反相离子对HPLC法测定人血浆中的氟喹诺酮类药物

本文建立了用反相离子对 HPLC 法测定血浆中三种氟喹诺酮类广谱抗生素药物——诺氟沙星(Ⅰ)、阿米氟沙星(amifloxacin,Ⅱ)和依诺沙星(Ⅲ)的方法。样品制备取血浆样品1ml,加50μl 内标液(吡哌酸,50μg/ml),稍加涡旋后,再加50μl 高氯酸(60％,w/v),并同时涡旋30s,离心(10000×g)10min,取上清液20μl 注入色谱柱中进行测定。色谱条件不锈钢柱(100×2mm,id)匀浆填充5μm 的 ODS Hypersil 作为固定相;流动相为乙腈/水(25:75),其中含10mmol/L Na_2HPO_4、10mmol/L 十二烷基硫酸钠和5mmol/L 溴化四丁基铵,以磷酸调 pH 值至2.0;流速0.5ml/min;荧光检测280nm/418nm。     

人血清中氟卡胺HPLC立体选择测定

本文报道了人血清中氟卡胺的HPLC立体测定方法。氟卡胺标准贮备液及内标溶液(2,5-二乙氧基-N-(2-哌啶基甲基)苯甲酰胺盐酸盐)分别由10mg外消旋醋酸盐溶于1000ml去离子水中(10μg/ml),工作标准液则将贮备液稀释10倍而得。在试管中放入1.0 ml血浆,然后加入50μl内标溶液(50 ng),1 ml Tris盐酸(2.0 M,pH 8.5)缓冲液和过量(3 g)氯化钠。NaCl极度溶解后,用5 ml氯丁烷:2-丙醇(95∶5v/v)旋涡提取30秒钟。在室温以每分钟3000     

一种新的HPLC法测定肾损伤病人血中万古霉素

万古霉素系糖肽类抗生素,临床上用于耐青霉素金葡菌所致感染。本品在肾脏功能损伤病人中血清半衰期延长,由于受体温影响,导致晶状降解产物CDP-1蓄积。在此介绍一种同时测定万古霉素和CDP-1含量的HPLC法。试剂将盐酸万古霉素贮备液加到冷藏血清中,制备5、10、20和50μg/ml万古霉素标准液。将新鲜配制盐酸CDP-1碳酸氢钠缓冲液(0.05mol/L,pHg.0)的贮备液加到冷藏血清中,制备1、2、5和10μg/mlCDP-1标准液。用水配制0.4mg/ml维生素B_(12)内标液。各标准液于-20℃贮存。仪器采用Beckman Gold HPLC系统。色谱分析采用十八硅烷柱,粒度5μm。也可使用ODS反相C_(18)柱(4.6mm×22cm)。色谱条件万古霉素和内标B_(12)的检测波长分别为235nm和360nm。采用梯度洗脱的     

在玻璃碳电极上肼苯哒嗪的电流测定法

本文介绍基于在流体中玻璃碳电极上的电化学氧化作用,用流动注入法连续测定盐酸肼苯哒嗪。方法:用往复泵使流动相Walpole 醋酸盐缓冲液-无水甲醇(40∶60)流经一Metrohm EA-1096型电化学池(具E611型检测器),流速:1.0ml/min。池中配有玻璃碳工作电极、银-氯化银参比电极与另一玻璃碳辅助电极。用微量注射器将样品注入进样口,进样量:50μl。整个系统用HPLC 不锈钢管(0.02cm)连接固定,在室温下用记录器记录电流。标准、样品液制备:用Walpole 醋酸盐缓冲液(pH4.2)配制盐酸肼苯哒嗪贮备液(0.1mg/ml),再将其稀释成1～50μg/ml 的标准液,用作制备工作曲线。     

反相离子对HPLC测定人血浆中的氟喹诺酮类药物

氟喹诺酮类为广谱抗菌剂。采用HPLC的ODS Hypersil C_(18)柱(5μm,100mm×2mm),荧光检测器。流动相为25%乙腈磷酸盐缓冲液(pH2.0),以十二烷基硫酸钠(SLS)作离子对,嗅化四丁基铵(TBA)作反离子,吡哌酸为内标,可分离和测定人血浆中的氟哌酸、Amifloxacin。氟啶酸和吡哌酸。也可用于其它氟喹诺酮类的测定。样品制备取血浆1ml置于1.5ml离心管中,加入内标液50μl(吡哌酸50μgml~(-1)),涡流振荡几秒,再加入高氯酸50μ1,再振荡     

液质联用法测定人血浆中厄贝沙坦和氢氯噻嗪浓度(英文)

