IL-9抗体对小鼠银屑病样皮损及IL-17和CCR6的影响

目的探讨白介素(IL)-9抗体对小鼠银屑病样皮损及白介素(IL)-17与CC趋化因子受体(CCR)6的影响。方法 Balb/c雌性小鼠随机分为三组:凡士林空白对照组(空白对照组)、咪喹莫特模型组(模型组)以及IL-9抗体实验组(实验组)。通过PASI评分观察银屑病小鼠皮损严重程度变化,免疫组化法检测皮损中IL-17,CCR6的变化,Western blot检测皮损IL-17的表达。结果免疫组化结果表明,与空白对照组相比,模型组小鼠皮损中IL-17,CCR6的含量显著增高(P0.05);与模型组相比,实验组小鼠的皮损严重程度明显降低,炎症细胞浸润减轻,IL-17,CCR6表达亦明显降低(P0.05)。而Western blot也显示实验组与模型组皮损IL-17的差异有统计学意义(P0.05)。结论 IL-9抗体可能通过抑制CCR6,减少皮损中Th17细胞及树突状细胞的数目,以及抑制IL-17的含量,从而达到改善银屑病样皮损的目的。     

丹皮酚通过抑制树突状细胞活性在咪喹莫特诱导的银屑病皮肤病中的作用研究

目的探究丹皮酚对树突状细胞(DCs)抑制作用,及对咪喹莫特(IMG)诱导的银屑病模型小鼠炎症反应的干预效果。方法选择BALB/c雄性小鼠作为实验用鼠,按照随机数字表法平均分为6组,分别为空白对照组(Con组)、模型对照组(IMQ组)、甲氨蝶呤阳性组(MTX组)及丹皮酚高(PG-H)、中(PG-M)、低(PG-L)剂量组,每组10只。通过模型建立及药物干预,以及BMDCs骨髓细胞分离及体外诱导培养,比较皮损组织白细胞介素(IL)-23、CD11c及CD3的表达水平,以及体外细胞实验对DCs细胞IL-23、IL-1β、IL-12p40 m RNA的表达水平综合评价丹皮酚对咪喹莫特诱导的银屑病的干预效果。结果皮损组织CD3~+表达水平方面,丹皮酚各剂量之间差异无统计学意义,与MTX组效果一致。皮损组织IL-23表达水平方面,高剂量效果最显著,差异有统计学意义(P0.05)。体外实验中,丹皮酚直接作用于BMDCs,IL-23 mRNA表达明显降低(P0.05),而对IL-1β、IL-12p40 m RNA的影响差异无统计学意义(P0.05)。结论丹皮酚可有效减轻咪喹莫特诱导的银屑病局部皮损,作用机制可通过减弱IL-23 m RNA表达,抑制了树突细胞的成熟和活化,最终减轻了银屑病的皮肤损伤。     

6-羟基多巴胺阻断交感神经对咪喹莫特诱导银屑病样小鼠模型的系统性炎症的影响

 目的 探讨交感神经对咪喹莫特诱导银屑病样小鼠模型的系统性炎症的影响。 方法 将24只SPF级C57BL/6J小鼠以简单随机抽样法分为银屑病样皮炎模型组（模型组）、白念珠菌感染组、阴性对照组及银屑病样皮炎模型伴溶剂处理组（溶剂模型组）、6-羟基多巴胺（6-OHDA）处理组、溶剂对照组，每组4只。每日肉眼观察各组小鼠银屑病皮损变化情况；取小鼠背部、耳部皮损通过HE染色、q-PCR及Western blot检测白介素17A（IL-17A）炎症因子表达情况；取小鼠脾脏，通过流式细胞术检测炎症细胞、q-PCR及Western blot检测白介素6（IL-6）及白介素1β（IL-1β）观察小鼠脾脏的系统性炎症情况。结果 白念珠菌感染组小鼠背部及模型组小鼠背部均可见表皮增厚、角化不全、基底角化细胞增殖和炎症细胞浸润，且IL-17A上升，以上指标两组小鼠之间无统计学差异（均P>0.05）。相较于白念珠菌感染组，模型组还可见皮肤大量鳞屑产生及脾脏增大，脾脏炎症细胞增多,且IL-6、IL-1β水平升高（均P<0.01）。相较于溶剂模型组小鼠，6-OHDA处理组小鼠脾脏明显变小，脾脏中性粒细胞、单核细胞来源的巨噬细胞数显著降低，脾脏IL-6、IL-1β水平降低（均P<0.01）。结论 咪喹莫特诱导银屑病样小鼠模型存在系统性炎症，交感神经的激活可能参与银屑病中系统性炎症的产生。     

