利用基因芯片技术研究大鼠脂肪肝相关基因

本研究应用基因芯片技术探讨脂肪肝形成过程中基因表达的情况,以进一步阐明脂肪肝的发病机制,并为诊断和治疗脂肪肝提供新的靶点。     

中药对肝癌凋亡相关基因的调节

肝细胞肝癌是最常见的人类致死性恶性肿瘤之一，近年来，细胞凋亡在肝癌发病、诊断、治疗中的研究层出不穷。肝癌细胞凋亡是一个多基因参与的复杂调控机制，当促凋亡基因与抑制凋亡基因失去正常调控，控制某一细胞凋亡的基因失活，则该细胞不能通过凋亡清除变异细胞，进而促使细胞某些癌基因活化、表达，形成肿瘤细胞。     

大鼠创伤性脑损伤后降钙素基因相关肽对骨折愈合的影响

目的 通过侧方液压脑损伤骨折模型研究脑损伤后大鼠血清中降钙素基因相关肽(calcitonin gene-related peptide,CGRP)的变化及对骨折愈合的影响.方法 SD大鼠随机分成三组,空白对照组10只(A组,n=10),单纯骨折组48只(B组,n=48),脑损伤骨折组48只(C组,n=48),通过侧方液压脑损伤及开放骨折建立模型,损伤后适时取SD大鼠血清及骨折标本,通过放射免疫荧光、免疫组化、X片、骨折直径及生物特性测量骨痂直径、骨痂中阳性细胞的数量表达及抗应力的大小等,了解血清中CGRP的含量、骨折愈合情况.结果 伤后各组血清中CGRP的含量:从伤后CGRP水平的变化看,脑损伤骨折组CGRP含量明显升高,第7天达高峰(196.73±54.98)pg/ml,随后逐渐下降,单纯骨折组CGRP含量也升高,第5天达高峰(74.70±20.76)pg/ml,随后下降;脑损伤骨折组中CGRP含量明显高于单纯骨折组,且高峰时间长,差异有统计学意义(P＜0.05);脑损伤骨折组骨痂无论在影像学、直径大小及骨痂抗应力均大于单纯骨折组,免疫组化发现脑损伤骨折组骨痂中阳性细胞明显增多,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 脑损伤骨折大鼠骨折愈合快于单纯骨折,推测脑损伤血清中CGRP可促进骨折愈合.     

降钙素基因相关肽对大鼠离体心脏的作用及机理探讨

本文利用离体大鼠心脏标本,观察降钙素基因相关肽(CGRP)对心脏活动的影响,并用双脉冲技术测定左心房功能不应期(FRP)和α、β受体阻断剂,前列腺素合成抑制剂对CGRP对心脏活动影响。结果表明:CGRP对心脏具有明显的正性变力和正性变时作用,正性变力作用可能与β受体有关,正性变时作用可能与Na~+内流有关。     

基因表达谱芯片对结肠癌相关基因的研究

基因芯片技术是一项低消耗、高灵敏度、高通量地分析细胞内基因表达谱的新技术[1] ,目前已广泛应用于基因功能的研究 ,尤其是肿瘤发生的分子生物学方面的研究。结肠癌是消化道常见的恶性肿瘤 ,发病率在逐年增加 ,已成为严重危害人民健康的主要疾病之一。结肠癌的发生和发展与许多已知的和未知的基因相关 ,用基因芯片方法寻找在结肠癌组织中特异性表达差异的基因 ,会对结肠癌的早期诊断、防治起到积极的作用。一、材料与方法(一 )组织材料我院普外科经病理证实的 3例Ｄｕｋｅｓ改良分期Ⅰ期的结肠腺癌新鲜标本及距肿瘤边缘 5ｃｍ、ＨＥ染色无…     

唑吡坦对大鼠下丘脑内睡眠相关基因表达的影响

目的 研究催眠药唑吡坦对下丘脑内一些睡眠相关基因表达的影响.方法 大鼠随机分为唑吡坦组和对照组(生理盐水灌胃).采用RT-PCR方法检测下丘脑内GABAA受体α1和α2、褪黑素1a受体、hypocretin及hypocretin受体2的mRNA表达水平.结果 与对照组相比,唑吡坦降低下丘脑内hypocretin及褪黑素1a受体表达(P<0.05),增加hypocretin受体2表达(P<0.05),但对GABAA受体α1和α2表达则无明显影响(P>0.05).结论 唑吡坦在下丘脑可能是通过褪黑素和hypocretin途径发挥其催眠作用,而不是通过GABA途径.     

中药抗脂质过氧化与抗肝纤维化

脂质过氧化反应在体内胶原基因表达的调节中起主导作用,它是连结组织损伤与纤维化两个过程的纽带[1].基础研究和中药药理研究表明,抗脂质过氧化是中药抗肝损伤和抗肝纤维化作用的重要靶点之一.现就国内近年来运用中药及中药复方抗脂质过氧化与抗肝纤维化的研究进展作一综述.     