建立了适用于测定人血浆中厄贝沙坦和氢氯噻嗪浓度的液相色谱-质谱(LC-MS)法,并将其应用于厄贝沙坦氢氯噻嗪人体药代动力学研究。人血浆样品采用液-液萃取法提取,内标为对乙酰氨基酚。采用依利特C_(18)柱,以乙腈-水(35:65,v/v)为流动相,选择离子监测负离子模式检测,厄贝沙坦m/z为427.25,氢氯噻嗪m/z为295.95,内标对乙酰氨基酚m/z为150.05。厄贝沙坦和氢氯噻嗪的日内和日间精密度(RSD%)均低于14.5%,准确度(RE%)分别低于1.9%和-2.0%。厄贝沙坦在10-5000ng/mL浓度范围内线性关系良好(r>0.99),氢氯噻嗪在1-200ng/mL浓度范围内线性关系良好(r>0.99)。所建立的方法已成功应用于厄贝沙坦氢氯噻嗪人体药代动力学研究。     

用于自动生物分析方法的实验室机器人系统的发展:Ⅰ.血浆中茶碱的测定

近几年来,许多不同类型的自动化样品制备技术取得较大进展,使用实验室机器人便是其中之一。人工操作步骤(Ⅰ法):将200μl 血浆置于5ml 聚丙烯试管中,加入水、内标液和饱和(NH_4)_2SO_4溶液各200μl,涡旋混合10s,再加入1.6ml 氯仿-异丙醇(95∶5),涡旋混合80s,离心10min,将有机相转移至自动取样器小瓶中,进样20μl 于 LichrosorbSi-60柱进行测定。流动相的组成为:氯仿(1325ml)、正庚烷(950ml)、甲醇(225ml)、四氢     

同时测定4’-去氧阿霉素及其代谢产物的反相液相色谱法

与阿霉素(DX)相比,4’-去氧阿霉素(4’-DODX)具有高效、广谱,心脏毒性低等优点。本文报道测定4'-DODX 及其代谢产物体内浓度的反相HPLC 法。分析方法:取样品血浆1～3ml,使通过预先经10ml 甲醇和5ml 水依次处理过的1ml C_(18)样品制备柱(Cartridge),再用5ml 水洗涤,然后,用250μl0.25M甲醇-HCl 液洗脱药物,吸取洗提液100μl 进样。HPLC柱为10μmμ-Bondapak C_(18)(30cm×3.9mm~*内径),     

HPLC法测定生物体液中4-氨基-5-氯-N-[(1-乙基咪唑啉-2-取代)甲基]-2-甲氧基苯甲酰胺(Ⅰ)和它的代谢物(Ⅱ)及其在药动学研究中的应用

(Ⅰ)用于治疗胃-食管返流。本文报道一灵敏、可靠且专一的 HPLC 法测定生物体液中的(Ⅰ)和(Ⅱ),并应用此法研究其药动学。色谱条件 HPLC 色谱柱为 Nucleosil-C_(18)柱(颗粒直径3μm,10×4.6mm,id)。柱温50℃。荧光检测:激发波长270mm,发射波长370nm。流动相为含1ml 三乙胺的乙腈-1g/L 枸橼酸混合液(10∶90),使用前脱气处理,流速1.8 ml/min。0.1g/L的4-氨基-5-(甲氨磺酰基)-N-((卜烯丙基-2-吡咯烷基)-甲基)-2-甲氧苯甲酰胺(Ⅲ)的水溶液为内标。样品制备将1ml 血浆、全血或尿液置50ml 离心管中,加入内标(Ⅲ)50～100μl     

HPLC法测定巯甲丙脯酸及双氢氯噻嗪的复合片剂

作者用反相HPLC 的梯度洗脱法,可同时测定复方片剂中巯甲丙脯酸(Ⅰ)与双氢氯噻嗪(Ⅱ)二种成分及其分解产物——巯甲丙腩酸二硫化物和双氢氯噻嗪二磺酰氨的含量。样品以甲醇提取,离心,将提取液注入苯基柱中,用甲醇磷酸水溶液作梯度洗脱,于210nm 波长处检测。仪器为:HPLC 梯度系统带有流速及流动相组分控制装置,连接50×0.2cm 饱和柱内装37μm 硅酸。入口滤过器(2 μm);环状进样器(20 μl);反相苯基柱,5或10μm,250～300mm×内径4.6mm;可变波长检出器210 nm 波长;柱温保持约30℃、双通道具有输入、输出功能的记录器,一通道记录(Ⅰ)及(Ⅱ)峰,     

复方替米沙坦胶囊中替米沙坦和氢氯噻嗪的HPLC测定

建立了HPLC法同时测定复方替米沙坦胶囊中替米沙坦和氢氯噻嗪的含量.采用Hypersil-BDS C18色谱柱,以氢氧化四丁铵磷酸盐缓冲液(pH 2.26)-乙腈(78:22)为流动相,检测波长230nm,柱温30C.替米沙坦在5～200μg/ml(r=0.9999)、氢氯噻嗪在1.6～64μg/ml(r=0.9998)浓度范围内线性关系良好.回收率分别为98.8%～99.8%和99.6%～99.9%.检测限分别为2.5和3.9ng.     