消退素D1对咪喹莫特诱导的小鼠银屑病模型的治疗作用

目的探讨消退素D1对咪喹莫特诱导的小鼠银屑病模型的治疗作用。方法 30只小鼠分为模型组、实验组及对照组,模型组仅使用咪喹莫特乳膏外涂造模,实验组造模并腹腔内注射消退素D1,对照组造模并腹腔内注射生理盐水。肉眼及镜下观察各组小鼠皮肤组织的皮损严重程度,并采用RT-PCR检测各组小鼠皮肤组织内TNF-α、IL-17A、IL-23的mRNA表达情况。结果使用咪喹莫特造模后,小鼠背部、耳部皮肤可见鳞屑性红色斑块,上覆银白色鳞屑,有不同程度的浸润感。使用消退素D1处理的实验组小鼠皮肤上述情况明显改善,而生理盐水组皮损无明显改善。光学显微镜下观察,模型组小鼠皮肤可见表皮角化过度伴角化不全,棘层肥厚,表皮突向下延长,真皮乳头内可见毛细血管扩张伴炎症细胞浸润等银屑病特征性病理改变,实验组上述病理表现明显改善,对照组的病理表现则无明显改善。模型组皮肤组织内TNF-α、IL-17A、IL-23的mRNA表达水平明显升高,而实验组的表达水平较模型组明显下降,其差异有统计学意义(P0.05),与对照组比较差异无统计学意义(P0.05)。结论消退素D1对咪喹莫特诱导的小鼠银屑病模型具有一定的治疗作用,其作用机制可能是通过降低TNF-α、IL-17A、IL-23等炎症因子的水平。     

咪喹莫特诱导小鼠银屑病样皮损机制的研究进展

咪喹莫特作为治疗人乳头瘤病毒感染的药物,在临床应用中发现可引起银屑病样皮损并能加重银屑病患者病情,而被广泛用于银屑病发病机制及治疗靶点的研究.由咪喹莫特诱发的小鼠银屑病样模型具有操作简单、易于成模的优点.应用咪喹莫特后,小鼠体内有包括Toll样受体信号通路等多条通路被激活,其中部分为协同作用.激活的信号通路进一步诱导角质形成细胞、树突细胞、Th17、γδT细胞、中性粒细胞等产生一系列炎性因子(如白细胞介素1、23、17,干扰素α等),这些炎性因子对银屑病样皮损的形成起到重要的作用.     

中和血清淀粉样蛋白A对咪喹莫特银屑病样小鼠皮损及IL-17A和CCL20的影响

目的探讨血清淀粉样蛋白A(Serum amyloid A,SAA)在咪喹莫特银屑病样小鼠中可能的作用。方法 24只小鼠外涂5%咪喹莫特乳膏或凡士林62.5 mg,1次/d,连续6 d,然后分为4组,每组6只。1组局部凡士林组腹腔注射控制性IgG,2组局部凡士林组腹腔注射抗-SAA抗体,3组局部咪喹莫特组腹腔注射IgG,4组局部咪喹莫特组腹腔注射抗-SAA抗体。所有小鼠在2周后安乐死,并取背部皮肤进行后续检测。结果咪喹莫特银屑病样小鼠皮损中SAA mRNA表达明显增加;中和SAA后咪喹莫特银屑病样小鼠皮损的厚度变薄,真皮浸润的炎症细胞减少,皮损中白细胞介素(IL)-17A和趋化因子20 mRNA的表达减少。结论咪喹莫特银屑病样小鼠皮损中SAA的表达明显增加,中和SAA可减轻银屑病相关的增生和炎症。     

