重组人促红细胞生成素治疗新生儿缺氧缺血性脑病疗效分析

目的探讨重组人促红细胞生成素（rhu—EPO）对新生儿缺氧缺血性脑病的治疗效果。方法将141例缺氧缺血性脑病患儿随机分为rhu—EPO治疗组（n=72）和对照组（n=69），治疗组于生后第5天给予rhu—EPO5001U／kg，每周3次，一个疗程4周，其它治疗措施同对照组。于胎龄40周时进行新生儿行为神经测定fNBNA），并随访后遗症的发生率。结果治疗组患儿在胎龄40周时的NBNA得分为38．10±1．91，明显高于对照组36.35±1．99（t=4．2330，P=0．000）。至2岁时后遗症的发生率明显降低。结论rhu—EPO对缺氧缺血性脑病患儿神经行为发育有促进作用，并能减少缺氧缺血性脑病后遗症的发生。     

重组人促红细胞生成素早期治疗新生儿缺氧缺血性脑损伤疗效观察

1资料和方法1.1一般资料选取2011-01—2012-06郑州大学第二临床学院NICU科收治的中、重度HIBD患儿共86例,入选标准:(1)入院时日龄不超过72h;(2)37周≤胎龄≤42周,出生体质量≥2.5kg;(3)头颅CT结果符合新生儿中、重度脑损伤的表现;(4)且有下列情况之一:①生后的Apgar评分1min≤4分、5min≤7分;②脐静脉血或生后60min的动脉血标本pH≤7.1;③出生12h内出现脑损伤的临床表现、无严重的先天性异常或大量颅内出血等并发症。全部入选病例随机分为2组,治疗组44例在常规治疗的基础上加用rhE-PO,对照组42例常规治疗。所有病例均需患儿家属知情,并     

不同剂量促红细胞生成素对于早产儿神经发育的作用

目的 探讨不同剂量促红细胞生成素(rhEPO),对早产儿神经系统发育的影响。方法 入住本院NICU病房的早产儿, 按入院先后次序分为rhEPO组(治疗组)和对照组,其中治疗组120例,对照组30例,其中rhEPO治疗组又随机分为3组,低剂量组(750 U·周·kg^-1),中等剂量组(1 500 U·周·kg^-1),高剂量组2 000 U·周·kg^-1)。比较2组早产儿在纠正胎龄40周时的新生儿神经行为测定(NBNA)评分和6,12月时的Gesell发育量表的评估得分。结果 rhEPO组NBNA评分显著高于对照组,中等剂量和高剂量组分别优于低剂量组(P<0.05),中等剂量和高剂量组无明显差异; 生后6个月时rhEPO组优于对照组大运动和适应能力,12个月时大运动、语言能力及精细动作得分实验组亦高于对照组(P<0.05)。结论 早期使用大剂量 EPO可显著改善早产儿预后,促进其神经系统发育。     

重组人促红细胞生成素对戊四氮致痫大鼠海马蛋白质组学的研究

目的 研究重组人促红细胞生成素（Recombinant human erythropoietin,r-HuEPO）对戊四氮（Pentetrazol,PTZ）致痫大鼠海马组织中差异表达的蛋白质,为探讨癫痫发病机制和寻找新的治疗靶点提供理论依据。方法 将12只体重为230～250 g的6～8周龄SD大鼠随机分为两组：PTZ组、PTZ+EPO组。运用基于质谱的TMT标记技术将r-HuEPO对PTZ致痫大鼠海马组织的差异蛋白进行分析鉴定。结果 检测到PTZ致痫大鼠海马组织中139个差异表达的蛋白质点,其中55个表达上调,84个表达下调。结论 r-HuEPO通过上调PTZ致痫大鼠海马组织中异柠檬酸脱氢酶（Isocitrate dehydrogenase,NADP）、还原型辅酶Ⅱ（Reduced nicotinamide purine dinucleotide phosphate,NADPH）、硫氧还蛋白还原酶（Thioredoxin reductase 2 mitochondrial,TrxR）,减轻神经细胞损伤。     