舒洛芬及其胶囊的高效液相色谱法测定

舒洛芬(Suprofen)系新型镇痛药及前列腺素合成酶抑制剂。本文报道,用HPLC测定该原料药及其胶囊剂,方法简便、快速、稳定性好。方法:使用C_(18)键合反相硅胶柱,流动相为乙腈-pH3.0缓冲液(3:2)混合液,pH3.0缓冲液系用0.02M磷酸氢二钠液(Na_2HPO_4-7H_2O)再以0.01M枸橼酸调至pH2.97～3.04。流速为0.5ml/分,于UV254nm处检测。样品用甲醇溶解或提取,最后制成浓度为1mg/ml并含有内标4-硝基苯甲酸0.6mg/ml的甲醇液(标准品制备相同),每次注射2μl,随后测量峰高     

用HPLC法直接分离Saterinone对映体

saterinone 外消旋体1-[4-氰基-1,2-二氢-6-甲基-2-氧代吡啶基-5)-苯氧基]-3-(4-(2-甲氧苯基)哌嗪-1]丙烷-2-醇,是治疗慢性心脏闭锁不全的新药,已在实验动物和人体进行了药动学研究。为了检查药理活性,合成了R-(+)(Ⅰ)和S-(-)(Ⅱ)对映体。近期有应用了灵敏方法测定体液中saterinone 外消旋体的报道。本文介绍用HPLC 法直接分离和测定其对映体纯度及服用外消旋体药物后人体血浆中对映体的比率。测定条件:合成样品用甲醇溶解并稀释到5μg/ml,直接进样;血浆样品取血浆1 ml加1 mol/L NaOH 50μl,用二氯甲烷3 ml萃取15 min 并离心10 min,将二氯甲烷层移入另一瓶中蒸干,用100μl 甲醇溶解进样。色谱条件:Chiralcel OD~(TM)柱250×4.6 mm     

用改进的HPLC法同时测定人体血清中的卤泛曲林和去丁基卤泛曲林

曾有报道用 HPLC 同时测定人血清中的卤泛曲林(HAL)和去丁基卤泛曲林(BHAL),但分析时间长,内源性物质与BHAL 几乎同时出峰,对测定有干扰。本文报道的方法迅速、分辨率更高。实验采用 757 可变波长 UV-VIS 检测器。Ultrasphere C_8 柱(5μm,25cm×4.6mm)。内标为2,4-二氯-9-(2-二氯基-1-羟基)乙基-6-三氟甲基菲盐酸盐。流动相为乙腈∶水(75∶25,v/v)与0.2%(w/v)十二烷基硫酸钠和0.2%(v/v)冰醋酸。在含0.5ml 血清的试管中,加入内标50μl(游离碱4μg/ml),乙腈1ml,沉淀出蛋白质,涡流混合20s,1200g 离心10min,将上清液移至 C_8-键合洗脱柱,用真空仪抽入柱体,脂乙腈洗柱后,药物被1.0ml 混合液[1.0mol/L 盐酸∶乙腈,1∶9(v/v)]洗脱下。用硅试管收集洗脱液,洗脱液中加入NH_4OH 1.0ml,CH_2Cl_2 6.0ml,旋转器上旋转25min,1000g 离心5min,分出有机相,在40℃通氮下挥发至干,践留物用150μl 流动相溶解,取25μl 注入 HPLC 柱。     

高效液相色谱法测定血浆中酮基布洛芬的含量

建立测定血浆中酮基布洛芬简便、灵敏的HPLC法.色谱柱为SpherisorbC18柱(10cm×4.6mm,3μ),流动相为5mmol/L磷酸盐缓冲液(pH6.8)-甲醇(28∶72,V/V),流速1ml/min,在UV262nm波长处检测,检测器灵敏度设为0.005aufs,响应时间0.2s.采用内标法定量,内标物为萘普生.1ml血浆样品盐酸酸化后加入6ml乙醚提取,提取液空气吹干,用250μl流动相重溶解后进行分析.实验结果表明,在此分析条件下酮基布洛芬和内标分离完全且无其它干扰,保留时间分别为12.3和9.5min.在0.01～5.0μg/ml浓度范围内酮基布洛芬峰面积比与其浓度间呈良好的线性关系,r=0.9999,血浆中酮基布洛芬最低检测浓度为3ng/ml,回收率85.9%～90.9%,天内变异1.4%～4.9%,天间变异2.5%～6.2%.     