银屑病小鼠模型建立的新方法

目的确立一种新的、有效的、稳定的银屑病鼠造模新方法。方法使用咪喹莫特乳膏外用及干扰素腹腔内注射造模;观察BALB/c小鼠皮损改变及稳定性;并进行皮肤病理片制作和皮损组织病理评分;免疫组织化学法检测银屑病样小鼠皮损中CD3~+,CD4~+,CD8~+T细胞、IL-12,IL-17,IL-23,TNF-α,MPO及SOD的表达情况;与正常组小鼠比对,观察造模效果。结果肉眼观察模型小鼠皮肤较对照组明显增厚,颜色偏红,表面覆盖厚层鳞屑,符合银屑病样改变;银屑病组织病理学Baker评分符合银屑病样改变;银屑病样模型小鼠皮肤中CD3~+,CD4~+及CD8~+T细胞在真皮层较正常鼠显著增多,两组比对差异有统计学意义;IL-12,IL-17,IL-23及TNF-α银屑病样模型小鼠皮肤中表达增强,与正常组相比差异有统计学意义;模型组小鼠皮损MPO表达较正常小鼠显著增多。模型组小鼠皮损中SOD表达减少;结果显示造模小鼠皮损符合银屑病改变,皮损典型,2周内皮损未消退。结论该方法是一种有效的、稳定的、值得推广的银屑病造模新方法。     

Notch信号通路相关配体在咪喹莫特诱导的银屑病样小鼠模型中的表达

目的：检测Notch信号通路相关配体在咪喹莫特（IMQ）诱导的银屑病样小鼠模型中的表达。方法： 6-8周雌性BALB/c小鼠随机分为IMQ模型组及空白对照组。HE染色观察皮损病理变化。RT-PCR及免疫组化分别检测IMQ模型组及空白对照组皮肤受体Notch1、Notch2、配体Jagged-1、目标基因Hes-1的mRNA和蛋白表达水平。结果：IMQ模型组小鼠皮肤出现典型银屑病样改变。IMQ模型组小鼠皮损中受体Notch 1、Notch2、配体Jagged-1、目标基因Hes-1的mRNA和蛋白表达水平高于对照组（P<0.05）。结论：Notch信号通路在咪喹莫特诱导的银屑病样小鼠模型中被激活。     

IL-36抗体对小鼠银屑病样皮损及CCL20的影响

目的探讨白细胞介素(IL)-36抗体对小鼠银屑病样皮损及CC趋化因子配体(CCL20)的影响。方法30只BALB/c雌性小鼠随机分为3组:凡士林空白对照组(空白对照组)、咪喹莫特模型组(模型组)以及IL-36抗体实验组(实验组)。采用PASI评分观察银屑病样小鼠皮损动态变化;光镜下观察皮损组织形态学变化,并测量表皮层厚度;采用实时荧光定量PCR、免疫组织化学法检测小鼠皮损中CCL20的表达水平。结果实时定量PCR结果显示,实验组与模型组皮损中CCL20 mRNA表达的差异具有统计学意义(P0.05);免疫组织化学结果也表明,与空白对照组相比,模型组小鼠皮损中CCL20的含量显著增高,差异有统计学意义(P0.05);与模型组相比,实验组小鼠的皮损严重程度明显降低,炎症细胞浸润减轻,实验组小鼠皮肤组织中CCL20含量亦明显降低,差异有统计学意义(P0.05)。结论 IL-36抗体可能通过抑制CCL20的表达,从而达到改善银屑病样皮损的目的。     

葫芦素Ⅰ对咪喹莫特诱导小鼠银屑病样皮损及STAT3、K17的影响

目的探讨葫芦素Ⅰ对咪喹莫特诱导的银屑病小鼠模型的影响及相关作用机制。方法 30只BALB/c雌性小鼠随机分为3组,空白组、模型组、实验组。用PASI评分动态观察小鼠皮损变化,光镜下观察小鼠皮损病理改变并测量表皮厚度。用酶联免疫吸附法检测各组小鼠血清中IL-17、IL-22、IFN-γ的含量变化,免疫组织化学检测小鼠皮损中STAT3、p-STAT3的含量表达,实时荧光定量PCR法检测小鼠皮损中STAT3和K17的mRNA表达。结果空白组小鼠皮肤未见明显改变。与模型组相比,实验组小鼠红斑、鳞屑严重程度减轻,PASI评分和血清炎症细胞因子水平明显下降(P0.05)。免疫组织化学显示,皮损中STAT3、p-STAT3表达较模型组低,STAT3和K17的mRNA表达含量也下降,差异均有统计学意义(P均0.05)。结论葫芦素Ⅰ可抑制STAT3磷酸化,一定程度上缓解小鼠银屑病皮损,减轻炎症反应,并在mRNA水平下调STAT3和K17的表达。     

消银解毒饮通过cdc7抑制角质细胞增殖作用的动物实验研究

目的:明确消银解毒饮通过细胞分裂周期蛋白7(cdc7)对小鼠银屑病模型角质细胞增殖的干预作用.方法:将20只健康雄性BALB/c小鼠随机分为对照组、银屑病模型组、消银解毒饮组与cdc7抑制剂TAK-931组,每组5只,除对照组外,每组背部涂抹咪喹莫特诱导银屑病模型,连续5天.对照组和银屑病模型组予蒸馏水10 mL/kg...     

