维甲酸对正常造血祖细胞集落形成的影响

用细胞培养方法观察了不同浓度（１０－９～１０－５ｍｏｌ／Ｌ）的全反式维甲酸（ＡＴＲＡ）对正常造血祖细胞集落形成的影响。结果表明，随着浓度的增加，ＡＴＲＡ对红系祖细胞集落形成单位（ＣＦＵ－Ｅ、ＢＦＵ－Ｅ）的抑制作用增加，但在１０－８～１０－６ｍｏｌ／Ｌ内对粒单系祖细胞集落形成单位（ＣＦＵ－ＧＭ）的形成有促进作用，１０－６ｍｏｌ／Ｌ的ＡＴＲＡ对巨核系祖细胞集落形成单位（ＣＦＵ－Ｍｅｇ）生长也有促进作用，提示在急性早幼粒细胞白血病（ＡＰＬ）用ＡＴＲＡ治疗过程中，ＡＴＲＡ参与了其正常造血功能的恢复。     

270例原发性肝癌α－L一岩藻糖苷酶测定及其临床意义

用显色多肽基质检测法对２７０例原发性肝癌患者及其他肝病组、正常对照组进行血清α－Ｌ－岩藻糖苷酶（ＡＦＵ）活力测定，结果显示：原发性肝癌组ＡＦＵ活力为每小时７６５．７４±２５６．４８μｍｏｌ／Ｌ、肝硬化组为每小时４８６．５１±１５０．３０μｍｏｌ／Ｌ、慢乙肝组为每小时４４０±７６．４４μｍｏｌ／Ｌ，正常对照组为每小时３１６．４１±７８．５μｍｏｌ／Ｌ。原发性肝癌组与各组比较Ｐ＜０．０１，有显著性差异。同时发现ＡＦＰ水平与ＡＦＵ活力不相关，在ＡＦＰ阴性的８４例原发性肝癌中ＡＦＵ阳性５７例，阳性率占６７．８５％，表明同时测定血清ＡＦＰ和ＡＦＵ可显著提高原发性肝癌的发现率。     

急性早幼粒细胞白血病患者巨核系祖细胞集落形成单位的抑制活性

确定急性早幼粒细胞白血病（ＡＰＬ）患者血清及全反式维甲酸（ＡＴＲＡ）对正常骨髓巨核系祖细胞集落形成（ＣＦＵ－Ｍｅｇ）生长是否有抑制作用。方法用细胞培养方法，动态观察２２例ＡＰＬ患者用ＡＴＲＡ治疗时其血清及１０－６ｍｏｌ／ＬＡＴＲＡ对ＣＦＵ－Ｍｅｇ生长的影响，同时测定患者血清肿瘤坏死因子（ＴＮＦ）活性和骨髓白血病细胞集落形成单位（ＣＦＵ－Ｌ）。结果治疗前，血清对ＣＦＵ－Ｍｅｇ生长呈抑制作用（２９．６％±２．４％），该活性随治疗而减轻，骨髓缓解时为刺激作用（－１８．７％±４．１％，Ｐ＜０．００１），与骨髓ＣＦＵ－Ｌ、血清ＴＮＦ活性呈正相关，与血小板计数、骨髓巨核细胞数呈负相关，ＡＴＲＡ促进ＣＦＵ－Ｍｅｇ的生长。结论ＡＰＬ患者血清对ＣＦＵ－Ｍｅｇ生长有抑制作用，该作用可监测疗效，Ａ－ＴＲＡ对ＣＦＵ－Ｍｅｇ生长有刺激作用。     