降钙素基因相关肽的抗室颤作用

作者用电脉冲刺激家兔心脏引致室颤发生，在麻醉兔心肌缺血再灌注模型上观察降钙素基因相关肽（ＣＧＲＰ）对正常及心肌缺血再灌注后室颤时间的影响。结果显示，高于室颤阈的电脉冲刺激可致家兔心脏发生室颤，继而自行恢复为正常心律。静注ＣＧＲＰ（．５μｇ／ｋ）后，血压和心率无明显的变化，室颤时间明显缩短（Ｐ〈０．０１）。结扎冠脉后，室颤时间延长（Ｐ〈０．０１）；松扎后再灌注期可见室颤时间恢复到明显低于正常水平。结     

亚砷酸钠对几个肿瘤相关基因表达水平影响的研究

为探讨砷作用的分子遗传机制，采用寡核苷酸芯片和cDNA芯片两种方法来研究砷对已知基因(c-myc和p53）和未知基因表达水平的影响，结果表明亚砷酸钠造肝细胞中p53抑癌基因、人肿瘤抑制基因表达增强，c-myc癌基因和解偶联蛋白基因表达减弱，说明亚砷酸钠在正常人肝细胞中表现出抗癌效应并能促进能量储存。     

人类抗砷相关基因hARRG cDNA抗砷功能的研究

目的探讨人类抗砷相关基因hARRGcDNA对砷化物的抵抗作用。方法将人类抗砷相关基因hARRGcDNA基因开放阅读框克隆于真核表达载体pcDNA4/HisC中。通过磷酸钙共沉淀方法将带hARRGcDNA基因开放阅读框的表达质粒与空pcDNA4/HisC质粒分别转染到人正常肝L鄄02细胞中,细胞分别用2、4、6、8、10μmol/LNaAsO2染毒,根据染砷细胞存活数确定hARRGcDNA的抗砷性。结果生物信息学分析hARRG蛋白为膜外蛋白,转染含hARRGcDNA基因开放阅读框的pcDNA4/HisC质粒在砷环境中细胞存活数目多于未带hARRG基因开放阅读框的空质粒。结论hARRGcDNA基因具有一定的抗砷作用。     

脑缺血后大鼠脑组织内皮素及降钙素基因相关肽含量变化

目的探讨大鼠脑缺血后，其脑组织内皮素（ET-1）及降钙素基因相关肽（CGRP）含量的变化。方法采用Pulsinelli4-血管闭塞法的改良法制作脑缺血动物模型，用放射免疫法测定大鼠顶叶脑组织内皮素（ET-1）及降钙素基因相关肽（CGRP）的含量。结果脑缺血后，大鼠脑组织内皮素（ET-1）的含量与对照组比较明显升高（P〈0．01），而降钙素基因相关肽（CGRP）的含量与对照组比较明显减低（P〈0．05）。结论脑缺血对大鼠脑组织内皮素及降钙素基因相关肽的含量有一定影响。     

次声作用后大鼠下丘脑血管紧张素Ⅱ含量的改变

目的 :观察次声作用后大鼠下丘脑血管紧张素 （Ang ）含量的变化。方法 :用 16 Hz,（130 d B和 90 d B）次声连续作用 1,7,14,2 1次 ,2 h/次。每月 1次。分别于作用后 0 .5 ,6 ,12 ,18,2 4h观察大鼠下丘脑 Ang 含量。结果 :130 d B次声作用 1,14,2 1次和 90 d B次声作用 7,2 1次后 ,大鼠下丘脑 Ang 含量均经历升高 ,下降 ,复呈升高的动态变化过程。 130 d B次声作用 7次后大鼠下丘脑 Ang 含量呈持续性升高。 90 d B次声作用 1,14次后 ,大鼠下丘脑 Ang 含量呈升高和下降的单峰曲线 ,且 14次组于次声停止作用后 12 h已与对照组之间的差异无显著性意义。结论 :不同声强和作用次数的次声 ,对大鼠下丘脑 Ang 含量的影响呈波动性改变。     