重组Ad-SOCS1介导的树突状细胞源外泌体对银屑病样小鼠模型的影响

目的:明确重组腺病毒(Ad-SOCS1)介导的树突状细胞(DCs)分泌的外泌体对银屑病样小鼠模型的影响。方法:Ad-SOCS1腺病毒感染小鼠骨髓来源的DCs,分离纯化培养物中的外泌体,Western blot分析鉴定外泌体中的CD63、SOCS1和ICAM-1蛋白。咪喹莫特(IMQ)诱导10只银屑病样小鼠模型,其中5只给予外分泌体治疗(外分泌体组)组,5只作为对照(IMQ组)。RT-PCR检测小鼠外周血IL-17A、IL-22和IL-23 mRNA的表达水平。结果:外泌体中能够鉴定到SOCS1、CD63和ICAM-1蛋白。外分泌体组小鼠的银屑病样表现较IMQ组轻。外分泌体组小鼠外周血IL-17A和IL-23 mRNA的表达低于IMQ组(P0.01),IL-22水平两组间无显著差异(P0.05)。结论:Ad-SOCS1感染DC后培养物分离的外泌体可改善银屑病的症状,其机制可能与外泌体SOCS1抑制IL-17A有关。     

Critical role of the interleukin-23/T-helper 17 cell axis in the pathogenesis of psoriasis

Psoriasis is an inflammatory disease with dynamic interactions between the immune system and the skin. Recent studies have demonstrated that the interleukin (IL)-23/T-helper (Th)17 cell axis plays an important role in the pathogenesis of psoriasis. Here, the biology and function of Th17 cells as well as the crucial role of IL-23 in the context of the Th17 cell-dependent chronic inflammation in psoriatic skins are reviewed. Recent study about the role of the IL-23/Th17 axis in the pathogenesis of psoriasis-like lesions in K5.Stat3C transgenic mice is also discussed. This model mouse for psoriasis not only verifies the therapeutic efficacies of biologics that specifically target the IL-23/Th17 axis, but also clarifies the pathogenesis of psoriasis.     

他扎罗汀和窄谱中波紫外线对银屑病基质金属蛋白酶13表达的影响

【摘要】 目的 检测基质金属蛋白酶13（MMP13）在银屑病患者中的表达,评估他扎罗汀和窄谱中波紫外线（NB-UVB）对银屑病样皮炎小鼠MMP13表达的影响。方法 收集2019年5 - 8月就诊于天津医科大学总医院的18例银屑病患者皮损组织和10例健康人正常皮肤组织及所有受试者血清。将25只SPF级BALB/c雄性小鼠随机分成对照组、咪喹莫特组、咪喹莫特 + NB-UVB组、咪喹莫特 + 他扎罗汀组和咪喹莫特 + 他扎罗汀 + NB-UVB组,每组5只。分别给予小鼠背部皮肤不同处理,除对照组外,其余各组进行银屑病样皮炎造模处理,造模时间为7 d,造模成功后,第8天早上取小鼠眼球血,并使用脱颈法处死后,切取背部皮损组织。HE染色观察皮损处表皮厚度和病理变化,免疫组化检测表皮MMP13表达水平,ELISA检测血清MMP13含量。两组比较采用独立样本t检验,多组间比较采用单因素方差分析,组间两两比较用LSD检验,计数资料采用χ2检验比较。结果 银屑病患者皮损处MMP13呈强阳性表达,表皮和血清MMP13水平［84.11 ± 17.16、（13.29 ± 3.95） μg/L］显著高于健康对照组［11.98 ± 4.08、（7.46 ± 1.58） μg/L,均P < 0.01］。与对照组表皮厚度［（1.26 ± 0.04） μm］、表皮和血清MMP13水平［25.40 ± 2.34、（185.76 ± 7.22） μg/L］比较,咪喹莫特组表皮厚度［（7.93 ± 0.59） μm］明显增加,表皮和血清中MMP13水平［147.14 ± 5.53、（215.98 ± 15.17） μg/L］也显著增加（均P < 0.01）。与咪喹莫特组比较,咪喹莫特 + 他扎罗汀组、咪喹莫特 + NB-UVB组、咪喹莫特 + 他扎罗汀 + NB-UVB组表皮厚度均下降［分别为（3.56 ± 0.37）、（3.83 ± 0.39）、（2.14 ± 0.34） μm,均P < 0.05］,表皮中MMP13表达减弱（分别为120.42 ± 3.23、91.08 ± 0.46、71.12 ± 7.11,均P < 0.05）,且血清MMP13含量下降［分别为（197.39 ± 3.92）、（196.13 ± 11.76）、（183.21 ± 14.99） μg/L,均P < 0.05］。结论 MMP13蛋白表达水平在银屑病患者皮损及血清中增高;他扎罗汀和NB-UVB治疗后银屑病样皮炎小鼠皮损和血清中MMP13下降。MMP13可能参与银屑病的发展,他扎罗汀和NB-UVB可能通过减少MMP13的表达而抑制银屑病发展。     