高效液相色谱法测定血浆中酮基布洛芬的含量

建立测定血浆中酮基布洛芬简便、灵敏的HPLC法.色谱柱为Spherisorb C18柱(10c m×4.6mm,3μ),流动相为5mmol/L磷酸盐缓冲液(pH6.8)-甲醇(28∶72,V/V),流速1ml/ min,在UV 262nm波长处检测,检测器灵敏度设为0.005aufs,响应时间0.2s.采用内标法定量 ,内标物为萘普生.1ml血浆样品盐酸酸化后加入6ml乙醚提取,提取液空气吹干,用250μl 流动相重溶解后进行分析.实验结果表明,在此分析条件下酮基布洛芬和内标分离完全且无其它干扰,保留时间分别为12.3和9.5min.在0.01～5.0μg/ml浓度范围内酮基布洛芬峰面积比与其浓度间呈良好的线性关系,r=0.9999,血浆中酮基布洛芬最低检测浓度为3ng /ml,回收率85.9%～90.9%,天内变异1.4%～4.9%,天间变异2.5%～6.2%.     

反相液相色谱法测定人血清中的几种常用青霉素

本文建立了一种快速灵敏的HPLC法,可用于同时测定人血清中青霉素(Ⅰ)、氨苄青霉素(Ⅱ)、青霉素Ⅴ(Ⅲ)、邻氯青霉素(Ⅳ)、双氯青霉素(Ⅴ)和乙氧萘青霉素(Ⅵ)的浓度。标准溶液取上述各青霉素标准品配成1mg/ml的水溶液作贮备液,4℃贮存。内标物贮备液为1mg/mlβ—羟乙基茶碱的乙腈溶液,于测定当日以水稀释至20μg/ml作为内     

HPLC法测定凝集血小板中的内源性5-羟色胺

本文报道用HPLC-ED法测定家兔血小板和血浆中的5-HT,方法简便、精确、灵敏度高,适用于直接测定凝集血小板的5-HT 释放量,亦适用于研究凝集程度和释放量间的关系。实验用电化学检出器配有玻璃碳电极和Ag/AgCl参比电极,5μm Nucleosil C-18柱(15cm×4.6mm)反相层析。流动相为含17%甲醇的0.05 M 醋酸-枸橼酸盐缓冲液(pH 4.6)。实验温度37±1°,流速0.6ml/分。供试兔血浆的血小板量约为9×10~5/μl,以5-羟基-N-甲色胺(5-HMT)为内标。作者采用Shore 和Olin 方法,从血浆或血小板中提取5-HT。方法为,样品0.1ml 中加入0.1N 盐酸1ml,氯化钠1g,正丁醇3ml,充分混匀20分钟,离心,取正丁醇层2ml 于试管中,加入0.1N 盐酸0.5ml,正庚烷3ml,充分混匀5分钟,离心,弃去有机液层。取少量水层(5～10μl)注入HPLC-ED 系统中,     

LC-MS法测定人血浆中复方厄贝沙坦分散片中氢氯噻嗪的浓度

目的建立测定人血浆中氢氯噻嗪浓度的LC-MS法。方法采集到的血浆样品加人对乙酰氨基酚为内标,经乙酸乙酯提取,进行LC-MS法测定。色谱柱为Kromasil C_(18)(150 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇-水(30:70,V/V),流速为0.8 mL·min~(-1),进样量为20μL,APCI选择负离子检测。结果本研究所建立测定氢氯噻嗪血浓度的LC-MS法,其线性范围为2.0～200μg·L~(-1),最低定量限为2.0μg·L~(-1),日内、日间RSD分别<8.6%、10.6%,均符合生物样品分析标准。结论该法灵敏度好、准确度高,可用于氢氯噻嗪的药动学研究及临床药物浓度检测。     

大鼠血浆中盐酸多西环素的HPLC法测定

建立了RP-HPLC法测定大鼠血浆中盐酸多西环素。以美他环素为内标,血浆样品用乙酸乙酯提取,采用C_(18)色谱柱,流动相为乙腈-80mmol/L磷酸盐缓冲液(pH 2.4)-磷酸-三乙胺(18:79.7:0.5:1.8,调至pH 6.5),检测波长346nm。盐酸多西环素线性范围为0.05～10μg/ml(r=0.9998),检测限为0.04μg/ml。方法相对回收率为96.8%～104.2%,绝对回收率为82.4%～92.8%;日内RSD为3.6%～5.2%,日间RSD为4.0%～7.6%。