重组人促红细胞生成素对大鼠颅脑损伤后Survivin表达的影响

目的观察重组人促红细胞生成素（r-HuEPO）对大鼠颅脑损伤后伤侧脑组织核因子-κB（NF-κB）和Survivin表达的影响,探讨其脑保护机制。方法选取78只健康雄性Wistar大鼠,随机分为假手术组（6只）、颅脑损伤对照组（36只）及r-HuEPO治疗组（36只）。采用自由落体法建立大鼠颅脑损伤模型,应用EpicsXL流式细胞仪检测细胞凋亡情况,并应用免疫组织化学SP法检测Survivin和NF-κB表达的变化。结果与假手术组相比,颅脑损伤对照组的细胞凋亡率及Survivin、NF-κB的表达水平明显升高（P〈0.01）;与颅脑损伤对照组相比,r-HuEPO治疗组除在伤后6h和7d外,其它各时相点的细胞凋亡率均明显降低（P〈0.05）,且在伤后1、2、3、5d的Survivin表达及伤后各时间点的NF-κB表达均较明显升高（P〈0.05）。结论r-HuEPO可促进NF-κB及抗凋亡因子Survivin的表达而减少颅脑损伤后的细胞凋亡,发挥脑保护作用。     

重组人促红细胞生成素对大鼠颅脑损伤后 Survivin表达的影响

目的 观察重组人促红细胞生成素(r-HuEPO)对大鼠颅脑损伤后伤侧脑组织核因子-κB(NF-κB)和Survivin表达的影响,探讨其脑保护机制.方法 选取78只健康雄性Wistar大鼠,随机分为假手术组(6只)、颅脑损伤对照组(36只)及r-HuEPO治疗组(36只).采用自由落体法建立大鼠颅脑损伤模型,应用Epics XL流式细胞仪检测细胞凋亡情况,并应用免疫组织化学SP法检测Survjvin和NF-κB表达的变化.结果 与假手术组相比,颅脑损伤对照组的细胞凋亡率及Survivin、NF-κB的表达水平明显升高(P＜0.01);与颅脑损伤对照组相比,r-HuEPO治疗组除在伤后6 h和7 d外,其它各时相点的细胞凋亡率均明显降低(P＜0.05),且在伤后1、2、3、5d的Survivin表达及伤后各时间点的NF-κB表达均较明显升高(P＜0.05).结论 r-HuEPO可促进NF-κB及抗凋亡因子Survivin的表达而减少颅脑损伤后的细胞凋亡,发挥脑保护作用.     

重组人促红细胞生成素预处理对帕金森病大鼠胶质细胞源性炎症因子表达的影响

目的探讨重组人促红细胞生成素(rhEPO)预处理对帕金森病(PD)大鼠胶质细胞源性炎症因子表达的影响。方法 40只SD大鼠随机分为4组,A组:右侧纹状体内注射rhEPO 24 h后,同侧黑质内注射6-羟基多巴胺(6-OHDA);B组:右侧纹状体内立体定向注射与rhEPO等量的生理盐水,24 h后同侧黑质内立体定向注射6-OHDA;C组:右侧黑质内立体定向注射6-OHDA;D组:右侧黑质内立体定向注射与6-OHDA等量的生理盐水。4周后采用酶联免疫吸附法检测血清诱导型一氧化氮合酶(iNOS)和肿瘤坏死因子(TNF)-α含量;逆转录(RT)-PCR法检测黑质iNOS和TNF-αmRNA的表达。结果与D组比较,A、B、C组大鼠血清iNOS、TNF-α含量增多,黑质iNOS、TNF-αmRNA表达增高(均P<0.05);与B组和C组比较,A组大鼠血清iNOS、TNF-α含量显著减少,黑质iNOS、TNF-αmRNA表达显著降低(均P<0.05)。结论 rhEPO可能通过抑制黑质TNF-α、iNOS表达,减轻6-OHDA对多巴胺能神经元的毒性损害,具有神经保护作用。     