人脐带间充质干细胞对咪喹莫特诱导的银屑病样皮炎小鼠模型的治疗作用

目的 研究人脐带间充质干细胞(MSC)对咪喹莫特诱导的银屑病样皮炎小鼠模型的治疗作用及机制.方法 将18只C57BL/6小鼠按随机数字表等分为凡士林组、模型组和治疗组,每组6只.小鼠背部剃毛后,模型组和治疗组小鼠背部涂抹5％咪喹莫特乳膏62.5 mg每天1次,连续6d,凡士林组小鼠涂抹等量的凡士林软膏;治疗组小鼠在第1...     

寻常性银屑病患者Th17细胞与相关转导因子的表达

目的探讨Th17细胞与相关转导因子在银屑病中的表达及意义。方法采用ELISA法检测寻常性银屑病患者及对照组血清IL-17,IL-23和IL-6水平;收集寻常性银屑病患者皮损及正常人皮肤作为对照,用免疫组化法检测STAT3和ROR_γt的表达;通过蛋白印迹法测定STAT3和RORγt含量;实时荧光定量PCR法检测STAT3 mRNA和ROR_γtmRNA的表达。结果银屑病患者血清IL-17,IL-23和IL-6的表达水平明显高于对照组,银屑病患者皮损STAT3和ROR_γt阳性率及蛋白含量和STAT3mRNA的表达均高于对照组,差异均有统计学意义(P均<0.01),ROR_γt mRNA的表达与对照组相比差异无统计学意义(P>0.05)。结论 Th17细胞在患者血清与相关转导因子在皮损中表达上调,STAT3和ROR_γt可能参与诱导Th17细胞的产生,这可能是Th17细胞与相关转导因子参与银屑病发生和发展的机制之一。     

Novel RNA polymerase I inhibitor CX-5461 suppresses imiquimod-induced experimental psoriasis

Clinical treatment of psoriasis remains challenging because of possible long-term drug toxicities and loss of therapeutic effects over time. CX-5461 is a novel selective inhibitor of RNA polymerase I. Our previous studies have shown that CX-5461 has potent anti-inflammatory effects. Here we investigated whether CX-5461 could inhibit the development of imiquimod-induced experimental psoriasis in mice. Adult male C57BL/6 mice were used, and psoriasis-like lesions were induced by topical imiquimod treatment. In vivo, we demonstrated that topical application of CX-5461 prevented the development of imiquimod-induced psoriasis, with decreases in keratinocyte proliferation, T-cell infiltration and pathological angiogenesis. CX-5461 also reversed existing skin inflammation induced imiquimod and retarded the development of 12-O-tetradecanoylphorbol-13-acetate-induced epidermal hyperplasia and inflammation. In vitro, CX-5461 induced cell cycle arrest in keratinocytes, inhibited expressions of interleukin-17, interleukin-23 receptor and retinoic acid receptor-related orphan receptor-γt in activated T cells, and reduced angiogenic functions of endothelial cells. In conclusion, CX-5461 exhibits therapeutic effects on experimental psoriasis in mice, likely via multiple mechanisms including anti-proliferative, anti-inflammatory and anti-angiogenic activities.