维拉帕米联用阿霉素、长春新碱、足叶己甙体外净化白血病细胞

采用体外克隆形成培养技术研究维拉帕米（ＶＰＬ）联用阿霉素（ＡＤＭ）、长春新碱（ＶＣＲ）和足叶己甙（ＶＰ－１６）体外净化白血病细胞，结果显示：ＶＰＬ２．２μｍｏｌ／Ｌ能明显增加单一应用的不同浓度ＡＤＭ、ＶＣＲ或ＶＰ－１６对白血病细胞克隆形成单位（Ｌ－ＣＦＵ）的抑制作用，而不增加其对正常粒巨系克隆形成单位（ＧＭ－ＣＦＵ）的毒性。０．９２μｍｏｌ／ＬＡＤＭ、０．０２５０μｍｏｌ／ＬＶＣＲ及１．７０μｍｏｌ／ＬＶＰ－１６联合应用下，Ｌ－ＣＦＵ集落存活率为１１．６１％％，再联用２．２０μｍｏｌ／ＬＶＰＬ则为３．５２％；而相同条件下ＧＭ－ＣＦＵ集落存活率分别为３５．８１％及２６．０５％（与相应Ｌ－ＣＦＵ组相比，Ｐ＜０．０１），提示ＶＰＬ能明显增加上述化疗药物联合应用下的选择性体外净化白血病细胞作用。     

维拉帕米联用阿霉素,长春新碱,足叶己甙体外净化白血病细胞

采用体外克隆形成培养技术研究维拉帕米（ＶＰＬ）联用阿霉素（ＡＤＭ），长春新碱（ＶＣＲ）和足叶己甙（ＶＰ－１６）体外净化白血病细胞，结果显示，ＶＰＬ２．２μｍｏｌ／Ｌ能明显增加单一应用的不同浓度ＡＤＭ，ＶＣＲ或ＶＰ－１６对白血病细胞克隆形成单位（Ｌ－ＣＦＵ）的抑制作用，而不增加其对正常粒巨系克隆形成单位（ＧＭ－ＣＦＵ）的毒性，０．９２μｍｏｌ／ＬＡＤＭ，０．０２５０μｍｏｌ／ＬＶＣＲ及１．７０μｍｏ     

人大肠癌多药耐药细胞LoVo/5-FU的建立及其生物学特性的初步研究

目的建立人大肠癌ＬｏＶｏ细胞多药耐药细胞株ＬｏＶｏ／５－ＦＵ,并探讨其生物学特性及耐药机制。方法人大肠癌细 胞系 ＬｏＶｏ在体外经 ２．５μｇ／ｍｌ５－氟尿嘧啶（５－ＦＵ）作用,成功诱导 ＬｏＶｏ／５－ＦＵ耐药细胞株。体外细胞毒性实验观察它 们对５－ＦＵ、丝裂酶素（ＭＭＣ）、阿霉素（ＡＤＭ）、顺铂（ＤＤＰ）、氨甲喋呤（ＭＴＸ）和阿糖胞苷（ＡｒａＣ）等６种药物的敏感性。 用噻唑蓝（ＭＴＴ）法、光镜及扫描电镜观察两种细胞形态及结构并绘制出细胞体外生长曲线。免疫组化ＬＳＡＢ法检测细 胞中Ｐ２６－Ｂｃｌ－２的表达。应用原位ＤＮＡ末端转移酶标记法检测５－ＦＵ在两种细胞中诱导的细胞凋亡。结果ＬｏＶｏ／５－ＦＵ 细胞株对５－ＦＵ、ＭＭＣ和ＡＤＭ均有耐药性,且对５－ＦＵ的耐药程度较亲本细胞提高。与亲本细胞相比,耐药细胞株生长 慢,倍增期延长,汇合密度低,异型性明显。免疫组化ＬＳＡＢ法提示,ＬｏＶｏ／５－ＦＵ细胞的凋亡与Ｐ２６－Ｂｃｌ－２过度表达有 关。ＬｏＶｏ细胞原位ＤＮＡ末端转移酶标记阳性率高于ＬｏＶｏ／５－ＦＵ。结论ＬｏＶｏ／５－ＦＵ多药耐药细胞株耐药性稳定,在相 同条件下与敏感细胞株ＬｏＶｏ相比,细胞凋亡受到抑制,提示ＬｏＶｏ／     