重组人促红细胞生成素(rhEPO)对帕金森病大鼠模型小胶质细胞活化的影响

目的探讨重组人促红细胞生成素(recombinant human erythropoietin,rhEPO)对6-羟基多巴胺(6-OHDA)诱导的SD大鼠帕金森病(PD)模型小胶质细胞活化的影响。方法 40只SD大鼠随机分为A组(rhEPO+6-OHDA)、B组(生理盐水+6-OHDA)、C组(6-OHDA)、D组(生理盐水),每组10只。(1)A组:右侧纹状体内立体定向注射重组促红细胞生成素(rhEPO),24h后同侧黒质内立体定向注射6-OHDA;(2)B组:右侧纹状体内立体定向注射与rhEPO等量的生理盐水,24h后同侧黒质内立体定向注射6-OHDA;(3)C组:右侧黒质内立体定向注射6-OHDA;(4)D组:右侧黒质内立体定向注射与6-OHDA等量的生理盐水。4w后采用免疫组化检测黒质内酪氨酸羟化酶(TH)阳性神经元和CD11b阳性细胞数量及CD11b阳性细胞形态变化。结果与D组比较,A组大鼠黒质TH阳性神经元明显减少,CD11b阳性细胞明显增多,大部分小胶质细胞胞体小,突起细长;与B组和C组比较,A组大鼠黒质TH阳性神经元显著增多,CD11b阳性细胞显著减少,仅有少量小胶质细胞胞体大,突起短粗。结论重组人促红细胞生成素(rhEPO)可能通过抑制小胶质细胞活化,减轻6-OHDA对多巴胺(DA)能神经元的毒性损害,对DA能神经元产生神经保护作用。     

重组人促红细胞生成素对急性脑缺血大鼠Nrf2及HO-1表达的影响

目的 研究重组人促红细胞生成素(rhEPO)对急性脑缺血大鼠脑组织中核因子E2相关性因子2(Nrf2)及血红素加氧酶1(HO-1)表达的影响,探讨rhEPO的抗氧化作用机制. 方法 将36只雄性SD大鼠按随机数字表法分为假手术组、模型组、rhEPO组,后两组采用线栓法制备大鼠永久性局灶性脑缺血模型.rhEPO组在造模成功2h后腹腔注射rhEPO 5000 IU/kg,假手术组和模型组给予等量生理盐水.缺血24 h后处死大鼠取脑,采用免疫组化染色和Western blotting检测脑组织中Nrt2及HO-1的表达. 结果 免疫组化染色结果显示,假手术组Nrf2及HO-1均只有少量阳性表达,模型组和rhEPO组Nrf2及HO-1阳性表达细胞数均较假手术组明显增多,且rhEPO组阳性表达细胞数亦明显多于模型组,差异均有统计学意义(P＜0.05);阳性表达细胞主要为缺血区的神经元和星形胶质细胞.Western blotting结果也显示Nrt2及HO-1表达按假手术组、模型组、rhEPO组顺序依次增强,组间两两比较差异均有统计学意义(P＜0.05). 结论 急性脑缺血后脑组织中Keap1 -Nrf2/ARE抗氧化系统可被激活,rhEPO通过激活该抗氧化系统从而发挥脑保护作用.     