四磨汤对糖尿病大鼠降钙素基因相关肽及饥饿素的影响

目的 研究四磨汤对糖尿病大鼠降钙素基因相关肽( CGRP)及饥饿素的影响.方法 48只SD大鼠分为健康对照组、糖尿病组、糖尿病四磨汤低剂量治疗组、糖尿病四磨汤中剂量治疗组、糖尿病四磨汤高剂量治疗组及糖尿病中剂量预防组,每组8只.予糖尿病组及各干预组大鼠1％链脲佐菌素腹腔注射造模,健康对照组仅予柠檬酸母液注射.造模成功后8周,各干预组大鼠予低(0.15 ml·kg-1·d-1)、中(1.5ml·kg-1·d-1)、高(3.0 ml·kg-1·d-1)剂量四磨汤灌胃2周,对照组及糖尿病组予等体积0.9％NaCl溶液灌胃.预防组于造模成功后即开始予1.5 ml·kg-1·d-1四磨汤灌胃10周.药物干预结束后处死大鼠,取胃窦组织行实时PCR检测饥饿素、CGRP的表达.数据处理采用单因素方差分析和t检验.结果 糖尿病大鼠胃窦饥饿素基因水平较对照组无明显变化,但低、中剂量四磨汤干预后饥饿素表达水平高于糖尿病组(1.45±0.34、1.87±0.68比0.87±0.28,Dunnett's T3检验,P＜0.05),高剂量四磨汤干预对糖尿病大鼠饥饿素的表达无影响,四磨汤中剂量预防或治疗对糖尿病大鼠饥饿素的影响差异无统计学意义;糖尿病大鼠胃窦CGRP基因水平明显高于对照组(4.61±1.67比1.06±0.40,t=5.843,P＜0.01),低剂量四磨汤干预对糖尿病大鼠CGRP表达无影响,四磨汤中、高剂量干预可下调糖尿病大鼠CGRP的表达,四磨汤中剂量预防或治疗对糖尿病大鼠CGRP表达的影响差异无统计学意义.结论 四磨汤可促进糖尿病大鼠胃窦饥饿素的基因表达.糖尿病大鼠胃窦CGRP基因表达显著增加,但四磨汤可下凋糖尿病大鼠胃窦CGRP的基因表达水平.     

降钙素基因相关肽对大鼠主动脉内皮剥脱的保护作用

为研究降钙素基因相关肽在防止动脉内膜损伤后平滑肌细胞增殖所致再狭窄中的作用机制，采用内皮剥脱、血管条灌流和放射免疫测定法测定了环磷一酸尿苷、降钙素基因相关肽和内皮素水平。结果发现，内皮剥脱后两周，血浆及主动脉组织降钙素基因相关肽含量增加（前者对照组为9．2±1．7，去内皮组为14．1±2．0ng／L；后者对照组为7．4±1．4，去内皮组为12．2±2．0ng／g）。应用外源性降钙素基因相关肽（25μg/Kg）可明显改善损伤血管对乙酰胆碱的内皮依赖性舒张反应；促进去内皮血管壁一氧化氮的合成；增加主动脉组织内cGMP的含量（对照组4．4±0．5，去内皮组2．0±0．5，降钙素基因相关肽组3．3±0．5ng/g；P＜0．01），减少内皮素的生成（P＜0．01），抑制损伤部位的内膜过度憎生（P＜0．01）．提示外源性降钙素基因相关肽可通过促进内皮的修复、抑制内膜的过度增殖而防止剥脱血管的再狭窄。     

紫外线照射对果蝇凋亡相关基因reaper、grim、hid表达的影响

目的探讨紫外线照射对果蝇凋亡相关基因reaper(rpr),grim,hid表达的影响。方法收集8 h内羽化果蝇,雌雄分开培养至10日龄,紫外线照射0,0.5,1,1.5,2 h。提取果蝇总RNA,运用逆转录PCR(RT-PCR)方法检测各组果蝇rpr、grim、hid基因的表达。结果对照组果蝇rpr、grim、hid基因表达较弱,照射后rpr、grim、hid基因的表达量呈现先增后减的趋势。结论紫外线照射可增加果蝇凋亡相关基因rpr,grim,hid的表达,可能是其诱导细胞凋亡的分子机制之一,但照射达到一定时间,基因表达减弱,可能是其引起衰老的原因。     

降钙素基因相关肽的抗室颤作用

作者用电脉冲刺激家兔心脏引致室颤发生，在麻醉兔心肌缺血再灌注模型上观察降钙素基因相关肽（ＣＧＲＰ）对正常及心肌缺血再灌注后室颤时间的影响。结果显示，高于室颤阈的电脉冲刺激可致家兔心脏发生室颤，继而自行恢复为正常心律。静注ＣＧＲＰ（２．５μｇ／ｋｇ）后，血压和心率无明显的变化，室颤时间明显缩短（Ｐ＜０．０１）。结扎冠脉后，室颤时间明显延长（Ｐ＜０．０１）；松扎后再灌注期可见室颤时间恢复到明显低于正常水平。结扎冠脉及松扎同时均注射ＣＧＲＰ，发现室颤时间较对照组显著缩短（Ｐ＜０．０１）。该实验结果说明:ＣＧＲＰ具有较强的抗室性缺血性心律失常的能力，因而具有一定的临床意义。