ATRA联合IFNγ对Tca8113细胞凋亡的诱导作用

目的 观察全反式维甲酸（ＡＴＲＡ）联合干扰素－γ（ＩＦＮγ）对人舌鳞癌细胞系（Ｔｃａ８１１３）细胞的凋亡作用，并明确其作用机制。方法 应用航向电镜、ＤＮＡ凝胶电泳、流式细胞术等凋亡测定手段，对细胞凋亡进行了定性、定量观察。结果 透射电镜细胞开矿观察、ＤＮＡ凝胶电泳、流式细胞术凋亡检测等结果都证实ＡＴＲＡ联合ＩＦＮγ可诱导Ｔｃａ８１１３细胞凋亡。ＡＴＲＡ（１μｍｏｌ／Ｌ）、ＩＦＮγ（１０００Ｕ／ｍｌ     

SMU1对正常人体外PBMNC功能效应的影响

目的：研究ＳＭＵ１（自制抗ＣＤ３）对正常人外周血单个核细胞（ＰＢＭＮＣ）的体外功能效应,方法：（地）以ＳＭＵ１６种不同浓度、ＩＬ－２、ＭＣＤ３（丝裂性抗ＣＤ３）孵育ＰＢＭＮＣ,观察细胞密度和形态变化,ＭＴＴ法测定细胞增殖力;（２）分别用ＳＭＵ１０．５ｍｇ／Ｌｆ、５ｍｇ／Ｌ、ＩＬ－２２００ｋＵ／Ｌ培养ＰＢＭＮＣ３ｄ,ＥＬＩＳＡ法测定上清液ＩＬ－６、ＩＬ－８、ＩＬ－１２、ＩＦＮ－α及Ｇ－ＣＳＦ水平。结     

人大肠癌多药耐药细胞LoVo／5—FU的建立及其生物学特性的初步研究

目的 建立人大肠癌ＬｏＶｏ细胞多药耐药细胞株ＬｏＶｏ／５－ＦＵ,并探讨其生物学特性及耐药机制。方法 人大肠癌细胞系ＬｏＶｏ在体外经２．５ｕｇ／ｍｌ５－氟尿嘧啶（５－ＦＵ）作用,成功诱导ＬｏＶｏ／５－ＦＵ耐药细胞株。体外细胞毒性实验观察它们对５－ＦＵ、丝裂酶素（ＭＭＣ）、阿霉素（ＡＤＭ）、顺铂（ＤＤＰ）、氨甲喋呤（ＭＴＸ）和阿糖胞苷（ＡｒａＣ）等６种药物的敏感性。用噻唑蓝（ＭＴＴ）法、光镜及扫描电镜观察两种细胞形态及结构并绘制出细胞体外生长曲线。免疫组化ＬＳＡＢ法检测细胞中Ｐ２６－Ｂｃｌ－２的表达。应用原位ＤＮＡ末端转移酶标记法检测５－ＦＵ在两种细胞中诱导的细胞凋亡。结果 ＬｏＶｏ／５－ＦＵ细胞株对５－ＦＵ、ＭＭＣ和ＡＤＭ均有耐药性,且对５－ＦＵ的耐药程度较亲本细胞提高。与亲本细胞相比,耐药细胞株生长慢,倍增期延     

维拉帕米逆转白血病祖细胞多药耐药性的实验研究

应用ＰＨＡ－ＬＣＭ二步法Ｌ－ＣＦＵ半固体琼脂培养体系，对１７例白血病患者进行体外药敏试验。结果显示，２．２μｍｏｌ／Ｌ的维拉帕米能增加高三尖杉酯碱（１．８３×１０－１μｍｏｌ／Ｌ）或柔红霉素（１．７μｍｏｌ／Ｌ）对Ｌ－ＣＦＵ的抑制作用，对Ｌ－ＣＦＵ抑制率分别增加２５．２６％和１４．９５％。２．２μｍｏｌ／Ｌ的维拉帕米本身对Ｌ－ＣＦＵ生长无明显影响。该研究为临床应用维拉帕米辅佐治疗白血病，特别是难治性白血病提供了实验依据。     