重组人促红细胞生成素联合高压氧对移植大鼠背部逆行超长缺血皮瓣

背景：有研究表明,重组人促红细胞生成素可诱导内皮前细胞分化成新生内皮细胞,高压氧则为新生内皮细胞提供增殖所需的充足氧分,加速了新生血管的发生。 目的：分析重组人红细胞生成素、高压氧及其联合应用时对大鼠背部逆行超长缺血皮瓣的影响。 设计、时间及地点：随机分组,细胞形态学观察,于2008-04/09在山东大学实验动物中心进行。 材料：40只Wistar大鼠,于背部制作逆行超长缺血皮瓣。 方法：于大鼠背部按4∶1设计逆行超长缺血随意皮瓣,皮瓣原位缝合后按照不同的干预方式均分为4组,常压氧组：给予生理盐水+常压氧;高压氧组：高压氧+生理盐水;重组人促红细胞生成素组：重组人促红细胞生成素+常压氧;综合组：重组人促红细胞生成素+常压氧。干预方法：重组人促红细胞生成素的注射量为400 IU/kg与生理盐水等量,1次/d,连用10 d。高压氧为202.65 kPa,体积分数为95%;常压氧为101 kPa;体积分数为35%,给氧均于缝合后8 h进行,1 h/次,2次/d,共10 d。 主要观察指标：于缝合后10 d测量各组皮瓣成活率。以血管内皮细胞生长因子和CD34作为血管标记行免疫组化染色,计数皮瓣新生血管密度。 结果：定性分析：常压氧组局部坏死,腺体萎缩。高压氧组腺体形态较好,重组人促红细胞生成素组腺体增生,而综合组增生更加明显。定量分析：与常压氧组比较,后3组的血管密度值均增高(P < 0.01),且呈递增趋势,以α=0.05的检验标准,各组之间的差别有显著性意义(P < 0.01),方差分析结果显示重组人促红细胞生成素和高压氧之间存在协同作用,同时使用效果更好。 结论：重组人促红细胞生成素和高压氧以及二者联合应用,可以促进缺血皮瓣下的毛细血管生成,提高皮瓣存活率并扩大皮瓣长宽比例,重组人促红细胞生成素促进皮瓣成活效果好于高压氧,二者同时使用效果更好。     

氨甲酰化促红细胞生成素的制备及鉴定

目的：制备不具有促红细胞生成作用的氨甲酰化促红细胞生成素（CEPO）。方法：用氰酸钾使促红细胞生成素（EPO）氨甲酰化，对CEPO的蛋白酶（endoproteinase Lys-C）酶切产物进行电泳鉴定。分别给予成年KM小鼠腹腔注射EPO、CEPO和生理盐水，每周3次，于3、7和14d测定小鼠红细胞（RBC）、网织红细胞（Ret）数及Ret百分数，观察其动态变化。另外，给予不同种属的成年C57／B6小鼠腹腔注射增加1倍剂量的EPO、CEPO和生理盐水，隔日1次，30d后测定各组小鼠上述的血细胞指标，以证明CEPO不具有促红细胞生成作用。结果：经SDS-PAGE电泳鉴定，EPO已成功地氨甲酰化为CEPO，并且有较高的纯度。KM小鼠和C57／B6小鼠分别接受EPO注射后，RBC数、Ret数、Ret百分数均随给药次数的增多而显著增加，而接受CEPO和生理盐水组均未见有明显的改变。结论：经氨甲酰化反应后，EPO成功地转化为CEPO，并消除了促RBC生成的作用。     

促红细胞生成素对颅脑创伤后炎性反应和细胞凋亡的影响

目的 探讨重组人促红细胞生成素(rhEPO)对大鼠创伤性脑损伤后(TBI)脑组织核因子NF-κB的表达、下游炎性因子水平及皮层神经细胞凋亡的调控作用.方法 72只Wistar大鼠随机分成对照组、TBI组、TBI+rhEPO组,后两组再分为脑损伤后1 d、3 d、7 d亚组,应用EMSA法检测挫伤灶周围脑组织NF-κB结合活性、ELISA法检测炎性因子TNF-α、IL-6水平、干湿比重法检测脑组织水含量、TUNEL法检测皮层神经细胞凋亡.结果 TBI后脑组织中NF-κB结合活性、炎性因子水平持续升高;伤后脑水肿明显;TUNEL阳性细胞显著增多.给予rhEPO治疗后,脑组织NF-κB结合活性、TNF-α、IL-6水平、伤侧脑组织水肿程度及神经细胞凋亡均比TBI组降低(P＜O.01).结论 rhEPO能够抑制TBI后脑组织NF-κB的结合活性、降低下游炎性因子的表达和脑水肿程度、减少神经细胞凋亡,明显减轻继发性脑损害.

