丁酯纳米粒(ADM-PBCA-MNPS)平均直径194.30 nm;纳米粒的饱和磁化强度为0.488 emu/g,药物包封率为89.63%,载药量为9.73%;在体外条件下ADM-PBCA-MNPS显示出良好的缓释性能,体内药-时数据符合二室模型,ADM-PBCA-MNPS在大鼠体内的血药浓度-时间曲线下面积(AUC)、达峰浓度(Cmax)、消除半衰期(T1/2Beta)、平均滞留时间(MRT)均明显大于游离阿霉素(F-ADM)(P<0.01)。结论:制备的磁性纳米粒溶液性质稳定,符合在机体血管中随循环流动而不会沉淀的条件。实验组药物可在体内外缓慢释放阿霉素,有较高的生物利用度。     

载三氧化二砷pH敏感型脂质体的制备及体内外评价

目的  将三氧化二砷制备为pH敏感型脂质体,并进行体外抗胶质瘤活性与体内安全性评价。方法  采用反相微乳法制备疏水性修饰的锰砷共沉淀,后采用乳化蒸发法进行负载制备脂质体(Liposome/MnAs)。测定Liposome/MnAs的粒径、PDI以及Zeta电位;透射电镜观察Liposome/MnAs的形态;ICP-MS测定包封率;透析袋法考察其体外不同pH条件下的释药特性;考察酸性条件下体外MRI成像能力。共聚焦显微镜观察鼠源性脑胶质瘤GL261细胞对Liposome/C6的摄取情况和胞内分布情况;MTT法考察游离三氧化二砷及Liposome/MnAs对GL261的毒性;流式细胞仪检测游离三氧化二砷及Liposome/MnAs对GL261细胞的凋亡作用。结果  制备的锰砷共沉淀具有疏水性,可较好地被氯仿溶解;Liposome/MnAs呈规整的类球型,粒径约为(286.43±6.41)nm,As包封率为(48.32±5.95)%;可在pH5.4条件下迅速响应释放As3+及Mn2+,具有良好的体外MRI成像能力。GL261细胞对C6标记的脂质体的摄取情况较好,且主要分布在细胞质。Liposome/MnAs抑制GL261细胞生长的作用(IC₅₀=2.99μmol/L)较游离三氧化二砷(IC₅₀=4.74μmol/L)有所上升;细胞凋亡实验也表明Liposome/MnAs较游离三氧化二砷有更好地促进GL261细胞凋亡的作用,促凋亡率由13.73%提高至21.42%。给药周期内,Liposome/MnAs对小鼠体内主要脏器无明显毒性。结论  以反相微乳法制备的锰砷共沉淀具有良好的疏水性,被脂质体包载制备为Liposome/MnAs,具有pH响应释药的特性,能有效增强GL261细胞对脂质体摄取。可增强三氧化二砷对胶质瘤细胞GL261的毒性,且具有一定的体内安全性。      

纳米级磁性阿霉素脂质体的制备及对人胃癌细胞的体外细胞毒作用

目的 探讨纳米级磁性阿霉素脂质体的制备及其体外细胞毒性.方法 用反相蒸发法制备纳米级磁性阿霉素脂质体,以正交实验设计确定最佳制备工艺;电镜观察其形态,Zetapal无机粒度分析仪测量其粒径分布,利用紫外-Sephadex G-50法测定其包封率,利用磁测仪测量其磁响应性.用比色法分析其对人胃癌细胞的体外细胞毒作用.结果 磁性阿霉素脂质体在电镜下为圆形或椭圆形,平均粒径为(293.4±20.6)nm,包封率为(30.8±3.3)%,磁响应性50.28 emu,其体外抑制肿瘤细胞生长的能力与阿霉素无显著差异.结论 用反相蒸发法制备的磁性阿霉素脂质体平均粒径小,达到纳米级,磁响应性高,抑瘤效果好.     

低分子肝素纳米脂质体的制备及大鼠口服吸收

目的：制备低分子肝素纳米脂质体制剂,并进行大鼠口服吸收的研究。方法：用超声波分散法制备低分子肝素纳米脂质体,以正交实验设计确定最佳制备工艺;电镜观察其形态及粒径分布,以大鼠用药前后血液凝固时间的变化研究其口服吸收的促进作用。结果：低分子肝素纳米脂质体在民镜下为圆形或椭圆形,平均粒径为89．6mm,包封率为36．1％,大鼠用药后血液凝固时间显著延长。结论：纳米脂质体对低分子肝素大鼠口服吸收有良好的促进作用。     

多柔比星葡聚糖纳米粒的制备及其对卵巢癌细胞SKOV3的杀伤作用

目的:制备载多柔比星葡聚糖纳米粒(DOX/DEX-PLA),观察其药物缓释规律,探讨其对卵巢癌细胞的杀伤作用。方法:以双乳化剂蒸发法制备DOX/DEX-PLA载药纳米粒,透射电镜观察纳米粒形态,分光光度法计算载药率,体外药物释放实验考察纳米粒对DOX的缓释作用。MTT法观察对卵巢癌细胞的体外杀伤作用,动物实验观察其体内抑瘤效应。结果:DOX/DEX-g-PLA纳米微粒呈球形,粒径约83 nm,药物包封率约67.1%。体外释放实验提示,纳米制剂中约50%的药物持续缓慢释放,可持续达7 d;体内抑瘤实验显示,纳米缓释制剂间隔给药疗效优于未包载药物每日给药的疗效。结论:DOX/DEX-PLA纳米粒可有效抑制卵巢癌细胞的生长。     

共聚物Poly(DMAEMA-co-TPE-a)的合成及pH敏感荧光多孔光纤制备

将甲基丙烯酸N,N-二甲氨乙酯（DMAEMA）和微量荧光单体4-丙烯酰氧基四苯乙烯（TPE-a）经自由基共聚合制备了共聚物Poly（DMAEMA-co-TPE-a）（PDT）,并通过引入交联剂N,N-亚甲基双丙烯酰胺（Bis）和致孔剂N,N-二甲基甲酰胺（DMF）制备了pH敏感荧光多孔光纤。采用FT-IR、¹H-NMR、TG和SEM表征了产物的结构,研究了产物的荧光和pH响应性能。研究表明,共聚物PDT具有聚集诱导发光（AIE）效应,并具有较好的pH响应性能;当单体、交联剂和致孔剂的物质的量之比为60：1：40时,制备的pH敏感荧光多孔光纤具有较好的耐热性能、内部结构和pH响应性能。     

pH敏感性P(AM-AA-co-C8PhEO10Ac)水凝胶溶胀动力学及其对茶碱的控释

以丙烯酰胺(AM)、丙烯酸(AA)和丙烯酸辛基酚聚氧乙烯醚酯(C8PhEO10Ac)为单体,采用自由基交联共聚法合成了具有pH敏感性的P(AM-AA-co-C8PhEO10Ac)水凝胶。研究了pH、单体配比对凝胶溶胀性能、溶胀动力学和退溶胀动力学的影响。初步探讨了模拟胃液(pH=1.4)、肠液(pH=7.4)中水凝胶对茶碱的控释情况。结果表明:凝胶具有高溶胀、退溶胀速率和良好的pH敏感性等特征;水凝胶的扩散行为在pH=7.4的缓冲溶液中为非Fickian扩散模式;载药凝胶在模拟肠液中对药物的累积释放率明显大于胃液中的累积释放率,其中n(C8PhEO10Ac)∶n(AM)∶n(AA)为1∶20∶30的载药水凝胶对茶碱的累积释放率最大。