维甲酸对人体肝癌细胞几种酶活性的影响

目的：探讨细胞分化诱导剂全反式维甲酸对人体肝癌细胞几种酶活性的影响。方法：用 １０μｍｏｌ／Ｌ全反式维甲酸处理 ＢＥＬ－７４０２人肝癌细胞,观察细胞碱性磷酸酶（ＡＬＰ）、酪氨酸－α－酮成二酸转氨酶（ＴＡＴ）和γ－谷氨酸转肽酶（γ－ＧＴ）活性以及甲胎蛋白（ＡＦ Ｐ）分泌量。结果：１０μｍｏｌ／Ｌ全反式维甲酸使反映肝细胞恶变的指标 ＡＦＰ分泌量和 γ－ＧＴ比活力明显下降（ Ｐ＜ ０．０５或＜０．０１）,ＡＬＰ比活力和反映肝细胞分化的ＴＡＴ比活力则明显升高（Ｐ＜０．０１或＜０．０５）。这些酶学指标与ＡＦＰ分泌量的变化有助于综合反映肝癌细胞的再分化。     

心肌细胞缺氧通过激活AMPK促进GLUT4移位和葡萄糖摄取

目的：探讨心肌缺氧时ＡＭＰ激活的蛋白激酶（ＡＭＰＫ）激活对葡萄糖转运子４（ＧＬＵＴ４）移位和葡萄糖摄取的作用。方法：大鼠心室肌经５００μｍｏｌ／Ｌ腺嘌呤－９－β－Ｄ－阿糖呋喃腺苷（ａｒａＡ）处理后,分别与胰岛素、氰化钾、５－氨基咪唑－４－氨基甲酰－１－β－Ｄ核糖呋喃腺苷（ＡＩＣＡＲ）孵育,用放射性核素分析技术测定其葡萄糖摄取量和ＡＭＰＫ活力,应用Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹法分析心肌细胞ＧＬＵＴ４含量。结果：ＡＭＰＫ特异性激活剂ＡＩＣＡＲ和氰化钾可使心肌葡萄糖摄取增加（１倍和１．５倍）,但均受ａｒａＡ抑制。ＡＩＣＡＲ增加心肌ＡＭＰＫ活力和葡萄糖摄取,而ａｒａＡ则有抑制作用。心肌细胞质膜ＧＬＵＴ４分布明显增加而细胞器膜ＧＬＵＴ４分布相应减少。结论：氰化钾所致的心肌缺氧与ＡＩＣＡＲ一样可通过ＡＭＰＫ激活途径,促进ＧＬＵＴ４移     

钙指示剂Fura－2／AM对血小板功能及细胞内游离钙测定结果的影响

本实验结果表明，以Ｆｕｒａ－２／ＡＭ负载家兔洗脱血小板，当Ｆｕｒａ－２／ＡＭ的浓度低于２μｍｏｌ／Ｌ时，３μｍｏｌ／Ｌ和１０μｍｏｌ／Ｌ花生四稀酸（ＡＡ）诱导的血小板聚集（透光度增加：７２．５±７．８４％）及释放反应（ＡＴＰ释放：１．１２±０．２１μｍｏｌ／４×１０５血小板）不受影响，但随Ｆｕｒａ－２／ＡＭ浓度增加，ＡＡ的聚集和释放反应明显减弱（Ｐ＜０．０５或Ｐ＜０．０１）。Ｆｕｒａ－２／ＡＭ浓度对单一血小板内钙（［Ｃａ２＋］ｉ）的静息水平无影响，但Ｆｕｒａ－２／ＡＭ为２μｍｏｌ／Ｌ时，ＡＡ诱导的［Ｃａ２＋］ｉ动员最明显。另外，标本中血小板的数量也明显影响［Ｃａ２＋］ｉ的测定结果（Ｐ＜０．０５或Ｐ＜０．０１）。提示，Ｆｕｒａ－２／ＡＭ浓度过高，很可能导致过多的钙离子被螯合，降低了血小板的功能，同时，细胞内游离钙与Ｆｕｒａ－２／ＡＭ的结合过程存在着饱和性。     