Abstract：

Objective To investigate the role of rhEPO in regulating expression of nuclear factor -kappaB (NF - κB) , proinflammatory cytokines and neural apoptosis in the injured brain following traumatic brain injury. Methods A total of 72 Wistar rats were randomly divided into control group, trauma group and rhEPO treatment group. TBI group and rhEPO group sacrificed at days 1, 3 and 7 post injury respectively. Activity of NF - κB in the brain tissues were detected by using EMSA and levels of TNF - αand IL - 6 by ELISA. The water content of the injured brain was measured by dry - wet weight method. Furthermore, apoptosis in the cortical contusion was estimated by TUNEL method. Result The result showed a persistent up - regulation of NF - κB binding activity, expression of TNF -α,IL -6 in the area surrounding the injuried brain and significant brain edema. The TUNEL positive cells significantly increased. The level of NF - κB binding activity and inflammatory factors expression, the water content of the injury brain and apoptosis can be significantly decreased by administration of rhEPO ( P ＜ 0.01). Conclusion rhEPO administration can inhibit the binding activity of the NF - κB, down - regulate the expression of the inflammatory factors, alleviate the brain edema and apoptosis and decrease the secondary brain injury after TBI.     

促红细胞生成素联合甲强龙对脊髓损伤病人神经功能的影响

目的 探讨促红细胞生成素（EPO）联合甲强龙对脊髓损伤（SCI）病人神经功能的影响。方法 回顾性分析2018年1~12月收治的60例SCI的临床资料。采用EPO联合甲强龙治疗30例（观察组）,单用甲强龙治疗30例（对照组）。甲强龙首次用量30 mg/kg,在15 min内静脉注射,1 h后以5.4 mg/（kg·h）维持治疗24 h后;EPO治疗,3 000 IU/次,3次/周,持续8周。治疗前及治疗后1个月按照美国脊髓损伤协会（ASIA）评分评估神经功能,采用日常生活活动能力（ADL）评分评估生活能力。治疗前、治疗后2周检测红细胞和血红蛋白水平,准确记录两组病人治疗2周内并发症情况。结果 治疗前,两组ASIA评分、ADL评分、红细胞、血红蛋白水平均无统计学差异（P>0.05）。治疗后,两组ASIA评分、ADL评分、红细胞、血红蛋白水平均明显增高（P<0.05）,而且,观察组明显高于对照组（P<0.05）。观察组并发症发生率明显低于对照组（P<0.05）。结论 EPO联合甲强龙治疗有利于促进SCI病人神经功能的恢复,减少并发症,具有很好的临床疗效。     

氨甲酰化促红细胞生成素衍生物对小鼠低氧脑损伤保护作用的研究

目的：观察氦甲酰化促红细胞生成素衍生物（CEPO）对低氧所致小鼠海马损伤的保护作用。方法：成年雄性C57／B6小鼠置低氧（8％O2）分别处理0,5、1．5、3和6h,记录各组小鼠复氧后连续6及30d的Y迷宫训练错误反应次数。用免疫组化检测海马神经元核蛋白（NeuN）。在此基础上,将经Y迷宫训练筛选的小鼠低氧处理6h,并分为3组：CEPO组、促红细胞生成素（EPO）组和生理盐水组,隔日1次分别腹腔注射CEPO、EPO和生理盐水,共15次。第10和30天对小鼠进行Y迷宫测试,记录错误反应次数。用NeuN免疫组化检测给予药物干预2次（72h）后各组小鼠海马神经元的脱失状况。结果：①低氧处理的小鼠学习能力明显下降,以低氧3h组和6h组尤为明显;第30天Y迷宫测试时,低氧6h组的错误反应次数最高;NeuN免疫染色显示低氧后复氧3d的各组小鼠海马各亚区神经元均有明显脱失,以低氧6h组最为明显。②第10和30天Y迷宫测试显示,低氧小鼠经CEPO或EPO干预后Y迷宫的错误反应次数明显低于生理盐水处理的小鼠;NeuN免疫染色显示低氧小鼠给予CEPO或EPO处理后海马神经元脱失明显少于生理盐水处理的小鼠。结论：低氧处理6h的小鼠学习和记忆能力明显降低,海马神经元损伤严重。CEPO具有与EPO相似的减轻低氧所致学习和记忆损伤、减少海马神经元脱失的作用。     