外源性神经节苷脂GM_3对Ca~（2＋）－ATP酶及红细胞胞浆Ca~（2＋）－浓度的影响

研究神经节苷脂ＧＭ３（简称ＧＭ３）对部分纯化的人红细胞膜Ｃａ２＋－ＡＴＰ酶的作用和对完整兔红细胞浆［Ｃａ２＋］的影响。结果表明：外源性ＧＭ３对Ｃａ２＋－ＡＴＰ酶的作用呈浓度依赖性双相调节即浓度为１～６．５μｍｏｌ／Ｌ时抑制酶活性，浓度大于６．５μｍｏｌ／Ｌ时激活酶活性；ＧＭ３不影响钙调素（ＣａＭ）对酶的激活；ＣＭ３对兔红细胞浆［Ｃａ２＋］也呈浓度依赖性双相调节即在ＧＭ３浓度低于６９μｍｏｌ／Ｌ时［Ｃａ２＋］有不同程度升高，浓度大于６０μｍｏｌ／Ｌ时则降低［Ｃａ２＋］。     

血清α－L－岩藻糖苷酶对诊断原发性肝癌的评价

为探讨ＡＦＵ活性对ＰＨＣ诊断的价值，应用分光光度比色法测定血清ＡＦＵ活性。结果：ＰＨＣ组的ＡＦＵ值为８２１．２０±１３３．００μｍｏｌ／Ｌ·ｈ；其他肝病组（肝硬化、肝炎、肝脓肿、肝海绵状血管瘤）的ＡＦＵ值分别为：５０６．４０±１５２．８０μｍｏｌ／Ｌ·ｈ、５２１．８５±１３３．３２μｍｏｌ／Ｌ·ｈ、５１３．２０±８３．４８μｍｏｌ／Ｌ·ｈ、５２８．７３±８１．６４μｍｏｌ／Ｌ·ｈ；对照组的ＡＦＵ值：４０８．３６±８１．６４μｍｏｌ／Ｌ·ｈ；经统计学处理，ＰＨＣ组的ＡＦＵ值显著高于对照组；其他肝病组的ＡＦＵ值亦较对照组高，但以ＡＦＵ＞６５０μｍｏｌ／Ｌ·ｈ为ＰＨＣ诊断界值其他肝病组敏感性远不及ＰＨＣ组。     

PB230体外抗肿瘤活性的研究

目的：研究ＰＢ２３０对人胃癌细胞（ＭＧＣ８０－３）、人红白血病细胞（Ｋ５６２）和人乳腺癌细胞（ＭＣＦ－７）的生物抑制作用,探讨其抗癌作用机制,方法：采用ＭＴＴ法检测不同浓度ＰＢ２３０对体外培养的ＭＧＣ８０－３细胞系、Ｋ５６２细胞系和ＭＣＦ－７细胞系的生长抑制作用,结果：ＰＢ２３０明显抑制ＭＧＣ８０－３、Ｋ５６２和ＭＣＦ－３三种细胞系的生长,其ＩＣ５０值分别为２&;#215;１０＾－６－１&;#215;１０＾－５ｍｏｌ／Ｌ之间,２&;#215;１０＾－６ｍｏｌ／Ｌ和１&;#215;１０＾－５ｍｏｌ／Ｌ,结论：ＰＢ２３０能直接抑制肿瘤细胞生长。     