重组人促红细胞生成素对颅脑损伤患者的神经保护作用

目的评价促红细胞生成素用于颅脑损伤患者的临床意义。方法对两组条件相似的颅脑损伤患者共40例进行随机配对的前瞻性研究；其中治疗组于入院后24h开始使用重组人促红细胞生成素（rhEPO）；采用6000U／次，皮下给药，隔日1次共2w。对照组不给予rhEPO处理，其他处理同治疗组，高压液相色谱法（HPLC）测定两组患者脑脊液谷氨酸含量，并将两组的治疗结果进行对比分析。结果两组患者脑脊液谷氨酸含量及预后有明显差异，治疗组脑脊液谷氨酸含量低于对照组（P〈0．01），预后优于对照组（P〈0．01）。结论颅脑损伤患者使用rhEPO可减轻损伤后谷氨酸的兴奋性毒性作用，对颅脑损伤患者有神经保护作用。     

重组人促红细胞生成素对氧化损伤的血管内皮细胞的保护作用

目的观察重组人促红细胞生成素对氧化损伤的血管内皮细胞的保护作用以及其机制。方法体外培养人脐静脉内皮细胞建立过氧化氢诱导的内皮细胞氧化应激损伤模型,不同重组人促红细胞生成素预处理组,用噻唑蓝(MTT)比色检测细胞活力,黄嘌呤氧化法和硫代巴比妥法分别测定细胞上清的超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量,流式细胞仪检测细胞凋亡。结果 H2O2对人脐静脉内皮细胞有损伤作用。rhEPO可增加细胞活性,抑制H2O2诱导人脐静脉内皮细胞的MDA的产生,增加SOD的活力及抑制细胞凋亡。结论重组人促红细胞生成素对氧化损伤的血管内皮细胞具有保护作用,其作用机制可能与抗氧化有关。     

促红细胞生成素对尿素症患者脑干电位的影响

对３０例尿毒症患者脑干听觉诱发电位（ＢＡＥＰ）检测，观察到用促红细胞生成素（ＥＰＯ）治疗前，患者ＢＡＥＰ各波潜伏期（ＰＬ）及峰间潜伏期（ＺＰＬ）普遍延长，治疗１２周后，神经系统症状得到改善，ＰＬ及ＺＰＬ相应缩短，与治疗前相比差异显著（Ｐ〈０．０５）。而非血透非ＥＰＯ组及单纯血透组，脑干电位无明显改善。相关分析显示，尿毒症患者ＢＡＥＰ异常与Ｈｂ、ＲＢＣ呈负相关，与尿素氮（ＢＯＮ）、肌酐（Ｓｃｒ）无明     

重组促红细胞生成素对大鼠颅脑损伤后血清IL-6IL-8含量的影响及临床意义

目的 观察重组促红细胞生成素（R-HUEPO）对大鼠颅脑损伤后血清IL-6、IL-8水平变化的影响及临床意义.方法 成年雄性SD大鼠50只,随机分为对照组（n=25）和R-HUEPO治疗组（n=25）;对照组和治疗组脑创伤模型均采用Morganti等的实验方法,采用放射免疫分析法检测2组患者血清IL-6、IL-8含量变化,分析两者的动态关系.结果 R-HUEPO治疗组在1 d、2 d、3 d、7 d 4个时间点的IL-6、IL-8含量明显低于对照组（P〈0.05）.结论 R-HUEPO能减少炎症细胞因子介导继发性脑损害,起到保护神经细胞的作用.     

促红细胞生成素对尿毒症患者脑干电位的影响

对３０例尿毒症患者脑干听觉诱发电位（ＢＡＥＰ）检测，观察到用促红细胞生成素（ＥＰＯ）治疗前，患者ＢＡＥＰ各波潜伏期（ＰＬ）及峰间潜伏期（ＺＰＬ）普遍延长，治疗１２周后，神经系统症状得到改善，ＰＬ及ＺＰＬ相应缩短，与治疗前相比差异显著（Ｐ＜０．０５）。而非血透非ＥＰＯ组及单纯血透组，脑干电位无明显改善。相关分析显示，尿毒症患者ＢＡＥＰ异常与Ｈｂ、ＲＢＣ呈负相关，与尿素氮（ＢＯＮ）、肌酐（Ｓｃｒ）无明显相关性。