小檗碱对体外培养大鼠大脑皮层神经元损伤的保护作用

体外培养大鼠胎鼠大脑皮层神经细胞,观察小檗碱（ｂｅｒｂｅｒｉｎｅ,Ｂｅｒ）对Ｎ－甲基－Ｄ－门冬氨酸（Ｎ－ｍｅｔｈｙｌ－Ｄ－ａｓｐａｒ－ｔａｔｅ,ＮＭＤＡ）、过氧化氢（Ｈ２Ｏ２）及撤血清培养引起的细胞损伤的保护作用。结果表明,培养的大鼠胚胎大脑皮层神经细胞在ＮＭＤＡ５００μｍｏｌ／Ｌ作用１０ｍｉｎ、或Ｈ２Ｏ２１００μｍｏｌ／Ｌ２４ｈ、或无血清培养４８ｈ后,细胞的死亡率及乳酸脱氢酶（ＬＤＨ）漏出率明显增加,抗氧化酶ＳＯＤ、谷胱甘肽过氧化酶（ＧＳＨ－Ｐｘ）活性显著降低,而脂质过氧化物丙二醛（ＭＤＡ）生成增多。Ｂｅｒ１０、３０μｍｏｌ／Ｌ能显著降低细胞死亡率、ＬＤＨ漏出率及ＭＤＡ的生成,且能明显提高抗氧化酶活性。提示：Ｂｅｒ可拮抗ＮＭＤＡ、Ｈ２Ｏ２及撤血清培养引起的神经细胞损伤,其机理可能与其减少膜脂质过氧化物生成,提高抗氧化酶活性有关     

血β_2－微球蛋白在慢性肺心病缓解期判定肾功能减退的价值

对３０例慢性肺心病缓解期患者及５０例正常人采用ＲＩＡ法测定了血清的β_２－微球蛋白（β_２－ＭＧ），结果显示：慢性肺心病缓解期患者血清β_２－ＭＧ值为３．５±０．５８ｍｇ／Ｌ，较正常人血清β_２－ＭＧ值３．２４±０．４５ｍｇ／Ｌ为高（ｔ检验，Ｐ＜０．０１），肺心病缓解期患者中有１４例（Ａ组）血清β_２－ＭＧ值为４．２９±０．３８ｍｇ／Ｌ，超过正常上限，且血ＢＵＮ６．８ｍｍｏｌ／Ｌ，Ｃｒ１３２μｍｏｌ／Ｌ，Ｃｃｒ６４ｍｌ／ｍｉｎ；另１６例（Ｂ组）血清β_２－ＭＧ值（３．１２±０．３４ｍｇ／Ｌ）正常，血ＢＵＮ５．４ｍｍｏｌ／Ｌ，Ｃｒ１１４μｍｏｌ／Ｌ，Ｃｃｒ１０２ｍｌ／ｍｉｎ，两组β_２－ＭＧ及Ｃｃｒ比较有显著差异（ｔ检验，Ｐ＜０．０１）。提示血清β_２－ＭＧ测定在慢性肺心病缓解期患者中较ＢＵＮ、Ｃｒ能更早地发现肾功能减退。     

环孢菌素A与细胞因子联合逆转白血病多药耐药性的体外研究

目的 探讨环孢菌素Ａ（ＣｓＡ）联合细胞因子对耐药细胞系Ｋ５６２／Ａ０２的逆转作用,方法 以甲基四唑蓝法测定柔红霉素（ＤＮＲ）的细胞毒性,用流式细胞仪技术测定细胞内罗丹明（Ｒｈ１２３）浓度,用ＲＴ－ＰＣＲ及ＪＳＢ－１抗体分别检测多药耐药（ＭＤＲ１）ｍＲＮＡ及其Ｐ糖蛋白的表达。结果 １μｍｏｌ／ＬＣｓＡ,５００Ｕ／ｍｌ干扰素２００Ｕ／ｍｌ白介素２（ＩＬ－２）均能增加ＤＮＲ对耐药细胞系Ｋ５６２／Ａ０２的     

Aβ25—35对培养大鼠大脑皮质和海马神经元存活和生长的影响

β－淀粉样蛋白是老年斑和血管壁淀粉样淀积的主要成份,它在早老性痴呆法,结合图像分析技术研究Ａβ２５－３５对大鼠大脑质神经元和海马神经元存活和生长的作用,为揭示Ａβ在ＡＤ发病中的作用提供资料。结果：（１）ＭＴＴ法测得的“老化”Ａβ２５－３５（２０μｍｏｌ／Ｌ）组的ＯＤ值比５μｍｏｌ／Ｌ组,１０μｍｏｌ／Ｌ组及未老的Ａβ２５－３５（２０μｍｏｌ）组的ＯＤ值均明显降低,其它各组之间无明显差异。（２）形态